【中圖分類號】R285.6 【文獻標志碼】A 【文章編號】1007－8517（2025）09－0041-0

DOI： 10.3969/j . issn.1007-8517. 2025.09. zgmzmjyyzz202509010

Study onthe Mechanism of Dai Medicine“Yajie Shaba”in Treating Staphylococcus Aureus-induced Mastitis inRats

LIWenyan1 LIBenfa2 CHEN Wanyil YANG Canru1 HUANG Min *

1.Yunnan UniversityofTraditionalChineseMedicine，Kunming650ooo，China；2.Yunnan HospitalofTraditionalChinese Medicine The First Afiliated Hospital of Yunnan Universityof Traditional Chinese Medicine，Kunming 650oooo，China

Abstract：ObjectiveToexplore the efect and mechanismof dai medicine“Yajie Shaba”on Staphylococcus aureus mastitis in rats.Method SDratswererandomlydivided into5groups：blank control group，aureusrat mastitis modelgroup，and“Yajie Shaba”low，medium and high dose group （ 0.3g/kg ， 0.6g/kg ， 0.9g/kg ），and each group had 3mice.After the molding，theblank controlgroupndthemodelgroupwereinfusedwithnormalsaline，andtherestof thegroupwas giventhecorrespondingdoseof“Yajie Shaba”once a day，the changes of CRP， IL-Iβ ， 1L-6 and IL-8 in serum and the pathological changes of breast tissue in each group were observed.Results There wasnobreast massformation intheblank control group，but breastmass formationintheother groups；thehistopathologicalsectionobservedthatthebreastdamagedegreeinthemodelgroupwassignificantlyhigherthanthatofthe low，medium and high dose group；the content of CRP， 1L-1β ， 1L-6 and 1L-8 in the serum of each group was significantly higher than that of the blank control group.After treatment，the expression of CRP， 1L-1β ， 1L-6 and 1L-8 in serum decreased in the experimental group（The changes in the values in the high- dose group were all Plt;0.05 ，the expressions of 1L-1β and IL ^-6 in the middle- dose group were decreased， It was statistically significant， Plt;0.05 ， and the expression of 1L-6 in the low - dose group wasstatistically significant， Plt;0.05 ）.Conclusion“Yajie Shaba”can reduce the inflammation of acute mastitis inrats，and its mechanismofactionmayberelatedtotheibitionofproinflammatoryctokines-I-1β，I-6，I-expresionandtasi cal pathway of" N F "- B "signaling pathway.

KeyWords：Yajie Shaba；Staphylococcus Aureus Mastitis；Acute Mastitis；Dai Medicine；Cytokine

急性乳腺炎（acutemastitis，AM）是常見的一種發(fā)生于產(chǎn)后哺乳期的乳腺疾病，其臨床表現(xiàn)主要為患側(cè)乳腺的紅腫、疼痛、腫塊，部分患者可伴有發(fā)熱等全身癥狀。乳腺膿腫是乳腺炎最常見的并發(fā)癥[1]，乳腺膿腫、破潰可造成乳房外形的不良影響。金黃色葡萄球菌感染是急性乳腺炎的常見病原菌，在運用抗生素治療時有藥性強和多重耐藥等特點，部分抗生素可通過血乳屏障進入乳汁對嬰兒造成影響，使用時需中斷哺乳[]。長期使用抗生素還可造成乳房“僵塊”形成，造成急性乳腺炎遷延難愈，延長病程的同時增加患者焦慮、恐慌等不良情緒[3]。因此開發(fā)其他安全高效的AM治療方案對于希望繼續(xù)進行規(guī)律哺乳的患者來說意義重大。

傣藥“雅解沙把”是西雙版納傣族自治州傣醫(yī)醫(yī)院的院內(nèi)制劑，主要以多種“解藥”配伍而成，包括百樣解、葛根、傣百解、定心藤、大黃藤、奶子藤、白花臭牡丹根等[4]。組方以傣醫(yī)學基礎(chǔ)理論為指導，通過調(diào)平“四塔五蘊”功能，清除人體的各種毒素，使人正常的生理功能平衡、協(xié)調(diào)。研究[5-8]表明，“雅解沙把”具有抗炎、保護肝臟，增強肝臟的解毒能力、清除機體自由基、降血脂、抗過敏的作用。譚志剛等通過口服雅解沙把、外敷擺麻夯（酸角葉）鮮品加歪亮（紅糖）結(jié)合硫酸鎂、青霉素治療急性乳腺炎12例，取得了較好的療效。根據(jù)其明確的抗炎作用，本實驗在“雅解沙把”目前已有的研究基礎(chǔ)上，通過研究“雅解沙把”對大鼠金黃色葡萄球菌性乳腺炎的影響，為其治療急性乳腺炎提供實驗依據(jù)，也為進一步研究其抗炎的作用機制提供數(shù)據(jù)支持。

1實驗材料

1.1動物清潔級SD雌性大鼠，8周齡，分娩后5～7d ，體質(zhì)量 200～220g ，購自斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司［生產(chǎn)許可證號：SCXK（京）2019-0010；使用許可證號：SYXK（滇）K2020- 0006]。

1.2實驗菌株金黃色葡萄球菌，分離自云南省中醫(yī)醫(yī)院乳腺外科急性乳腺炎患者膿液

1.3實驗藥物 “雅解沙把”（百解膠囊），滇藥制字（Z）20082252K， 0.2g×60 粒/瓶，口服，5粒/次，每日3次，自西雙版納州傣醫(yī)院購入。參照人和動物的體表面積計算方法，根據(jù)人每天服用傣藥“雅解沙把”的劑量，計算出大鼠每天服用“雅解沙把”的劑量，計算如下：成人體重按照 70kg 計算，其平均體表面積為 1.73m² ；大鼠體重按照 200g 計算，其平均體表面積為 305cm² 0面積與體重比成人為 1.73m²/70kg≈0.02471 ，大鼠為 305cm²/200g=1.525 ，大鼠劑量/人的劑量 ≈ 6.2，成人每日服用“雅解沙把”劑量為 3g/70kg ≈0.043g/kg ，則大鼠每日服用“雅解沙把”劑量為 0.043g/kg×6.2≈0.3g/kg ，設(shè)置低劑量為0.3g/kg ，中劑量為 0.6g/kg ，高劑量為 0.9g/kg 。將“雅解沙把”按各組需求量與 1mL 無菌生理鹽水混勻，在 4^°C 的條件下保存以備使用。

1.4實驗試劑及器材大鼠Elisa試劑盒（欣博盛生物）， 4% 多聚甲醛（廣東光華科技股份有限公司），高速低溫離心機（安徽中科中佳科學儀器有限公司）， -80^°C 冰箱（海爾集團）， 4^° 冰箱（海爾集團），水浴鍋（上海一恒科學儀器有限公司），制冰機（常熟市學科電器有限公司），電子分析天平（天津精科天平廠），隔水式培養(yǎng)箱（美國Thermo公司），高速離心機（德國Eppendorf公司）， Elx800 酶標儀（自帶電腦）（EIx800），紫外分光光度計（JINGHCLA），電熱恒溫培養(yǎng)箱（紹興昇輝儀器有限公司），掌上離心機（SCILO-GEX），渦旋混勻儀（武漢賽維爾科技有限公司），20μL 、 200μL 、 1000μL 槍頭（Axygen公司），伊紅染色液（索萊寶），蘇木素（賽維爾）。

2實驗方法

2.1大鼠金黃色葡萄球菌性乳腺炎模型構(gòu)建和分組給藥大鼠飼養(yǎng)1周后隨機分為5組（3只/組），即空白對照組、金黃色葡萄球菌大鼠乳腺炎模型組、雅解沙把低劑量組、雅解沙把中劑量組和雅解沙把高劑量組。

模型構(gòu)建：除空白對照組，其余大鼠均在麻醉后仰臥并固定于體視顯微鏡下，備皮后用 75% 酒精消毒腹部乳腺及其周圍皮膚。使大鼠第4對乳腺雙側(cè)乳頭充分暴露，使用無菌眼科剪將乳頭尖端約 1mm 左右的組織剪除使乳導管露出。使用30G平端針頭 100μL 微量注射器向乳導管灌注金黃色葡萄球菌菌種懸液，每側(cè)注射 100μL ?？瞻捉M和模型組灌胃生理鹽水，其余組給予對應劑量雅解沙把灌胃，每天1次，持續(xù) 14d 。

2.2 相關(guān)指標觀察

2.2.1一般指標造模前后均對5組大鼠乳房進行觀察及測量，觀察大鼠癥狀、體征。

2.2.2ELISA分別在治療前造模 24h 后、治療14d后收集并檢測各組大鼠血液，血液經(jīng)離心后收集上層血清。按Elisa試劑盒說明書分別測定血清CRP、IL-1β、IL-6、IL-8。

2.2.3乳腺組織病理學檢測治療 14d 后頸椎脫白處死深麻醉狀態(tài)下的大鼠，消毒后剪開大鼠腹部皮膚暴露第4對乳腺組織，剝離完整的乳腺組織并用 4% 的多聚甲醛浸泡固定 24～48h ，各組標本進行脫水、透明、浸蠟、包埋、切片處理制作石蠟切片，經(jīng)蘇木素復染、伊紅染色等步驟完成HE染色后的切片放置在顯微鏡下，用100倍、400倍放大倍數(shù)觀察其病理變化。

2.3統(tǒng)計學分析使用prism軟件t檢驗單因素進行統(tǒng)計分析，以 Plt;0.05 為差異具有統(tǒng)計學差異，Plt;0.01 為差異具有顯著統(tǒng)計學差異。

3結(jié)果

3.1雅解沙把對大鼠乳腺腫塊的影響造模 24h 后除空白對照組，其余各組大鼠乳腺均有腫塊，提示造模成功。 14d 后高劑量組腫塊明顯消退，具體如圖1所示。取各組大鼠乳腺腫塊作比較，經(jīng)數(shù)據(jù)分析，模型組腫塊最大，與模型組相比，低、中、高劑量組較小，且具有統(tǒng)計學意義。具體如圖2所示。表明經(jīng)雅解沙把干預后，大鼠乳房外形呈現(xiàn)劑量依賴性恢復。

3.2雅解沙把對乳腺炎大鼠乳腺組織影響鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，空白對照組大鼠乳腺組織結(jié)構(gòu)正常，未見明顯炎細胞浸潤；金黃色葡萄球菌大鼠乳腺炎模型組腺泡結(jié)構(gòu)破壞嚴重，有大量炎細胞，漿細胞聚集，纖維化加重；與雅解沙把高劑量組相比，雅解沙把中劑量組腺泡減少并伴有大量炎癥細胞、漿細胞；與雅解沙把高劑量組相比，雅解沙把低劑量組腺泡結(jié)構(gòu)破壞嚴重，有炎癥細胞浸潤；與雅解沙把低劑量組相比，雅解沙把中劑量組腺泡結(jié)構(gòu)較完好，炎癥細胞、漿細胞減少，具體如圖3所示。

3.3雅解沙把對乳腺炎大鼠血清中CRP、 IL-1β 、IL-6、IL-8的影響結(jié)果顯示，金黃色葡萄球菌大鼠乳腺炎模型組與空白對照組相比表達升高（ Plt;0.05， ；治療14d后，雅解沙把高劑量組與模型組相比表達均降低，且具有統(tǒng)計學意義（ Plt; 0.05）；雅解沙把中劑量組與模型組相比表達均降低， L-1β 、IL-6差異具有統(tǒng)計學意義（ Plt; 0.05）；雅解沙把低劑量組與模型組相比表達均降低，IL-6差異具有統(tǒng)計學意義（ Plt;0.05） ；雅解沙把給藥劑量越高，炎性細胞因子水平下降越明顯。具體結(jié)果見表1。

4討論

AM是哺乳期婦女的常見疾病，乳汁淤積、病原菌入侵并擴散引發(fā)炎癥反應是發(fā)病的重要因素，抗生素治療易使局部結(jié)成僵塊，部分抗生素可通過乳汁對嬰兒造成潛在影響。處理不及時還會形成乳腺膿腫，需外科手術(shù)切開排膿，手術(shù)疼痛、術(shù)后護理及術(shù)后瘢痕均會給患者帶來身心壓力。

目前中醫(yī)綜合治療的有效性、安全性和不需中斷哺乳、無耐藥性的優(yōu)勢已使其成為治療AM的首選方案，清熱解毒藥是AM乳房紅腫熱痛，全身炎癥反應強烈時的常用藥[10]。民族醫(yī)藥作為中國傳統(tǒng)醫(yī)學的一部分，其有效性已在臨床實踐中得到了驗證，但作用機理的研究仍具有巨大的空間?！把沤馍嘲选弊鳛榇鲠t(yī)學中的重要解毒藥物，其解熱毒的作用與清熱解毒藥物相契合，并在西醫(yī)學研究中展示出對炎癥疾病的治療潛力。方中百樣解、傣百解、大黃藤、葛根、定心藤性寒涼，為主藥，入四塔，具有調(diào)四塔、解百毒、消療瘡之功。臨床中認為傣百解具有清熱解毒、消腫止痛的功效，提示其可能具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)生物活性，在傅錦鋒等\"的實驗中也證實了傣百解的抗炎作用。有研究[12表明，定心藤具有良好的抗炎作用，且無細胞毒性；大黃藤在民間常用于外傷感染，瘡毒引起的慢性潰瘍，其抗炎作用明確，大黃藤的各類制劑早已成熟，并已收錄在《中華人民共和國藥典》中；白花臭牡丹根、奶子藤、甘草性涼，入風、火、水、土塔，具有清火解毒的功效，可加強主藥的作用，全方合用，可調(diào)平四塔，清熱解毒[13]。雅解沙把在治療急性乳腺炎方面的有效性及其機理還有待進一步研究。

細胞因子由多種活化的免疫細胞產(chǎn)生，促炎性細胞因子的過度產(chǎn)生導致炎癥。本研究顯示，IL-1β 、IL-6、IL-8在金黃色葡萄球菌誘導的乳腺炎中顯著增加，雅解沙把治療AM的機制可能涉及降低促炎細胞因子（如 IL-1β 、IL-6和IL-8）的活性，且有效性呈劑量依賴性。

CRP是在臨床運用廣泛的一種炎癥標志物，其水平的升高與機體內(nèi)炎癥反應的激活密切相關(guān)。當機體被病原體入侵時，炎癥介質(zhì)釋放和白細胞活化增加，免疫系統(tǒng)被激活，CRP會迅速合成并釋放到血液中，激活補體系統(tǒng)并促進病原體的清除，當炎癥反應緩解后，其水平可快速降低。因此CRP對于感染性疾病診斷、預后評估具有一定價值[14-15] 。

促炎癥細胞因子 IL-1β 由多種細胞類型（包括巨噬細胞、樹突狀細胞、中性粒細胞和上皮細胞）產(chǎn)生，推動著炎癥反應、促進發(fā)熱、細胞增殖和分化、細胞黏附和遷移以及組織修復和重塑等多重作用[16]。 IL-1β 的產(chǎn)生不但介導了炎癥反應，而且可能會對乳腺的增殖和發(fā)育造成不利影響，故 IL-1β 的降低對于急性乳腺炎的治療有重大意義[17]

IL-6可參與全身的應激和免疫反應，促進了抗原呈遞、T細胞激活、急性相蛋白合成，并增加炎癥細胞遷移，是起到促炎作用、內(nèi)皮細胞及成纖維細胞等分泌的多功能炎性細胞因子，還能促進B細胞產(chǎn)生免疫球蛋白及T細胞的增殖與分化，與受體結(jié)合后通過糖蛋白激活酪氨酸蛋白激酶，從而活化絲氨酸/蘇氨酸激酶，促進相關(guān)基因活化而催化炎癥反應[18]，在IL-6的刺激下CRP合成分泌[19]，本研究中治療后CRP、IL-6均有下降，其中IL-6水平的降低最為敏感，低劑量時也可明顯降低I-6水平。因此雅解沙把降低大鼠血清CRP可能與降低大鼠血清IL-6水平密切相關(guān)。IL-6是參與在炎癥性疾病的發(fā)生、發(fā)展和預后全過程的重要促炎癥細胞因子，雅解沙把或可成為以IL-6為靶點治療炎性疾病的藥物。

乳腺上皮細胞可分泌大量的I-8，誘導嗜中性粒細胞（PMN）從血液遷徙到乳腺中，通過黏附分子CD11/CD18家族與內(nèi)皮細胞間黏附分子-1（ICAM-1）、內(nèi)皮細胞間黏附分子-2（ICAM-2）和內(nèi)皮細胞白細胞黏附分子-1（ELAM-1）相結(jié)合，在患側(cè)乳腺充當吞噬細胞，發(fā)揮更強的抑菌效果[20]。IL－8水平升高反映機體炎癥加重，促進病情發(fā)[21] 。

TNF- α 、I-1β、I-6的水平可反映機體炎癥反應程度。金黃色葡萄球菌入侵機體引起炎癥反應主要受 NF-κB 信號通路的調(diào)節(jié)。 NF-κB 是一種可以參與免疫和炎癥反應的轉(zhuǎn)錄因子。I-1β等促炎細胞因子信號出現(xiàn)后，會和相應的胞膜受體結(jié)合， NF-κB 激酶等會通過相應的膜受體激活[22]。雅解沙把或可通過抑制 NF-κB 信號通路的激活來降低促炎因子的產(chǎn)生，以此對金黃色葡萄球菌性乳腺炎起到治療作用。

本實驗通過乳腺腫塊體積、ELisa檢測血清、病理學觀察發(fā)現(xiàn)，使用不同劑量的雅解沙把后，大鼠觀察指標較模型組均有改善，且未發(fā)現(xiàn)明顯毒副作用，雅解沙把低、中、高劑量組均有治療效果，治療效果低劑量組 lt; 中劑量組 lt; 高劑量組，效果與給藥劑量呈正比，高劑量組給藥量或可作為雅解沙把治療大鼠金黃色葡萄球菌性乳腺炎的常用量。雅解沙把治療AM的作用機制可能通過抑制促炎細胞因子IL-1β、IL-6、IL-8表達及NF一 κB 信號通路經(jīng)典途徑相關(guān)，具體量-效關(guān)系和作用機制還有待進一步研究。

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