張余霞　符方非

[摘要] 目的:建立小兒氨酚黃那敏片中對乙酰氨基酚的溶出度測定方法,并進(jìn)行方法學(xué)考察。方法:采用2.4%鹽酸溶液900 ml為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速為50 r/min,取樣時(shí)間為20 min,紫外分光光度法檢測,檢測波長為257 nm。結(jié)果:對乙酰氨基酚在2.04～10.2 μg/ml線性范圍內(nèi)(r=0.999 9)呈良好線性關(guān)系,平均回收率為99.5%,RSD為0.11%。結(jié)論:本法能夠用于測定小兒氨酚黃那敏片中對乙酰氨基酚的溶出度,操作簡便,準(zhǔn)確可靠。

[關(guān)鍵詞] 小兒氨酚黃那敏片;對乙酰氨基酚;溶出度;紫外分光光度法

[中圖分類號(hào)]R927.2

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B

[文章編號(hào)]1674-4721(2009)08(a)-147-02

小兒氨酚黃那敏片為兒科常用的一種復(fù)方制劑感冒藥,用于感冒引起的發(fā)熱、頭痛、關(guān)節(jié)痛、鼻塞等,每片含對乙酰氨基酚125 mg,人工牛黃5 mg,馬來酸苯那敏 0.5 mg,載于《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品地標(biāo)升國標(biāo)第三冊》。組方中對乙酰氨基酚占比重較大 ,占 95%以上,所以對乙酰氨基酚的溶出度速率的測定至關(guān)重要,且其溶出度的測定,國內(nèi)目前尚無規(guī)定。原藥品標(biāo)準(zhǔn)采用分光光度法測定其含量[1],為保持同一標(biāo)準(zhǔn)的一致性,故溶出度檢測方法亦采用紫外分光光度法。本文采用高效液相色譜法,結(jié)果簡便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。

1 儀器與材料

ZRS-4型智能溶出試驗(yàn)儀(天津大學(xué)無限電廠);WFH-203B三用紫外分析儀(上海精科實(shí)業(yè)有限公司);對乙酰氨基酚對照品(中國藥品生物制品檢定所;批號(hào):100018-200408);小兒氨酚黃那敏片(廣州香雪制藥股份有限公司);鹽酸(分析純);氫氧化鈉(分析純)。

2方法與結(jié)果

2.1 溶出條件的選擇

對乙酰氨基酚照溶出度測定法(中國藥典2005年版二部附錄XC第二法)進(jìn)行檢測[2]。

2.1.1 溶出介質(zhì)的選擇[3]

對乙酰氨基酚略溶于水,因此水不適宜作為溶出介質(zhì),溶出介質(zhì)的pH值在 1.2～7.5之間對對乙酰氨基酚的溶出度幾乎沒影響[4],且中國藥典2005年版中對乙酰氨基酚片溶出度測定法,選擇2.4%的鹽酸溶液(24→1 000)900 ml作為溶出介質(zhì)。

2.1.2 溶出轉(zhuǎn)速的選擇

按溶出度測定法進(jìn)行測定,轉(zhuǎn)速分別為每分鐘50、75和100轉(zhuǎn),在5、10、15、20、25和30 min時(shí)取溶出液5 ml(同時(shí)補(bǔ)充同體積同溫度的溶出介質(zhì)),搖勻, 用0.45 μm微孔濾膜濾過,精密量取續(xù)濾液1 ml置25 ml量瓶中,加0.08%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度,搖勻, 用0.45 μm微孔濾膜過濾,照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版二部附錄ⅣA),在257 nm的波長處測定吸光度,按C8H9NO2的吸收系數(shù)(E1%)為715計(jì)算每片的溶出量。結(jié)果顯示,50、75、100 r/min溶出結(jié)果沒有顯著性差異,故選擇溶出轉(zhuǎn)速為50 r/min。

2.2取樣點(diǎn)與限度的確定

2.2.1 溶出均一性[5]

取本品6片,照溶出度測定法,以2.4%鹽酸溶液900 ml作為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速為50 r/min,照“2.1.2”(從“在5、10、15、20、25和30 min時(shí)取樣5 ml”到“在257 nm的波長處測定吸光度”)操作,以取樣時(shí)間對溶出量繪圖。結(jié)果顯示本品在20 min處均有一趨于溶出平衡的拐點(diǎn),故本品的取樣時(shí)間確定為20 min,限度不得低于標(biāo)示量的90%。

2.2.2溶出度重復(fù)性

取3批本品同“2.2.1法”操作,結(jié)果顯示3批樣品具有良好的溶出均一性和重現(xiàn)性。

2.3 溶出方法的確定

以2.4%鹽酸溶液(24→1 000)900 ml為溶劑,轉(zhuǎn)速為每分鐘50轉(zhuǎn),在20 min時(shí)取5 ml溶出液,搖勻,濾過,精密量取濾液1 ml置25 ml量瓶中,加0.08%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,照紫外-可見分光光度法(中國藥典2005年版二部附錄ⅣA)在257 nm處測定吸光度。按C8H9NO2的吸收系數(shù)(E1%)為715計(jì)算每個(gè)樣品的溶出量。限度為標(biāo)示量的90%。應(yīng)符合規(guī)定。

3 溶出度測定法的驗(yàn)證

3.1 空白輔料干擾

取6片空白輔料片,按“2.3法”測定;另按處方比例精密稱取空白輔料適量置100 ml量瓶中,加2.4%鹽酸溶液超聲溶解20 min,并稀釋至刻度,搖勻,濾過,分別精密量取續(xù)濾液 1ml于25 ml量瓶中,加0.08%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,按上面方法測定輔料溶液的吸光度。試驗(yàn)結(jié)果看出空白吸收主要是由溶出過程引入,而溶出過程干擾很可能是由于儀器槳桿涂料引起的,扣除溶出過程的吸光度后,空白輔料對試驗(yàn)幾乎無影響。

3.2 線性試驗(yàn)

精密稱取對乙酰氨基酚對照品10.2 mg置100 ml量瓶中,加0.08%氫氧化鈉溶液超聲溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為線性試驗(yàn)儲(chǔ)備液。再精密量取該儲(chǔ)備液1、2、3、4、5 ml分別置于50 ml量瓶中,加0.08%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。按樣品測定項(xiàng)下操作,測定吸光度。以對乙酰氨基酚濃度對吸光度A回歸,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.0716X+0.0084,相關(guān)系數(shù)為r=0.9999,表明對乙酰氨基酚在2.04～10.2 μg/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.3 精密度試驗(yàn)

精密量取上述對照品儲(chǔ)備液5 ml,置50 ml量瓶中,加0.08%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,按樣品測定項(xiàng)下操作,測定吸光度。其RSD=0.11%(n=5)。

3.4 回收率試驗(yàn)

分別精密稱取對乙酰氨基酚對照品各適量,并按處方量加入輔料,各置100 ml量瓶中,加2.4%鹽酸溶液超聲溶解10 min,稀釋至刻度,搖勻,濾過,分別量取續(xù)濾液1 ml置25 ml量瓶中,加0.08%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,按樣品測定項(xiàng)下操作,測定吸光度,計(jì)算回收率。平均回收率為97.14%,RSD為0.54%(n=5)。

3.5 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取回收率試驗(yàn)項(xiàng)下的溶液,分別于0、2、4、6和8 h在257 nm的波長處測定吸光度。結(jié)果RSD=0.38%(n=5),表明對乙酰氨酚溶出液在8 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

4 樣品溶出度的測定

取三批樣品,每批各6片,照2.3項(xiàng)下操作,測定吸光度,計(jì)算出每片的溶出量及每批樣品的平均溶出度,結(jié)果表明樣品測定的結(jié)果基本一致,三批樣品在20 min時(shí)溶出度均已超過標(biāo)示量的95%,考慮到生產(chǎn)實(shí)際可能存在偏差,乙酰氨基酚的溶出限度在45 min時(shí)的溶出度不得低于標(biāo)示量的90%。

5討論

考慮到小兒氨酚黃那敏片中對乙酰氨基酚含量測定采用的是紫外分光度法,為保持同一標(biāo)準(zhǔn)的一致性,故溶出度檢測方法亦采用紫外分光光度法。對乙酰氨基酚結(jié)構(gòu)中含有芳酰氨基,在酸性溶液中易水解為芳伯氨基化和物及醋酸[7],紫外光譜在243 nm處有最大吸收峰,但出現(xiàn)裂峰。藥典中對乙酰氨基酚片中溶出度檢查用0.04%氫氧化鈉溶液稀釋50倍[1],改變?nèi)芤旱膒H值,中和溶出液中產(chǎn)生的醋酸及氫離子,并與對乙酰氨基酚形成鹽,在257 nm處有最大吸收峰[8],根據(jù)此原理,同時(shí)參考《中國藥典》2005年版二部對乙酰氨基酚片的溶出度測定法,制定了本品對乙酰氨基酚的溶出度測定法,經(jīng)系列方法學(xué)研究,該方法符合要求。

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