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        肉羊重點(diǎn)疫病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)

        2009-04-12 00:00:00孫云霞馬步君
        農(nóng)業(yè)科學(xué)研究 2009年4期

        摘要:肉羊的口蹄疫、布病、羊痘、梭菌病等重點(diǎn)疫病的防治工作各地普遍采用以防為主、防檢結(jié)合的方法進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)由于受條件限制,防檢結(jié)合方面比較落后,因而科學(xué)有效的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指導(dǎo)疫病控制工作亟需加強(qiáng)。為此。按照國(guó)家相關(guān)技術(shù)規(guī)程,對(duì)肉羊口蹄疫、布病病原和口蹄疫抗體水平進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),對(duì)發(fā)現(xiàn)的口蹄疫病原陽(yáng)性羊群和布病陽(yáng)性羊只采取撲殺深埋等無(wú)害化處置措施,對(duì)羊痘、梭菌病進(jìn)行,臨床監(jiān)測(cè)。在執(zhí)行國(guó)家羊只口蹄疫常年程序化計(jì)劃免疫的同時(shí),對(duì)檢測(cè)、監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)的布病、羊疽、梭菌病羊群進(jìn)行了兩年以上強(qiáng)制免疫,效果明顯。探索總結(jié)出了一定的經(jīng)驗(yàn)。

        關(guān)鍵詞:肉羊;疫病;檢測(cè)技術(shù);效果;計(jì)劃免疫

        中圖分類號(hào):S852.65+4

        文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

        按照石嘴山市科技局《肉羊疫病監(jiān)測(cè)與防治研究項(xiàng)目》的要求,組織進(jìn)行了肉羊疫病病原和免疫效果實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。根據(jù)項(xiàng)目實(shí)施方案的要求,分階段開展了口蹄疫病原學(xué)與抗體水平和布病病原學(xué)的采樣、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),系統(tǒng)整理了實(shí)驗(yàn)資料。現(xiàn)將檢測(cè)完成情況及統(tǒng)計(jì)、分析結(jié)果和對(duì)肉羊疫病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)的初步探討求教于大家,以供肉羊疫病防控研究者參考。

        1 材料與方法

        1.1 檢測(cè)內(nèi)容和要求

        口蹄疫進(jìn)行病原和免疫效果2項(xiàng)內(nèi)容的采樣檢測(cè),布病進(jìn)行病原檢測(cè)。實(shí)行季度抽檢和不定期抽檢,每年檢測(cè)3次以上,每年采樣數(shù)量在240份以上,監(jiān)測(cè)小組按照要求對(duì)監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行匯總,并完成半年、全年性階段性監(jiān)測(cè)工作總結(jié)和分析報(bào)告。

        1.2 檢測(cè)方法

        1.2.1 口蹄疫免疫效果監(jiān)測(cè) 口蹄疫免疫效果監(jiān)測(cè)按照國(guó)標(biāo)NY/SY150-2000采用口蹄疫正向間接血凝試驗(yàn)操作,檢測(cè)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為:O型口蹄疫抗體效價(jià)≥2的判為免疫合格。

        1.2.2 口蹄疫病原學(xué)檢測(cè) 口蹄疫病原學(xué)檢測(cè)請(qǐng)寧夏回族自治區(qū)疫病控制中心采用PCR方法進(jìn)行試驗(yàn)檢測(cè)。

        1.2.3 布病病原學(xué)檢測(cè) 布病病原學(xué)檢測(cè)按照國(guó)標(biāo)GB/T18646-2002采用虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)操作。

        2 試驗(yàn)結(jié)果

        監(jiān)測(cè)工作組負(fù)責(zé)各試驗(yàn)點(diǎn)病料采集和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作,對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行匯總統(tǒng)計(jì)和分析報(bào)告,并完成階段性監(jiān)測(cè)工作總結(jié)。實(shí)施項(xiàng)目以來(lái),監(jiān)測(cè)工作組按照實(shí)施方案的要求,在課題研究期間,共計(jì)完成O型口蹄疫抗體水平檢測(cè)524份,完成口蹄疫病原學(xué)檢測(cè)524份,完成布魯氏菌病病原學(xué)檢測(cè)524份。

        2.1 2007年度檢測(cè)項(xiàng)目及結(jié)果

        2007年共計(jì)進(jìn)行了3次集中采樣和2次分散采樣。其中在4月份、7月份和10月份進(jìn)行了集中采樣。在各試驗(yàn)點(diǎn)共計(jì)采集樣品238份,完成口蹄疫病原學(xué)監(jiān)測(cè)223份,完成口蹄疫免疫效果監(jiān)測(cè)223份,完成布病病原學(xué)監(jiān)測(cè)238份。

        2.1.1 口蹄疫病原學(xué)監(jiān)測(cè)情況 經(jīng)寧夏回族自治區(qū)疫病控制中心采用PCR試驗(yàn)檢測(cè),223份樣品口蹄疫病原學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果為陰性。

        2.1.2 布病病原學(xué)監(jiān)測(cè)情況 石嘴山市動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室采用虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)223份,可疑樣品采用試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行復(fù)檢,結(jié)果為7個(gè)陽(yáng)性。

        2.1.3 口蹄疫免疫效果監(jiān)測(cè)情況 2007年共計(jì)完成樣品口蹄疫抗體檢測(cè)238份,其中,檢測(cè)大武口試驗(yàn)點(diǎn)(長(zhǎng)勝36份,長(zhǎng)興113份)樣品149份,檢測(cè)平羅試驗(yàn)點(diǎn)(渠口20份,通伏11份,城關(guān)32份)樣品63份,檢測(cè)惠農(nóng)試驗(yàn)點(diǎn)(燕子墩)樣品26份。經(jīng)過(guò)檢測(cè),平均抗體水平在7 log 2以上,抗體檢出率在90%以上,免疫合格率在70%。

        2.2 2008年度檢測(cè)項(xiàng)目及結(jié)果

        2008年,分別在2月份、4月份和6月份進(jìn)行了集中采樣。在各試驗(yàn)點(diǎn)共計(jì)采集樣品301份,完成口蹄疫病原學(xué)監(jiān)測(cè)301份,完成口蹄疫免疫效果監(jiān)測(cè)301份,完成布病病原學(xué)監(jiān)測(cè)286份。

        2.2.1 口蹄疫病原學(xué)監(jiān)測(cè)情況 經(jīng)寧夏回族自治區(qū)疫病控制中心采用PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè),301份樣品口蹄疫病原學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果為陰性。

        2.2.2 布病病原學(xué)監(jiān)測(cè)情況 石嘴山市動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室采用虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)與試管凝集實(shí)驗(yàn)檢測(cè)樣品286份,結(jié)果為陰性。

        2.2.3 口蹄疫免疫效果監(jiān)測(cè)情況 2008年,共計(jì)完成樣品口蹄疫抗體檢測(cè)301份,其中,檢測(cè)大武口試驗(yàn)點(diǎn)(長(zhǎng)勝40份,長(zhǎng)興70份)樣品110份,檢測(cè)平羅試驗(yàn)點(diǎn)(渠口80份,寶豐21份,城關(guān)20份)樣品121份,檢測(cè)惠農(nóng)試驗(yàn)點(diǎn)(燕子墩)樣品70份。經(jīng)過(guò)檢測(cè),2月份和4月份的樣品平均抗體水平在7 log 2以上,抗體檢出率100%,免疫合格率在70%以上。6月份樣品平均抗體水平在7 log 2以上,免疫合格率在90%以上。

        以上檢測(cè)分析結(jié)果見表1。表1中為了便于免疫后不同天數(shù)抗體消長(zhǎng)規(guī)律的統(tǒng)計(jì)分析,序號(hào)不分年度,按免疫后采樣時(shí)的天數(shù),即“免疫天數(shù)”順序進(jìn)行排列。

        3 討論

        3.1 結(jié)果的可靠性分析

        在每日采樣工作結(jié)束后,于當(dāng)晚完成實(shí)驗(yàn)室樣品收檢登記并分離動(dòng)物血清等工作。樣品采集和分析處理方法符合國(guó)家和自治區(qū)有關(guān)監(jiān)測(cè)采樣技術(shù)要求,檢測(cè)中嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行,結(jié)果真實(shí)可靠。

        3.2 口蹄疫病原學(xué)分析

        根據(jù)口蹄疫病原學(xué)檢測(cè)為陰性的結(jié)果,說(shuō)明被檢測(cè)試驗(yàn)羊群中不存在口蹄疫病毒感染。

        3.3 布魯氏菌病病原學(xué)分析

        根據(jù)布病病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果為7(+),說(shuō)明部分試驗(yàn)羊群已經(jīng)受到布病病原侵襲,需要采取措施凈化羊群。但羊群中存在的流產(chǎn)現(xiàn)象不是布病所致。

        3.4 免疫效果分析

        根據(jù)以上檢測(cè)結(jié)果,分時(shí)段進(jìn)行抗體水平統(tǒng)計(jì)分析,分析結(jié)果見表2。

        從表2可以看出,試驗(yàn)羊只在接種口蹄疫疫苗30d后,O型口蹄疫抗體水平已經(jīng)達(dá)到國(guó)家口蹄疫免疫要求標(biāo)準(zhǔn),在免疫38~40d抗體水平達(dá)到最高(8.15 log 2),免疫合格率在95%以上,之后有不明顯下降趨勢(shì),在免疫161d后,抗體水平依然保持在7 log 2以上,免疫合格率在95%以上。

        4 結(jié)論

        1)通過(guò)檢測(cè)結(jié)果分析說(shuō)明,羊的口蹄疫防治工作在堅(jiān)持程序化免疫的條件下,免疫羊口蹄疫抗體水平可以保護(hù)到161d以上。同時(shí),通過(guò)采取綜合防治措施,可以有效減少口蹄疫病原的存在和傳播,杜絕疫情流行。

        2)根據(jù)布病病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果分析可知,在檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性羊群及其區(qū)域,在堅(jiān)決撲殺深埋無(wú)害化處理陽(yáng)性羊只的同時(shí),采取連續(xù)進(jìn)行布病疫苗強(qiáng)制免疫的措施,是非常必要和有效的手段。

        3)由于受目前各地實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)設(shè)備條件和能力所限,羊只的梭菌病、羊痘只能進(jìn)行臨床疫情監(jiān)測(cè),對(duì)出現(xiàn)癥狀和病變的羊群堅(jiān)持進(jìn)行相應(yīng)疫菌苗免疫2年以上,能夠及時(shí)有效地控制羊只梭菌病、羊痘疫情的發(fā)生。

        4)要鞏固口蹄疫、梭菌病、羊痘、布病的防治效果,還需要擴(kuò)大宣傳教育面和加強(qiáng)防控措施的落實(shí),實(shí)行羊痘、布病發(fā)病區(qū)以及陽(yáng)性檢出區(qū)的強(qiáng)制免疫和凈化措施。這是目前防止和凈化石嘴山市舍飼羊口蹄疫、梭菌病、羊痘、布病的唯一有效的手段。

        5)養(yǎng)殖戶羊只生產(chǎn)周轉(zhuǎn)快,羊只存欄變動(dòng)大,致使跟蹤監(jiān)測(cè)和防治工作量加大,要真實(shí)掌握舍飼羊疫病發(fā)生情況,在調(diào)查研究過(guò)程中需要進(jìn)行大力宣傳教育和說(shuō)服工作,給調(diào)查研究造成了一定的困難,調(diào)查結(jié)果受到時(shí)間和地點(diǎn)的限制。

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