陳先榮，李 智，劉一平

(株洲市二醫(yī)院檢驗科，湖南 株州 412005)

檢驗醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展使得具有測定速度快、結(jié)果穩(wěn)定、使用方便等優(yōu)點(diǎn)的全自動生化分析儀大量進(jìn)入各醫(yī)療單位。由于標(biāo)本量大、各種技術(shù)檢測項目不一等原因，在一些大、中型實驗室里特別是標(biāo)本量很大的獨(dú)立醫(yī)學(xué)實驗室里常擁有多臺生化分析系統(tǒng)。我實驗室除了現(xiàn)使用的德國羅氏Modular P800全自動生化分析儀外，近期又新安裝了羅氏Cobas6000 C501全自動生化分析儀。該分析儀是羅氏診斷公司于近年推出的一款新產(chǎn)品，具有試劑完全條形碼掃描功能、自動化程度很高、精密度高等特點(diǎn)。為保證檢測結(jié)果的一致性，我實驗室按照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)EP9-A文件的要求[1]，對兩臺不同型號的生化分析儀檢測的常規(guī)生化項目結(jié)果進(jìn)行了比對分析，結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1 .1儀器和試劑 德國羅氏Modular P800全自動生化分析儀及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、尿素(UREA)、尿酸(UA)、肌酐(CREA)、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、葡萄糖(GLU)、淀粉酶(AMY)、鉀(K)、鈉(NA)、氯(CL)、總鈣(CA)、鎂(MG)20個生化項目的的原裝配套試劑及校準(zhǔn)品；德國羅氏Cobas6000 C501全自動生化分析儀及上述20個項目的原裝配套試劑、校準(zhǔn)品。

1.1 .2質(zhì)控品 美國伯樂公司質(zhì)控品。

1.1 .3樣本 為我醫(yī)院送檢的新鮮病人標(biāo)本，其濃度選擇按照EP9-A文件中方法對比試驗數(shù)據(jù)分布建議表的要求，盡可能覆蓋檢測范圍，特別注意地覆蓋了醫(yī)學(xué)決定水平，并且留有足夠的量利于重復(fù)性檢測。

1.2 方法

1.2 .1方法的選擇 以德國羅氏Modular P800全自動生化分析儀為比對儀器(X)，以羅氏Cobas6000 C501全自動生化分析儀為實驗儀器(Y)。

1.2 .2儀器校準(zhǔn) 在熟悉評價方案后，用各自原裝配套的校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，保證儀器檢測結(jié)果的量值溯源性。

1.2 .3質(zhì)量控制 使用伯樂公司的第三方質(zhì)控品為質(zhì)控血清分別在兩臺生化分析儀上做日常室內(nèi)質(zhì)控，保證結(jié)果的穩(wěn)定性。

1.2 .4樣品的測定 由專業(yè)技術(shù)人員嚴(yán)格按照本檢驗中心的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程分別用羅氏Modular P800和羅氏Cobas6000 C501每日選8個病人樣本，每個病人樣本進(jìn)行雙份測定，分成5天進(jìn)行，共完成40個標(biāo)本測定。

2 統(tǒng)計學(xué)處理

兩個檢測系統(tǒng)血清測定結(jié)果的統(tǒng)計分析按照NCCLS EP9-A的要求在EXCEL 2003上編制程序進(jìn)行分析，將40個標(biāo)本在兩個檢測系統(tǒng)的測定結(jié)果(Xij，Yij)輸入X、Y列，電腦EXCEL2003軟件自動計算并繪制成相應(yīng)的圖表。主要內(nèi)容有：(1)進(jìn)行方法內(nèi)離群點(diǎn)的檢驗；(2)比對方法(X)測定范圍的檢驗，如 γ≥0.975(或 γ2≥0.95)，則認(rèn)為 X 取值范圍合適，直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠；(3)計算回歸方程y=bx+a；(4)計算方法間的系統(tǒng)誤差：根據(jù)臨床需要，將常規(guī)化學(xué)20個項目的醫(yī)學(xué)決定水平濃度(Xc)代入回歸方程，計算實驗方法(Y)與比對方法(X)之間的系統(tǒng)誤差(SE)，SE=|Yc-Xc|=|(b-1)Xc+a|；SE%=(SE/Xc)×100%。按照美國國會通過的臨床實驗室改進(jìn)修正案(Clinical Laboratory Amendment,CLIA’88)允許變異偏差進(jìn)行結(jié)果判斷。

3 結(jié)果

3.1 病人標(biāo)本20項常規(guī)化學(xué)測定結(jié)果的離群點(diǎn)檢驗：通過方法內(nèi)和方法間離群點(diǎn)的分析，比對方法(X)絕對偏差限值、相對偏差限值、實驗方法(Y)絕對限值、相對偏差限值、方法間絕對偏差限值、方法間相對偏差限值分別見表1。經(jīng)比較，本實驗中兩個檢測系統(tǒng)20個常規(guī)化學(xué)測定數(shù)據(jù)無離群點(diǎn)存在。

3.2 線性相關(guān)性的檢驗：在EXCEL2003軟件中，用函數(shù)CORREL計算得到各個項目的相關(guān)系數(shù)(γ)，見表2。從表2中可判斷所有項目的相關(guān)系數(shù)γ均滿足EP9-A文件中γ≥0.975的要求，則可判斷X值取值范圍合適，可用簡單的直線回歸來估計斜率和截距。

3.3 回歸方程：在EXCEL2003軟件中，分別用函數(shù)LINEST和INTERCEPT計算斜率和截距，得到相應(yīng)的回歸方程，見表2。

結(jié)果顯示，兩個檢測系統(tǒng)病人血清20個常規(guī)化學(xué)測定結(jié)果間具有良好的相關(guān)性和可比性。

表1 方法內(nèi)和方法間離群點(diǎn)檢驗數(shù)據(jù)

3.4 羅氏Coabas6000 C501檢測系統(tǒng)常規(guī)化學(xué)檢測結(jié)果偏倚分析：本研究選定20個常規(guī)化學(xué)項目的CLIA’88醫(yī)學(xué)決定水平[2]計算羅氏Coabas6000 C501檢測系統(tǒng)的預(yù)期偏差。向20個常規(guī)化學(xué)定值欄中分別輸入各個項目的醫(yī)學(xué)決定水平數(shù)值，EXCEL2003按照編制程序計算其系統(tǒng)預(yù)期偏差和相對偏差的結(jié)果，見表2。結(jié)果顯示，所有20個項目的預(yù)期偏差和相對偏均小于CLIA’88允許誤差的二分之一，證實兩個檢測系統(tǒng)的20個常規(guī)化學(xué)結(jié)果具有良好的一致性，兩個系統(tǒng)所測常規(guī)生化20個項目在分析范圍內(nèi)的相對偏差較小可滿足臨床要求。

4 討論

隨著檢驗醫(yī)學(xué)的飛速發(fā)展，檢驗技術(shù)的不斷分支，檢測項目的不斷增多，檢驗質(zhì)量的控制變得越來越重要，ISO15189實驗室認(rèn)可已經(jīng)成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實驗室發(fā)展的必經(jīng)之路。ISO 15189文件指出：“當(dāng)同樣的檢驗應(yīng)用不同程序或設(shè)備，或在不同地點(diǎn)進(jìn)行，或以上各項均不同時，應(yīng)有確切機(jī)制以驗證在整個臨床適用區(qū)間內(nèi)檢驗結(jié)果的可比性”。應(yīng)按適合于程序和設(shè)備特性的規(guī)定周期驗證[3]。因為即使每臺儀器工作性能穩(wěn)定、室內(nèi)質(zhì)控正常，但不同的檢測系統(tǒng)相同項目之間的結(jié)果也可能存在系統(tǒng)誤差[4-5]，因此要使每一項檢驗項目的結(jié)果符合質(zhì)量要求，除了要有標(biāo)準(zhǔn)及嚴(yán)格的質(zhì)量控制外，還必須要對使用的檢測系統(tǒng)做嚴(yán)格的選擇和評價，確定它的不精密度、不準(zhǔn)確度、患者結(jié)果可報告范圍、分析靈敏度、分析干擾、參考范圍和其他需說明的性能，為保證不同檢測系統(tǒng)之間的結(jié)果具有可比性有必要對不同的檢測系統(tǒng)之間的結(jié)果一致性進(jìn)行評價。

表2 相關(guān)系數(shù)和回歸方程及誤差

本研究按照EP9-A文件的要求，對我實驗室的羅氏Cobas6000 C501和羅氏Modular P800生化分析儀進(jìn)行比對分析和偏倚評估，結(jié)果表明在做好室內(nèi)質(zhì)控基礎(chǔ)上，由于使用了配套試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，兩臺分析儀20項常規(guī)化學(xué)項目檢測結(jié)果之間的偏倚評估在線性范圍之內(nèi)，顯示良好的相關(guān)性，線性回歸方程良好,究其原因在于該兩臺分析儀使用的是相同的校準(zhǔn)品,結(jié)果可以溯源到同一個標(biāo)準(zhǔn),因此該20個常規(guī)生化項目可以在兩臺儀器上任意檢測而得到一致性很高的結(jié)果。通過對這兩臺儀器的比對分析，我們對檢測結(jié)果在兩分析系統(tǒng)間的偏倚有了明確的了解，對其準(zhǔn)確性的判斷有了評估依據(jù)，保證了同一實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠性，使病人的檢測結(jié)果在不同的時間前后有了可比性，滿足了臨床的需要，使檢驗醫(yī)學(xué)可以更好地為臨床服務(wù)。

[1]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method comparison and bias estimation using patient samples,approved guideline,EP9-2A,Pennsylvania.NCCLS,1986:1-14.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程.3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:59-60.

[3]魏 昊,叢玉隆.醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量管理與認(rèn)可指南.北京:中國計量出版社,2004,72-75.

[4]邱 玲,程歆琦,劉 荔,等.多臺生化分析儀多項目同時進(jìn)行比對的實驗研究設(shè)計及應(yīng)用.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2007,30:1001-1004.

[5]Chen Y,WuW,Li LJ,et al.Comparison of the result for three automated immunoassay system in determining serum HBV markers.Clin Chim Acta,2006,372:129-133.