韋素珍 ，黃艷蓮 ，陸貽遜 ，黃桂雄 ，趙善民 ，晉 玲 ，黃彥峰

（右江民族醫(yī)學(xué)院，廣西百色 533000）

隨著社會(huì)逐漸步入老齡化階段，中國(guó)已經(jīng)成為一個(gè)典型的“未富先老”的國(guó)家，衰老及老年群體的健康問(wèn)題已成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱門(mén)。大量資料表明，黃精含有皂苷、黃精參、多糖、醌類(lèi)、氨基酸及微量元素等多種生物活性物質(zhì)[1-2]，對(duì)機(jī)體具有一定的降血壓、血脂等作用，也有部分研究表明黃精具有抗衰老作用[3-5]，但目前相關(guān)深入研究不多。為此，本實(shí)驗(yàn)研究不同濃度的黃精提取液對(duì)老齡小鼠心、腦組織中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的影響，以進(jìn)一步探討黃精的抗衰老作用，為黃精的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種小白鼠24只（由右江民族醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供），均為雌性。鼠齡13~15周，體重30~42 g，隨機(jī)分為黃精提取液高劑量組、中劑量組、低劑量組和對(duì)照組，每組6只，分籠飼養(yǎng)。

1.2 黃精提取液的制備

稱取100 g黃精干品（產(chǎn)地廣西，購(gòu)于南寧生源中藥飲品有限責(zé)任公司，批號(hào)090903），用自來(lái)水浸泡12 h，加自來(lái)水至500 ml，煮沸30 min，自然冷卻至室溫后過(guò)濾，保存濾液，將自來(lái)水加入濾渣至500 ml，再次煮沸30 min后過(guò)濾。合并2次濾液再加入95%乙醇50 ml醇提，水浴加熱使乙醇完全揮發(fā)，幷濃縮至100 ml，制成1.0 g/ml的黃精提取液，4℃低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

從第1天起，全部小鼠給予正常飼料和飲水，將黃精提取液濃度15、10、5 g/kg依次給高劑量組、中劑量組、低劑量組灌胃，對(duì)照組給予生理鹽水5 g/kg灌胃，每天灌胃1次，連續(xù)21 d，室溫控制在25~28℃，濕度為50%。第22天采取頸椎脫臼法處死小鼠，迅速取出其心、腦組織，用冰凍生理鹽水洗凈，濾紙吸干。稱重后制備成10%和1%的組織勻漿，分別測(cè)定組織勻漿中的SOD、MDA含量。

1.4 10%和1%組織勻漿的制備

取組織塊在冰凍生理鹽水中漂洗，濾紙吸干稱重，放入勻漿管中剪碎并加入該組織塊重量9倍的4℃冰凍生理鹽水，用勻漿機(jī)勻漿（15 000 r/min，連續(xù)3~5次）并制備成10%的組織勻漿液，再將其中一部分10%的組織勻漿液用生理鹽水按1∶9稀釋成1%的組織勻漿液，最后用10%勻漿液和1%勻漿液分別加藥并離心（3 000 r/min，10 min）。

1.5 氧自由基的測(cè)定

心、腦組織勻漿中SOD、MDA含量的測(cè)定均按南京建成生物工程研究所提供的試劑盒說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行操作，組織中蛋白含量的測(cè)定采用四川省邁克科技有限責(zé)任公司提供的總蛋白Doumas法檢測(cè)試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，測(cè)定儀器用722型分光光度計(jì)（上海第三分析儀器廠）。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用 SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用方差分析法（LSD法），P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 黃精提取液對(duì)小鼠心、腦組織SOD含量的影響

結(jié)果顯示，除高劑量組腦組織SOD含量升高不明顯外，其余各黃精提取液實(shí)驗(yàn)組心、腦SOD含量均較對(duì)照組明顯升高（P＜0.01），其中以低量組變化最明顯，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 黃精提取液對(duì)小鼠心、腦組織SOD、MDA含量的影響（x±s）

2.2 黃精提取液對(duì)小鼠心、腦組織MDA含量的影響

結(jié)果顯示，黃精提取液實(shí)驗(yàn)組心、腦組織中MDA含量與對(duì)照組相比均有所降低，其中中劑量組明顯降低（P＜0.01），高劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），低劑量組變化不明顯，結(jié)果見(jiàn)表1。

3 討論

在生命活動(dòng)的新陳代謝過(guò)程中，自由基是生命活動(dòng)過(guò)程中生物化學(xué)反應(yīng)的中間產(chǎn)物。在健康機(jī)體內(nèi)自由基的形成和清除處于一種動(dòng)態(tài)平衡，一旦這種動(dòng)態(tài)平衡遭到破壞，自由基積累過(guò)量時(shí)就會(huì)造成對(duì)組織的損害，引起衰老以及多種疾病的發(fā)生[6]。超氧陰離子自由基是機(jī)體代謝過(guò)程中的一種活性氧[7]，它可以攻擊生物膜上的不飽和脂肪酸，并發(fā)生一系列連鎖反應(yīng)，生成脂質(zhì)過(guò)氧化物——MDA，MDA可以攻擊蛋白質(zhì)、核酸大分子等，最終引起細(xì)胞代謝及功能障礙，導(dǎo)致細(xì)胞衰老死亡。因此，通過(guò)測(cè)定MDA含量的高低可以間接反映組織細(xì)胞的損傷程度[8-9]。SOD是一種清除氧自由基的關(guān)鍵酶[10-11]，能夠清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，檢測(cè)SOD含量的高低可以間接反映機(jī)體清除自由基的能力。因此，通過(guò)測(cè)定組織中SOD和MDA含量可了解機(jī)體的生理狀態(tài)。大量研究表明，SOD含量與物種壽命呈正相關(guān)，在保護(hù)心、腦功能及延緩衰老方面發(fā)揮重要作用。隨著年齡的增加，體內(nèi)SOD的活性降低，MDA含量增加。隨著社會(huì)步入老齡化階段，衰老問(wèn)題已受到社會(huì)的普遍關(guān)注。因此，研究清除氧自由基的抗氧化劑用于保護(hù)細(xì)胞和組織免受損傷或減輕其受損程度具有重要意義，并可為保健及延緩衰老提供一些重要的依據(jù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，服用黃精提取液3周后，除高劑量組腦組織SOD含量升高不明顯外，其余各黃精提取液實(shí)驗(yàn)組心、腦SOD含量均較對(duì)照組明顯升高（P＜0.01），其中以低量組變化最明顯。MDA含量均低于正常對(duì)照組，其中以中劑量組降低最明顯（P<0.01），高劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明黃精提取液中的某種生物活性物質(zhì)在參與清除自由基或間接增強(qiáng)機(jī)體其他清除自由基系統(tǒng)的功能中起重要作用。在本實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組小鼠心、腦組織SOD含量均高于對(duì)照組，但以低劑量組最明顯，說(shuō)明低劑量組所對(duì)應(yīng)的黃精提取液的濃度抗自由基損傷的能力較強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)組小鼠心、腦組織的MDA含量均低于對(duì)照組，中劑量組降低最明顯（P<0.01），低劑量組MDA下降不明顯。這可能是因?yàn)辄S精提取液中的生物活性物質(zhì)在提高機(jī)體對(duì)抗超氧陰離子能力上較明顯，而對(duì)如羥自由基、過(guò)氧化氫等自由基的清除能力較弱。所以同一濃度的黃精提取液其抗自由基損傷能力較強(qiáng)，但其清除自由基的能力不一定較強(qiáng)，其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，服用黃精提取液對(duì)機(jī)體抗氧化及延緩衰老有良好的作用，這與民間常用黃精來(lái)強(qiáng)身健脾、補(bǔ)中益氣、延長(zhǎng)壽命一致。

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