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        廣藿香抗青枯病鑒定技術(shù)研究*

        2010-09-17 06:40:32楊春雨魏建和馮錦東甘炳春
        中國藥業(yè) 2010年24期
        關(guān)鍵詞:青枯病土壤濕度抗病性

        楊春雨 ,魏建和 ,,張 爭 ,馮錦東 ,甘炳春

        (1.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所海南分所·海南省南藥資源保護(hù)與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,海南 萬寧 571533;2.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所,北京 100193)

        廣藿香是唇形科植物廣藿香 Pogostemon cablin(Blanco)Benth.,以葉、梗入藥,有芳香化濕、和胃止嘔、祛暑解表的功能,是重要的南藥之一[1]。廣藿香原產(chǎn)于菲律賓、馬來西亞等國,宋代引入我國。廣藿香分為石牌香、高要香、湛江香和海南香,在海南省萬寧市有悠久的種植歷史。廣藿香在海南種植時(shí)出現(xiàn)了多種病害,嚴(yán)重影響著藥材產(chǎn)量和質(zhì)量。在對病害的多種防治方法中,抗病育種是一種很好的方法,具有廣闊的發(fā)展前景,而廣藿香抗青枯病鑒定技術(shù)是抗病育種技術(shù)的有機(jī)組成部分。筆者對比進(jìn)行了探討,報(bào)道如下。

        1 材料與方法

        1.1 海南廣藿香材料

        海南廣藿香取材于萬寧市。

        1.2 廣藿香青枯病特征及病原菌

        植株開始發(fā)病時(shí)部分葉片萎垂,后發(fā)展到整株調(diào)萎,最后根部腐爛;剖開病株根部和莖部,發(fā)現(xiàn)病部維管變褐;擠壓切口,有乳白色菌濃溢出;作切片顯微鏡檢查,見病部維管組織有細(xì)菌溢出。病原菌從萬寧市種植單位采樣分離、鑒定獲得。廣藿香青枯病病原是青枯假單胞桿菌 Pseudomonasso lanacearum(Smith)Smith.,生物變種3,生理小種1[2]。

        1.3 抗病性鑒定原理

        抗病性比較原理:在相同侵染強(qiáng)度致病菌、相同接種條件下,不同品種或不同株系植物表現(xiàn)出不同的發(fā)病情況。發(fā)病較早品種的抗病性弱,發(fā)病較晚品種的抗病性強(qiáng),一直不發(fā)病品種為免疫品種。

        抗病性比較方法:在相同的大田條件和菌種濃度條件下,廣藿香青枯病抗性評價(jià)可以用發(fā)病時(shí)間差來表示??剐圆畹钠贩N,接種后,發(fā)病較快;抗性好的品種,接種后,發(fā)病較慢;免疫品種,接種后一直都不發(fā)病。因此,這些情況可以用時(shí)間差比較其抗性差異。

        抗病性品種等級分類:免疫品種為接種后不發(fā)病;抗病品種為接種后在較晚的一段時(shí)間內(nèi)發(fā)病;感病品種為接種后在較早的一段時(shí)間內(nèi)發(fā)病。

        1.4 抗性比較試驗(yàn)方法

        大田接種方法:采用灌根接種法。在大田中,將一定濃度和質(zhì)量的菌種懸浮液灌在植物根部,讓菌種在自然條件下侵入植物體內(nèi),從而達(dá)到接菌的目的。

        大田溫度、土壤濕度記錄方法:土壤含水率測定方法要點(diǎn)為土壤過1 mm篩,土樣烘干溫度為(105±2)℃,用稱重器裝載土樣,室溫稱取數(shù)據(jù)。干重測定要測至“恒重”,數(shù)據(jù)精確到0.001 g。土壤(質(zhì)量)含水率計(jì)算方法為土壤(質(zhì)量)含水率(%)=[(土樣濕重-土樣干重)/土樣干重]×100。

        土壤特點(diǎn)、菌種和苗木標(biāo)準(zhǔn):土壤為沙壤土,風(fēng)干土含水率3.8%,最大含水率38%;本所試驗(yàn)田實(shí)驗(yàn)期間土壤濕度為15% ~25%;大田日平均溫度為20~35℃;將在KBA培養(yǎng)基上培養(yǎng)24~48 h的菌苔,用蒸餾水稀釋,并在30℃、200次/min的恒溫振蕩器中,振蕩30 min,即得菌種;苗木標(biāo)準(zhǔn)為扦插種植40~60 d,高度15~20 cm。

        2 結(jié)果

        2.1 灌根接菌法濃度篩選試驗(yàn)

        苗木標(biāo)準(zhǔn)為高度20~25 cm,種植40~60 d;實(shí)驗(yàn)期間,日平均溫度為20~35℃,土壤濕度為15% ~25%;菌種懸浮液濃度分別為 105/mL,106/mL,107/mL,用量為 5~10 mL/株。以 20株為一小樣,重復(fù)3次,以滅菌水代替菌種懸浮液,設(shè)為CK對照(表1)。結(jié)果顯示,濃度為107/mL時(shí)有利于抗病植株的徹底比較,其他兩個(gè)濃度組表現(xiàn)比較力不足。

        表1 廣藿香青枯菌致病性濃度篩選試驗(yàn)表

        2.2 廣藿香青枯菌107/mL濃度致病性試驗(yàn)

        苗木標(biāo)準(zhǔn)為高度20~25 cm,種植40~60 d;實(shí)驗(yàn)期間,日平均溫度為20~35℃,土壤濕度為15% ~25%;菌種濃度為107/mL,用菌量為5 mL/株。以100株為一小樣,重復(fù)3次,以滅菌水代替菌種懸浮液,設(shè)為CK對照(表2)。結(jié)果在相同的接種條件下,不同抗性的植株在發(fā)病時(shí)間上存在很大的差異,抗性弱的植株發(fā)病較早,抗性強(qiáng)的植株發(fā)病較晚。

        表2 廣藿香青枯菌107/mL濃度致病性試驗(yàn)表

        2.3 抗性篩選分級標(biāo)準(zhǔn)

        對于海南萬寧市的廣藿香,用廣藿香青枯病病原菌濃度達(dá)到107~108/mL、用量5 mL/株的接種水平,日平均溫度為20~35℃,土壤濕度為15% ~25%。品種不同抗性在發(fā)病時(shí)間上的不同見表3。

        表3 抗性篩選分級

        3 討論

        采用灌根接種法,廣藿香青枯病病原菌濃度達(dá)到107~108/mL、用量5 mL/株,在日平均溫度為20~35℃、土壤濕度15% ~25%等條件下,能檢測到不同抗性的廣藿香苗木。

        [1]中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草(第7冊)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1999:130-134.

        [2]文衍堂,鄭小波.海南島廣藿香、沙姜青枯病病原鑒定[J].熱帶作物學(xué)報(bào),1984(2):113-120.

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