中圖分類號(hào)：S663.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1008-1038（2025）07-0008-06

DOI：10.19590/j.cnki.1008-1038.2025.07.002

Dietary Risk Assessment ofPyraclostrobin and Boscalid in Grapes

WANGFeixiang1，F(xiàn)ENGYizhi2，YU Miao，LIANGLin2，LI Xiangyang？ （1.Feixian Agricultural Technology Extension Center， Linyi 2734Oo， China; 2.Shandong Academy of Pesticide Sciences， Jinan 25oo33， China; 3.Institute for the Control of Agrochemicals， Shandong Province， Jinan 25O1Oo， China）

Abstract： To evaluate theriskof disipation，residue anddietary intakeof pyraclostrobinandboscalid in grapes under field conditions，the residue analysis of pyraclostrobin and boscalid in grape samples was carried out by thefield experiment combined with themass spectrometry method with QuEChERS as the pretreatment method，andthe dietary safety was evaluated in combination with the dietary data in China.Under field conditions，the half-lives of pyraclostrobin and boscalid in grapes were3.5-9.6 dand2.9-8.8d，respectively.

The maximum residue of pyraclostrobin and boscalid in grape samples at 7d and 10d after the last application was 1.7mg/kg and 3.8mg/kg ，respectively，which were lower than the maximum residue limit standard in China.The long-term dietary risk quotients （RQc） of pyraclostrobin and boscalid to Chinese adults were 97.9 % （204 and 70.0% ，respectively，which were lower than 100% ．At this test dose，the residues of pyraclostrobin and boscalid in grapes would not have an impact on the health of Chinese adults.

Keywords：Pyraclostrobin; boscalid; grape; dissipation; risk assessment

灰霉病是葡萄生產(chǎn)中的主要病害，嚴(yán)重影響葡萄果實(shí)的品質(zhì)和產(chǎn)量1-2。近年來(lái)，葡萄灰霉病日趨嚴(yán)重，為害葡萄造成的年均損失約占其產(chǎn)量的 30% 3]。目前，實(shí)際生產(chǎn)中灰霉病的防治仍以化學(xué)防治為主，然而藥劑的重復(fù)使用，會(huì)導(dǎo)致抗藥性的產(chǎn)生，最終導(dǎo)致防效降低4。

吡唑醚菌酯（pyraclostrobin）是一種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，通過(guò)組織細(xì)胞色素bc1復(fù)合體的電子傳遞而抑制線粒體呼吸作用達(dá)到殺菌效果5。啶酰菌胺（boscalid）屬于琥珀酸脫氫酶抑制劑類殺菌劑，已廣泛用于防治蔬菜、果樹等作物的灰霉病。研究表明，吡唑醚菌酯與啶酰菌胺按不同比例混配后均對(duì)葡萄灰霉病的病原菌灰葡萄孢霉表現(xiàn)出良好的毒力增效作用。隨著這兩種農(nóng)藥的普及，其在農(nóng)產(chǎn)品中的安全性也受到了人們的關(guān)注。目前，同時(shí)使用兩種藥劑對(duì)農(nóng)產(chǎn)品安全性的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究建立了QuEChERS（Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged，andSafe）前處理方法結(jié)合高效液相串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)葡萄中吡唑醚菌酯與啶酰菌胺殘留，并對(duì)我國(guó)10個(gè)葡萄主產(chǎn)區(qū)田間樣品進(jìn)行分析，同時(shí)結(jié)合我國(guó)居民的膳食水平，對(duì)我國(guó)成年居民的膳食風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了評(píng)估，為兩種藥劑在葡萄上的科學(xué)合理使用提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1 材料與試劑

吡唑醚菌酯和啶酰菌胺標(biāo)準(zhǔn)品，德國(guó)Dr.EhrenstorferGmbH; 38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑（吡唑醚菌酯 12.8% 、啶酰菌胺 25.2%） ，山東東泰農(nóng)化有限公司；氯化鈉（分析純）、無(wú)水硫酸鎂（分析純）、甲酸（色譜純）、乙腈（分析純、色譜純），國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；N-丙基乙二胺（PSA） （40～60μm） ，天津博納艾杰爾科技有限公司；有機(jī)濾器 （0.22μm） ，天津天羽嘉瀾科技有限公司。

1.2 田間試驗(yàn)

按照《農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》8和《農(nóng)藥登記殘留試驗(yàn)區(qū)域指南》要求設(shè)計(jì)試驗(yàn)： 38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑在葡萄上防治灰霉病的試驗(yàn)劑量為1000倍液，于灰霉病發(fā)病前或發(fā)病初期噴霧施藥3次，施藥間隔 7d 。在我國(guó)10個(gè)葡萄主產(chǎn)區(qū)作為試驗(yàn)地點(diǎn)，其中在吉林省、寧夏回族自治區(qū)、河南省、上海市、湖北省和廣西壯族自治區(qū)開展最終殘留試驗(yàn)，河北省、山東省、安徽省和云南省開展消解試驗(yàn)，具體試驗(yàn)信息見(jiàn)表1。每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)直線距離大于 200km 。最終殘留和消解試驗(yàn)均設(shè)置1個(gè)處理小區(qū)和1個(gè)對(duì)照小區(qū)，每小區(qū)至少8株或面積至少 50m² 。

在試驗(yàn)小區(qū)中用隨機(jī)方法在葡萄架的上、中、下、左、右不同部位采樣，每個(gè)樣品的采樣點(diǎn)至少采集12串生長(zhǎng)正常、無(wú)病害、成熟的葡萄果實(shí)。將葡萄田間樣本除去果柄，充分混勻后用四分法分取 150g 樣品，放于 -18°C 以下的冰柜中，待測(cè)。

1.3樣品處理

采用改進(jìn)的QuEChERS方法對(duì)葡萄樣品進(jìn)行處理[0]。用食品料理儀將冰凍狀態(tài)的葡萄搗碎，準(zhǔn)確稱取10.0g 至 50mL 具塞塑料離心管內(nèi)，加入 20mL 乙腈，置于自動(dòng)渦旋儀上 2500r/min 渦旋提取 5min ，之后加入 4g 氯化鈉，劇烈振蕩 1min 后轉(zhuǎn)入離心機(jī)，以 4000r/min 離心 5min ，取上清液 1mL 至加有 40mgN- 丙基乙二胺（PSA）的 2mL 離心管中，渦旋凈化 1min ，過(guò) 0.22μm 有機(jī)濾器待測(cè)。

1.4儀器與設(shè)備

高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（1200-6460，Agilent）配Poroshell 120EC-C18（100mm×4.6mm，2.7μm） 色譜柱，采用 0.1% 甲酸水溶液和乙腈 （20/80，V/V） 為流動(dòng)相，對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行分離，流速為 0.8mL/min; 進(jìn)樣體積 2μL 多管漩渦混合儀，MTV-100，杭州奧盛儀器有限公司；電

表1葡萄試驗(yàn)地信息匯總

Table1 Grape test site informationsummary

注：“BBCH*”是植物各個(gè)生長(zhǎng)階段表現(xiàn)型編碼系統(tǒng)。

表2吡唑醚菌酯與啶酰菌胺儀器條件

Table2 Instrumentconditionsof pyraclostrobinand boscalid

注：1）為定量離子，2）為定性離子。

子天平，AL204，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；高速組織搗碎機(jī)，JYL-C020E，九陽(yáng)股份有限公司；離心機(jī)，F(xiàn)C5706，美國(guó)奧豪斯公司。

吡唑醚菌酯與啶酰菌胺儀器采集條件見(jiàn)表2。

1.5 計(jì)算公式

按照公式（1）（2）計(jì)算每日攝入量和長(zhǎng)期膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)商。

式中，NEDI為國(guó)家估算每日攝入量， mg/kg ；FI為某類食物攝入量， kg;STMR 為良好試驗(yàn)殘留中值， mg/kg bw為成年居民的平均體質(zhì)量， 63kg;RQc 為長(zhǎng)期膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)商， % ；ADI為藥劑每日允許攝入量， 其中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺分別為 0.03mg/kgbw 和 0.04mg/ 若風(fēng)險(xiǎn)值大于100，則表明風(fēng)險(xiǎn)不可接受]。

通過(guò)計(jì)算基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積的斜率與溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積斜率評(píng)估基質(zhì)效應(yīng)（公式3），超過(guò) 10% 則認(rèn)為有明顯的基質(zhì)效應(yīng)[3]。

式中，ME為基質(zhì)效應(yīng)， %：a_I 為標(biāo)樣斜率； a₂ 為溶劑斜率。

2結(jié)果與分析

2.1 方法驗(yàn)證

在空白葡萄樣品中按照 0.02，0.2，2mg/kg 水平添加吡唑醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照 0.02，0.2，5mg/kg 水平添加啶酰菌胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)濃度5次平行試驗(yàn)。在 0.01～

2.5mg/L 范圍內(nèi)，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在乙腈和空白葡萄基質(zhì)中均有較好的線性 _{（rgt;0.9917）} 。添加回收結(jié)果見(jiàn)表3，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的平均回收率分別為93%～96% 和 95%～108% ；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為3%～6% 和 2%～7% 。基質(zhì)效應(yīng)表明，兩種藥劑在葡萄中均基質(zhì)增強(qiáng)，為消除基質(zhì)效應(yīng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，兩種藥劑均采用基質(zhì)標(biāo)樣進(jìn)行校準(zhǔn)。以最低添加濃度為最低檢測(cè)濃度，兩種藥劑定量限為 0.02mg/kg_° 方法參數(shù)均符合《農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》8。

2.2 消解試驗(yàn)

為明確吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄中的消解動(dòng)態(tài)，在河北、山東、安徽和云南四地開展試驗(yàn)。如表4所示，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在四地葡萄中的半衰期差異較大，分別為 3.5～9.6d 和 2.9～8.8d° 其中，山東費(fèi)縣葡萄中兩個(gè)藥劑的半衰期明顯快于其余三地，這主要與山東試驗(yàn)期間降雨較多有關(guān)，雨水的沖刷加快了藥劑在葡萄中的降解。陳勇達(dá)等[4研究表明，吡唑醚菌酯在葡萄中半衰期為 14.1～24.9d ，明顯長(zhǎng)于本研究。張玉婷等[研究表明，啶酰菌胺在葡萄中半衰期為 9.9～12.0d ，與本研究結(jié)果類似。也有研究表明[16-18]，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在農(nóng)作物中半衰期與作物種類有關(guān)，一般在蘋果、葡萄等生長(zhǎng)較慢的作物中半衰期較長(zhǎng)，而在黃瓜、草莓等生長(zhǎng)較快的作物中半衰期較短，說(shuō)明生長(zhǎng)稀釋作用對(duì)藥劑半衰期影響巨大。另外，本研究發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)間葡萄中藥劑的原始沉積量也有一定的差異，這可能與不同地區(qū)種植模式和各地施藥習(xí)慣有關(guān)。目前，葡萄田間用藥為稀釋倍數(shù)用藥，葡萄中藥劑殘留量直接與藥劑噴液量有關(guān)，而田間條件下作物生長(zhǎng)狀態(tài)（大小、密度等）能直接影響噴液量，所以導(dǎo)致各地間的原始沉積量存在差異。

2.3最終殘留試驗(yàn)

通過(guò)開展 38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑在葡萄上防治灰霉病的10地田間試驗(yàn)，研究?jī)煞N藥劑在葡萄中的殘留情況。 38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑以1000倍液噴霧施藥3次，施藥間隔7d，末次施藥后7d和10d的最終殘留量檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖1。采收間隔7d的葡萄樣品中吡唑醚菌酯的殘留量在 0.096～1.700mg/kg 之間，啶酰菌胺殘留量在 0.36～3.80mg/kg 之間。采收間隔10d樣品中吡唑醚菌酯的殘留量在 0.068～0.790mg/kg 之間，啶酰菌胺殘留量在 0.32～2.60mg/kg 之間。隨著采收時(shí)間的延長(zhǎng)，葡萄樣品中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺殘留量逐漸減低。兩個(gè)不同采收間隔的葡萄樣品中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺最大殘留量均低于我國(guó)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB2763—2021）中規(guī)定的葡萄中吡唑醚菌酯 （2mg/kg） 和啶酰菌胺（5mg/kg） 最大殘留限量。

表3吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄中的添加回收試驗(yàn)參數(shù)

Table3Test parameters for recoveryof pyraclostrobinand boscalidin grapes

表4吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄的半衰期及原始沉積量

Table 4 Half-life and original deposition of pyraclostrobinand boscalid in grapes

圖1吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄不同采收間隔的殘留量Fig.1Residuesof pyraclostrobinand boscalid at differentharvestintervalsofgrapes

2.4膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

目前，我國(guó)對(duì)藥劑進(jìn)行膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)，同時(shí)考慮此藥劑在我國(guó)所有的登記作物種類，并根據(jù)登記作物進(jìn)行膳食分類，然后使用此類別中殘留最大值（限量或中值）進(jìn)行評(píng)估。吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在我國(guó)分別登記了77種和20種作物（截至2024年12月）。分別對(duì)應(yīng)水果等12個(gè)和5個(gè)膳食分類。按照本研究中距末次施藥后7d，葡萄中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的規(guī)范殘留試驗(yàn)中值分別為 0.79，1.6mg/kg° 結(jié)合我國(guó)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的ADI分別為 0.03mg/kg bw 和0.04mg/kgbw^[11]s 按照1.5中公式（1）和（2）計(jì)算（表5），吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在所有登記作物中風(fēng)險(xiǎn)商數(shù)RQc值為97.9% 和 70.0% ，均低于 100% 。因此，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄中的殘留量對(duì)我國(guó)一般人群健康的長(zhǎng)期膳食攝入影響在可接受的風(fēng)險(xiǎn)水平。

3討論與結(jié)論

在田間試驗(yàn)條件下吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄中的殘留消解符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，半衰期分別為 3.5～ 9.6d和 2.9～8.8d， ，不同地區(qū)間差異明顯。農(nóng)藥在環(huán)境中的降解是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，除受物理化學(xué)因素如降雨、光照、濕度等影響外，作物狀態(tài)、栽培方式等也是影響其降解的關(guān)鍵因素[19-20]。通過(guò)不同試驗(yàn)地了解藥劑消解情況，對(duì)于藥劑安全使用具有至關(guān)重要的作用。

表5吡唑醚菌酯和啶酰菌胺長(zhǎng)期膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

Table5Risk assessment of long-term dietary intake of pyraclostrobin and boscalid

注：“—”表示此類未登記。

38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑按照1000倍液噴霧施藥3次，施藥間隔7d，末次施藥后7d和10d葡萄樣品中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺殘留量均低于我國(guó)制定的限量標(biāo)準(zhǔn)。吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的長(zhǎng)期膳食風(fēng)險(xiǎn)對(duì)成年人健康是可接受的。目前，我國(guó)膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)采用的膳食數(shù)據(jù)為2002年制定，而當(dāng)前居民膳食結(jié)構(gòu)已發(fā)生了巨大變化。我國(guó)應(yīng)盡快完善居民膳食數(shù)據(jù)調(diào)查，以便進(jìn)行更加科學(xué)的膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

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