兜蘭屬植物是蘭科中最原始的洋蘭之一[，是極重要的種質(zhì)資源。由于被大量采挖瀕臨滅絕，兜蘭屬植物被列入2016版《瀕危野生動(dòng)植物種國(guó)際貿(mào)易公約》（CITES 附錄I）2。兜蘭屬植物分布于亞洲至太平洋島嶼的熱帶、亞熱帶地區(qū)，中國(guó)的云南、貴州和廣西是兜蘭屬植物的中心分布區(qū)之一[3。中國(guó)位于兜蘭屬物種分布的北緣，特殊的地理位置成就了我國(guó)極具特色的兜蘭種質(zhì)資源4]。

兜蘭屬植物傳統(tǒng)的繁殖方式有分株繁殖和種子繁殖。分株繁殖效率低，無法滿足市場(chǎng)需求和保護(hù)利用。在野外，兜蘭種子萌發(fā)依賴共生真菌的異養(yǎng)，萌發(fā)率極低。當(dāng)前，無菌播種和共生萌發(fā)是擴(kuò)大兜蘭屬植物繁殖規(guī)模的關(guān)鍵方法，有極少數(shù)種攻克外植體去污難、愈傷組織誘導(dǎo)率低的難題，在離體快繁方面取得突破性進(jìn)展5。兜蘭的生長(zhǎng)發(fā)育都依賴于菌根真菌的共生。近年來，兜蘭屬植物原生地遭到嚴(yán)重破壞，加大其保護(hù)力度及提高栽培繁殖技術(shù)極為重要。

目前，兜蘭屬植物的相關(guān)研究主要集中在遺傳資源和地理分布、分類學(xué)、菌根真菌、快繁技術(shù)及栽培管理等方面?；诖?，進(jìn)一步提出針對(duì)兜蘭屬植物研究的建議：進(jìn)行系統(tǒng)的兜蘭屬植物資源調(diào)查，以詳細(xì)了解兜蘭屬植物的分布特征、生態(tài)環(huán)境、形態(tài)學(xué)特點(diǎn)和生長(zhǎng)發(fā)育情況；強(qiáng)化自然保護(hù)區(qū)的建設(shè)和管理，提升公眾的保護(hù)意識(shí)；加強(qiáng)遺傳多樣性的研究與保護(hù)以及對(duì)繁育技術(shù)的開發(fā)，突破兜蘭屬植物栽培難、培育難的問題。

1種質(zhì)資源及分布

1.1資源概況兜蘭屬（PaphiopedilumPfitz）隸屬蘭科（Orchidaceae），其唇瓣呈兜狀或囊狀，花色艷麗，花期較長(zhǎng)，是蘭科植物中的\"旗艦\"物種6-7。兜蘭屬植物花色艷麗多樣，如硬葉兜蘭（Paphiopedilummicranthum）唇瓣白色至淡粉紅色，與同屬顏色鮮黃的杏黃兜蘭（P.armeniacum）被稱為“金童玉女”，麻栗坡兜蘭花朵呈現(xiàn)獨(dú)特的黃綠色，并伴有香氣。兜蘭屬植物花瓣花紋呈不規(guī)則斑點(diǎn)或條紋，例如巨瓣兜蘭（P.bellatulum）的萼片和花朵上有許多紫褐色大斑點(diǎn)，飄帶兜蘭具綠色條紋，斑葉類兜蘭的葉上表面具深或淺綠色相間的網(wǎng)格斑，而綠葉類的葉上表面綠色，不具網(wǎng)格斑[8]。

1.2地理分布及生境特征研究指出，大陸分裂和冰期氣候變冷造成了該亞科物種的不連續(xù)分布格局[。兜蘭屬植物在世界分布有130多種，東南亞分布116種，主要分布于中國(guó)西南部至越南中部、婆羅洲中部和菲律賓中部，中國(guó)是兜蘭屬植物的中心分布區(qū)之一[10]。中國(guó)現(xiàn)有兜蘭屬植物約41種，主要分布于中國(guó)西南部至南部，包括云南、廣西、貴州、廣東、海南、重慶、西藏等，其中云南是兜蘭屬植物的中心分布區(qū)，在我國(guó)分布的41個(gè)種中，36個(gè)種在云南有分布，例如卷萼兜蘭（P.appletonianum）、根莖兜蘭（P.areeanum）紅旗兜蘭（P.charlesworthii）、波瓣兜蘭（P.insigne）淺斑兜蘭（P.jackii）硬葉兜蘭（P.micran-thum）、白旗兜蘭（P.spicerianum）瑰麗兜蘭（P.villo-sum? 翡翠兜蘭（P.smaragdinum）等。

兜蘭屬植物主要分布于熱帶及亞熱帶，海拔1 000～1 700m 的山林中，對(duì)環(huán)境要求嚴(yán)格，其自然居群常分布于石灰?guī)r山地的山坡、山脊等透氣、排水良好、相對(duì)干凈的林下環(huán)境中[1。兜蘭屬植物斑葉種喜溫，綠葉種喜涼，大部分為地生蘭，少數(shù)為附生蘭或石生蘭[2]。

2研究概況

2.1分類學(xué)研究基于形態(tài)學(xué)特征，德國(guó)植物學(xué)家E.H.Pfitzer在1886年首次將兜蘭屬從杓蘭屬中獨(dú)立出來。此后，眾多植物學(xué)家針對(duì)兜蘭屬植物的分類提出了各自的分類體系[13-15]。我國(guó)蘭科植物專家陳心啟認(rèn)為兜蘭屬下設(shè)2個(gè)亞屬較為恰當(dāng)，將中國(guó)產(chǎn)兜蘭屬18個(gè)原生種劃分為寬瓣亞屬（SubgenParvisepa-lum）和兜蘭亞屬（Subgen Paphiopedilum）[]。而另一分類學(xué)家Cribb則將兜蘭屬分為3個(gè)亞屬，即Parvisepalum、PaphiopedilumBrachypetalum[4]。陳業(yè)采用ISSR對(duì)23種中國(guó)兜蘭屬植物親緣關(guān)系進(jìn)行分析，所有供試種被分為3個(gè)類群，第一個(gè)類群包括14個(gè)種，例如帶葉兜蘭、紫毛兜蘭、格利兜蘭、亨利兜蘭等;第二個(gè)類群包括3個(gè)種，文山兜蘭、巨瓣兜蘭、同色兜蘭；第三個(gè)類群包括6個(gè)種，杏黃兜蘭、硬葉兜蘭、德式兜蘭、麻栗坡兜蘭、白花兜蘭、韓式兜蘭。范繼征通過親緣關(guān)系分析，將29種兜蘭屬植物分為6個(gè)類群。目前國(guó)內(nèi)兜蘭屬的分類系統(tǒng)劃分：兜蘭屬分為2個(gè)亞屬和8個(gè)組：寬瓣亞屬和兜蘭亞屬，寬瓣亞屬再分為3個(gè)組：小萼組、綠葉組和同色組；兜蘭亞屬分5個(gè)組：兜蘭組、單花斑葉組、多花短瓣組、多花長(zhǎng)瓣組和多花無耳組[1，12]

2.2繁殖技術(shù)研究兜蘭屬植物的傳統(tǒng)繁殖方式為分株繁殖和種子繁殖。分株繁殖的周期長(zhǎng)，繁殖系數(shù)低，無法滿足物種保護(hù)和市場(chǎng)需求，而兜蘭種子需與真菌共生才能萌發(fā)，且萌發(fā)率極低。目前，兜蘭的組培快繁技術(shù)還未達(dá)到完善的階段，導(dǎo)致大多數(shù)兜蘭的種類和品種還無法大規(guī)模量產(chǎn)。無菌播種、共生萌發(fā)、組織培養(yǎng)、離體快繁等是提高兜蘭的繁殖效率、培育新品種的有效手段。研究表明，硬葉兜蘭、亨利兜蘭和巨瓣兜蘭種子的發(fā)育階段對(duì)無菌播種的萌發(fā)率有重要影響，綠莢種子在未成熟階段存在一個(gè)最佳采集時(shí)期，有利于種子萌發(fā)，而成熟種子會(huì)在發(fā)育后期產(chǎn)生次生抑制因子，其萌發(fā)率會(huì)降低[18-19]。接種共生真菌是提高兜蘭種子萌發(fā)率的有效方法之[20-22]

大多數(shù)兜蘭種子萌發(fā)需低鹽濃度的培養(yǎng)基，高鹽濃度的培養(yǎng)基會(huì)抑制種子萌發(fā)[23]，通常以1/2或1/4MS較為適宜，但培養(yǎng)基濃度過低不利于種子萌發(fā)后的生長(zhǎng)發(fā)育，可通過添加有機(jī)物來解決這一難題[24]。謝欣宇等人以綠摩帝兜蘭“云之君\"成年株的側(cè)芽作為外植體組培快繁，發(fā)現(xiàn)接種前噴施并澆灌殺菌劑處理，用 75% 酒精、 1% 有效氯的 NaClO 溶液、0.1%HgCl₂ 溶液依次消毒，消毒成功率 51.7% ，后將其置于醫(yī)用鏈霉素溶液中處理，消毒成功率提高至60%^[5]

2.3菌根真菌的研究在自然界中，兜蘭種子萌發(fā)、生長(zhǎng)和繁殖過程都依賴菌根真菌獲取有機(jī)養(yǎng)分25。兜蘭屬植物內(nèi)生真菌的研究主要集中在菌根真菌的分離、鑒定及其與共生真菌互作等方面。從兜蘭屬植物中分離的內(nèi)生真菌主要是擔(dān)子菌綱，包括從硬葉兜蘭中分離得到的優(yōu)勢(shì)菌群膠膜菌屬、瘤菌根菌屬、鐮刀菌屬和絲核菌屬[26-27]，從杏黃兜蘭中分離得到的優(yōu)勢(shì)菌群鐮刀菌屬和組絲核菌屬[28]，從帶葉兜蘭中分離得到的優(yōu)勢(shì)菌屬膠膜菌屬、鐮刀菌屬和輪層菌屬[29-30]。其中，膠膜菌屬是兜蘭屬中主要的共生真菌，并促進(jìn)其宿主植物的生長(zhǎng)發(fā)育[31-32]。

在野外，蘭科植物種子的萌發(fā)依賴于與1種或多種特定真菌建立穩(wěn)定的共生關(guān)系，并依靠真菌異養(yǎng)以獲取養(yǎng)分和水來促進(jìn)胚胎發(fā)育和植物形態(tài)建成[33。楊文科從遷地共生萌發(fā)的白旗兜蘭原球莖中分離純化得到2枚膠膜菌屬真菌，利用該菌與白旗兜蘭種子進(jìn)行真菌促進(jìn)種子萌發(fā)的實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其有效促進(jìn)了白旗兜蘭種子的萌發(fā)，幼苗形成率增加至 50.83%^[20] 。兜蘭屬植物與真菌共生可有效促進(jìn)植物生長(zhǎng)。朱鑫敏等采用菌株P(guān)M-1與兩種兜蘭屬植物進(jìn)行共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示接種了該菌株的兜蘭生物量較對(duì)照組有顯著提升。同時(shí)，菌株P(guān)A-1也被發(fā)現(xiàn)對(duì)杏黃兜蘭的干重增加具有積極影響[22]。

2.4栽培管理兜蘭常采用分株方式進(jìn)行栽培繁殖。兜蘭栽植時(shí)間長(zhǎng)達(dá)2＼～3年，新老植株的莖根滿盆、抑制植株正常生長(zhǎng)時(shí)便可進(jìn)行分株換盆。分株的最佳時(shí)間是春季，可選擇在新芽萌發(fā)前或開花后進(jìn)行，該時(shí)段兜蘭積累了較多養(yǎng)分，有利于分株后新植株的快速恢復(fù)。夏季高溫，分株會(huì)導(dǎo)致植株根部腐爛，而冬季溫度低，不利于植株恢復(fù)。兜蘭喜疏松、透氣性好且有機(jī)質(zhì)豐富的栽培基質(zhì)，可用腐殖土、樹皮、杉木屑、椰糠等材料按照適當(dāng)比例混合配制。兜蘭屬植物常見的病害為細(xì)菌軟腐病，應(yīng)以預(yù)防為主，栽培基質(zhì)要進(jìn)行消毒，棚內(nèi)每 15d 噴灑多菌靈或百菌清。

3結(jié)論與展望

3.1結(jié)論兜蘭是世界著名觀賞花卉，中國(guó)作為多種兜蘭屬植物種質(zhì)資源的分布中心，擁有多種顏色、花紋豐富和香花品種的兜蘭，而云南是中國(guó)兜蘭物種分布最多的省份，目前發(fā)現(xiàn)分布有36個(gè)種。目前，國(guó)內(nèi)將兜蘭屬系統(tǒng)劃分為寬瓣亞屬和兜蘭亞屬共8個(gè)組。其次，兜蘭屬植物的繁殖技術(shù)研究已取得初步成果，無菌播種、共生萌發(fā)等技術(shù)手段有效提高了兜蘭的萌發(fā)率，而通過改良培養(yǎng)基、接種菌根真菌等措施能有效加快兜蘭的生長(zhǎng)，但其繁殖技術(shù)、規(guī)模等相較于其他蘭花品種仍有較大差距。此外，在栽植兜蘭時(shí)應(yīng)注意選擇透氣性良好的栽培基質(zhì)。

3.2展望目前，對(duì)于兜蘭屬植物的分類學(xué)、繁殖技術(shù)、菌根真菌及栽培管理等方面已有突破性研究，但其深度和廣度仍需進(jìn)一步拓展，尤其在基礎(chǔ)研究方面，仍有諸多問題亟待深入探討，主要集中在以下兩個(gè)方面。

第一，需強(qiáng)化兜蘭屬植物的種質(zhì)資源的鑒定與評(píng)價(jià)工作。在此基礎(chǔ)上，應(yīng)優(yōu)先對(duì)現(xiàn)有的原生種野生生境加以保護(hù)，深人研究其在自然生境中的生長(zhǎng)表現(xiàn)與形態(tài)特征，考慮采用遷地保護(hù)等方法，以促進(jìn)兜蘭屬植物的可持續(xù)發(fā)展。通過分類形態(tài)學(xué)、分子數(shù)據(jù)等解決兜蘭屬植物的分類爭(zhēng)議。

第二，加速兜蘭的育種進(jìn)程?，F(xiàn)階段，國(guó)內(nèi)兜蘭品種選育工作主要依賴傳統(tǒng)的雜交育種，育種效率相對(duì)較低，且未形成特色，未來的育種方向?qū)⒔Y(jié)合傳統(tǒng)育種技術(shù)和現(xiàn)代生物技術(shù)，旨在培養(yǎng)出更具觀賞性、抗逆性和市場(chǎng)潛力的新品種。

參考文獻(xiàn)

[1]劉仲健，陳心啟.中國(guó)兜蘭屬植物[M].北京：科學(xué)出版社，2009.

[2] Zeng Songjun，HuangWeichang，Wu Kunlin.In vitro propagationofPaphiopedilum orchids[J].Critical Reviews in Biotechnology，2016，36（3）：521-534.

[3]王英強(qiáng).中國(guó)兜蘭屬植物生態(tài)地理分布[J].廣西植物，2000，20（4）：289-294.

[4]Cribb P.J.，Tang C.Z.Plantsman.The genus Paphiopedilum（Orchidaceae）in China[M].Borneo：Natural History Publications，1982.

[5]謝欣宇，楊維，劉心怡，等.綠摩帝兜蘭‘云之君'外植物體消毒和組培快繁研究[J/OL].分子植物育種，1-15[2022-06-06].

[6]賈建生，王春玲，羅毅波.中國(guó)蘭科植物保育的現(xiàn)狀和展望[J].生物多樣性，2003，11（1）：70-77.

[7]曾宋君，夏念和，陳之林，等.國(guó)產(chǎn)兜蘭屬植物觀賞價(jià)值評(píng)價(jià)及其在華南地區(qū)的應(yīng)用前景分析[J].中國(guó)野生植物資源，2011，30（2）：9-13+35

[8]王英強(qiáng).中國(guó)兜蘭屬野生花卉資源[J].仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院學(xué)報(bào)，2000，13（1）：45-49.

[9]張哲，任明迅，向文倩，等.東南亞蘭科植物的物種多樣性、生活習(xí)性及其傳粉系統(tǒng)[J.廣西植物，2021，41（10）：1683-1703.

[10]龍波，龍春林.兜蘭屬植物及其研究現(xiàn)狀[J].自然雜志，2006，28（6）：341-344.

[11]張央，武建勇，安明態(tài)，等.中國(guó)硬葉兜蘭地理分布格局及其潛在分布區(qū)預(yù)測(cè)[J.西北植物學(xué)報(bào).2021，41（11）：1932-1939.

[12]李宗艷，郭榮.滇東南地區(qū)硬葉兜蘭多樣性與保護(hù)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2017.

[13]AveryanovL.V.，CribbP.，LocPhanKe.SlipperOrchids of Vietnam.With an Introduction to the Flora of Vietnam[M]. Kew：KewPublishing，2003.

[14]劉仲健，陳心啟.中國(guó)蘭屬植物[M].北京：科學(xué)出版社，2006.

[15] Chochai Araya，Leitch Ilia J.Molecularphylogenetics of Paphiopedilum（Cypripedioideae;Orchidaceae） based on nuclear ribosomal ITS and plastid sequences[J].Botanical Journal of the Linnean Society，2012，170（2）：176-196.

[16]陳業(yè)，石建明，沈文華，等.23種中國(guó)兜蘭屬植物親緣關(guān)系的ISSR分析[JJ.西南大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2013，35（6）：15-21.

[17]范繼征，李秀玲，何荊洲，等.29個(gè)兜蘭屬物種的表型多樣性及親緣關(guān)系研究[J.植物遺傳資源學(xué)報(bào)，2023，24（3）：680-691.

[18]陳之林，葉秀磷，梁承鄴，等.杏黃兜蘭和硬葉兜蘭的種子試管培養(yǎng)[J].園藝學(xué)報(bào)，2004（4）：540-542.

[19]Lee Y.I.The asymbiotic seed germination of six Paphiopedilum species in relation to the time of seed collection andseed pretreatment[J].ActaHorticulturae，2007，755：381-386.

[20]楊文科.促進(jìn)白旗兜蘭種子共生萌發(fā)有效真菌的分離與應(yīng)用[D].昆明：云南大學(xué)，2020.

[21]田凡，朱國(guó)勝，桂陽，等.硬葉兜蘭菌根真菌的分離及培養(yǎng)特性研究[J].北方園藝，2012（7）：61-64.

[22]朱鑫敏，胡虹，李樹云，等.內(nèi)生真菌與兩種兜蘭共培養(yǎng)過程中的相互作用[J植物分類與資源學(xué)報(bào)，2012.34（2）：171-178.

[23]丁長(zhǎng)春，虞泓，劉方媛.影響杏黃兜蘭種子萌發(fā)的因素[J].植物分類與資源學(xué)報(bào)2004，26（6）：673-677.

[24]胡琦敏，李勇毅，黃云峰，等.海倫兜蘭的無菌播種與快 速繁殖[J].植物生理學(xué)報(bào)，2016，52（9）：1443-1448.

[25] Peterson R.L.Mycorrhizas：anatomy and cell biology [M].Wallingford，Oxon，UK：NRC Research Press，2004.

[26]田凡，廖小鋒，王蓮輝，等.硬葉兜蘭菌根真菌的分類鑒定[J].北方園藝，2017（24）：116-122.

[27]YuanLi，Yang ZhuL.，Li Shu-Yun.Mycorrhizal specificity，preference，and plasticity of six slipper orchids from South"Western China[J].Mycorrhiza，2010，20（8）：559-568.

[28]李明，張灼.杏黃兜蘭菌根研究與應(yīng)用[J].生物學(xué)雜志，2001，18（6）：17-18.

[29]王曉國(guó)，閆海霞，李秀玲，等.帶葉兜蘭菌根真菌的鑒定及其促生作用[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2021，34（1）：119-125.

[30]Cao Xiaolu，Wang Xiaojing，Wang Tao.Dynamic Shifts in the Root Microbiota of Cultivated Paphiopedilum armeniacum duringDifferent Stagesof Growth[J].Diversity，2022，14（5）：321.

[31] Sutthinon Pornsawan，RungwattanaKanin，Suwanphakdee Chalermpol.EndophyticFungi fromRootofThreeLady'sSlipper Orchids（Paphiopedilum spp.）in Southern Thailand[J].Chiang Mai Journal of Science，2021，48：853-866.

[32] YangWen-Ke，LiTai-Qiang，Wu Shi-Mao.Exsitu seed baiting to isolate germination-enhancing fungi for assisted colonization in Paphiopedilum spicerianum，a critically endangered orchid in China[J].Global Ecology and Conservation，2020，23： e01147.