岳 鑫 黃莉萍 岳 磊 孔祥波

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院泌尿外科,吉林 長春 130033)

多種泌尿外科手術(shù)術(shù)后為防止輸尿管狹窄的發(fā)生,需要置入輸尿管支架。目前臨床使用的多為不可降解的硅膠輸尿管支架,術(shù)后 2～4個(gè)月須將支架取出,增加了患者痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。本研究中,利用生物醫(yī)用高分子材料制備的己內(nèi)酯/丙交酯共聚物(PCLA,CL∶LA=30∶70)及己內(nèi)酯/環(huán)氧乙烷共聚物(PCL/PEO=50∶50)進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)降解研究,以評(píng)價(jià)己內(nèi)酯作為原料與其他高分子材料共聚后的應(yīng)用前景。

1 材料與方法

1.1 材料 精密光電分析天平(上海天平儀器廠)、掃描電子顯微鏡、410型凝膠滲透色譜儀(GPC)美國 WATERS公司、真空干燥箱。無規(guī)聚合物 PCLA(CL∶LA=30∶70)和嵌段共聚物PCL-PEO(PCL-PEO=50∶50)由中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所生物醫(yī)用高分子材料中心合成。試樣截成 10 mm×5 mm、厚約 1mm的片狀,每片材料質(zhì)量約 100 mg。真空干燥 48h,以除去殘余有機(jī)溶劑,甲醛熏蒸消毒后備用。健康成年 SD大鼠 80只(吉林大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供),性別不限,體重 250～300 g。1.2 方法

1.2.1 分組 PCLA組:將 40只實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成 5組,每組8只,分別設(shè)為 2,4,6,8和 12 w五個(gè)時(shí)間點(diǎn)。PCL-PEO組:SD大鼠 40只分為 5組,每組 8只,分成 2,4,6,8和 12 w不同的時(shí)間組。

1.2.2 埋植過程 所有動(dòng)物均籠養(yǎng),喂以全價(jià)精飼料。大鼠麻醉生效后,于背部中線切開皮膚長約 3 cm左右,逐層分離達(dá)脊柱肌肉。于無菌條件下將PCLA試件植入各組大鼠脊柱肌肉中,逐層縫合。PCL-PEO組中,將PCL-PEO試件植入各組大鼠脊柱肌肉中,

1.2.3 取材過程 分別在 2,4,6,8 w和 12 w以過量麻醉處死大鼠,取出大鼠背部試件及外周的肌肉組織,小心去除包裹材料的組織包膜,用蒸餾水反復(fù)沖洗,試樣真空干燥48 h后備用。

1.2.4 分析評(píng)價(jià)方法 測(cè)量材料的質(zhì)量和分子量變化,并計(jì)算失重率及生物降解率。失重率:小心去除包裹材料的組織包膜,用蒸餾水反復(fù)沖洗,試樣真空干燥 48h后,用分析天平稱取材料的重量為殘重。試樣的原始重量為初重,為 100 mg。失重率 =100%(初重-殘重)/初重。分子量:凝膠滲透色譜儀測(cè)量材料的分子量。以聚苯乙烯(PS)為標(biāo)樣,氯仿為流動(dòng)相,用凝膠滲透色譜(GPC)測(cè)量材料的數(shù)均相對(duì)分子量。生物降解率 =100%(初始分子量 -降解后分子量)/初始分子量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用 SPSS9.0統(tǒng)計(jì)軟件,組間比較采用方差分析及 U檢驗(yàn),t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 失重率 PCLA在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中于 2,4,6,8w和 12 w時(shí)的失重率分別是 1.28%,2.37%,5.68%,18.3%及 32.1%。PCLEO在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中于 2,4,6,8 w和 12 w時(shí)的失重率分別是0.96%,1.48%,7.56%,14.6%,23.2%。明顯失重在 6～8 w之后(P＜0.01)。在降解的初期(0～6 w)無明顯失重。

2.2 生物降解率 PCLA于 2,4,6,8 w和 12 w時(shí)分別為22.47%,46.54%,51.86%,52.99%和 57.8%。聚合物酯鍵斷裂成低分子量物質(zhì),高分子鏈斷裂速率較快在共聚物開始降解的 0～4 w,其分子量下降迅速,PCLA于 4 w時(shí)其生物降解率已達(dá)到 46.54%,隨后緩慢,12 w時(shí)的生物降解率僅達(dá)到 57.8%。

2.3 電鏡觀察 隨著降解時(shí)間的延長,表面出現(xiàn)大量侵蝕后的小孔洞,于 8w時(shí)可見裂口加深加寬,試樣結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)疏松狀,可見有斷層出現(xiàn),斷面有較深的裂洞?？梢钥闯銎涿黠@吸收時(shí)間為 8 w左右,斷面降解快于表面。見圖 1。

圖1 電鏡觀察降解變化

3 討 論

3.1 在臨床應(yīng)用及生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)上的探索 生物醫(yī)學(xué)工程是從工程學(xué)及多個(gè)層面上研究生物體,特別是人體的結(jié)構(gòu)、功能和生命現(xiàn)象,研究和開發(fā)用于防治疾病、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料、制品、裝置系統(tǒng)和工程技術(shù)的學(xué)科。支架材料的發(fā)展經(jīng)歷了從聚乙烯,硅樹脂等惰性材料到近期高分子聚酯類降解材料的漫長發(fā)展過程。對(duì)于多數(shù)輸尿管手術(shù),腎盂手術(shù),腎鏡手術(shù),輸尿管鏡手術(shù),術(shù)后均需留置輸尿管支架管,留置支架管已成為目前一種常用的手術(shù)方式。輸尿管支架管的作用是引流尿液,維持管徑,防止狹窄。對(duì)于支架管的長期留置,支架管的二次有創(chuàng)取出,各種原因?qū)е碌妮斈蚬荛L段狹窄或缺損等問題的處理,一直是臨床醫(yī)生所必須面臨及較難解決的問題,可降解性輸尿管支架管的出現(xiàn)為上述問題的解決提供了可能性,它可以為短期留置,長期留置提供選擇的可能,避免二次有創(chuàng)取出。

理想的輸尿管支架應(yīng)具備以下特征:(1)可操作性。從外形設(shè)計(jì)到物理性能都要考慮操作方便。(2)良好的支架功能。(3)無刺激性,生物相容性好。材料本身應(yīng)該不致畸、不致癌、不致突變,局部無刺激性。(4)抗感染和抗硬化特性。(5)對(duì)于要求長期植入(大于 1個(gè)月)的輸尿管支架應(yīng)該在體內(nèi)穩(wěn)定,不降解,不變性;對(duì)于要求短期植入(小于 1個(gè)月)的輸尿管支架管則在完成支架和引流功能后可完全生物降解,隨尿液排出體外。(6)支架管造價(jià)不宜過高。

PCL和PLA及PEO作為生物降解支架材料都具有良好的加工性能〔1,2〕。選作輸尿管支架材料的 PCL力學(xué)性能優(yōu)異,但是降解時(shí)間長,體內(nèi)完全降解約需時(shí) 1～2年。與其他組分共聚能夠改進(jìn) PCL基材料生物相容性并調(diào)節(jié)降解時(shí)間。PEO本身機(jī)械強(qiáng)度不高,但是具有良好的親水性,生物相容性好。PLA的降解時(shí)間短于PCL,可加快共聚物降解的時(shí)間,使其降解周期在數(shù)月內(nèi)。通過比較,加快降解時(shí)間丙交酯的比例應(yīng)大于70%,環(huán)氧乙烷的比例應(yīng)大于 50%。因此,己內(nèi)酯基是一種可調(diào)控的輸尿管支架原料。

通過比較兩種材料發(fā)現(xiàn) PCLA降解快于 PCL-PEO。PCLA體內(nèi)降解 4 w內(nèi)大體性狀無明顯改變強(qiáng)度在 8 w內(nèi)呈增強(qiáng)趨勢(shì)。PCL均聚物的體內(nèi)降解要經(jīng)過兩個(gè)過程,第一階段是無規(guī)水解過程,重量損失不明顯,第二階段是低聚物擴(kuò)散離開材料本體,可觀察到明顯的重量損失。

通過比較,己內(nèi)酯基輸尿管支架原料既可以作為長期使用輸尿管支架材料,又可作為短期輸尿管支架材料使用。

3.2 探討失重率,降解率及電鏡下改變的內(nèi)在原理 在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,PCLA于 8 w時(shí)失重率是 18.3%,而生物降解率則是52.99%,重量的損失滯后于分子量的損失,這表明共聚物的降解過程,是屬于酯鍵斷裂的本體水解范圍〔3,4〕。電鏡下可見試樣表面出現(xiàn)增多的凹陷,逐漸變成小孔洞,裂隙增寬、加深,表明聚合物降解是一個(gè)酯鍵無規(guī)水解過程。降解材料的降解可分為本體降解和表面腐蝕降解。表面腐蝕降解的特征是材料的降解僅發(fā)生于材料的表面,而材料內(nèi)部結(jié)構(gòu)基本保持不變,材料的降解速度僅取決于材料同周圍組織液的接觸面積。

聚合物體內(nèi)肌肉埋植實(shí)驗(yàn)中其降解過程,主要是水解過程,但亦與體內(nèi)酶、血液循環(huán),應(yīng)力等多種因素有關(guān)〔5～8〕。 PCL是半晶聚合物,當(dāng)與 PLA以化學(xué)鍵形成共聚物時(shí),PCL能夠排列形成規(guī)整的結(jié)構(gòu),PLA存在于 PCL的非晶區(qū),降解時(shí),由于PLA降解速率快于 PCL,非晶區(qū)的組分首先降解,故而 PCLA降解性快于單純PCL。在本實(shí)驗(yàn)中,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)8 w PCLA的生物降率已達(dá)到約 50%左右。結(jié)果說明共聚物的降解是從較快的組分開始的,而且結(jié)晶區(qū)降解速度慢于非結(jié)晶區(qū)降解速度,親水組分降解快于非親水組分。因此,將兩種或兩種以上具有不同的降解速率的單體進(jìn)行共聚后,通過調(diào)節(jié)共聚物的組成,可以達(dá)到調(diào)節(jié)共聚物生物降解速率的目的。

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