耿家玲 陸宇照 陳明麗
摘要:水提三七葉苷能延長小鼠在亞硝酸鈉中毒后的存活時間和延長小鼠在急性腦缺血性缺氧(斷頭)后張口喘氣時間,對小鼠在常壓下耐缺氧死亡時間無影響。
關(guān)鍵詞:水提三七葉苷;缺氧耐受力;實驗研究
中圖分類號:R285.5
文獻標識碼:A
文章編號:1007-2349(2007)07-0037-02
缺氧耐受是一種應激反應,是機體多個系統(tǒng)功能的綜合表現(xiàn)。不同性別、種系和級別對小鼠在生長、發(fā)育、代謝、解剖、生理、生殖等方面都有所不同,故機體的氧儲備能力、氧耗水平、代謝水平、敏感器官對缺氧損傷的耐受水平也不同,最終影響缺氧耐受力。
水提三七葉苷是以云南文山地道藥材三七(Pnanaxnotoginseng)的地上部分莖葉為原料,在中醫(yī)藥理論指導下,用王興文教授“中藥水提專有技術(shù)”提取、分離、精制而得到的。水提三七葉苷含人參二醇苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re,還含有人參三醇苷Rf、Rg1、Rg2、Rh1、R1、R2、R3、R4、R6 等10多種皂苷成分。水提三七葉苷近年來在國際上引起極大關(guān)注,在美國、日本、臺灣等地區(qū)亦稱三七葉黃素,被譽為“植物黃金”,臨床上有多種功效和治療作用。水提三七葉苷膠囊是以水提三七葉苷制成的純中藥口服制劑,與市場同類產(chǎn)品比較,具有微量、速效、高效等特點。我們對此藥物進行了提高氧耐受力動物實驗研究,目的是為臨床實驗提供科學的依據(jù)和必要的安全性數(shù)據(jù),現(xiàn)將實驗結(jié)果報道如下:
1 實驗材料
1.1樣品及供試液制備 由云南紅云生物工程技術(shù)有限公司提供的三七葉苷膠囊,膠囊內(nèi)容物為淡黃色粉未,規(guī)格為330mg/粒,樣品批號:2003015。人體推薦用量為每人(成人)每日2次,每次1粒,按60kg體重折算成11mg/KgBW。室溫保存。實驗前用蒸餾水配成試驗所需濃度的溶液作為供試液。
1.2實驗動物選用廣西醫(yī)科大學醫(yī)學實驗動物中心【批準號為:桂動許字(2000)第001號】繁殖的清潔級(Ⅱ級)昆明種健康雄性小鼠132只,體重為18~22g。實驗動物房合格證號:桂醫(yī)動字第23003號。動物室溫度:22~25℃,相對濕度:55~70%。
1.3劑量選擇設(shè)82.5、165.0、330mg/kg BW(分別相當于人體推薦用量的7.5、15.30倍)3個劑量的實驗組,同時設(shè)一個陰性對照組(蒸餾水)。每組11只動物。采用灌胃法給予受試物,按每10g體重0.2ml的容量灌胃。
1.4儀器與試劑250ml磨口瓶、1ml注射器、秒表、剪刀、鈉石灰、亞硝酸鈉、凡士林等。
2 實驗方法
2.1檢驗依據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》(2003年版)中的提高缺氧耐受力功能檢驗方法。
2.2常壓耐缺氧實驗各劑量組按0.2ml/10g BW經(jīng)口給受試物30d。陰性對照組給予等量的蒸餾水,每天一次,連續(xù)給受試物30d。于末次灌胃后1h,將各組小鼠分別放入盛有5g鈉石灰的250ml磨口瓶內(nèi)(每瓶1只),用瓶塞和凡士林密封瓶口,記錄小鼠因缺氧而死亡的時間。
2.3亞硝酸鈉中毒存活實驗給受試物方法同2.2項。于末次灌胃后1h,各組小鼠按240mg/kg BW劑量腹腔注射亞硝酸鈉(注射量為0.1ml/10g BW),注射完畢立即計時,記錄小鼠中毒后存活的時間。
2.4急性腦缺氧實驗給受試物方法同2.2項。于末次灌胃后lh,各組動物逐只自頸部快速斷頭,立即計時,記錄小鼠自斷頭至張口喘氣停止的時間。
2.5試驗數(shù)據(jù)用方差分析進行統(tǒng)計處理。但如果試驗數(shù)據(jù)方差不齊,則改進秩和檢驗統(tǒng)計分析。
2.6結(jié)果判定常壓耐缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗、急性腦缺氧實驗中任二項實驗結(jié)果陽性,可判定該受試物具有提高缺氧耐受力功能作用。
3 試驗數(shù)據(jù)
3.1樣品對動物的一般情況和體重的影響 見表1。
各劑量組與陰性對照組比較,差異均無顯著性意義(P>0.05)。
3.2樣品對小鼠的缺氧而死亡時間的影響見表2。
各劑量組與陰性對照組比較,差異均無顯著性意義(P>0.05)。
3.3樣品對小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間的影響見表3。
樣品各劑量組小鼠與陰性對照組的差異均具有極顯著性意義(P<0.01)。
3.4樣品對小鼠急性腦缺血性缺氧存活時間的影響 見表4。
樣品各劑量組小鼠與陰性對照組的差異均具有顯著性意義(P<0.05和P<0.01)。
4 小結(jié)
分別以82.5、165.0、330.omg/kg BW劑量(分別當于人體推薦用量的75、15、30倍)的水提三七葉苷膠囊連續(xù)給小鼠灌胃30天,結(jié)果:
給受試物后,各組動物的飲食和活動正常。樣品各劑量組小鼠在試驗結(jié)束時體重與陰性對照組比較后的差異均無顯著性意義(P>0.05),表明該樣品對小鼠體重增長無影響作用。
樣品各劑量組小鼠因缺氧而死亡時間與陰性對照組比較,差異均無顯著性意義(P>0.05),表明該樣品沒有延長小鼠因缺氧而死亡時間的作用。
樣品各劑量組小鼠中毒后存活時間均大于陰性對照組,且與陰性對照組的差異均具有極顯著性意義(P<0.01),表明該樣品具有延長小鼠在亞硝酸鈉中毒后存活時間的作用。
樣品各劑量組小鼠斷頭后至張口喘氣停止時間均比陰性對照組延長,且與陰性對照組的差異均具有顯著性意義(P<0.05和P<0.01),表明該樣品具有延長小鼠在急性腦缺血性缺氧(斷頭)后張口喘氣時間的作用。
由此可見,該樣品具有提高缺氧耐受力功能作用。