胡盛松，袁梅蕊

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科，湖南 長(zhǎng)沙 410007）

甲砜霉素是氯霉素的同類物，抗菌譜和抗菌作用與氯霉素相仿，具廣譜抗微生物作用，用于敏感菌如流感嗜血桿菌、大腸埃希菌、沙門菌屬等所致的呼吸道、尿路、腸道等感染。目前國(guó)內(nèi)現(xiàn)有的普通片日服3～4次，給藥次數(shù)多，易漏服，而且血液中藥物濃度波動(dòng)較大，有峰谷現(xiàn)象。筆者參照文獻(xiàn)[1－3]將甲砜霉素制成緩釋制劑，以減少服藥次數(shù)，避免峰谷現(xiàn)象，降低藥物的毒副作用，提高患者的順應(yīng)性?，F(xiàn)將甲砜霉素緩釋片的制備方法及體外釋放度考察情況報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

ZRS－4型智能溶出度測(cè)定儀（天津大學(xué)無(wú)線電廠）；LC－10AT型高效液相色譜儀（日本島津）；Adventurer AR1140型電子分析天平（美國(guó)奧豪斯國(guó)際貿(mào)易有限公司）；DP－120型單沖壓片機(jī)（東港市制藥設(shè)備廠）。甲砜霉素（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為130433－200501，供含量測(cè)定用）；甲砜霉素原料藥（武漢鑫華醫(yī)藥化學(xué)原料生產(chǎn)責(zé)任有限公司）；預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素（浙江湖州展望化學(xué)藥業(yè)有限公司）；乳糖（上海昌為藥用輔料有限公司）；羥丙基甲基纖維素（HPMC，上?？?lè)康包衣技術(shù)有限公司）；硬脂酸鎂（山東聊城阿華制藥有限公司）；乙腈為色譜純；水為重蒸水。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備方法

取甲砜霉素適量，加入HPMC、預(yù)膠化淀粉充分混合均勻，加入適量85％乙醇制軟材，制粒，50℃左右干燥，整粒，加入潤(rùn)滑劑滑石粉及助流劑硬脂酸鎂，壓片即得。

2.2 緩釋片體外釋放度測(cè)定

2.2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈－水（1∶4）；檢測(cè)波長(zhǎng)：225 nm；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：10μL。

2.2.2 溶液制備

取甲砜霉素緩釋片適量，精密稱定（約相當(dāng)于甲砜霉素10mg），置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。稱取甲砜霉素對(duì)照品約10mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。取不含甲砜霉素的陰性樣品，按樣品溶液制備法制備陰性對(duì)照品溶液。

2.2.3 方法學(xué)考察

空白干擾試驗(yàn)：分別吸取2.2.2項(xiàng)下溶液各10μL，在2.2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果在供試品溶液色譜中，與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上有保留時(shí)間一致的色譜峰，而陰性對(duì)照品溶液對(duì)測(cè)定無(wú)干擾（見(jiàn)圖1）。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：精密稱取甲砜霉素對(duì)照品50mg，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，充分振蕩，使其溶解，定容。分別精密稱取該溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，置25mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，按上述色譜條件進(jìn)樣，以峰面積 A對(duì)質(zhì)量濃度 C進(jìn)行回歸，得直線回歸方程 A=28.3 C－2.85，r=0.999 9（n=5）。

圖1 高效液相色譜圖

精密度試驗(yàn)：精密量取同一對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，依法測(cè)定并計(jì)算含量。結(jié)果的 RSD為1.17％（n=6）。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別在0，2，4，6，8，10h時(shí)進(jìn)樣，依法測(cè)定并計(jì)算含量。結(jié)果的 RSD為1.42％（n=6）。

加樣回收試驗(yàn)：精密稱取已知含量的供試品溶液6份，分別精密加入甲砜霉素對(duì)照品，依法測(cè)定并計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率為99.2％，RSD為1.43％（n=6）。

2.2.4 樣品測(cè)定

按2005年版《中國(guó)藥典（二部）》[4]方法測(cè)定。以pH=6.8的磷酸鹽緩沖液為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為150 r/min，在1，2，4，6，8，10，12h時(shí)分別取溶液5mL，濾過(guò)，并立即在操作容器中補(bǔ)充磷酸鹽緩沖液5mL，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按上述色譜條件測(cè)定，按外標(biāo)法分別計(jì)算出每片在不同時(shí)間點(diǎn)的累積釋放率。

2.3 處方及工藝單因素考察

HPMC（K100－LV）用量：在保持片重不變的條件下，研究不同用量HPMC（K100－LV）對(duì)甲砜霉素體外釋放度的影響。結(jié)果見(jiàn)圖2A?？梢?jiàn)，隨著HPMC用量的增大，藥物的釋放速率逐漸變慢。當(dāng)HPMC的用量大于7％時(shí)，由于已經(jīng)形成了連續(xù)的凝膠層，用量再增加，緩釋作用增加的程度也不明顯。因此，處方中HPMC的用量選定為7％。

填充劑：固定處方中其他成分不變，且填充劑用量為50mg，分別選用微晶纖維素、乳糖、預(yù)膠化淀粉為填充劑，考察填充劑種類對(duì)藥物釋放的影響。結(jié)果見(jiàn)圖2B。可見(jiàn)，使用相同用量的填充劑，釋放速率預(yù)膠化淀粉最慢，乳糖次之，微晶纖維素最快。由于預(yù)膠化淀粉本身有黏性，有助于骨架的形成，故有較明顯的緩釋作用，故選用預(yù)膠化淀粉作填充劑。

填充劑用量：處方中其他物料不變，僅改變預(yù)膠化淀粉用量，分別加入50，100，150mg，考察釋放度。結(jié)果見(jiàn)圖2C?？梢?jiàn)，隨著預(yù)膠化淀粉用量的增大，釋放速率逐步減慢。調(diào)節(jié)骨架片中預(yù)膠化淀粉的用量對(duì)緩釋片的釋放速率有較大影響，最后預(yù)膠化淀粉用量定為150mg。

圖2 處方單因素考察

壓力：對(duì)同一處方采用不同壓力制備不同的片劑，調(diào)節(jié)壓力分別為3～5，5～8，8～10 kg，以調(diào)節(jié)緩釋片的硬度。結(jié)果見(jiàn)圖2D?？梢?jiàn)，3個(gè)不同壓力值的樣品釋放度并無(wú)明顯區(qū)別，表明壓力在一定范圍內(nèi)對(duì)藥物釋放幾乎無(wú)影響。

2.4 釋放度測(cè)定方法及條件選擇

測(cè)定方法：以磷酸鹽緩沖溶液為釋放介質(zhì)，分別在轉(zhuǎn)籃法和槳法在轉(zhuǎn)速為150 r/min的情況下考察釋放度。結(jié)果見(jiàn)圖3A?？梢?jiàn)，當(dāng)轉(zhuǎn)速相同時(shí)，轉(zhuǎn)籃法比槳法的釋放速率略慢，這可能是由于部分溶蝕的凝膠骨架堵塞了轉(zhuǎn)籃的網(wǎng)眼，影響了轉(zhuǎn)籃的空隙率；也可能是由于骨架片容易上浮貼在轉(zhuǎn)籃的頂部，減少了與介質(zhì)的接觸面積，從而影響了擴(kuò)散速率。

圖3 釋放度測(cè)定方法與條件選擇

轉(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)速：考察了緩釋片在轉(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)速分別為50，100，150 r/min時(shí)藥物的釋放情況。結(jié)果見(jiàn)圖3 B。可見(jiàn)，轉(zhuǎn)速增加對(duì)溶出速率的影響較大，因此確定以150 r/min作為測(cè)定溶出速率的轉(zhuǎn)速。

2.5 驗(yàn)證試驗(yàn)

按照篩選的處方進(jìn)行3次驗(yàn)證試驗(yàn)，并按上述篩選的釋放度方法進(jìn)行測(cè)定，以驗(yàn)證該處方的重現(xiàn)性和可操作性。結(jié)果表明，放大后釋放度總體上變化不大。因此該工藝穩(wěn)定，處方的重現(xiàn)性可靠。

2.6 釋藥機(jī)制

將所制得的甲砜霉素緩釋片3批樣品用Peppas方程擬合。結(jié)果3批樣品 n值分別為0.65，0.72，0.68，均在0.45～0.89之間。根據(jù)Peppas方程理論，說(shuō)明其釋放機(jī)制應(yīng)該是擴(kuò)散和溶蝕同時(shí)起作用。

3 討論

在本制劑中，HPMC的含量是影響藥物釋放機(jī)制的最主要因素。HPMC含量增加，水化速度加快，可迅速形成凝膠層，使藥物釋放速率趨于緩慢。預(yù)膠化淀粉作為不溶性或部分可溶性賦形劑，可造成空間效應(yīng)，還會(huì)改變聚合物凝膠的物理滲透性，故能在片劑，表面形成有限的阻礙凝膠層，并與其他聚合物聯(lián)合應(yīng)用而成為緩釋制劑中有效的賦形劑，能使緩釋片具有較高的藥物緩釋特性。根據(jù)Peppas方程擬合結(jié)果表明，藥物以擴(kuò)散、溶蝕并存的混合型機(jī)制釋放。該處方設(shè)計(jì)合理，方法簡(jiǎn)單，工藝重現(xiàn)性好，適合工業(yè)生產(chǎn)。

[1]朱來(lái)峰，張靜芳.鹽酸氨溴索緩釋片的制備及釋放度研究[J].海峽藥學(xué)，2009，12（5）：20－22.

[2]袁偉清.瑞貝克緩釋片的制備及其體外釋放度的試驗(yàn)研究[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2009，7（6）：103.

[3]陳寶林，楊 昕.不同廠家卡馬西平溶出度考察[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2007，26（9）：1 064－1 067.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（二部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄74.