王吉春
第三軍醫(yī)大學(xué)附屬西南醫(yī)院藥劑科(400038)
廣藿香為常用中藥,是唇形科刺蕊草屬植物廣藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth.的干燥地上部分,多年生草本,全草藥用。其味辛,微溫,歸脾、胃、肺三經(jīng),具有芳香化濁、開胃止嘔、發(fā)表解暑的功能,用于濕濁中阻,脘痞嘔吐,暑濕倦怠,胸悶不舒,寒濕閉暑,腹痛吐瀉,鼻淵頭痛,是消化系統(tǒng)疾患及暑濕時(shí)令之常用中藥[1]。按產(chǎn)地不同可分為石牌藿香、高要藿香和海南藿香3種,雖為同一植物品種,但它們的形態(tài)、氣味及化學(xué)成分含量有一定差異。近年來對該植物的研究日趨深入,有關(guān)其化學(xué)成分和藥理活性方面的研究已進(jìn)行了一定的工作。為了進(jìn)一步研究和開發(fā)利用該植物,現(xiàn)將廣藿香中揮發(fā)油成分的研究進(jìn)展綜述如下。
近年來,由于氣質(zhì)聯(lián)用色譜技術(shù)的普及,出現(xiàn)了較多關(guān)于廣藿香揮發(fā)性成分的分析報(bào)道。例如采用超臨界CO2流體萃取技術(shù)從廣藿香中提取出揮發(fā)油成分,用不同類型的毛細(xì)管柱對廣藿香揮發(fā)油進(jìn)行分析,以面積歸一化法測定其相對含量,從廣藿香葉揮發(fā)油中鑒定出24個(gè)化合物[2];采用GC 法測定廣藿香提取物中百秋李醇和廣藿香酮的含量,并用氣相色譜-質(zhì)譜法對化學(xué)成分進(jìn)行鑒定;采用毛細(xì)管氣相色譜法測定了海南藿香油中百秋李醇和廣藿香酮的含量;采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)測定廣藿香油中廣藿香酮含量的報(bào)道[3]。
在廣藿香指紋圖譜方面也有了大量的研究。有報(bào)道采用GC-MS對3個(gè)栽培品種的廣藿香揮發(fā)性成分進(jìn)行了研究;對21個(gè)廣藿香樣品進(jìn)行主成分分析,建立了廣藿香揮發(fā)油指紋特征圖譜;并且考察了影響廣藿香揮發(fā)油及主要成分含量的因素[4,5]。采用裂解色譜法(PGC)測定,模糊聚類法研究不同栽培品種,分析比較各地廣藿香揮發(fā)油的指紋圖譜,并考察了裂解溫度、裂解時(shí)間對指紋圖譜的影響[6]。湯丹等[7]運(yùn)用人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)(B-P網(wǎng)絡(luò))方法對文獻(xiàn)中廣藿香GC-MS指紋圖譜進(jìn)行解析,證明了人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)(ANN)方法解析中藥廣藿香指紋圖譜的可行性。利用揮發(fā)油特征指標(biāo)成分群建立中藥GC-MS特征指紋圖譜,通過大樣本分析,將圖譜特征轉(zhuǎn)化成數(shù)據(jù)信息,極大提高了指紋圖譜的實(shí)用性[8]。黃月純等[9]建立了廣藿香的HPLC分析色譜條件,初步擬定指紋特征圖譜指標(biāo)成分群,為廣藿香藥材內(nèi)在質(zhì)量評價(jià)積累了數(shù)據(jù)。
傳統(tǒng)的廣藿香油提取技術(shù)是水蒸氣蒸餾法或索氏提取法,在實(shí)驗(yàn)室中較為普及。李江濤等[10]用水蒸汽蒸餾法提取廣藿香中揮發(fā)油,用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)圖譜檢索對照方法分離和鑒別各化學(xué)組分。近年來,出現(xiàn)了采用微波技術(shù)提取廣藿香中的揮發(fā)油,并對其含量進(jìn)行測定,收率提高[11];采用超臨界二氧化碳萃取的方法對藿香梗和藿香葉浸膏的提取工藝條件進(jìn)行了探討[12]。靳德軍等[13]用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化超臨界CO2流體萃取海南廣藿香揮發(fā)油成分的工藝條件。廣藿香油的分離方面研究文獻(xiàn)報(bào)道比較少,主要是采用硅膠柱層析法,胡海燕等[14]采用分子蒸餾技術(shù)對廣藿香油進(jìn)行分離純化,可有效地提高廣藿香油中廣藿香醇和廣藿香酮的含量。
取本品粗粉適量,照揮發(fā)油測定法(中國藥典2005版一部附錄XD)分取所得揮發(fā)油,進(jìn)行以下試驗(yàn)[1]。取揮發(fā)油1滴,加氯仿0.5mL,滴加5%溴的氯仿溶液數(shù)滴。石牌廣藿香先褪色,繼顯綠色;海南廣藿香先褪色,繼顯紫色。
另取揮發(fā)油1滴,加苯0.5mL,再加5%醋酸銅溶液少量,充分混合,放置分層,吸取上層苯液,點(diǎn)于載玻片上,待苯揮發(fā)后,于殘?jiān)霞右掖?~2滴,放置后,置顯微鏡下觀察。石牌廣藿香可見眾多灰藍(lán)色針狀結(jié)晶;海南廣藿香可見少量灰藍(lán)色結(jié)晶及綠色無定形物。
取揮發(fā)油0.5mL,加醋酸乙酯稀釋至5mL,作為供試品溶液。另取百秋李醇對照品,加醋酸乙酯制成每1mL含2mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗(yàn)[1],吸取上述兩種溶液各1~2μL分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以石油醚(30~60℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(95∶5∶0.2)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中顯一黃色斑點(diǎn);加熱至斑點(diǎn)顯色清晰,供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的紫藍(lán)色斑點(diǎn)。
2005版藥典第一次收載了廣藿香的含量測定方法,采用氣相色譜法對百秋李醇進(jìn)行定量,規(guī)定其含量不得少于0.10%。龐賀等[15]采用柱層析-分光光度法測定了6批廣藿香葉中總黃酮的含量。孟青等[16]采用毛細(xì)管GC法測定了廣藿香精油中百秋李醇的含量。黃月純等[17]建立了廣藿香中百秋里醇的氣相色譜法 GC 含量測定方法。
研究發(fā)現(xiàn),廣藿香揮發(fā)油具有調(diào)節(jié)消化功能和胃腸平滑肌解痙的作用;抑制大部分皮膚細(xì)菌的生長繁殖,尤其是與人體腋臭和腳氣有關(guān)的負(fù)責(zé)菌;刺激胃黏膜、促進(jìn)胃液分泌,增強(qiáng)消化能力;有明顯的止咳化痰及抗炎、鎮(zhèn)痛作用[18,19]。
綜上所述,對廣藿香已從不同方面進(jìn)行了一定的研究,但是在質(zhì)量控制和藥理方面的研究還不夠深入。因?yàn)閺V藿香藥材的對照品相對比較貧乏,而且在廣藿香質(zhì)量控制研究方面一般都采用GC-MS儀器進(jìn)行測量,這就不可避免使藥材在測量的過程中要經(jīng)歷一個(gè)高溫的過程,使得藥材中的揮發(fā)性成分有可能發(fā)生變化;另外在測量中很少采用標(biāo)準(zhǔn)品對照的方法,這就給測量的結(jié)果帶來了一定的不準(zhǔn)確性;由于不同產(chǎn)地的廣藿香揮發(fā)油中的有效成分組成有不小的差異,有必要制定相應(yīng)的藥材標(biāo)準(zhǔn),以利于其合理應(yīng)用和藥理學(xué)研究。在藥理研究方面,雖然對廣藿香油中的活性成分有一定的研究,但是很多成分的活性還不太確定,對于體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)的研究也比較少。對于臨床效果已得到肯定的活性成分,應(yīng)進(jìn)一步的研究利用,使得這味中藥發(fā)揮更大的藥用價(jià)值。
[1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會(huì)編.中華人民共和國藥典[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:30-31.
[2]黃麗莎,吳惠勤,張桂英,等.廣藿香超臨界CO2萃取產(chǎn)物的GC-MS分析[J]. 分析測試學(xué)報(bào),2001,20(4):79-81.
[3]汪小根,鄒玉繁,王玉生,等.GC-MS聯(lián)用技術(shù)測定廣藿香油中廣藿香酮的含量[J].藥物分析雜志,2005,25(5):582-584.
[4]曾志,譚麗賢,蒙紹金,等.廣藿香化學(xué)成分和指紋圖譜研究[J].分析化學(xué)研究報(bào)告,2006,34(9):1249-1254.
[5]魏剛,符紅,王淑英,等.GC-MS法建立廣藿香揮發(fā)油指紋特征圖譜研究[J].中草藥,2002,24(6):407-410.
[6]張銘光,袁敏,袁鵬,等.廣藿香裂解色譜指紋圖譜及其聚類分析[J].中草藥,2003,34(8):749-752.
[7]湯丹,李薇,許毅,等.廣藿香指紋圖譜解析的人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)方法研究[J].中藥材,2004,27(7):534-536.
[8]魏剛.廣藿香GC-MS特征指紋圖譜“數(shù)字化”在藥材鑒定中的應(yīng)用模式研究[J].中成藥,2007,29(3):322-325.
[9]黃月純,魏剛.HPLC建立廣藿香指紋圖譜的方法學(xué)研究[J].中成藥,2005,27(12):1370-1372.
[10]李江濤,李敏,楊曉慧,等.廣藿香揮發(fā)油的提取[J].西安文理學(xué)院學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2007,10(4):25-28.
[11]魯建江,王莉,陳宏偉,等.微波法提取藿香中的揮發(fā)油[J].中醫(yī)藥信息,2001,18(5):40.
[12]劉玉平,孫寶國,石華治,等.超臨界二氧化碳萃取藿香梗和藿香葉浸膏[J].化工學(xué)報(bào),2008,59(3):791-795.
[13]靳德軍,李澤友,任兆平,等.正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選海南廣藿香超臨界二氧化碳萃取條件研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2007,18(2):315-316.
[14]胡海燕,彭勁甫,黃世亮,等.分子蒸餾技術(shù)用于廣藿香油純化工藝的研究[J].中國中藥雜志,2004,29(4):320-322.
[15]龐賀,楊明,胡麗萍,等.聚酰胺柱層析——紫外分光光度法測定廣藿香葉總黃酮的含量[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2008,26(3):602-603.
[16]孟青,梁漢明,陳耕夫,等.毛細(xì)管GC法測定藿香精油中百秋李醇的含量[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào),2005,21(3):245-246.
[17]黃月純,魏剛.氣相色譜法測定廣藿香中百秋里醇的含量[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2006,17(4):503-504.
[18]趙書策 ,賈強(qiáng),廖富林,等.廣藿香提取物的止咳、化痰、平喘藥理研究[J].中成藥,2008,30(3):449-450.
[19]趙書策 ,賈強(qiáng),廖富林. 廣藿香提取物的抗炎、鎮(zhèn)痛藥理研究[J].中成藥,2007,29(2):285-287.