李勇海 田力 馮志剛 殷向黨 陶冶

膽管癌是一種少見的消化道惡性腫瘤，以起病隱匿，診治困難，預(yù)后較差為特點(diǎn)。近年來，隨著診斷水平的提高，膽管癌的發(fā)病率逐年上升。由于膽管畸形、炎癥、損傷、結(jié)石、結(jié)核等病變都可以產(chǎn)生與膽管癌相似的臨床表現(xiàn)和影像學(xué)特征，臨床上經(jīng)常遇到難以確定良惡性的膽管狹窄病例，這給決定采取何種方案進(jìn)一步治療帶來困難。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，腫瘤標(biāo)志物的檢測新技術(shù)不斷出現(xiàn)，越來越多的腫瘤相關(guān)抗原檢測被應(yīng)用于膽管癌的診斷。本研究采用化學(xué)發(fā)光酶免方法檢測患者血清和膽汁中CA19-9、CEA水平，進(jìn)行定量分析，以探討二者對膽管癌的診斷價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2008年9月至2010年4月于吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院院肝膽胰外科住院患者，行手術(shù)治療并經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)為膽管癌患者31例，男18例，女13例，年齡48～76歲，平均年齡62.0歲，包括乳頭狀腺癌7例，高分化腺癌20例，中分化腺癌1例，低分化腺癌3例作為觀察組，同期膽道良性病變患者35例，男25例，女10例，年齡28～69歲，平均年齡49.65歲，其中膽管結(jié)石合并膽管炎性狹窄19例，膽管囊腫5例，膽囊切除術(shù)后膽道狹窄4例，慢性胰腺炎胰頭纖維化或腫大壓迫胰腺段膽總管3例，繼發(fā)性硬化性膽管炎3例，膽管術(shù)后膽道狹窄1例)，作為對照組。

1.2 標(biāo)本采集及測定 對兩組患者在做ERCP前空腹采集靜脈血3 ml，分離血清，-20℃冰箱保存待檢。所有病例均在ERCP術(shù)中，注入造影劑之前通過造影管用無菌注射器分2次連續(xù)取膽汁1 ml、5 ml，使用第2管膽汁，2000r/min離心，取上清液，稀釋8倍后置無菌管-20℃保存，同批測定CA19-9、CEA。膽汁和血清CA19-9、CEA的測定采用化學(xué)發(fā)光酶免方法，蛋白芯片技術(shù)檢測。主要儀器:HD-2001系列生物芯片檢測儀，儀器及芯片由湖州數(shù)康生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS13.0 for Windows軟件，計量資料以()表示，利用t檢驗(yàn)及u檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 血清和膽汁中CA19-9，CEA的檢測結(jié)果 觀察組血清和膽汁中CA19-9、CEA水平明顯高于對照組，觀察組膽汁CA19-9、CEA水平明顯高于血清中兩者水平。對照組膽汁CA19-9、CEA水平雖然較對照組血清中兩者升高，但幅度明顯低于觀察組中膽汁與血清中兩者的比較，見表1。

2.2 膽汁CA19-9、CEA的正常值與分界值 膽汁標(biāo)志物正常值以對照組的2s計算，大于2s作為陽性分界值，其正常值分別為:CA19-9:(37.75±20.92)KU/L，CEA:(6.12±9.34)ng/ml;其分界值分別為:CA19 ～9:58.00 KU/L，CEA:15.00 ng/ml。

2.3 膽汁CA19-9、CEA檢測對膽管癌的診斷價值 根據(jù)以上分界值，膽汁CA19-9、CEA單項(xiàng)及聯(lián)合檢測對膽管癌診斷的結(jié)果見表2。

表1 兩組血清和膽汁中腫瘤標(biāo)志物檢測結(jié)果()

表1 兩組血清和膽汁中腫瘤標(biāo)志物檢測結(jié)果()

注:*、＊＊與對照組比較，P＜0.01，△、△△與對照組比較，P＜0.01，* 與△及＊＊與△△比較，P＜0.01，◇與◆及◇◇與◆◆比較，P＜0.05

組別 例數(shù) CA19-9(KU/L) CEA(ng/ml)血清 觀察組對照組3135126.76±59.3*27.68±4.21◇23.62±9.83＊＊3.42±2.14◇◇膽汁 觀察組對照組3135692.0±263.08△37.75±10.46◆112.7±34.63△△6.12±4.67◆◆

表2 膽汁CA19-9、CEA檢測對膽管癌診斷的比較

3 討論

3.1 檢測膽管癌患者膽汁中腫瘤標(biāo)志物CA19-9、CEA的臨床意義 對膽管癌標(biāo)志物的研究最早開始于血液，并經(jīng)歷了由單獨(dú)檢測到聯(lián)合檢測的階段。血清CA19-9、CEA由于在對膽管癌的診斷中具有較高的敏感性和特異性而受到致力于膽道系統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物研究學(xué)者們的重視。但血清中腫瘤標(biāo)志物含量易受機(jī)體諸多因素的影響，且在合并膽道感染時，膽管良性病變患者的血清CA19-9、CEA含量亦可顯著提高，在檢測中出現(xiàn)較高的假陽性和假陰性，使其診斷價值降低［1，2］。由于膽管癌細(xì)胞直接接觸膽汁，加上膽汁中膽汁酸鹽對癌細(xì)胞膜的破壞作用，膽汁中的腫瘤標(biāo)志物含量遠(yuǎn)高于血清，較血清腫瘤標(biāo)志物更容易被檢測出來，且有文獻(xiàn)報道其敏感性和特異物均較高［3，4］。因此，國內(nèi)外學(xué)者提出檢測膽汁中腫瘤標(biāo)志物，以提高其對膽管良惡疾病的鑒別診斷價值。本研究中，31例膽管癌患者治療前血清CA19-9值為(126.76±59.3)KU/L，而膽汁CA19-9值為(692.0±263.08)KU/L，約為血清的6倍;血清CEA值為(23.62±9.83)ng/ml，而膽汁 CEA值為(112.7±34.63)ng/ml，約為血清CEA含量的5倍。這些結(jié)果均與國外文獻(xiàn)報道接近［5，6，7］。可見膽汁腫瘤標(biāo)志物在膽管癌時升高程度較血清腫瘤標(biāo)志物敏感，在診斷膽管癌時較血清有更高的靈敏性。

3.2 膽汁CA19-9、CEA聯(lián)合檢測對膽管癌的診斷價值 本研究顯示，膽汁CA19-9、CEA聯(lián)合檢測對膽管癌的敏感性可達(dá)96.78%(平行試驗(yàn))，特異性可達(dá)94.29%(系列試驗(yàn))，均明顯高于單獨(dú)檢測膽汁CA19-9、CEA所得結(jié)果。可見膽汁CA19-9、CEA聯(lián)合檢測對提高膽管癌的檢出率及膽管良惡性狹窄的鑒別診斷有很高的價值。

3.3 腫瘤標(biāo)志物檢測對膽管癌診斷的局限性 理想的腫瘤標(biāo)志物不但應(yīng)該有100%的腫瘤特異性，即在良性病變時不升高，同時應(yīng)該有100%腫瘤敏感性，即能提示微量瘤細(xì)胞的存在［8］。本研究顯示，膽汁CA19-9、CEA聯(lián)合檢測在平行試驗(yàn)中敏感性可達(dá)96.78%，相對應(yīng)的特異性只有48.57%，而在系列試驗(yàn)中聯(lián)合檢測膽汁CA19-9、CEA可將特異性提高到94.29%，相應(yīng)的敏感性只有54.84%。這些檢測方法在提高檢出率的同時增加了誤診率，在減少誤診率的同時又相應(yīng)減少了檢出率，沒有一項(xiàng)檢測可以在敏感性較高的同時具備較高的特異性。而利用判斷腫瘤標(biāo)志物區(qū)分腫瘤與非腫瘤能力的有效性指標(biāo)［(真陽性+真陰性)/(真陽性+假陽性+真陰性+假陰性)%］比較發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)檢測膽汁CA19-9、CEA的有效性分別為74.24%和72.12%，膽汁CA19-9、CEA聯(lián)合檢測平行試驗(yàn)中的有效性為71.21%，系列試驗(yàn)中的有效性為75.76%，差異最大的兩者比較亦未見明顯差異，P＞0.05。可見聯(lián)合檢測只是單方面提高了敏感性或特異性，而并未提高腫瘤與非腫瘤的能力。除了同時具有較高的敏感性和特異性，理想的腫瘤標(biāo)志物還應(yīng)該有在體液中的濃度應(yīng)與瘤體大小、臨床分期密切相關(guān)，并可據(jù)此判斷預(yù)后;半衰期短，可根據(jù)其水平的升降監(jiān)測治療效果及腫瘤是否復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移;檢測方法靈敏可靠，操作簡便，價格低廉等特點(diǎn)［9］。在國內(nèi)外的報道中還沒有發(fā)現(xiàn)如此理想的診斷膽管癌的腫瘤標(biāo)志物，而且所報道的各項(xiàng)指標(biāo)無論是具體數(shù)值還是診斷膽管癌的敏感性、特異性及有效性等都有較大差異，考慮與不同的檢測試劑、判定方法及采集標(biāo)本的患者差異有關(guān)。因此，對膽管癌腫瘤標(biāo)志物的研究還有待深入，臨床工作中判斷膽管癌的良惡性還應(yīng)該將腫瘤標(biāo)志物與臨床表現(xiàn)及相應(yīng)輔助檢查結(jié)合，以明確診斷及選擇合理的治療方案。

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［2］趙明，季曉鵬，王善菊，等.腫瘤標(biāo)志物CA19-9、CEA聯(lián)檢對胰腺癌的診斷價值.放射免疫學(xué)雜志，2003，16(6):355.

［3］陳錦隆，易石堅，賀德，等.膽管癌患者血清 CEA、CA19-9、CA242聯(lián)合檢測的臨床意義.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2008，7(5):96-97.

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