馮寶章

早在20世紀(jì)70年代，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液學(xué)研究所楊天楹等[1]和楊崇禮等[2]分別用靛玉紅對(duì)314例慢性粒細(xì)胞白血?。╟hronic myelocytic leukemia，CML）和7例骨髓增生異常綜合征（myelodysplastic syndrome，MDS）進(jìn)行治療，取得60%左右的CML和70%左右MDS治療的有效率。由于靛玉紅是一種中藥提取物，又是一種新的抗癌藥，對(duì)其療效原理國(guó)內(nèi)外均無(wú)報(bào)道。中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院組織院內(nèi)兩個(gè)研究所即基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所和血液研究所有關(guān)專家對(duì)其進(jìn)行攻關(guān)性的研究。

近年來(lái)，國(guó)外學(xué)者對(duì)靛玉紅及其衍生物的藥理進(jìn)行了十分深入的研究。不僅重復(fù)支持了國(guó)內(nèi)研究結(jié)果，同時(shí)還深入到基因調(diào)控水平。特別是發(fā)現(xiàn)靛玉紅衍生物對(duì)成纖維細(xì)胞及其生長(zhǎng)因子和受體（FGF和FGFRs）的抑制作用，折射出骨髓和上皮基質(zhì)及其FGF和FGFRs在白血病等癌癥發(fā)展中的作用，為白血病等癌癥的治療提供了新的靶點(diǎn)，現(xiàn)一并綜述如下。

1 我國(guó)科技工作者對(duì)靛玉紅療效原理的研究

1.1 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所吳冠蕓組的研究

吳氏組在靛玉紅治療的初期即治療期（多數(shù)病例在治療開(kāi)始后2～3周）取患者外周血分離白細(xì)胞進(jìn)行3H-TdR、3H-UR和34C-leu摻入試驗(yàn)，并與治療前作比較。結(jié)果顯示，3H-TdR摻入率較治療前為低，大多數(shù)病例表現(xiàn)為遞降的趨勢(shì)。治療開(kāi)始后2～3周期時(shí)間3H-TdR摻入減少50%以上，但此期間病例外周血白細(xì)胞總數(shù)和幼稚細(xì)胞百分比降低不多，有些病例還有上升趨勢(shì)。說(shuō)明此階段靛玉紅療效并未發(fā)揮出來(lái)，只是觀察到了DNA合成受到抑制[3]。這是否是靛玉紅的毒性反應(yīng)，值得商榷。因?yàn)榇似陂g電鏡亦觀察到骨髓標(biāo)本中大量的壞死細(xì)胞。不過(guò)，作者們后來(lái)在腫瘤細(xì)胞系上確實(shí)觀察到靛玉紅對(duì)腫瘤細(xì)胞DNA合成的抑制[4-9]。

1.2 血液研究所馮寶章組的研究

與吳組的設(shè)計(jì)不同，馮氏組獲取患者的標(biāo)本是經(jīng)過(guò)靛玉紅治療后病情緩解即療效顯現(xiàn)之后的骨髓標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)研究。

1.2.1 觀察骨髓細(xì)胞Ph陽(yáng)性（Ph+）細(xì)胞的百分比變化，并與治療前比較。Ph+率的變化是當(dāng)時(shí)普遍使用的療效觀察指標(biāo)，因?yàn)镻h+染色體是CML的標(biāo)記染色體。結(jié)果顯示治療前平均為（65.28±24.93）%，治療緩解后為（32.28±19.98）%。Ph+率細(xì)胞%下降顯著（P＜0.05）。與當(dāng)時(shí)CML一線藥物馬利蘭治療相比，靛玉紅對(duì)CML緩解解作用不如馬利蘭。馬利蘭治療后骨髓Ph+細(xì)胞平均僅為（11.0±8.7）%（P＜0.01）。下降非常顯著。

這些結(jié)果與臨床觀察十分一致，即靛玉紅治療CML導(dǎo)致骨髓象血象改善不如馬利蘭，但它的縮脾作用卻優(yōu)于馬利蘭，后者還觀察到骨髓細(xì)胞染色體畸變，而靛玉紅則無(wú)此異常。

1.2.2 同時(shí)，還觀察骨髓細(xì)胞姐妹染色單體互換（sister chromatid exchange，SCE ）的變化。細(xì)胞SCE率高低反映其DNA損傷修復(fù)的程度。結(jié)果顯示，靛玉紅治療緩解后，其骨髓SCE率從治療前平均（9.30±4.05）%，下降到（6.57±2.36）%（P＜0.05）。對(duì)同一病例前后觀察，特別Ph+細(xì)胞SCE，治療后有非常顯著的下降（P＜0.01）。說(shuō)明，靛玉紅治療提高了CML骨髓細(xì)胞DNA損傷修復(fù)能力。根據(jù)國(guó)內(nèi)外的研究，這種變化代表細(xì)胞的分化成熟過(guò)程，因?yàn)橛没瘜W(xué)致癌劑和誘變劑誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化，則顯示細(xì)胞SCE率顯著上升[6]。

1.2.3 為了進(jìn)一步證明SCE率下降代表細(xì)胞分化成熟，馮氏組繼而采用小鼠體內(nèi)骨髓SCE技術(shù)，將骨髓不同SCE水平的細(xì)胞與骨髓分化成熟進(jìn)行分類的細(xì)胞作相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)二者顯著相關(guān)性[8]，與Popescu等[7]的研究相一致。

2 國(guó)外學(xué)者對(duì)靛玉紅藥理作用的研究

近年來(lái)，國(guó)外學(xué)者們對(duì)靛玉紅及其衍生物的藥理作用進(jìn)行了許多研究，發(fā)現(xiàn)靛玉紅有不止一個(gè)靶分子，因而就有幾個(gè)方面藥理作用，現(xiàn)歸納如下：

2.1 抑制細(xì)胞周期素依賴性激酶（CDKs）的作用，從而導(dǎo)致對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制[9]，與上述研究結(jié)果，即抑制DNA合成和Ph+細(xì)胞百分比下降相一致。

2.2 促進(jìn)HL-60白血病細(xì)胞分化成為噬中性粒細(xì)胞[10]。與我們對(duì)靛玉紅治療致CML Ph+細(xì)胞SCE率下降的結(jié)果相符。

2.3 通過(guò)特異性地抑制受體FGFR1的自動(dòng)堿酸化，阻斷受體信號(hào)介導(dǎo)，從而抑制NIH3T3細(xì)胞的增殖[11]。這些結(jié)果解釋了靛玉紅突出的縮脾作用，因?yàn)镃ML脾臟有大量早幼和中晚幼粒細(xì)胞，可能還有大量成纖維細(xì)胞增殖。

3 FGF和FGFR在白血病等癌癥發(fā)展中的作用

靛玉紅諸多藥理研究中，我們認(rèn)為，最重要的在于發(fā)現(xiàn)靛玉紅對(duì)FGFR1的作用。

3.1 FGFR1在白血病發(fā)病中的作用[12]

已知累及到8p11～12的易位同急性髓細(xì)胞白血病和骨髓增殖性疾?。╩yeloproliferative disorders，MPD）有關(guān)。這類MPD患者的特點(diǎn)是骨髓過(guò)度增生，外周血中嗜伊紅紅血球增多，以及B或T細(xì)胞淋巴瘤，并在診斷后1年進(jìn)間內(nèi)發(fā)展為髓系白血病。與MPD相關(guān)的易位常累及FGFR基因所在的8p11.1～11.2，編碼一個(gè)酪氨酸激酶受體，后者正常情況下受FGFs的活化。迄今為止，已有發(fā)現(xiàn)5個(gè)這樣的易位，導(dǎo)致鋅指198（ZNF198）與FGFR1的融合，其融合蛋白是結(jié)構(gòu)性活化的酪氨酸激酶，能轉(zhuǎn)化Ba、T-3小鼠造血細(xì)胞，這些發(fā)現(xiàn)表明，F(xiàn)GFR1酪氨酸激酶的活化及它的下游通道在由FGFR1融合蛋白誘導(dǎo)的MPD發(fā)生中起關(guān)鍵作用，且應(yīng)用其小分子抑制劑治療有效。

3.2 從FGF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)看前列腺癌發(fā)病中上皮/基質(zhì)之間的互動(dòng)[13-15]

人們相信，F(xiàn)GF族的成員，通過(guò)上皮和基質(zhì)之間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在器官發(fā)育和腫瘤發(fā)生中起關(guān)鍵作用，已有兩項(xiàng)研究顯示，在前列腺腫瘤發(fā)生中，上皮和基質(zhì)之間FGF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的失調(diào)導(dǎo)致腫瘤發(fā)展，并促成上皮一間充質(zhì)之間的轉(zhuǎn)換。提示對(duì)FGF受體的抑制將對(duì)前列腺腫瘤有治療價(jià)值。

3.3 FGFR可作為甲狀脾癌治療的靶分子[16]

已知FGFRs表達(dá)于甲狀腺癌。這些配體信號(hào)是通過(guò)4個(gè)具有高度親和力的酪氨酸激酶活性受體（FGFR1-4）來(lái)傳導(dǎo)的。每個(gè)受體都含有3個(gè)免疫球蛋白（Ig）樣的胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)。后者包含一個(gè)剪切的酪氨酸激酶區(qū)和C末端。與上皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）相似。Rosanne等的研究證明，F(xiàn)GFR可作為甲狀腺癌治療的靶分子。

目前認(rèn)為，受體細(xì)胞內(nèi)TPK區(qū)域在傳遞和放大配基結(jié)合反應(yīng)，以及引起細(xì)胞內(nèi)各信號(hào)通路活化方面是最為關(guān)鍵的。雖然信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制目前仍不十分清楚，但受體TPK活化似乎是生長(zhǎng)因子結(jié)合膜受體后第一個(gè)細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)。各種受體TPK區(qū)氨基酸序列高度保守，其同源范圍長(zhǎng)達(dá)725個(gè)氨基酸。這也說(shuō)明該區(qū)域?qū)κ荏w的重要性。其中有一段最敏感的序列，其功能是結(jié)合ATP。此外還有一個(gè)酪氨酸自動(dòng)堿酸化區(qū)，配基與受體結(jié)合之后受體會(huì)被自動(dòng)磷酸化。酪氨酸磷酸化可能調(diào)節(jié)激酶活性，影響底物和激酶的相互作用，包括受體傳導(dǎo)有絲分裂反應(yīng)。而EGFR和FGFR1之間可能協(xié)同作用，共同導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞快速增殖、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。

3.4 基底FGF表達(dá)同口腔扁平細(xì)胞癌（OSCC）的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移[17]

腫瘤細(xì)胞與宿主基質(zhì)之間的相互作用在實(shí)體瘤發(fā)展中起重要作用。特別是腫瘤細(xì)胞與其周圍成纖維細(xì)胞通過(guò)它們產(chǎn)生的細(xì)胞因子進(jìn)行互動(dòng)。這些被認(rèn)為累及到腫瘤的浸潤(rùn)?；壮衫w維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）是與成纖維細(xì)胞活化密切相關(guān)的細(xì)胞因子，它可能由很多類型細(xì)胞所產(chǎn)生。業(yè)已證明，腫瘤細(xì)胞bFGF和FGFR1的表達(dá)與OSCC的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移相關(guān)。

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