周建

(東?？h中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 東海 222300)

慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，它的發(fā)展和后果主要取決于宿主的免疫應(yīng)答。TH1細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ和IL-2等細(xì)胞因子，TH2細(xì)胞產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-6與IL-10等細(xì)胞因子[1]。它們在CHB患者病毒持續(xù)感染的發(fā)病機(jī)理中起重要作用。我們對68名CHB患者血清中 HBV DNA、IFN-γ和IL-10的含量進(jìn)行分析，探討其與肝損傷的關(guān)系，為CHB治療提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病例選擇 所有病例均為2006年3月～2008年5月期間在我院住院治療的CHB患者，診斷符合2000年西安會議修訂的《病毒性肝炎防治方案(試行)》的標(biāo)準(zhǔn)[2]，選擇了68名未經(jīng)免疫或抗病毒治療的CHB患者,其中男46例，女22例，年齡22～48歲，均齡31±3歲。所有患者在檢測前均未使用過免疫制劑和抗病毒治療，并排除其他病毒型肝炎的感染，以20名獻(xiàn)血員為對照組，一般資料同觀察組。

1.2 標(biāo)本收集 靜脈采血4ml，分離血清置-20℃保存，集中檢測HBV-DNA載量及IL-10、IFN-γ水平。

1.3 方法 IL-10、IFN-γ水平采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測定，試劑由深圳晶美生物工程有限公司提供，血清HBV-DNA載量采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)，試劑購自中山達(dá)安生物科技發(fā)展有限公司，嚴(yán)格按說明書操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS 12.0軟件包分析。

2 結(jié)果

2.1 不同HBV載量及對照組IL-10、IFN-γ的水平各不同，IFN-γ水平隨著患者體內(nèi)HBV載量的增加而減少，IL-10、ALT的水平則相反，與對照組比較有顯著增加，各組與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義見表1。

表1 不同HBV載量及對照組ALT、IL-10、IFN-γ的水平比較

2.2 慢乙肝患者IFN-γ水平變化與HBVDNA載量呈負(fù)相關(guān) ((γ=-0.88，P＜0.001)，IL-10、ALT 水平變化與HBV-DNA載量變化呈正相關(guān)(分別為γ=0.82，P＜0.001；γ=0.76，P＜0.001)。

2.3 31例使用拉米夫定抗病毒治療6個(gè)月后，患者血清中HBV-DNA載量、IL-10、ALT水平下降，IFN-γ水平上升，各指標(biāo)變化情況見表2。

表2 31例抗病毒治療6個(gè)月后病毒載量、ALT、IL-10、IFN-γ的水平變化

3 討論

慢性乙型肝炎患者機(jī)體免疫功能紊亂特別是細(xì)胞免疫功能紊亂可能導(dǎo)致肝損害和病程遷延不愈。高水平病毒復(fù)制和抗原負(fù)載是T細(xì)胞對HBV抗原低反應(yīng)性的主要因素[3]，研究表明TH1型細(xì)胞因子與殺滅HBV和肝炎活動性增強(qiáng)有關(guān)并有利于病毒的清除[4]。而TH2型細(xì)胞因子與慢性HBV感染有關(guān)[5]。TH1/TH2細(xì)胞失平衡在慢性HBV感染中的作用日益受到人們關(guān)注。HBV感染的慢性化一直普遍認(rèn)為主要是人體細(xì)胞免疫功能降低所致，但其細(xì)胞免疫功能低下的機(jī)制尚不明確。TH1/TH2型細(xì)胞的失平衡似能較合理的解釋這一機(jī)制。

IL-10和IFN-γ參與了肝炎的病理過程。當(dāng)患者機(jī)體內(nèi)IL-10表達(dá)較高，而IFN-γ誘生水平較低時(shí)，預(yù)示肝臟受損較重，患者預(yù)后較差。同時(shí)，當(dāng)IFN-γ誘生不足時(shí)，患者體內(nèi)病毒難以被清除，將導(dǎo)致感染慢性化。IFNγ在慢性乙型肝炎病毒感染中減少的原因，可能與產(chǎn)生IFN-γ的活性細(xì)胞的功能低下有關(guān)，因?yàn)樵诋a(chǎn)生IFN-γ的活性細(xì)胞內(nèi)檢測出HBV DNA，這些細(xì)胞帶有病毒，可能引起其功能改變，造成IFN-γ的誘生障礙[6]，本文研究結(jié)果表明HBV載量越高，IL-10的水平越高，IFN-γ水平越低，高病毒載量組IFN-γ水平最低，并隨著病毒載量降低而增加，而IL-10水平則明顯相反，并隨著病毒載量減少而下降，HBV-DNA載量與患者IFN-γ水平呈負(fù)相關(guān)(γ=-0.88，P＜0.001)，與文獻(xiàn)報(bào)道相近[7]，HBV-DNA 載量、IL-10水平與 ALT 呈正相關(guān)(分別為 γ=0.82，P＜0.001；γ=0.76，P＜0.001)，Th2 類細(xì)胞因子水平增高以及由此引起的Th1/Th2比值下降導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能紊亂可能造成HBV持續(xù)性感染及肝損傷。

本研究結(jié)果還表明慢性乙型肝炎患者經(jīng)抗病毒治療后HBV-DNA載量、IFN-γ、IL-10水平均有不同程度的變化，與治療前比較有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，抗病毒治療后慢性乙型肝炎患者HBVDNA 載量、IL-10、ALT 水平同步下降，IFN-γ 則顯著增加，這與國內(nèi)相關(guān)的報(bào)道一致[8-9]，HBV-DNA載量、IL-10表達(dá)水平與CHB的臨床轉(zhuǎn)歸有一定的關(guān)系，高水平IFN-γ的表達(dá)可能不利于HBV的復(fù)制且水平高低與病情活動相關(guān)。

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[4]姜榮龍,盧橋生,駱抗先,等.慢性乙型肝炎病毒感染者外周血T輔助細(xì)胞1、2型因子的表達(dá)[J].中華傳染病雜志,2000,18:26-28.

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