摘要：目的：制定健兒口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用薄層色譜法鑒別陳皮、黃芪，高效液相色譜法測定橙皮苷的含量。結(jié)果：TIC色譜能明顯檢出陳皮、黃芪，含量測定線性關(guān)系良好，橙皮苷的平均回收率為97.53％，RSD＝1.31％。結(jié)論：本方法簡便，準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可供本品質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：健兒口服液；橙皮苷；HPLC；TLC

中圖分類號：R927.2

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1007－2349(2007)07－0040－02

健兒口服液由陳皮、山楂、黃芪、麥芽等11味中藥組成，具有益氣健脾，調(diào)和營衛(wèi)之作用，對小兒脾虛兼痰，食欲不振，厭食，反復(fù)感冒咳喘，病后體虛等有較好療效。為控制產(chǎn)品質(zhì)量，確保臨床療效，本文建立了陳皮、黃芪的薄層色譜鑒別，并采用高效液相色譜法對主要藥味陳皮的主要成分橙皮苷的含量進(jìn)行含量測定。

1 儀器、試劑與樣品

1．1儀器島津LC－10AT高效液相色譜儀，SPD－10Avp紫外檢測器，SCL－10Avp色譜工作站。Meter AF240電子天平。

1．2試藥硅膠G，青島海洋化工廠，甲醇為色譜純，其他均為分析純。黃芪甲苷(中國藥品生物制品檢定所，批號：0781—200210，供鑒別用)、橙皮苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：110721—200512，供含量測定用)。健兒口服液為本院生產(chǎn)，批號：061128、061122、061125。

2 薄層色譜鑒別

2．1陳皮的鑒別取本品5ml，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?0ml，超聲40rain，放冷，濾過，濃縮至約1ml，作為供試品溶液。另取橙皮苷對照品，加甲醇制成每iml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。按處方要求制成缺陳皮的陰性供試品，同供試品溶液的制備方法，制成陰性對照溶液。吸取上述供試品及對照品溶液，及陰性對照溶液各2μ1，分別點(diǎn)于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯：甲醇：水(100:17:13)為展開劑，展開至3cm，取出，晾干，再以甲苯：乙酸乙酯：甲酸：水(20:10:1:1)的上層溶液為展開劑，展開至8cm，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對照液則無，見圖l。

2. 2黃芪的鑒別取本品20ml，水浴蒸干，加甲醇30ml，超聲提取lh，濾過，濾液加于已處理好的中性氧化鋁柱(100～120目，5g，內(nèi)徑10～15mm)，用40％甲醇lOOml洗脫，收集洗脫液，水浴蒸干，殘?jiān)铀?0ml，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml溶解，作為供試品溶液。取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含1rng的溶液。取缺黃芪的陰性供試品，同供試品溶液的制備方法，制成陰性對照溶液。吸取上述3種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿：乙酸乙酯：甲醇：水(20:40:22:10)10℃以下放置后的下層溶液為展開劑展開，取出，晾干。噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。在日光下檢視，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)，陰性對照液則無。見圖2。

2．3橙皮苷的含量測定

2．3．1對照品的制備精密稱取橙皮苷對照品10.5mg，置25ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，制成每1ml含42gg的溶液，即得。

2．3．2供試品溶液的制備精密量取樣品10ml置50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，離心，精密量取5ml，置50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2．3．3色譜條件色譜柱：大連依利特Hypersl0DS2(150mmX4.6mm，5μm)；流動相：甲醇：冰醋酸：水(32:4:64)；流速：1ml／min柱溫：30℃；檢測波長：283nm；理論塔板數(shù)按橙皮苷計(jì)算應(yīng)不低于2000。

2．3．4線性關(guān)系考察分別精密吸取對照品溶液3，5，7，10，12μl，按上述色譜條件進(jìn)樣測定，以峰面積積分值Y為縱坐標(biāo)，對照品量X(μg)為橫坐標(biāo)，作線性回歸，得回歸方程Y=1988666.9X－5062.9，r=0.9999，結(jié)果表明橙皮苷在0.126μg～0.504gg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2．3．5精密度試驗(yàn)精密吸取對照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣5次，按上述色譜條件測定，橙皮苷峰面積積分值的平均值為834943.6，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=0.24％。

2．3．6重復(fù)性試驗(yàn)取同一批號樣品(061128)5份，分別按樣品測定方法測定。結(jié)果：橙皮苷平均含量為0.81mg／ml，RSD＝1.20％．

2，3．7空白試驗(yàn)取缺陳皮的陰性對照溶液，按供試品溶液制備方法制備，進(jìn)樣，測定，結(jié)果表明處方中其他藥味無干擾。見圖3。

2．3．8穩(wěn)定性試驗(yàn)取供試品溶液，分別在0，1，6，12，24h進(jìn)樣(10tμl)，共進(jìn)樣5次，按上述色譜條件分別測定，峰面積積分值RSD＝1.31％，表明供試品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2．2．9加樣回收率試驗(yàn)取已知含量的供試品(批號：061128)2ml，精密加入一定量橙皮苷對照品，按供試品溶液制備方法制備，依法測定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

2．3．10樣品測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，以外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果見表2，色譜圖見圖3。

3 討論

橙皮苷的含量測定試驗(yàn)參考文獻(xiàn)陳皮項(xiàng)下橙皮苷的含量測定方法，采用流動相甲醇：冰醋酸：水(32:4:64)，流動相甲醇：冰醋酸：水(30:4:66)，甲醇：0.5％醋酸(39:61)，結(jié)果橙皮苷采用流動相甲醇：冰醋酸：水(32:4:64)可以基線分離不受其他組分干擾，分離效果好，準(zhǔn)確度高。