關(guān)鍵詞：水提三七皂苷；緩解體力疲勞；實(shí)驗(yàn)研究

中圖分類(lèi)號(hào)：R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007－2349(2007)09－0039－02

疲勞是機(jī)體在一定環(huán)境條件，由于長(zhǎng)時(shí)間或過(guò)度緊張的體力或腦力勞動(dòng)而引起的勞動(dòng)效率趨向下降的狀態(tài)，它是機(jī)體的一種防御反應(yīng)，是機(jī)體組織和器官興奮性下降而帶來(lái)工作效率的降低。隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)的日趨激烈，人們的生活節(jié)奏日益加快，工作壓力日益提高，處于疲勞或過(guò)度疲勞等亞健康狀態(tài)的人群比例不斷上升。開(kāi)發(fā)具有抗疲勞作用的保健藥品，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

水提三七皂苷是以云南文山地道藥材三七(Pnanaxnotoginseng)的地下根、根莖為原料，在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，用王興文教授“中藥水提專(zhuān)有技術(shù)”提取、分離、精制而得到的。水提三七皂苷含人參皂苷Rb₁、Rb₂、Rc、Rd、Re、雕、Rg₁、Rg₂、Rh，三七皂苷R₁、R₂、R₃、R₄、R₆等二十多種皂苷成分。具有多種功效和治療作用。水提三七皂苷膠囊是以水提三七皂苷制成的純中藥口服制劑，與市場(chǎng)同類(lèi)產(chǎn)品比較，具有微量、速效、高效等特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)旨在研究三七皂苷對(duì)緩解體力疲勞的影響。

1 材料和方法

1．1 樣品及供試液制備 由云南紅云生物工程技術(shù)有限公司提供三七皂苷膠囊，膠囊內(nèi)容物為灰白色粉未，規(guī)格為330mg/粒，樣品批號(hào)：20021212。人體推薦量為每人(成人)每日2次，每次1粒，按60kg體重折算成11mg/kg．BW。室溫保存。試驗(yàn)前用蒸餾水配成試驗(yàn)所需濃度的溶液作為供試液。

1．2 動(dòng)物選用廣西醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[批準(zhǔn)號(hào)為：桂動(dòng)許字(2000)第001號(hào)]繁殖的清潔級(jí)(Ⅱ級(jí))健康成年昆明種雄性小鼠184只，體重為18～26克，分為4批，每批44～48只。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房合格證號(hào)：桂醫(yī)動(dòng)字第23003號(hào)。動(dòng)物室溫度：22～25℃，相對(duì)濕度：55～70％。

1．3 選擇與受試物給予方式根據(jù)該樣品的人體推薦量，設(shè)55、110、220mg/kg．BW(分別相當(dāng)于人體推薦量的5、10、20倍)3個(gè)劑量的實(shí)驗(yàn)組，同時(shí)設(shè)1個(gè)陰性對(duì)照組(給蒸餾水)。每組11～12只動(dòng)物。采用經(jīng)口方式給予受試物，按每10g體重0.2ml的容量灌胃。

1．4主要儀器與試劑

1．4．1 儀器動(dòng)物天平、電子分析天平、離心機(jī)、高速分散器、振蕩器、真空泵、恒溫水浴鍋、721分光光度計(jì)、半自動(dòng)生化分析儀、游泳箱(大小為50cm×50cm×40cm)等。

1．4．2 試劑蒽酮、硫脲、濃硫酸、TCA、葡萄糖、NaF、CuS04、鎢酸鈉、對(duì)羥基聯(lián)苯、乳酸鋰(均為分析純)、BUN試劑盒(試劑盒為酶法，由上海長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：000359)。

1．5 實(shí)驗(yàn)方法 依據(jù)衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范－2003》中緩解體力疲勞功能檢驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)設(shè)4個(gè)組，即3個(gè)實(shí)驗(yàn)組和1個(gè)陰性對(duì)照組，每組11～12只小鼠。采用灌胃法，每天以0.4ml/20g，BW的容量給小鼠灌胃不同劑量的受試物，陰性對(duì)照組給予等量蒸餾水。每天1次，連續(xù)30天。第31天進(jìn)行各項(xiàng)抗疲勞指標(biāo)的測(cè)定。

1．5．1 負(fù)重游泳試驗(yàn)?zāi)┐谓o小鼠受試物30min后，置于游泳箱中游泳，水深約30cm，水溫25℃±0.5℃，鼠尾根部負(fù)荷5％體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開(kāi)始至死亡的時(shí)間，作為小鼠負(fù)重游泳時(shí)間(s)。若實(shí)驗(yàn)組游泳時(shí)間明顯長(zhǎng)于陰性對(duì)照組游泳時(shí)間，且差異有顯著性(P＜0.05)，可判定該受試物有延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的作用。

1．5．2 血清尿素測(cè)定 酶法試劑盒：末次給小鼠受試物30min后，在溫度為30℃的水中不負(fù)重游泳90min。運(yùn)動(dòng)后休息60min后產(chǎn)即撥眼球采血0.5ml，離心取血清加測(cè)定血清尿素值。若實(shí)驗(yàn)組血清尿素含量明顯低于陰性對(duì)照組，且差異有顯著性(P＜0.05)，可判定該受試物有減少疲勞小鼠尿素產(chǎn)生的作用。

1．5．3 肝糖原測(cè)定蒽酮法：末次給小鼠受試物30min后，立即處死．取肝臟經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，精確稱取肝臟100mg，加入TCA，勻漿、離心，取上清液測(cè)定肝糖含量。若實(shí)驗(yàn)組肝糖原含量明顯高于陰性對(duì)照組，且差異有顯著性(P＜0.05)，可判定該受試物有促進(jìn)小鼠肝糖原儲(chǔ)備的作用。

1．5．4 血乳酸測(cè)定末次給小鼠受試物30min后，分別在游泳前、游泳(運(yùn)動(dòng))后0min、游泳(運(yùn)動(dòng))后休息20min采血20μl進(jìn)行乳酸測(cè)定。血乳酸變化值用下式表示：血乳酸變化值＝1/2X(安靜血乳酸值+運(yùn)動(dòng)后0min的血乳酸值)X10＋1/2X(運(yùn)動(dòng)后Omin的血乳酸值+運(yùn)動(dòng)后20rain\"的血乳酸值)X20。若實(shí)驗(yàn)組血乳酸變化明顯低于陰性對(duì)照組，且差異有顯著性(P＜0．05)，可判定該受試物有減少小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸變化值勤的作用。

1．6 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的數(shù)據(jù)處理用Stata軟件對(duì)各實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)--進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，滿足“方差齊”要求的數(shù)據(jù)資料用單因素方差分析方法和多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理；對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)資料進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足“正態(tài)方差齊”要求后，用轉(zhuǎn)換所得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。

1．7 結(jié)果判定若負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性，且血乳酸、血清BUN、肝糖原三項(xiàng)生化指標(biāo)中任二項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性，可判定該受試樣品具有緩解體力疲勞功能的作用。

2 結(jié)果

2．1 樣品對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響見(jiàn)表1。比陰性對(duì)照組延長(zhǎng)，其中高劑量、中劑量組與陰性對(duì)照組的差異具有非常顯著性意義(P＜0.01)，低劑量組與陰性對(duì)照組的差異無(wú)顯著性意義(P＞0.05)，表明該樣品在110、220mg/kg．BW兩個(gè)劑量組能延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。

2．2 樣品對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后血清尿素水平的影響見(jiàn)表2。

由表2可見(jiàn)，樣品各劑量組小鼠血清尿素氮含量均低于對(duì)照組，其中高劑量、中劑量組與陰性對(duì)照組的差異具有顯著性意義(P＜0.05)，低劑量組與陰性對(duì)照組的差異無(wú)顯著性意義(P＞0．05)，表明該樣品在110、820mg/kg．BW兩個(gè)劑量組能減少或抑制疲勞小鼠血清尿素氮產(chǎn)生。

2．3 樣品對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響見(jiàn)表3。組，其中高劑量與陰性對(duì)照組的差異具有非常顯著性意義(P＜0.01)，中、低劑量組與陰性對(duì)照組的差異無(wú)顯著性意(P＞0.05)，表明該樣品在220mg/kg.BW劑量組具有促進(jìn)糖原儲(chǔ)備的作用。

2．4 樣品對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸值的影響見(jiàn)表4。

由表4可見(jiàn)，樣品各劑量的血乳酸變化值均低于對(duì)照組，其中高劑量、中劑量組與陰性對(duì)照組的差異具有極顯著性意義(P＜0.01)，低劑量組與陰性對(duì)照組的差異無(wú)顯著性意義(p＞0.05)，表明該樣品在110、220mg/kg．BW兩個(gè)劑量組能降低小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸變化值。

3 小結(jié)

運(yùn)動(dòng)耐力的提高是抗疲勞能力加強(qiáng)最直接的表現(xiàn)，游泳時(shí)間的長(zhǎng)短可以反應(yīng)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)疲勞的程度。本實(shí)驗(yàn)顯示服用三七皂苷30天后，小鼠的游泳時(shí)間明顯長(zhǎng)于未服用的對(duì)照組小鼠。機(jī)體血尿素氮含量隨勞動(dòng)及運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的增加而增加。機(jī)體對(duì)負(fù)荷的適應(yīng)能力越差，血尿素氮增加越明顯，本研究表明三七皂苷能使機(jī)體內(nèi)血尿素氮減少。糖原是運(yùn)動(dòng)中最重要的能源物質(zhì)，體內(nèi)糖原的水平與耐力密切相關(guān)，當(dāng)糖原被大量消耗而又得不到及時(shí)的補(bǔ)充時(shí)，糖酵解產(chǎn)物乳酸過(guò)量堆積導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)環(huán)境失調(diào)和代謝過(guò)程紊亂，糖原儲(chǔ)備的提高有利于機(jī)體耐力的提高，肌糖原儲(chǔ)備越多，運(yùn)動(dòng)可持續(xù)的時(shí)間越長(zhǎng)，本實(shí)驗(yàn)表明三七皂苷能使體內(nèi)肝糖原儲(chǔ)備增加，從而使耐力提高。劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)，機(jī)體對(duì)能量的需求增加，由于有氧代謝能力的不足，需通過(guò)無(wú)氧酵解提供能量，同時(shí)產(chǎn)生大量的乳酸，使肌組織中H^＋離子濃度升高，PH降低，引起一系列生化反應(yīng)，導(dǎo)致疲勞的產(chǎn)生，血乳酸的清除需有氧的參加。有文獻(xiàn)報(bào)道，三七皂苷有活血、補(bǔ)血、溶血和抗溶血，并能改善血?dú)庋h(huán)等作用，本實(shí)驗(yàn)亦證明三七皂苷能幫助機(jī)體乳酸的清除。上述結(jié)果均說(shuō)明了三七皂苷具有緩解機(jī)體疲勞的功能。