關鍵詞 中華絨螯蟹;仔蟹;幼蟹；二尖梅奇酵母中圖分類號S945.6文獻標識碼A文章編號 0517-6611（2025）14-0090-07doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2025.14.018

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StudyntheDiseasePatersofChineseMitenCrab（Eriocheirsinnsis）InfectedwithMetschnikowiabicuspidtaatDierentCultivation Stages

BAI Yong-an1 ， QIN Hu² ，XING Dong-fei'etal（1.Panjin Guanghe Crab Industry Co.，Ltd./Key Laboratory of Chinese Miten Crab BreedingandPropagation，MinistryofAgricultureandRuralAais/KeyLaboratoryofChineseMitenCrabBreedingiLiaoningrovince， Panjin，Liaoning242O;2.ColgefAnimalSienceadVeterinaryMedicine，ShenangAgriculturalUniversityhenyang，Liog 110866）

AbstractThissudyainlyxploedeifectionpatesof“milkdsease”inEoheirensisatdfentfmngstagesCieien crabatdiffntgsagseredstesachctsfoartfalifectioexpeetsithMetscoacuspdtedis easecharacterisisofineseiabatierntfngsagseebseredandteurvivaldifectioatesofeien crabswerecountedTeresultsshowedthat：atfistsecondndthidstagesofyoungcrabs，terewasnognfcantdifrenceiteav eragsurvivalratebetweentheifectedgoupandtecontrolgroup.However，theaveragefectionratesofteifectedgrouwereetreely signfcantlyoigiiantlertaatofotolgoSpallyatisteovellot，oligdeeotate andvitaityoftifectedgouperelowerthantosfecotrooupAttescondstageeathocuredineifectedgrouuet moltingdifftdtdnfeedouudoaldiaetesouspdt creased;duringthtuempoaryulurepiod，thvialityfieseitencabsinefectedgoupasgeneallyloerattf thecontrolgroup.AneulsifationsyptomappearedintediesofeadanddseasdabsBthteaveragesurivalateandthaverage infection rate of the infected group were 83.33% and 89.00% respectively，and the average infection rate was extremely significantly higher thanthatofthecontrolgoupfrotetiefioculatiototedoftheexperimentduringteoverwinteringperiod，teodyfludofthe crablegsntheinfectedgrouptudhiteandubidndanemulsificationpenomenooccuedinteodyTheaveragesuralatef the infected group was as high as 100% ，and the average infection rate was 43.33% ，which was significantly higher than that of the control group.Duringthejuvenilecrabstage，MetschnikouiabicuspidatacancolonizewithinteChinesemitencrab，withtheinfectionateeing （204號 30% orabove.Duringtheautumntemporarycultureperiod，theaverageinfectionrateandsurvivalrateofthe“milkdisease”inChinsemittencrabswereeltivelyhighttioprgesedadlyndesptosweebviousinthlatertage，ichsteaifetio stageofMetschioiabicuspdata.Duringteoverwinteringperiod，uetotelowtmperature，teetablisofCieseitencabswas slow.AtesaiteviuleneofMetschouiaicuspdatamightdcreaseutoeempaturedopesefactosjlelad theinfectionanddeaseosett.issudpeliiailexplodtdiseasepatesofCineseitencabsifectedithetsou bicuspidataat diferent stages，providing an important reference for theartificial farming of Chinese mitten crabs.

Keywords Eriocheir sinensis;Young crab;Juvenile crab;Metschnikowia bicuspidata

中華絨蟹（EriocheirsinensisH.Milne-Edwards），俗稱大閘蟹、河蟹，是我國重要的淡水養(yǎng)殖品種之一，味道鮮美，營養(yǎng)豐富，具有較高的經(jīng)濟價值[1]。隨著中華絨螯蟹養(yǎng)殖行業(yè)的迅猛發(fā)展，不可避免地帶來了諸多問題與挑戰(zhàn)[2-4]，至今仍有一些傳染病未能完全攻克，比如河蟹呼腸弧病毒病、河蟹皰疹病毒病、“牛奶病”蟹奴病等[5]。目前北方地區(qū)中華絨螯蟹養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)正受到“牛奶病”的困擾，這種病潛伏期長、傳染力強、致死率高且出現(xiàn)癥狀時已出現(xiàn)不可逆的病變，缺乏救治措施。

中華絨螯蟹生長發(fā)育過程較長，從受精卵到成蟹共經(jīng)歷6個階段，分別為受精卵、蚤狀幼體、大眼幼體、仔蟹、幼蟹、成蟹[6]。目前大多數(shù)中華絨螯蟹“牛奶病”的研究集中在幼蟹或成蟹階段感染，比較單一且脫離實際養(yǎng)殖生產(chǎn)。在中華絨螯蟹養(yǎng)殖過程中從幼蟹到成蟹又可分為多個養(yǎng)殖環(huán)節(jié)，筆者所在科研團隊前期試驗中華絨螯蟹幼體期未檢測出二尖梅奇酵母，而其他階段鮮有人研究，或是沒有單獨完成中華絨螯蟹的多階段感染試驗。該研究以中華絨螯蟹與“牛奶病”病原菌二尖梅奇酵母為研究對象，重點研究中華絨螯蟹3個重要的養(yǎng)殖階段[包括幼體期到豆蟹期（春季投入稻田養(yǎng)殖期）幼蟹轉(zhuǎn)移暫養(yǎng)期（發(fā)生在秋收時，因此也稱為“秋季暫養(yǎng)期”）以及幼蟹越冬期二尖梅奇酵母對其生存的影響以及“牛奶病”的感染率及發(fā)病特點，結(jié)合不同養(yǎng)殖階段的感染情況進行分析，總結(jié)養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中中華絨螯蟹“牛奶病”的感染規(guī)律，并為減少“牛奶病”的發(fā)生提出建議。

1材料與方法

1.1試驗動物與菌株試驗于2022年9月6日至2023年8月3日在盤錦光合蟹業(yè)有限公司研發(fā)中心進行。試驗動物由盤錦光合蟹業(yè)有限公司提供，保證無“牛奶病”感染。選擇育種車間1000只健康中華絨螯蟹大眼幼體、秋季稻田回收的72只平均體質(zhì)量（ ?5.0±0.5 ）g的健康幼蟹、越冬池60只平均體質(zhì)量（ 25.0±2.5 ） g 的健康幼蟹用于試驗。

二尖梅奇酵母由盤錦光合蟹業(yè)有限公司研發(fā)中心提供。二尖梅奇酵母菌液通過Z字劃線在YPD 固體培養(yǎng)基上于28^°C 下恒溫培養(yǎng) 36h 進行活化。

1.2 方法

1.2.1不同養(yǎng)殖階段感染試驗。采取浸泡感染的形式對試驗蟹進行浸染，溫度模擬當季生存水溫（幼體期到豆蟹期25～30^°C ，秋季暫養(yǎng)期 12～20% ，幼蟹越冬期 4～8‰ ），水體體積為4L，病原菌浸泡濃度為 5×10⁵ CFU/mL，分為感染組和對照組，每組設置3個平行。每天更換1次水體并觀察記錄蟹的生存狀態(tài)，更換后感染組進行投菌與投喂（對照組僅投喂）。試驗期間若有死亡，及時撈出并檢測是否感染

幼體期到豆蟹期分為3個時期（I期為大眼幼體～1期仔蟹期、I期為2期仔蟹～3期仔蟹期、Ⅱ期為4期仔蟹～豆蟹期），每個時期采取浸泡感染 15d+ 凈水養(yǎng)殖2d的模式。每組樣本量50只。秋季暫養(yǎng)期的感染試驗采取浸泡感染 30d+ 凈水養(yǎng)殖2d的模式，每組樣本量為12只。幼蟹越冬期感染試驗采用的模式同秋季暫養(yǎng)期。每組樣本量為10只。

1.2.2樣本采集及處理。用無菌水對試驗動物沖洗1～2min ，大眼幼體及仔蟹直接分裝入燒杯備用；秋季暫養(yǎng)期及越冬期幼蟹使用 75% 乙醇擦拭蟹體體表消毒，隨后單獨分裝入滅菌燒杯，備用。

幼體期到豆蟹期：將清洗完的樣本分裝入已滅菌的1.5mL 離心管中，加人 1mL 無菌水，使用已消毒的鑷子將仔蟹樣本搗碎并充分攪拌，置于渦旋機上充分振蕩混勻，備用。秋季暫養(yǎng)期及幼蟹越冬期：使用已消毒的鑷子夾取幼蟹肝胰腺，裝入已滅菌的 1.5mL 離心管中，用于菌落培養(yǎng)。

1.2.3菌落培養(yǎng)方法及指標計算方法。使用已滅菌的棉簽蘸取保存在離心管中的組織樣本或混合液，在孟加拉紅培養(yǎng)基平板上進行Z字劃線，倒置于 28^°C 恒溫培養(yǎng)箱中 48h ，觀察培養(yǎng)基上菌落生長情況[7-8]，若菌落沿劃線痕跡連成片則判定為感染（圖1）。存活率和感染率計算公式如下：

Pgt;0.05 表示差異不顯著， P?0.05 表示差異顯著。

注：1、2號沿劃線痕跡生長，判定為感染；3號無法看出劃線痕跡， 判定為攜帶，不計為感染。

Note：No.1 and No.2 grow along the line marks asinfection;No.3 can not see the line marks as carrying，not asinfection.

Fig.1The judgment ofthebacterial colonycultureresults

2 結(jié)果與分析

2.1仔蟹階段感染試驗

2.1.1仔蟹I期感染試驗結(jié)果。

2.1.1.1發(fā)病特征。投菌1～2d：感染組大眼幼體活力明顯減退，出現(xiàn)沉底現(xiàn)象，攝食量減少，蛻殼相較于對照組稍有延遲。

投菌3～6d：感染組大部分大眼幼體成功蛻殼為1期仔蟹，食量恢復；少部分幼體因蛻皮失敗而死亡（如圖2所示），培養(yǎng)基檢測結(jié)果顯示，未檢測到二尖梅奇酵母。

投菌 7～15d ：感染組整體生長蛻殼發(fā)育速度及活力均低于對照組，食欲下降；對照組仔蟹聚集于水草附近，水底出現(xiàn)大量蛻下的殼，死亡個體肢體完整；感染組仔蟹多沉底靜臥，體色發(fā)白，部分個體腿部蜷曲僵硬，對于刺激反應遲緩，打斗減少，且出現(xiàn)較多蛻皮困難死亡的個體（如圖2所示）。

2.1.1.2感染率與成活率。I期感染試驗結(jié)果如表1所示，感染組的平均存活率為 40.00% ，而對照組為 41.33% ，標準差相近且均在 10% 以內(nèi)，離散程度適中；單因素方差分析結(jié)果表明 ，差異不顯著。這一結(jié)果與養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中仔蟹期高死亡率的現(xiàn)象相吻合。在I期感染試驗中，感染組檢出二尖梅奇酵母攜帶，平均感染率為 45.00% ，對照組的平均感染率為 0;P_ESP?=0.02lt;0.05 ，說明差異顯著。以上結(jié)果表明，從大眼幼體到蛻皮2～3次的仔蟹階段，在一定濃度的二尖梅奇酵母環(huán)境下中華絨螯蟹會受到感染，但短期浸泡感染對該時期中華絨螯蟹存活率的影響不大。

2.1.2仔蟹Ⅱ期感染試驗結(jié)果。

2.1.2.1發(fā)病特征。投菌1～2d：感染組的仔蟹出現(xiàn)應激性活力提高，但飼料攝食量有所減少。

投菌 3～10d ：感染組仔蟹蛻皮相較于對照組明顯延遲，甚至出現(xiàn)不蛻皮的現(xiàn)象，同時開始有仔蟹死亡；培養(yǎng)基檢測結(jié)果顯示，部分樣本中檢測到二尖梅奇酵母。

投菌 11～15d ：仔蟹進入蛻殼的下一階段，此過程中也有仔蟹因蛻殼而死亡；培養(yǎng)基檢測結(jié)果顯示檢測到二尖梅奇酵母。

2.1.2.2感染率與成活率。Ⅱ期感染試驗結(jié)果見表2。該時期感染組仔蟹的平均存活率為 49.33% ，且其標準差介于10%～20% ，離散程度適中; ，差異不顯著。與I期相比，Ⅱ期平均存活率略有增加。同時，Ⅱ期感染組的平均感染率為 61.67% ，對照組的平均感染率為0；感染組感染率的標準差介于 10%～20% ，離散程度適中； P_p⊥Sλ=0.01 ，差異極顯著。以上結(jié)果表明，Ⅱ期的仔蟹同樣能夠被二尖梅奇酵母感染，同時該時期相同濃度二尖梅奇酵母感染對其存活率的影響較小。

2.1.3仔蟹Ⅲ期感染試驗結(jié)果。

2.1.3.1發(fā)病特征。此時期仔蟹攻擊性較強。投菌1～7d：感染組與對照組都出現(xiàn)較多因打斗而導致的死亡，但攝食正常。相較于前2個時期，Ⅲ期仔蟹對二尖梅奇酵母的抵抗力有所增強。投菌 8～15d ：感染組打斗現(xiàn)象減少，同時出現(xiàn)蛻皮延后和生長減緩的情況，這與前2期試驗結(jié)果相一致。

2.1.3.2感染率與成活率。Ⅱ期感染試驗結(jié)果見表3。Ⅲ期感染組與對照組的平均存活率分別為 30.67% 和 35.33% ，2組標準差均在 10% 以內(nèi)，離散程度適中; ，差異不顯著。ⅡⅢ期感染組平均感染率為 30.33% ，比Ⅱ期有所下降； P_men= 0.031lt;0.05 ，差異顯著。整體來看，Ⅲ期仔蟹的平均存活率及平均感染率均低于前2個時期，表明經(jīng)過數(shù)次蛻皮仔蟹進入豆蟹階段后，二尖梅奇酵母對其感染力有所下降，但仍存在感染風險，再次證明該時期相同試驗濃度二尖梅奇酵母感染對其存活率的影響較小。

2.1.43個時期仔蟹感染試驗結(jié)果比較。幼體期到豆蟹期各時期仔蟹存活率和感染率對比見圖3、圖4。從整個仔蟹階段感染組的發(fā)病表現(xiàn)來看，感染組生長滯緩，且均比對照組少蛻殼1次，出現(xiàn)蛻殼延遲、活力下降的現(xiàn)象。

從存活率來看，各時期感染組與對照組的平均存活率差異不大，離散程度適中；3個時期對照組平均存活率差異不顯著，因此可判斷中華絨螯蟹幼體期到豆蟹期存活率較為穩(wěn)定且各時期間差異不顯著。感染組Ⅱ期與Ⅱ期的平均存活率存在顯著差異。感染組Ⅱ期平均存活率顯著高于Ⅲ期（ Plt;0.05） ，結(jié)合行為觀察，ⅢI期仔蟹打斗比Ⅱ期頻繁，判斷導致感染組存活率顯著降低的原因是由于攻擊性增強導致打斗行為加劇死亡。從感染率來看，各時期感染組平均感染率都維持在 30% 以上，且Ⅲ期平均感染率顯著低于Ⅱ期。3個時期感染組與對照組差異顯著或極顯著，說明二尖梅奇酵母可定殖于仔蟹體內(nèi)。

注：同一階段不同組間不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05 。

Note：Different lowercases indicate significant difference between groupsat the same stage（ Plt;0.05） .：

2.2秋季暫養(yǎng)期感染試驗

2.2.1發(fā)病特征。投菌1～5d;感染組幼蟹活力充沛，富有注：不同階段間標有不同小寫字母表示差異顯著（ Plt;0.05 ）攻擊性，攝食正常，未見感染癥狀。

投菌 6～15d ：感染組幼蟹活力逐漸減退，攝食量減少，攻擊性降低。在無外界刺激的情況下，它們常躲在角落靜止不動，生長速度放緩，蛻殼現(xiàn)象減少。

投菌16～25d：感染組幼蟹活力普遍低于對照組，蛻殼困難，出現(xiàn)首例死亡。解剖后發(fā)現(xiàn)，病死幼蟹與正常死亡幼蟹相比體內(nèi)出現(xiàn)乳化癥狀，肝胰腺顏色變淺（圖5），并伴有特殊腥臭味。感染組存活的幼蟹部分四肢僵直，行動時身體緊繃，翻轉(zhuǎn)后難以自由翻身，腿部關節(jié)發(fā)白，背甲發(fā)黃，體重減輕，行為僵硬。

投菌26～30d：感染組幼蟹死亡進一步加劇，行動能力較對照組大幅下降。解剖死亡的病蟹發(fā)現(xiàn)體內(nèi)有大量乳白色體液，肝胰腺顏色變淺。

2.2.2感染率與成活率。秋季暫養(yǎng)期感染試驗結(jié)果如表4所示。秋季暫養(yǎng)期培養(yǎng)基鑒定結(jié)果見圖6。該試驗中感染組平均存活率與平均感染率分別為 83.33% 和 89.00% ，而對照組平均存活率高達 97.33% ，且未出現(xiàn)感染情況；2組存活率標準差均介于 10%～20% ，離散程度適中； P_##=0.23gt;0.05 ，差異不顯著； ，差異極顯著。該階段中華絨螯蟹的平均感染率顯著高于仔蟹期，這與實際養(yǎng)殖生產(chǎn)中秋季幼蟹開始出現(xiàn)“牛奶病”的現(xiàn)象相吻合

2.3幼蟹越冬期感染試驗

2.3.1發(fā)病特征。該階段投菌后至試驗結(jié)束，外部觀察顯示感染組與對照組行為變化并不明顯。該階段后期感染組中華絨螯蟹的背甲顏色略微變淺，但從外部難以區(qū)分是否患有“牛奶病”。實驗室檢測蟹腿時發(fā)現(xiàn)感染組部分中華絨螯蟹的體液從原本清亮的透明狀態(tài)逐漸變?yōu)榘咨珳啙釥?，體內(nèi)出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，鰓部發(fā)白，但肝胰腺顏色依然鮮艷（圖7）。

2.3.2感染率與成活率。幼蟹越冬期感染試驗結(jié)果見表5。幼蟹越冬期培養(yǎng)基鑒定結(jié)果見圖8。此次試驗中，感染組的平均存活率高達 100% ，而對照組平均存活率為 96.67% ；感染組無1例死亡；對照組出現(xiàn)了1例死亡，未檢測到二尖梅奇酵母，標準差小于 5% ，離散程度較??； P_###=0.374gt;0.05 ，差異不顯著。此外，感染組的平均感染率為 43.33% ，對照組則未出現(xiàn)感染； P_Πkik，mk=0.008lt;0.01 ，差異極顯著。感染組感染率標準差為 15.27% ，離散程度較大，究其原因可能是因為樣本容量較小，后續(xù)試驗可加大感染組樣本容量。

3討論

3.1試驗條件的選取徐曉麗等[9]對注射、浸泡和喂食3種人工感染方式進行了比較，發(fā)現(xiàn)3種感染方式均有效，但注射感染容易造成死亡，喂食感染不便于控制感染濃度，因此建議選擇浸泡感染。據(jù)劉建男[的幼蟹期二尖梅奇酵母攻毒試驗結(jié)果可知，當浸泡濃度高達 2×10⁹CFU/mL 時，中華絨螯蟹的二尖梅奇酵母感染率為 67% ；當浸泡濃度為 2× 10⁵CFU/mL 時，感染率僅 27% ;考慮到實際生產(chǎn)環(huán)境中二尖梅奇酵母濃度較低，該試驗選取病原菌浸泡濃度為 5× 10⁵CFU/mL ，結(jié)果較為理想。

注：A為感染幼蟹；B為正常幼蟹。

Note：Aisaninfected juvenilecrab;Bisanormal juvenilecrab.

Fig.7Theanatomical results of infected juvenile crabs during the wintering period of juvenile crab

3.2二尖梅奇酵母對幼體期到豆蟹期中華絨螯蟹的影響從存活率來看，3個時期感染組與對照組平均死亡率均超過 50% 。楊志剛等[]研究發(fā)現(xiàn)仔蟹階段發(fā)育尚不完善、蛻皮頻繁且死亡率較高，與養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中仔蟹期死亡率高的現(xiàn)象相符。Ⅲ期感染組平均存活率顯著低于Ⅱ期;從感染率來看，各時期感染組與對照組差異顯著或極顯著，而Ⅲ期感染組平均感染率顯著低于Ⅱ期，說明二尖梅奇酵母對仔蟹的影響進一步降低，考慮到Ⅲ期平均存活率較Ⅱ期顯著降低，究其原因可能是這2個時期外界溫度高，蛻殼頻繁，蟹體變得脆弱，易受到攻擊。周楨等[12]研究發(fā)現(xiàn)河蟹蚤狀幼體期蛻殼后總能量會略低于蛻殼前，且此時期二尖梅奇酵母的影響變小，感染前期保持較強攻擊性，易發(fā)生同類相食，這與Liang等[13]認為幼蟹具有較高的攻擊性，蛻殼易被同類吞食導致死亡率升高的結(jié)果相似，同時也說明仔蟹階段短期同類相食造成的死亡危害大于“牛奶病”感染。幼體期到豆蟹期的3個時期都有檢出二尖梅奇酵母，可見幼體期到豆蟹期都可攜帶與感染二尖梅奇酵母。

根據(jù)試驗結(jié)果，結(jié)合發(fā)病特征分析，發(fā)現(xiàn)當環(huán)境中二尖梅奇酵母濃度達到一定水平后，會對幼體期到豆蟹期中華絨螯蟹的生長與蛻皮產(chǎn)生影響。這種影響并非僅以引發(fā)“牛奶病”的形式表現(xiàn)，而是以生長滯緩、食欲減退、蛻皮延遲以及活力下降等現(xiàn)象體現(xiàn)，這與申洪彬等[14]研究發(fā)現(xiàn)二尖梅奇酵母會使幼蟹與成蟹生長減慢、活力降低的結(jié)果相似，但仔蟹期蛻皮更頻繁，更易發(fā)生同類相食，也是該試驗出現(xiàn)大量死亡及組內(nèi)存活率差異不可忽視的因素。

3.3秋季暫養(yǎng)期二尖梅奇酵母對中華絨螯蟹的影響該階段試驗結(jié)果顯示，感染組和對照組平均死亡率都較低，但感染組平均感染率明顯提高。此階段中華絨螯蟹檢測出“牛奶病”呈陽性，當感染時間足夠時中華絨螯蟹會表現(xiàn)出明顯癥狀并發(fā)生死亡。這段時間對中華絨螯蟹養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)來說是極為危險的。受自然條件和溫度變化的影響，秋季水溫一般在12～20^°C ，此時二尖梅奇酵母變得活躍，且毒力較強，這與陳子玲等[15]通過溫度對污泥中厭氧氨氧化菌的影響試驗得出的高活化能反應溫度區(qū)間為 15～25‰ 的結(jié)論相符。有學者曾提出在 12^°C 低溫脅迫下中華絨螯蟹淋巴細胞部分指標會發(fā)生變化，其中LDH的異常波動說明低溫可能會對中華絨螯蟹的心肌細胞造成一定程度的損傷[16]，而水溫下降較緩慢不會導致心肌細胞損傷，但溫度變化會對代謝有影響，被感染的中華絨螯蟹體內(nèi)二尖梅奇酵母會迅速分裂增殖，只需15d就能從潛伏期進入前驅(qū)期。此時，中華絨螯蟹并未表現(xiàn)出明顯的病癥，大多數(shù)會與健康中華絨螯蟹一同進人越冬池，成為新的傳染源。這與生產(chǎn)實際情況相符，因而推測這可能是翌年春季越冬池中華絨螯蟹暴發(fā)“牛奶病”的導火索。

建議從該階段開始采取措施，比如在將中華絨螯蟹從田里撈出到投放越冬池前可以進行消毒浸泡，以減少病原菌的攜帶。同時，采取分池養(yǎng)殖，以減少水平傳播的規(guī)模，并增加暫養(yǎng)時間，進行嚴格篩選，從而降低越冬池中染病蟹所占的比例，減少越冬池中二尖梅奇酵母的濃度，削弱傳染源對幼蟹越冬期中華絨螯蟹的影響，有效降低來年“牛奶病”的發(fā)生率。

3.4幼蟹越冬期二尖梅奇酵母對中華絨螯蟹的影響 該試驗模擬了幼蟹越冬期的溫度條件即 。在此低溫下，二尖梅奇酵母的活力不佳，分裂速度也較慢[17]。同時，中華絨螯蟹因低溫常臥于池底，代謝也減緩，所以感染后并未觀察到明顯的行為學發(fā)病特征。該試驗結(jié)果顯示，感染組與對照組的平均存活率很高，幾乎無死亡。與秋季暫養(yǎng)期相比，該階段感染組平均感染率明顯下降。這表明秋季暫養(yǎng)期的中華絨螯蟹感染是越冬期乃至來年“牛奶病”暴發(fā)的主要原因，也是預防“牛奶病”的重點養(yǎng)殖階段。盡管存活率高，但解剖培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)仍有感染，且病蟹仍有一定活力，這與史文軍[18]研究的脊尾白蝦患“僵尸病”的情況相似。這與秋季暫養(yǎng)期的結(jié)果不符，考慮到唯一變量為溫度，推斷為低溫導致中華絨螯蟹代謝減慢，同時二尖梅奇酵母在低溫下活力減弱，毒力降低，因此延長了酵母侵占機體的時間，減緩了中華絨螯蟹的發(fā)病過程。

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