梁真寶,李海怡,黎艷光,梁青云,李喜蘭

(吉林大學(xué)珠海學(xué)院，廣東　珠海　519100)

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菘藍(lán)根莖葉有效成分的研究*

梁真寶,李海怡,黎艷光,梁青云,李喜蘭

(吉林大學(xué)珠海學(xué)院，廣東珠海519100)

靛藍(lán)靛玉紅是菘藍(lán)的有效成分，實(shí)驗(yàn)針對(duì)菘藍(lán)的干燥根、莖、葉使用同種溶劑即四氫呋喃溶液相同提取條件進(jìn)行提取，制定靛藍(lán)靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)曲線，用紫外分光光度法測(cè)定菘藍(lán)各個(gè)部位即根、莖、葉中的靛藍(lán)與靛玉紅的含量，通過比較菘藍(lán)根、莖、葉的靛藍(lán)靛玉紅含量大小，實(shí)驗(yàn)多次重復(fù)驗(yàn)證，結(jié)果得出菘藍(lán)葉中提取出的靛藍(lán)和靛玉紅含量最多，其次是莖，最后是根。

菘藍(lán)；四氫呋喃；靛藍(lán)；靛玉紅；紫外分光光度計(jì)

菘藍(lán)是十字花科植物，干燥其葉及根，根入藥稱“板藍(lán)根”，葉入藥稱“大青葉”[1]。具有清熱解毒、涼血消斑，治溫病發(fā)熱、發(fā)斑、風(fēng)熱感冒、咽喉腫痛、丹毒、流行性乙型腦炎、肝炎和腮腺炎等癥的作用。近年來研究表明，起重要療效的是菘藍(lán)中的生物堿靛藍(lán)和靛玉紅，靛藍(lán)和靛玉紅具有保肝、抗菌等藥理活性，而靛玉紅還具有一定的抗腫瘤作用[2]。為了探究菘藍(lán)中靛藍(lán)和靛玉紅在各部位的含量，用四氫呋喃提取菘藍(lán)根莖葉中的靛藍(lán)和靛玉紅，并用UV法測(cè)定出各部位靛藍(lán)與靛玉紅的含量，從而得出菘藍(lán)葉中提取出的靛藍(lán)和靛玉紅含量最多。

1　實(shí)　驗(yàn)

1.1材料與儀器

材料：菘藍(lán)，購(gòu)于廣東省珠海市金灣區(qū)三灶鎮(zhèn)壯音藥店。

試劑：靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品，上海源葉生物科技有限公司；四氫呋喃(分析純)，鄭州廣杰化工有限公司。

儀器：蒸餾裝置，實(shí)驗(yàn)室自制；回流裝置，實(shí)驗(yàn)室自制；索氏提取器,實(shí)驗(yàn)室自制；DHT型磁力攪拌電熱套，山東省菏澤市祥龍電子科技有限公司；九陽料理機(jī)，九陽有限公司；UV-2450紫外分光光度計(jì),日本島津公司；DHG-9140A型恒熱鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科技儀器有限公司。

1.2材料處理

將干燥的菘藍(lán)莖、根粉碎，根過40目篩，將葉莖根各精密稱取10 g。

1.3靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品的配制

稱取5 mg的靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品，加四氫呋喃溶解并分別在100mL容量瓶中定容。

分別取上述靛藍(lán)溶液0.3、0.35、0.4、0.45mL于5mL容量瓶中，用四氫呋喃定容，即靛藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)溶液。

再分別取上述靛玉紅溶液0.5、1.0、1.5、2.0mL于5mL容量瓶中，用四氫呋喃定容，即靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4樣品的配制

將稱取的菘藍(lán)根、莖、葉，分別加入25mL四氫呋喃，回流4 h，減壓蒸餾至粘稠狀，定容至5mL，最后各稀釋5倍，葉稀釋25倍。

1.5吸收曲線的繪制

在紫外-可見分光光度計(jì)上，以四氫呋喃為空白對(duì)照，分別對(duì)靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，得到吸收曲線，確定靛藍(lán)、靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品最大吸收波長(zhǎng)。

1.6工作曲線的繪制

用四氫呋喃調(diào)零作參比，于靛藍(lán)最大波長(zhǎng)處測(cè)定3.0、3.5、4.0、4.5 μg/mL靛藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，于靛玉紅最大波長(zhǎng)處測(cè)定5、10、15、20 μg/mL靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，最后以A對(duì)c作圖，繪制工作曲線。

1.7樣品濃度的測(cè)定

分別在最大波長(zhǎng)度測(cè)定樣品的吸光度值，并讀出濃度。

2　結(jié)果與討論

2.1靛藍(lán)和靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)溶液

表1　紫外分光光度計(jì)測(cè)靛藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度曲線表

回歸方程：y=0.1314x+1×10-16;相關(guān)系數(shù)：R2=0.99971。

表2　紫外分光光度計(jì)測(cè)靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度曲線表

回歸方程：y=0.03488x-0.0234;相關(guān)系數(shù)：R2=0.99922。

2.2UV法標(biāo)準(zhǔn)曲線求出四氫呋喃中菘藍(lán)根莖葉的靛藍(lán)和靛玉紅質(zhì)量

從圖1得出菘藍(lán)根莖葉中葉的高度比莖和根的要高，故葉中靛藍(lán)的含量是最多的，其次是莖，最后是根。在圖2中葉的高度也是比莖和根的要高，綜上，在菘藍(lán)不同部分中靛玉紅和靛藍(lán)的濃度由高到低為葉、莖、根。

圖1　菘藍(lán)根莖葉中靛藍(lán)濃度

圖2　菘藍(lán)根莖葉中靛玉紅濃度圖

3　結(jié)　論

通過實(shí)驗(yàn)，得知靛藍(lán)和靛玉紅在菘藍(lán)中盡管微量，但葉中的含量也是挺高的。在日常生活中，人們對(duì)板藍(lán)根比較熟悉，認(rèn)為板藍(lán)根作用大且療效好，大多數(shù)工廠實(shí)驗(yàn)室常從根提取靛藍(lán)和靛玉紅，而忽略了葉，造成了一定的浪費(fèi)，使葉得不到很好的利用。菘藍(lán)的葉中含有的靛藍(lán)和靛玉紅較多，以后可注重用菘藍(lán)的葉來提取，使菘藍(lán)得到充分的利用。如何充分利用菘藍(lán)的葉來進(jìn)行提取，是我們?nèi)蘸笥写芯康姆较?，這也有利于資源的保護(hù)。

[1]中國(guó)藥典.一部[S].2010.

[2]唐曉清,王康才,陳暄.菘藍(lán)花期靛藍(lán)、靛玉紅和多糖分布規(guī)律研究[J].中藥草,2011(07):1425 -1428.

[3]孫立新,唐虹,尹萍,等.RP-HPLC法測(cè)定板藍(lán)根、大青葉中靛藍(lán)、靛玉紅的含量[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2000(03):191-192.

[4]肖珊珊,金郁,孫毓慶.板藍(lán)根化學(xué)成分、藥理及質(zhì)量控制研究進(jìn)展[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2000(06):455-458.

[5]唐曉清,王康才,陳暄,等.不同產(chǎn)地來源菘藍(lán)根生物量、蛋白質(zhì)和多糖含量比較[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2007(03):224.

[6]雷黎明,潘清平.板藍(lán)根化學(xué)、藥理、質(zhì)量及提取方法的研究進(jìn)度[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2007(18):2578-2580.

Study on the Effective Components from Root,Stem and Leaf of Isatis Tinctoria*

LIANG Zhen-bao,LI Hai-yi,LI Yan-guang,LIANG Qing-yun,LI Xi-lan

(Zhuhai College of Jilin University,Guangdong Zhuhai 519100,China)

The active component of isatis tinctoria is indigo and indirubin.It uses tetrahydrofuran to extract the indigo and indirubin from dry root,stem and leaf of isatis tinctoria,make the standard curve.With ultraviolet spectrophotometer,the content of the indigo and indirubin in each position was determined comparing the component of indigo and indirubin from the root,stem and leaf of isatis tinctoria and repeating the experiment.It concluded that the leaf of isatis tinctoria had the most content of indigo and indirubin,then was stem,the least was root.

isatis tinctoria; tetrahydrofuran; indigo; indirubin; ultraviolet spectrophotometer

廣東省大學(xué)生科技創(chuàng)新培育專項(xiàng)資金(NO:pdjh2015b0931)；2015年度大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃院級(jí)項(xiàng)目(NO:DC2015007)。

梁真寶(1994-)，女，本科，主要研究方向?yàn)樗幬餀z測(cè)。

李喜蘭(1980-)，女，講師，主要研究方向?yàn)榫?xì)化學(xué)品。

R927.2

A

1001-9677(2016)011-0156-02