朱來華,鄭小龍,肖西志,鄧明俊,辛學(xué)謙,于紅光,魏乃林

(山東出入境檢驗(yàn)檢疫局,山東青島 266002)

2009年3月底至4月中旬,墨西哥、美國(guó)等國(guó)家接連報(bào)道人群感染所謂的“豬流感”,迅速蔓延到全世界,發(fā)展成全球性流感大流行,已擴(kuò)散到中國(guó)。當(dāng)初因A型H1N1流感病毒帶有豬A型流感病毒的基因片段而誤認(rèn)為豬流感,其病毒基因組是由4株已知的A型流感(1株人流感、1株禽流感、2株豬流感)病毒的基因片段重組而成,因此世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)將人的豬流感更名為大流行性甲型(A型)H1N1流感(Pandemic influenza A/H1N1/2009)[1]。豬流感病毒的M、H1基因分別與A型流感病毒歐亞系、北美系非常相似,N1基因與大流行性甲型H1N1流感病毒的關(guān)系非常密切,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(Office International des Epizooties,OIE)由此認(rèn)定為新型A型H1N1流感病毒(Novel influenza virus A/H1N1)[2]。新型A型H1N1豬流感病毒與人的甲型H1N1流感病毒之間的基因序列具有高度同源性,值得高度警惕[3]。通常情況下,人類很少感染豬流感病毒。但血清學(xué)研究表明,豬流感可感染與其密切接觸的人群,如飼養(yǎng)人員等[4]。也已證實(shí)有豬流感病毒在人際間傳染的病例,其傳染途徑、臨床癥狀與季節(jié)性流感類似[5],從而引起了聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(Food and Agriculture Organization,FAO)、WHO 、OIE的高度關(guān)注。

本文根據(jù)OIE最新疫情通報(bào)情況,如疫病信息周報(bào)(Weekly Disease Information)內(nèi)的緊急通報(bào)(Immediate notifications)和后續(xù)報(bào)告(follow-up reports),綜述了其2009年通報(bào)的新型豬流感A型H1N1疫情動(dòng)態(tài)(截止到2009年9月4日),總結(jié)其流行病學(xué)規(guī)律,提出了針對(duì)性預(yù)防與控制措施[2]。

1 疫情動(dòng)態(tài)

2009年7月24日,新型A/H1N1豬流感疫情再次出現(xiàn)。這是在加拿大、阿根廷爆發(fā)豬流感疫情后,第3次遠(yuǎn)涉重洋在澳大利亞出現(xiàn),顯示了新的流行趨勢(shì),值得重視。

1.1 新型A/H1N1豬流感疫情首次在加拿大發(fā)生

2009年4月21日,加拿大第1次發(fā)生新型A/H1N1豬流感疫情。2009年 5月5日,加拿大向OIE提交的緊急報(bào)告中,在加拿大阿爾伯特6個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)共有可疑病例3 013例,臨床病例450例(發(fā)病率為14.9%),出現(xiàn)呼吸道癥狀(疑似流感樣臨床癥狀),沒有死亡病例,撲殺全部疑似病例。加拿大食品檢驗(yàn)局(Canadian Food Inspection Agency,CFIA)采集樣品拭子樣品和血清樣品,常規(guī) RTPCR以及PCR產(chǎn)物序列分析證實(shí)為新型A/H1N1流感病毒。

2009年6月 11日、7月 31日,加拿大分別向OIE提交第1次后續(xù)報(bào)告、第2次后續(xù)報(bào)告(最終報(bào)告)中宣布沒有出現(xiàn)新的疫情,并采取隔離檢疫等生物安全措施。

1.2 阿根廷豬群發(fā)生A/H1N1流感

2009年6月25日阿根廷向OIE提交A/H1N1流感緊急報(bào)告,2009年6月15日,阿根廷一商品豬農(nóng)場(chǎng),5 586頭豬出現(xiàn)疑似流感癥狀,823頭豬經(jīng)RT-PCR證實(shí)為A/H1N1流感,發(fā)病率為14.73%,無死亡病例。該農(nóng)場(chǎng)采取生物安全措施,自6月24日后該農(nóng)場(chǎng)未出現(xiàn)流感癥狀。

2009年7月1日阿根廷向OIE提交第1次后續(xù)報(bào)告中宣布沒有出現(xiàn)新的疫情,并采取隔離檢疫、篩查、劃定區(qū)域、清洗和消毒等生物安全措施。

2009年7月9日阿根廷向OIE提交第2次后續(xù)報(bào)告;2009年6月29日,阿根廷另一商品豬農(nóng)場(chǎng),6104頭出現(xiàn)疑似流感癥狀,1632頭經(jīng)RT-PCR證實(shí)為A/H1N1流感,發(fā)病率為26.74%,無死亡病例。

2009年7月28日阿根廷向OIE提交第3次后續(xù)報(bào)告中宣布沒有出現(xiàn)新的疫情。病毒分離、和病毒序列測(cè)定均為陽性。

1.3 澳大利亞豬群發(fā)生A/H1N1/2009流感

2009年7月31日,澳大利亞向OIE提交的緊急報(bào)告中,2009年7月24日出現(xiàn)疑似豬流感病例1 950例,臨床病例 100例,發(fā)病率為5.13%,無死亡病例。這是澳大利亞首次發(fā)生豬流感。感染病豬癥狀非常輕微(輕微咳嗽),伊麗莎白農(nóng)科院(地方實(shí)驗(yàn)室)、澳大利亞動(dòng)物衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室(國(guó)家實(shí)驗(yàn)室)進(jìn)行的ELISA、HI、RT-PCR檢測(cè)均為陽性。

在2009年8月13日提交的第1次后續(xù)報(bào)告(最終報(bào)告)中,沒有出現(xiàn)新的疫情。

1.4 智利火雞發(fā)生A/H1N1/2009流感

2009年8月11日,智利向OIE提交的緊急報(bào)告中,分別于2009年7月23日、29日火雞爆發(fā)2處流感疫情,總計(jì)疑似流感病例59554例,確診病例36585例,發(fā)病率為61.43%,無死亡病例。這是澳大利亞首次發(fā)生豬流感。臨床癥狀為孵出率從70%異常下降到30%,但未出現(xiàn)呼吸道癥狀或死亡率上升;病禽尸檢發(fā)現(xiàn)輸卵管炎、腹膜炎、卵泡發(fā)育不全 ,實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)(AGID 、ELISA 、HI、NI、RT-PCR)均為陽性。

2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果

2.1 加拿大流行的病毒

CFIA外來動(dòng)物病中心進(jìn)行了常規(guī)RT-PCR檢測(cè),其中19/24樣品M基因?yàn)殛栃浴?5/24樣品H1基因?yàn)殛栃?PCR產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果顯示,其基因相互之間完全一致;6份樣品的M基因(約244 bp)與美國(guó)、墨西哥的新型A/H1N1流感病毒序列同源性達(dá)100%,5份樣品的H1基因(約500 bp)的同源性為99%～100%。來自豬樣品的M基因與A型流感病毒歐亞系(Eurasian lineage)非常相似,而 H1基因與A型流感病毒北美系(North American lineage)非常相似,由此認(rèn)為是新型流感病毒。N基因(約1400bp)部分測(cè)序結(jié)果顯示表明為N1亞型流感病毒,與新型A/H1N1流感病毒高度相關(guān),而且與在人群中流行毒株的關(guān)系非常密切。綜合判定為新型A/H1N1流感病毒。2009年5月5日,CFIA利用PCR產(chǎn)物進(jìn)行病毒全基因組測(cè)序,結(jié)果顯示在豬內(nèi)發(fā)現(xiàn)的病毒與全世界人群引發(fā)流感疫情的新型A/H1N1流感病毒相同。

2.2 阿根廷流行的病毒

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)包括在MDCK細(xì)胞上進(jìn)行病毒分離、提取RNA進(jìn)行 RT-PCR,結(jié)果均為陽性。PCR擴(kuò)增片段包括HA基因(片段4)、NP基因(片段5)、NS基因(片段 8)、M1基因(片段 7)。PCR產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果顯示,擴(kuò)增基因片段與2株參考毒株A/California/04/2009(H1N1)和A/swine/Alberta/OTH-33-8/2009(H1N1)的同源性高于99.99%。

2.3 澳大利亞流行的病毒

13份臨床病例樣品中,其中12份為A型流感M基因qPCR陽性,9份為A型流感H1基因qPCR陽性。HA基因測(cè)序結(jié)果顯示,與全世界流行的A/Auckland/1/2009(H1N1)的同源性達(dá)99%。

2.4 智利流行的病毒

感染的農(nóng)場(chǎng)在2009年6月28日前進(jìn)行的血清學(xué)監(jiān)測(cè)中均為陰性。采集的樣品送智利衛(wèi)生部公共衛(wèi)生研究所(Public Health Institute,ISP)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),季節(jié)性H1、H3流感均為RT-PCR陰性,但A/H1N1 2009份卻為陽性,進(jìn)一步試驗(yàn)(如AGID、ELISA 、HI、NI、RT-PCR)均為陽性[10]。

智利ISP測(cè)定了火雞中發(fā)現(xiàn)的H1N1流感病毒的8個(gè)基因(HA,NA,PA,PB,PB2,NP,NS和M),并與美國(guó) A/California/4/2009病毒株、智利H1N1病毒株同源性進(jìn)行比較,其中HA基因?yàn)?9.5% 、100%,NA 為 99.5%、99.7%,PB1 為99.8%、99.9%,PB2 為 99.8%、99.8%,PA 為99.7%、99.9%,NP為 99.5%、99.7%,NS為99.8%、99.8%,M 為99.8%、99.7%。因此,ISP認(rèn)為火雞A/H1N1是智利冬天流行的A/H1N1/2009病毒變異株(access number GenBank GQ 200279 to GQ 200286)。美國(guó)國(guó)家獸醫(yī)服務(wù)實(shí)驗(yàn)室(NVSL)根據(jù)其完成的 RT-PCR結(jié)果,認(rèn)為是新型H1N1流感病毒,序列測(cè)定顯示其HA基因與CA/14/2009的同源性為99.6%,與MX/4108/2009的同源性為 99.7%,與 NY/18/2009的同源性為100%,NA基因的同源性與MX/4108/2009、CA/4/2009、AZ/02/2009和KS/02/2009的同源性也高達(dá)99.6%。

3 流行病學(xué)趨勢(shì)

3.1 加拿大

流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),2009年3月18日墨西哥發(fā)生人類甲型H1N1流感疫情。加拿大1名農(nóng)場(chǎng)雇傭木匠曾去墨西哥旅游,2009年4月12日返回,4月14日期～29日期間木匠、農(nóng)場(chǎng)主及其家人先后出現(xiàn)流感樣癥狀(加拿大公共衛(wèi)生當(dāng)局正在調(diào)查人的病例)。2009年4月21日,該農(nóng)場(chǎng)發(fā)生新型A/H1N1豬流感疫情。

3.2 阿根廷

流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),在2009年6月7日-9日,阿根廷一商品豬農(nóng)場(chǎng)2名工人出現(xiàn)流感癥狀。6月15日,該農(nóng)場(chǎng)發(fā)生A/H1N1豬流感疫情。由此認(rèn)為,再次發(fā)現(xiàn)新型A/H1N1流感病毒可能由人類傳播給豬。

3.3 澳大利亞

流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),在澳大利亞A/H1N1流感疫情發(fā)生前,曾與養(yǎng)豬場(chǎng)接觸的人員出現(xiàn)流感樣臨床癥狀,后經(jīng)確認(rèn)感染了全世界流行的A/H1N1/2009流感病毒。

3.4 智利

流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),在智利A/H1N1流感疫情發(fā)生前,一些家禽曾與農(nóng)場(chǎng)出現(xiàn)呼吸道癥狀的人員發(fā)生過接觸,RT-PCR確認(rèn)這些家禽感染了全世界流行的A/H1N1/2009流感病毒。

3.5 流行病學(xué)變化

此次新型A/H1N1豬流感疫情呈現(xiàn)重大的流行病學(xué)變化:如突破種間屏障、地理屏障。

3.5.1 突破種間屏障由人傳染給豬、禽 這是首次發(fā)現(xiàn)新型A/H1N1流感病毒可能由人類傳播給豬禽的證據(jù)。目前,尚無新型A/H1N1豬流感病毒傳染給人類的報(bào)道。當(dāng)初因人的甲型H1N1流感病毒含有豬A型流感病毒的基因片段而誤認(rèn)為豬流感。實(shí)際上,造成今年流感大流行的病毒是由4株已知的A型流感病毒重組而成,如1株人流感、1株禽流感、2株豬流感病毒,因此WHO將豬流感更名為甲型H1N1流感病毒[1]。新型A/H1N1豬流感病毒與人的甲型(A型)H1N1流感病毒之間的基因序列具有高度同源性,值得高度警惕。通常情況下,人類很少感染豬流感病毒。但血清學(xué)研究表明,豬流感可感染與其密切接觸的人群,如飼養(yǎng)人員等。也已證實(shí)有豬流感病毒在人際間傳染的病例,其傳染途徑、臨床癥狀與季節(jié)性流感類似[3-5]。

3.5.2 突破地理屏障 此次新型A/H1N1豬流感疫情先后在北美洲的墨西哥、南美洲的阿根廷以及遠(yuǎn)在大洋洲的澳大利亞先后暴發(fā),應(yīng)密切關(guān)注。

4 豬流感的公共衛(wèi)生意義

一般而言,流感病毒具有宿主特異性,從一種動(dòng)物傳到另一種動(dòng)物是相當(dāng)困難的。越來越多的資料表明,豬作為流感病毒的“混合器”,在流感病毒跨種屬障礙而感染新宿主的過程中,起著重要的作用[6]。由于豬上皮細(xì)胞具有唾液酸2,6-半乳糖苷和唾液酸2,3-半乳糖苷,人流感病毒可與前者結(jié)合,而禽流感病毒與后者結(jié)合,因此豬上皮細(xì)胞就能夠被人流感病毒和禽流感病毒感染,而成為毒株間基因重組的活載體[7]。豬是人流感病毒和禽流感病毒雙向傳播的中介宿主和基因重組的混合器,因此豬在“禽-豬-人”的種間傳播鏈中,扮演著流感病毒中間宿主及多重宿主的作用,在人和動(dòng)物流感的病原學(xué)、分子進(jìn)化和生態(tài)學(xué)及流行病學(xué)中占有舉足輕重的地位,具有重要的公共衛(wèi)生意義。

基于對(duì)甲型(A型)流感病毒本身結(jié)構(gòu)及其流行情況的深入研究,越來越多的證據(jù)表明人類流感病毒與動(dòng)物流感病毒密切相關(guān)。這些研究證明了感染豬的流感病毒具有感染人的潛力并能使與豬接觸的人員產(chǎn)生急性、致死性呼吸道疾病。流行于歐洲豬群的類禽H1N1病毒可以感染人并具有在人身上復(fù)制的能力,這增加了新流感病毒基因經(jīng)豬體重排后傳播給人的可能性[8-9];Bikow r認(rèn)為人類 H3N2可能長(zhǎng)期存在于豬中,而豬是人類甲型流感病毒暴發(fā)流行的倉庫。這些病毒只在人群中引起有限的傳播,可能是因?yàn)槭澜绺鞯氐娜巳簩?duì)H3N2病毒有較高水平的免疫力[10]。

因此,對(duì)豬流感的監(jiān)測(cè)作為預(yù)測(cè)和防止流感大暴發(fā)的最重要手段在歐美國(guó)家早已引起關(guān)注并達(dá)成共識(shí)。

5 防控措施

5.1 預(yù)防措施

目前,豬流感尚無特效的治療藥物和方法。平時(shí)注意消除應(yīng)激因素,采取良好的飼養(yǎng)管理和嚴(yán)格的生物安全措施,對(duì)一切可能被污染的場(chǎng)所、設(shè)施等進(jìn)行清洗、消毒。不同種類的動(dòng)物,特別是豬和禽類,不能混養(yǎng)。除飼養(yǎng)人員外,嚴(yán)格控制人與豬的直接接觸。對(duì)野禽的帶毒情況予以重視,防止野禽、昆蟲和鼠類進(jìn)入。

預(yù)防和控制豬流感,最重要的是嚴(yán)防豬流感病毒從國(guó)外傳入,應(yīng)對(duì)進(jìn)口的豬及其產(chǎn)品進(jìn)行嚴(yán)格的檢疫,檢疫項(xiàng)目應(yīng)包括豬流感。入境檢疫如發(fā)現(xiàn)豬流感感染,全群動(dòng)物或全批產(chǎn)品應(yīng)作退回原輸出國(guó),或全群作銷毀處理。進(jìn)口活豬,入境隔離檢疫合格,轉(zhuǎn)入生產(chǎn)養(yǎng)殖階段,仍應(yīng)作生產(chǎn)過程中的疫病監(jiān)測(cè)和流向控制,特別不能與家禽直接接觸。進(jìn)口豬肉和豬肉制品的,其存放、加工單位應(yīng)實(shí)施檢疫監(jiān)督制度。

5.2 撲滅及控制措施

一旦暴發(fā)豬流感,必須立即逐級(jí)上報(bào)疫情。豬流感的控制措施主要包括早期診斷,劃定疫區(qū),嚴(yán)格隔離、封鎖,緊急撲殺陽性動(dòng)物,對(duì)疫區(qū)內(nèi)可能受到豬流感病毒污染的場(chǎng)所、設(shè)施進(jìn)行徹底、嚴(yán)格的清洗、消毒,禁止活豬及其產(chǎn)品流通,以防疫情擴(kuò)散、蔓延。如果發(fā)現(xiàn)了豬流感疑似病例,就應(yīng)進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查,進(jìn)一步確定豬群的發(fā)病情況,盡快劃定疫區(qū),建立隔離檢疫區(qū),制定緊急嚴(yán)格的撲滅措施。對(duì)進(jìn)出入豬場(chǎng)的人員和設(shè)備必須實(shí)行嚴(yán)格的消毒隔離措施。

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