摘要：目的 觀察大鼠局灶性腦缺血／再灌注(I／R)后腦組織水、鈉、鉀、鈣及一氧化氮變化情況以及腦心通膠囊對其影響。方法 雄性成年SD大鼠24只，隨機分成3組，假手術(shù)組、模型組和腦心通組(每組8只)，分別于缺血前6 d每日用生理鹽水4 mL、生理鹽水4 mL和腦心通膠囊0.48 g／kg(腦心通膠囊用4 mL生理鹽水溶解)灌胃。采用線拴法致大腦中動脈栓塞(MCAO)模型，在腦缺血2 h再灌注24 h后處死大鼠，測定雙側(cè)紋狀體腦組織中水、鈉、鉀、鈣及一氧化氮含量。結(jié)果 腦缺血/再灌注導(dǎo)致腦組織中鈉、鈣及一氧化氮含量升高，鉀含量降低(P＜0.01)。腦心通組鈉、鈣及一氧化氮含量較模型組明顯降低(P＜0.01)鉀含量升高(P＜0.01)。結(jié)論 腦心通膠囊可通過恢復(fù)離子的平衡緩解一氧化氮含量的升高，減輕一氧化氮在缺血后期的損傷下用，從而起到對缺血再灌注腦保護作用。

關(guān)鍵詞：腦心通膠囊；腦缺血／再灌注；一氧化氮；大鼠

中圖分類號：R285.6 文獻標識碼：A 文章編號：1672－1349(2007)10－0969－02

腦心通膠囊是根據(jù)中醫(yī)理論研制而成的中藥復(fù)方制劑，由黃芪、丹參、桃仁、紅花、乳香、地龍、全蝎等十六味藥組成，具有益血活血、通絡(luò)止痛之功效，臨床用于治療缺血性腦血管疾病取得良好療效。為探討其作用機制，特進行了腦心通膠囊對腦缺血一再灌注大鼠保護作用的實驗研究。

1 材料與方法

1．1 實驗動物及分組 SD雄性大鼠24只，清潔級，體重280g～300 g，由山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，隨機分為3組，即假手術(shù)組、模型組、腦心通組，每組8只。

1．2 實驗動物模型 參照Longa等的線栓改良法復(fù)制大鼠左側(cè)大腦中動脈閉塞(middle cerebral artery OCClusion，MCAO)局灶性腦缺血模型，假手術(shù)組除不插線外，全過程同模型組。按照Longa的5分法評分：0分無神經(jīng)缺損癥狀；1分右前肢不能完全伸直；2分向右旋轉(zhuǎn)；3分向右側(cè)傾倒；4分不能向右行走或昏迷。1分～4分為有效模型。

1．3 給藥方法 腦心通膠囊，咸陽步長制藥有限公司提供，批號：Z20025001，每粒0.4 g。用藥劑量0.48 g//kg。于缺血前6d開始，每日灌胃給藥1次(腦心通用4 mL生理鹽水溶解)，假手術(shù)組和模型組給予等體積生理鹽水。

1．4 腦組織鈉、鉀、鈣、一氧化氮含量測定 大鼠MCAO后24h處死，取雙側(cè)紋狀體，用電子分析天平(0.1 mg)稱重，然后按每100 mg組織加1 mL生理鹽水，勻漿，勻漿液放人事先準備好的容器中，0℃，12 000 r/min離心10 min，取上清液于－80℃低溫冰箱保存、一氧化氮含量的測定，應(yīng)用硝酸還原酶法測定一氧化氮的代謝產(chǎn)物，取上清液0.1 mL，一氧化氮(μmol/L)＝(樣品管OD/標準管OD)×100。腦組織鈉、鉀、鈣含量的測定，取勻漿液上清液，用火焰分光光度計測定雙側(cè)紋狀體鈉、鉀含量，用全自動生化分析儀測定鈣含量，所測定的數(shù)值用每克腦組織中含有離子的tanol數(shù)表示。

1．5 統(tǒng)計學(xué)處理 各組結(jié)果采用SAS 8.12軟件包統(tǒng)計，計量資料用均數(shù)±標準差(x±s)表示，組間比較采用單因素方差分析，組內(nèi)比較采用配對t檢驗，P＜0.05為差別有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

假手術(shù)組左、右側(cè)紋狀體各項含量基本相同；模型組左側(cè)紋狀體鈉、鈣、水及一氧化氮含量顯著升高，而鉀含量顯著降低，與對側(cè)紋狀體及假手術(shù)組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)；腦心通組左側(cè)紋狀體鈉含量升高、鉀含量降低，與對側(cè)紋狀體及假手術(shù)組比較均有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，但較模型組左側(cè)紋狀體鈉含量降低、鉀含量升高(P＜0.01)；腦心通組左側(cè)紋狀體鈣、水含量升高，與對側(cè)紋狀體及假手術(shù)組比較差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，而與模型組比較，鈣含量降低(P＜0.05)，水含量有降低趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義。腦心通組左側(cè)紋狀體一氧化氮含量升高，與對側(cè)紋狀體比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，而與假手術(shù)組比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，但與模型組比較一氧化氮含量明顯降低(P＜0.01)。詳見表1。

3 討 論

細胞內(nèi)鈣負荷增加為腦缺血再灌注損傷的基本病理之一，腦缺血再灌注時細胞外液Ca²⁺濃度下降，細胞內(nèi)鈣超載，使細胞膜受損，通透性增加，同時由于能量代謝障礙引起Na⁺－K⁺泵活性受抑從而導(dǎo)致水鈉潴留。它可使細胞結(jié)構(gòu)和功能破壞，并可促進一系列酶促反應(yīng)而加速細胞損傷。腦心通可以通過調(diào)節(jié)細胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)，恢復(fù)離子的平衡，減輕腦細胞結(jié)構(gòu)和功能破壞，從而達到抗腦缺血再灌注損傷的作用。

一氧化氮在腦缺血再灌注損傷中的變化及作用引起了人們的廣泛關(guān)注。高濃度的NO對細胞有損傷作用，可與超氧陰離子反應(yīng)生成超氧亞硝酸根離子，后者可降解為OH^-和NO^2-自由基，使細胞膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，引起強烈的神經(jīng)毒性，甚至導(dǎo)致神經(jīng)元死亡；引起細胞內(nèi)核酸亞硝?；?，破壞DNA結(jié)構(gòu)；NO還可與某些亞鐵血紅素的鐵原子結(jié)合，形成亞硝酰鐵絡(luò)合物，影響到呼吸鏈的成分，進一步加重腦組織能量代謝障礙，可能由此引發(fā)及加劇腦缺血再灌注損傷。腦心通可減輕缺血再灌注腦組織中一氧化氮含量升高的程度，通過緩解一氧化氮含量的升高減輕其在缺血后期的損傷作用，從而起到對缺血再灌注腦保護作用。

本文編輯 王雅潔