[摘要] 目的分析產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的大腸埃希菌(EC)對抗菌藥物的耐藥性，為指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物提供科學(xué)依據(jù)。方法 用紙片擴散法(K-B法)對大腸埃希菌進行14種常規(guī)抗菌藥物的敏感性試驗，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的篩選按美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)推薦的紙片確證法進行。結(jié)果2003～2006年從臨床標本中共分離到大腸埃希菌153株，其中產(chǎn)ESBLs陽性51株(產(chǎn)酶率33.3%)，除亞胺培南外對其他13種抗生素均有不同程度耐藥，頭孢類藥物耐藥率較高。結(jié)論 齊齊哈爾市EC的耐藥情況十分嚴重，應(yīng)對EC進行耐藥性動態(tài)監(jiān)測，以指導(dǎo)臨床科學(xué)使用抗菌藥物。

[關(guān)鍵詞] 耐藥性; 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶; 大腸埃希菌

[中圖分類號] R378.21 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2009)27-117-02

近年來，大腸埃希菌已成為醫(yī)院感染常見的條件致病菌，常引起尿路、呼吸道、血液、傷口感染，其中以尿路感染最為常見，其感染率呈逐年上升趨勢。隨著高效廣譜抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，EC中某些菌株對頭孢菌素、喹諾酮類及其他抗菌藥物獲得性耐藥，且該菌可產(chǎn)生ESBLs酶。為了分析本市EC的耐藥情況，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)，筆者對我院分離的153株EC進行了檢測分析。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

大腸埃希菌153株來自我院2003年2月~2006年7月住院和門診患者尿液、痰、咽試子、血、胸腹水、膿液等標本。質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603購自衛(wèi)生部臨床檢驗中心。

1.2 細菌鑒定

按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》鑒定，最后用法國生物梅里埃API-20E系統(tǒng)確證。

1.3 藥敏試驗

采用NCCLS推薦的K-B法進行、藥敏紙片和M-H瓊脂購自杭州天和微生物試劑有限公司。頭孢他啶、頭孢他啶/克拉維酸、頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸紙片購自英國Oxoid公司。

1.4 ESBLs的檢測

1.4.1 ESBLs初篩 選用頭孢噻肟、頭孢他啶、氨曲南(均為30μg/片)藥敏紙片，用標準紙片擴散法測試抑菌圈的直徑。采用NCCLS2002年版的標準進行判斷。凡頭孢他啶的抑菌環(huán)直徑≤22mm，頭孢噻肟或氨曲南≤27mm，均應(yīng)高度懷疑產(chǎn)ESBLs株，進一步做確診試驗。

1.4.2 ESBLs確證試驗 用頭孢他啶(30μg/片)和頭孢他啶/克拉維酸(30μg/10μg/片)、頭孢噻肟(30μg/片)和頭孢噻肟/克拉維酸(30μg/10μg/片)，分別測試其抑菌環(huán)的直徑(藥敏紙片均為英國Oxoid公司產(chǎn)品)。當兩種藥物中任意一種加克拉維酸與不加克拉維酸的抑菌圈直徑差≥5mm時，可確認為產(chǎn)ESBLs株。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用SPSS13.0軟件，率的比較采用χ2檢驗，α=0.05。

2 結(jié)果

見表1。

3 討論

近年來革蘭陰性桿菌引起的感染越來越多，EC主要引起泌尿系感染[1]。譚潔等[2]報道治療單產(chǎn)ESBLs EC引起的感染可首選哌拉西林/他唑巴坦合用阿米卡星，特別適用于同時伴粒細胞減少的患者。本研究中產(chǎn)ESBLs EC對阿米卡星敏感率較高，而對不含酶抑制劑的哌拉西林具有較高的耐藥性。本試驗中產(chǎn)ESBLs的發(fā)生率為33.3%(51/153)，說明EC對3代頭孢菌素耐藥的主要原因是產(chǎn)生ESBLs。

ESBLs是由質(zhì)粒介導(dǎo)的能水解氧亞氨基β-內(nèi)酰胺抗生素并可被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑(如克拉維酸等)所抑制的一類β-內(nèi)酰胺酶。ESBLs可以通過接合、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)等形式使耐藥基因在細菌中擴散，從一個細菌傳遞到另一個細菌，甚至在不同的菌種之間傳遞[3]。因此產(chǎn)ESBLs菌可在醫(yī)院內(nèi)或醫(yī)院間傳播，極易引起暴發(fā)流行[4，5]。本組產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌陽性率33.3%(51/153)，對頭孢菌素類、氨芐西林、哌拉西林、環(huán)丙沙星、復(fù)方磺胺呈多重耐藥，耐藥率顯著高于非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌(P<0.01)，可能與這些藥物為本院常規(guī)用藥、誘導(dǎo)產(chǎn)生耐藥有關(guān)。本組結(jié)果表明亞胺培南、阿米卡星對產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌具有很高的敏感性，建議治療EC感染首選，但應(yīng)注意阿米卡星的腎毒性。

細菌耐藥性的增加在全球都是個難題，各地因使用的抗生素種類的不同和用藥習(xí)慣的差異，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌分離率可能存在明顯的不同。延緩細菌的耐藥性的產(chǎn)生、延長抗生素的使用壽命，有賴于臨床醫(yī)生嚴格掌握抗生素使用指征。做好細菌耐藥性監(jiān)測，控制耐藥菌株流行刻不容緩。

[參考文獻]

[1]張秀珍. 當代細菌檢驗與臨床[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社，1999:96.

[2]譚潔，林漢沖. 哌拉西林/他唑巴坦聯(lián)合阿米卡星治療粒細胞減少伴發(fā)熱33例療效觀察[J]. 蘇州大學(xué)學(xué)報，2003，23:453-454.

[3] 俞云松. 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶研究進展[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志，2006，9(86):641-644.

[4]崔巖，沈定霞，周貴民. 產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)酸克雷伯菌的醫(yī)院感染流行分析[J]. 中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2002，25(5):277-280.

[5]陳茶，黃彬. 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的檢測及耐藥特性[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2002，12(1):73-74.

(收稿日期:2009-03-02)