郝陸飛 張妮

淀粉酶碘-淀粉比色法在全自動(dòng)生化分析儀上的應(yīng)用

郝陸飛 張妮

目的 探討淀粉酶碘-淀粉比色法在全自動(dòng)生化分析儀上的應(yīng)用。方法 按照日立7060C型全自動(dòng)生化分析儀參數(shù)設(shè)置，用K值輸入法校準(zhǔn)，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果 全自動(dòng)生化分析儀和手工法(傳統(tǒng)經(jīng)典方法)測(cè)定結(jié)果比對(duì)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論碘-淀粉比色法在全自動(dòng)生化儀上測(cè)定淀粉酶準(zhǔn)確、可靠、方便、高效、節(jié)省。

淀粉酶；碘-淀粉比色法；全自動(dòng)生化分析儀

隨著全自動(dòng)生化分析儀的普及，急診檢驗(yàn)項(xiàng)目也越來越多的在全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，根據(jù)我科生化室近兩年多的研究探討淀粉酶碘-淀粉比色法在日立7060C型全自動(dòng)生化儀上的應(yīng)用，檢驗(yàn)準(zhǔn)確可靠，檢驗(yàn)質(zhì)量保證，臨床應(yīng)用很好。供同行參考。

1 材料和方法

1.1 對(duì)象 血清標(biāo)本都來自我院2009年度患者。

1.2 質(zhì)控質(zhì)控物①號(hào)(英國(guó)RANOdox實(shí)驗(yàn)有限公司)201007；質(zhì)控物②號(hào)(陜西省臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)物)200902。

1.3 試劑 α-淀粉酶測(cè)定試劑盒(碘-淀粉比色法)購自四川省邁克科技有限責(zé)任公司。

1.4 儀器 日立7060全自動(dòng)生化分析儀；721W可見分光光度計(jì)。

1.5 方法 按照日立7060全自動(dòng)生化分析儀參數(shù)設(shè)置。關(guān)鍵參數(shù)：Assay Code [1pont]Wavelength [660]Assay Point [18]S.Vol.(Normol)[2]Reagent T1[100][0]T2[0][0]T3 [[100][250]Calibration Type [Linear][1][0][0]a=-1 b=0。S1ABC=[空白校準(zhǔn)吸光度]，K=[1095/S1ABC]。嚴(yán)格按照全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行參數(shù)設(shè)置[1]。

嚴(yán)格按照日立7060全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行測(cè)定。用K值輸入法校準(zhǔn)方法測(cè)定。首先進(jìn)行空白校準(zhǔn)；其次調(diào)整K值；最后測(cè)試樣品淀粉酶。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用t檢驗(yàn)確定P值。

2 結(jié)果

對(duì)36次質(zhì)控物①號(hào)、20次質(zhì)控物②號(hào)、36例患者淀粉酶測(cè)定結(jié)果分別計(jì)算出“數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示見附表1。

3 討論

從上述結(jié)果看,用36次質(zhì)控物：①號(hào)所測(cè)結(jié)果天間重復(fù)性好,用20次質(zhì)控物②號(hào)所測(cè)結(jié)果批內(nèi)重復(fù)性好，用36例患者所測(cè)結(jié)果均值很接近淀粉酶參考值80～180U/dl的均值。三種樣品類型在全自動(dòng)生化分析儀和手工法(傳統(tǒng)經(jīng)典方法)兩種方法比較試驗(yàn)中,兩種方法均值都很接近，P＞0.05，無顯著性差異，而且全自動(dòng)生化分析儀碘-淀粉比色法測(cè)定淀粉酶標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)都小于手工法，可見全自動(dòng)生化分析儀碘-淀粉比色法測(cè)定淀粉酶準(zhǔn)確性可靠,重復(fù)性好, 檢測(cè)效果好,成本又低,值得同行推廣應(yīng)用。

表1 全自動(dòng)生化儀和手工法測(cè)定淀粉酶結(jié)果一覽表

在全自動(dòng)生化分析儀上采用碘-淀粉比色法測(cè)定淀粉酶是在手工法測(cè)淀粉酶基礎(chǔ)上經(jīng)過改進(jìn)應(yīng)用于生化分析儀上的,因?yàn)榉磻?yīng)時(shí)間為5.5分鐘(即18點(diǎn)測(cè)光計(jì)算)，所以K值中1095=(7.5÷5.5)×800。800完全按照手工法測(cè)定淀粉酶單位定義計(jì)算獲得[1]。與其它方法測(cè)淀粉酶比較碘-淀粉比色法試劑價(jià)格更便宜,穩(wěn)定性好,結(jié)果滿意。

質(zhì)控物②號(hào)靶值是78U/L，允許范圍50～101U/L，此值是用速率法測(cè)定得到的。當(dāng)然，此值的淀粉酶單位定義與比色法(終點(diǎn)法)測(cè)定是不一樣的。但是，據(jù)觀察，發(fā)現(xiàn)二者測(cè)定結(jié)果有一個(gè)相關(guān)性，大致成正比的相關(guān)系數(shù)。就是說速率法和終點(diǎn)法這兩種方法測(cè)得患者結(jié)果對(duì)臨床診斷、治療、療效觀察提供的信息是一致的。這兩種方法檢測(cè)系統(tǒng)受多方面因素影響，二者比較有待今后進(jìn)一步研究探討。

全自動(dòng)生化分析儀在準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍等方面好于半自動(dòng)或手工法分光光度計(jì)測(cè)定淀粉酶。全自動(dòng)生化分析儀用碘-淀粉比色法測(cè)定淀粉酶，不僅減少了許多人為因素，而且充分發(fā)揮利用了樣品用量少,試劑用量少的優(yōu)點(diǎn)。用血量少，僅為2微升，減少采血量；試劑用量少，降低了成本，從而大大提高了經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。操作簡(jiǎn)便，節(jié)省了人力、精力，從而給檢驗(yàn)工作人員讓出更多時(shí)間，有利于提高檢驗(yàn)質(zhì)量。

[1]葉應(yīng)嫵.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版,南京:東南大學(xué)出版社,2006:549-552.

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.20.105

710068 陜西省交通醫(yī)院 (郝陸飛 張妮)