摘要""為篩選出產(chǎn)孢量高、致病力強以及遺傳穩(wěn)定的球孢白僵菌突變菌株以及適宜的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)條件，本研究將球孢白僵菌孢子菌懸液置于紫外燈下進行誘變處理，篩選菌落直徑和面積大、單位面積產(chǎn)孢量高以及對小菜蛾毒力強的突變菌株；并采用單因素試驗和響應(yīng)面試驗對篩選出的突變菌株進行固態(tài)發(fā)酵工藝優(yōu)化。結(jié)果表明，S2突變菌株的產(chǎn)孢量是原始菌株的3.05倍，其校正死亡率和半致死時間比原始菌株分別提高了8.7%和縮短了17.2%；在連續(xù)傳代培養(yǎng)5代后，其平均產(chǎn)孢量穩(wěn)定在4.74×10⁹個/cm²左右，表現(xiàn)出良好的遺傳穩(wěn)定性。進一步優(yōu)化得到S2突變菌株的最佳固態(tài)發(fā)酵工藝條件：麥麩和米糠質(zhì)量比1.34∶1.00，無機鹽含量0.26%，接種量9.32%，含水量50%，發(fā)酵溫度26"℃；在此條件下突變菌株的實際產(chǎn)孢量達到11.762×10⁸個/g。本研究為球孢白僵菌殺蟲劑的研發(fā)提供了試驗基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞""球孢白僵菌；高毒力；紫外誘變；產(chǎn)孢量；固態(tài)發(fā)酵

中圖分類號""Q932 """"""文獻標識碼""A """"""文章編號""1007-7731（2025）07-0053-07

DOI號""10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2025.07.014

Mutation breeding and optimization of the solid-state fermentation process for high virulence strains of Beauveria bassiana

QIAN Senhe¹""""YANG Zicheng¹""""RUAN Yonghai¹""""HOU Shumin²

（¹College of Biological and Food Engineering， Anhui Polytechnic University， Wuhu 241000， China;

²Crop Research Institute of Anhui Academy of Agricultural Sciences， Hefei 230041， China）

Abstract "To screen mutant strains of Beauveria bassiana"with high sporulation yield， high virulence， genetic stability， and suitable solid-state fermentation conditions， this study treated the spore suspension of B. bassiana"with UV irradiation mutagenesis. Mutants exhibiting large colony diameter and area， high sporulation per unit area， and enhanced virulence against Plutella xylostella"were selected. Single-factor experiments and response surface methodology were employed to optimize the solid-state fermentation process for the selected mutant strains. The results showed that the sporulation yield of the S2 mutant strain was 3.05-fold higher than that of the original strain， with corrected mortality and median lethal time improved by 8.7% and shortened by 17.2%， respectively. After five successive subcultures， the average sporulation yield of S2 remained stable at approximately 4.74×10? spores/cm2， demonstrating robust genetic stability. Further optimization revealed the optimal solid-state fermentation conditions for S2： wheat bran to rice bran mass ratio of 1.34∶1.00， inorganic salt content of 0.26%， inoculum size of 9.32%， moisture content of 50%， and fermentation temperature of 26 °C. Under these conditions， the actual sporulation yield reached 11.762×10? spores/g. This study provides an experimental foundation for the development of B. bassiana-based insecticides.

Keywords "Beauveria bassiana; high virulence; UV irradiation mutagenesis; spore production; solid-state fermentation

在農(nóng)作物病蟲害的防治實踐中，長期大量施用化學(xué)農(nóng)藥不僅會導(dǎo)致病蟲耐藥性的形成，還會對土壤環(huán)境造成污染，破壞生態(tài)平衡，一定程度上影響農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展進程^[1]。生物防治是一種促進可持續(xù)農(nóng)業(yè)發(fā)展的重要策略，其中利用微生物進行害蟲防治是生物防治策略中重要的組成部分之一^[2]。

球孢白僵菌是子囊菌門的昆蟲病原真菌，具有廣泛的地理分布特征，其生態(tài)位覆蓋從低海拔地區(qū)至高山區(qū)域。該菌通過無性生殖產(chǎn)生分生孢子，其菌落形態(tài)呈絨狀^[3]。球孢白僵菌具有侵染昆蟲體表和體內(nèi)的能力，其分生孢子能在蟲體表皮萌發(fā)，并長出芽管^[4]；同時，分生孢子產(chǎn)生的脂肪酶、蛋白酶、幾丁質(zhì)酶等物質(zhì)能夠溶解昆蟲表皮，為芽管侵入蟲體創(chuàng)造條件；芽管穿透表皮侵入蟲體，在蟲體內(nèi)生長繁殖，消耗寄主的營養(yǎng)物質(zhì)，并產(chǎn)生白僵菌素和卵孢霉素等代謝產(chǎn)物，導(dǎo)致蟲體中毒死亡^[5]。生產(chǎn)上可通過工業(yè)化培養(yǎng)球孢白僵菌，其產(chǎn)生的分生孢子可進一步開發(fā)為微生物殺蟲劑。

球孢白僵菌不同菌株在營養(yǎng)生長、產(chǎn)孢量以及對昆蟲的毒力等方面表現(xiàn)出顯著差異。因此，選育產(chǎn)孢量高、致病力強且遺傳穩(wěn)定的菌株，是開發(fā)球孢白僵菌微生物殺蟲劑的關(guān)鍵。獲得優(yōu)良菌株的方法包括自然分離篩選、誘變選育、雜交選育以及基因工程技術(shù)構(gòu)建等^[6]。誘變選育作為一種經(jīng)典方法，能夠快速獲得優(yōu)良突變菌株。特別是紫外誘變，作為一種有效的手段，能夠干擾DNA的正常復(fù)制過程，引起基因突變，從而在短時間內(nèi)篩選出具有正向突變的菌株^[7]。蘇筱雨等^[8]通過紫外誘變篩選出了對美國白蛾具有高毒力的白僵菌菌株。球孢白僵菌殺蟲劑的生產(chǎn)依賴充足的分生孢子產(chǎn)量，而突變菌株的產(chǎn)孢性能在適宜的培養(yǎng)條件下可以得到充分發(fā)揮。目前，固態(tài)發(fā)酵是生產(chǎn)上獲取球孢白僵菌分生孢子的主要方法，其優(yōu)勢在于能夠利用廉價的農(nóng)副產(chǎn)品作為基質(zhì)，這不僅降低了生產(chǎn)成本，而且促進了農(nóng)業(yè)廢棄資源的循環(huán)利用^[9]。本研究選取球孢白僵菌作為原始菌株，采用紫外誘變技術(shù)，旨在選育出產(chǎn)孢量高、對昆蟲毒力強且遺傳穩(wěn)定的突變菌株。同時，對突變菌株的固態(tài)發(fā)酵條件進行了優(yōu)化，以進一步提高突變菌株的產(chǎn)孢量。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗菌種 球孢白僵菌（Beauveria bassiana"Q2505），實驗室保藏菌種。

1.1.2 培養(yǎng)基 PDA培養(yǎng)基，其組成為瓊脂20"g、土豆200"g、葡萄糖20"g和蒸餾水1 000"mL；固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基由麥麩、米糠、硝酸鉀和水構(gòu)成。

1.1.3 試驗儀器 HI-4A數(shù)顯恒溫多頭磁力攪拌器（金壇市杰瑞爾電器有限公司），組合式搖床（太倉市強樂試驗設(shè)備有限公司），立式壓力蒸汽滅菌器（上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠），光學(xué)顯微鏡（上海長方光學(xué)儀器有限公司）。

1.2 試驗方法

1.2.1 球孢白僵菌菌懸液制備 先將球孢白僵菌接種于PDA培養(yǎng)基平板上，于26"℃恒溫條件下培養(yǎng)，直至產(chǎn)生分生孢子。采用0.1%吐溫80溶液將平板上的孢子洗脫至無菌燒杯中，并在搖床中以180 r/min轉(zhuǎn)速振蕩2"h以促進孢子分散。孢子懸液用擦鏡紙過濾后，采用血球計數(shù)板調(diào)節(jié)孢子懸液濃度至1.0×10⁷個/mL^[10]。

1.2.2 球孢白僵菌的紫外誘變 取5"mL球孢白僵菌原始菌株孢子懸液，置于無菌平皿中，并在磁力攪拌器上使孢子懸液均勻分散；采用30 W紫外燈（紫外燈距離平皿30"cm），分別對孢子懸液進行0、2、4、6、8和10"min的照射處理。對于誘變處理0、2、4和6"min的孢子懸液，分別稀釋1 000倍和100倍；而誘變處理8和10"min的孢子懸液，分別稀釋100倍和10倍。稀釋后的孢子懸液混勻后，分別取100"μL均勻涂布于PDA固體培養(yǎng)基上。整個操作過程需在避光條件下進行，涂布后的培養(yǎng)基在26"℃避光培養(yǎng)3"d，隨后計算致死率，并繪制致死率曲線。

1.2.3 突變菌株的篩選 對經(jīng)誘變處理的球孢白僵菌孢子進行平板培養(yǎng)，待長出菌落后重新接種于PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，直至長出成熟孢子。隨后測量菌落直徑和面積，并測定單位面積的孢子產(chǎn)量。通過與原始菌株比較，篩選出菌落直徑和面積大且單位面積產(chǎn)孢量高的正向突變菌株。

1.2.4 突變菌株的毒力測定 取2"mL孢子濃度為1×10⁷個/mL的突變菌株與原始菌株，對2齡小菜蛾幼蟲進行噴霧處理，以0.1%吐溫80無菌水作為對照；每組試驗3次重復(fù)，每重復(fù)20頭幼蟲。處理后的小菜蛾幼蟲被置于光照培養(yǎng)箱內(nèi)（12L∶12D，25"℃），于透明塑料盒中飼養(yǎng)，每日記錄小菜蛾幼蟲的死亡情況。對死亡幼蟲保濕培養(yǎng)5"d，檢查蟲體是否出現(xiàn)白僵菌菌絲或孢子，從而確定幼蟲的死亡是否由白僵菌感染所致。根據(jù)幼蟲的每日死亡率，計算校正死亡率，并構(gòu)建死亡率與時間的回歸方程，計算出半致死時間^[11]。

1.2.5 突變菌株的遺傳穩(wěn)定性測定 將篩選得到的突變菌株接種于PDA培養(yǎng)基上，連續(xù)傳代培養(yǎng)5代，測定每代產(chǎn)孢量，分析突變菌株的遺傳穩(wěn)定性。

1.2.6 突變菌株的固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化 采用麥麩與米糠混合基質(zhì)固態(tài)發(fā)酵制備球孢白僵菌孢子。先將麥麩與米糠按一定比例混勻，并加入適量的水和硝酸鉀，混合物經(jīng)115"℃立式壓力蒸汽滅菌鍋滅菌30"min，冷卻至室溫，在超凈臺中接種球孢白僵菌菌懸液。接種后用接種鏟將其混勻，并用封口膜封口，然后置于搖床中，在26"℃條件下培養(yǎng)5"d。

（1）固態(tài)發(fā)酵基質(zhì)比例優(yōu)化。確定基礎(chǔ)培養(yǎng)基中硝酸鉀含量0.2%，含水量50%，接種量10%，培養(yǎng)溫度26"℃，變換培養(yǎng)基質(zhì)中麥麩與米糠的質(zhì)量比，使其分別為3∶1、2∶1、1∶1、1∶2和1∶3，經(jīng)培養(yǎng)后測定產(chǎn)孢量，以確定最佳基質(zhì)比例。

（2）硝酸鉀含量優(yōu)化。確定基礎(chǔ)培養(yǎng)基中基質(zhì)質(zhì)量比1∶1，接種量10%，含水量50%，培養(yǎng)溫度26"℃，改變硝酸鉀的含量，使其分別為0.2%、0.3%、0.4%、0.5和0.6%，經(jīng)培養(yǎng)后測定產(chǎn)孢量，以確定最佳硝酸鉀含量。

（3）接種量優(yōu)化。確定基礎(chǔ)培養(yǎng)基中基質(zhì)質(zhì)量比1∶1，硝酸鉀含量0.3%，含水量50%，培養(yǎng)溫度26"℃，改變接種量，使其分別為4%、6%、8%、10%和20%，經(jīng)培養(yǎng)后測定產(chǎn)孢量，以確定最佳接種量。

（4）含水量優(yōu)化。確定基礎(chǔ)培養(yǎng)基中基質(zhì)質(zhì)量比1∶1，硝酸鉀含量0.3%，接種量10%，改變含水量，使其分別為10%、20%、40%、50%和60%，經(jīng)培養(yǎng)后測定產(chǎn)孢量，以確定最佳含水量。

1.2.7 響應(yīng)面試驗優(yōu)化 基于單因素試驗中含水量影響不明顯，因此，采用基質(zhì)比、接種量和無機鹽含量三因素進行響應(yīng)面試驗，進一步優(yōu)化突變菌株的發(fā)酵條件，其具體因素水平設(shè)計如表1所示。

1.2.8 產(chǎn)孢量測定 取培育5"d的固態(tài)基質(zhì)1.0"g，置于裝有30"mL 0.1%吐溫80溶液的離心管中，置于180 r/min搖床中振蕩2"h，使孢子均勻分散；用4層無菌紗布過濾多余基質(zhì)和殘渣，得到孢子懸液，采用血球計數(shù)板在光學(xué)顯微鏡下計數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

采用Excel 2019軟件對試驗數(shù)據(jù)進行整理，Origin 8.0軟件進行作圖，利用Design Expert 8.0.6軟件進行響應(yīng)面試驗設(shè)計和回歸分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 球孢白僵菌的誘變選育

2.1.1 紫外誘變致死率 將初始濃度為1.0×10⁷個/mL的孢子菌懸液置于30 W紫外燈下分別照射處理0、2、4、6、8和10"min，其結(jié)果如圖1～2所示。隨著紫外照射時間的延長，致死率逐漸升高，當照射6"min時，致死率幾乎達到100%。因此，根據(jù)致死率在90%左右為最佳誘變時間，將球孢白僵菌的紫外誘變時間確定為4"min。

2.1.2 球孢白僵菌紫外誘變篩選 經(jīng)紫外誘變處理后，挑取誘變后長出的球孢白僵菌菌落，并將其接種至PDA平板上培養(yǎng)。經(jīng)統(tǒng)計，共有12株突變菌株的菌落直徑超過原始菌株，將其編號為S1～S12，原始菌株編號為S0。突變菌株的菌落直徑、面積及產(chǎn)孢量如表2所示。篩選的12株突變菌株中，S2、S4和S9的菌落直徑、面積和單位面積產(chǎn)孢量均較大（圖3），其中S2菌株的單位面積產(chǎn)孢量最高，是原始菌株的3.05倍。

2.1.3 突變菌株對小菜蛾的毒力作用 原始菌株S0及突變菌株S2、S4和S9處理的供試小菜蛾校正致死率分別為78.42%、85.25%、83.17%和82.67%；半致死時間分別為6.56、5.43、5.78和5.84"d（表3）；其中菌株S2處理的小菜蛾的校正致死率最高，且半致死時間最短，較原始菌株分別提高了8.7%和縮短了17.2%。表明突變菌株S2對小菜蛾的毒力效果最好。因此，選取S2突變菌株進行后續(xù)相關(guān)試驗。

2.1.4 S2突變菌株的遺傳穩(wěn)定性測定 突變菌株的遺傳穩(wěn)定性對其后續(xù)的生產(chǎn)利用具有重要的影響。通過對S2突變菌株進行連續(xù)5代的傳代試驗，其單位面積產(chǎn)孢量如表4所示。S2突變菌株的平均產(chǎn)孢量穩(wěn)定在4.74×10⁹個/cm²水平，表明其具有較好的遺傳穩(wěn)定性。

2.2 S2突變菌株的固態(tài)發(fā)酵單因素條件優(yōu)化

2.2.1 培養(yǎng)基質(zhì)比 麥麩和米糠作為固態(tài)發(fā)酵基質(zhì)，對微生物的生長起著重要作用，能夠為微生物的生長提供必要的碳源和氮源^[12]。不同麥麩與米糠質(zhì)量比對S2突變菌株產(chǎn)孢量的影響如圖4所示。隨著米糠質(zhì)量的增加，產(chǎn)孢量逐漸增加，當麥麩與米糠質(zhì)量比達到1∶1時，產(chǎn)孢量達到峰值，為9.91×10⁸個/g；然而，若繼續(xù)提高米糠的含量，其產(chǎn)孢量則呈下降趨勢。

2.2.2 硝酸鉀含量""""在固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中添加微量的硝酸鉀、碳酸鈣等無機鹽，有利于提高真菌發(fā)酵的菌絲活力和產(chǎn)孢量^[13]。由圖5可知，隨著硝酸鉀含量的增加，S2突變菌株的產(chǎn)孢量逐漸增加，當無機鹽含量達到0.3%時，S2突變菌株的產(chǎn)孢量達到峰值，為9.96×10⁸個/g。然而，隨著硝酸鉀含量的繼續(xù)增加，其產(chǎn)孢量則呈下降趨勢。

2.2.3 接種量 發(fā)酵培養(yǎng)基中接種量對微生物生長速度具有重要影響，適宜的接種量能夠促進微生物快速繁殖^[14]。由圖6可知，當接種量為4%、6%、8%和10%時，S2突變菌株的產(chǎn)孢量分別為2.05×10⁸、4.04×10⁸、7.93×10⁸和9.98×10⁸個/g。表明，隨著接種量的增加其產(chǎn)孢量逐漸增加，當接種量超過10%時，產(chǎn)孢量出現(xiàn)下降。

2.2.4 含水量 發(fā)酵基質(zhì)含水量影響微生物的生長和代謝。由圖7可知，當含水量低于20%時，發(fā)酵基質(zhì)中的水分不足以支持真菌生長，導(dǎo)致無法形成孢子。隨著含水量的提高，產(chǎn)孢量逐漸增加，當含水量達到50%時，產(chǎn)孢量達到峰值，為10.01×10⁸個/g。然而，當含水量進一步增加時，產(chǎn)孢量則呈下降趨勢，這一現(xiàn)象表明，含水量過高會導(dǎo)致基質(zhì)中麥麩和米糠結(jié)塊和黏性增大，從而影響通氣量，導(dǎo)致最終產(chǎn)孢量減少。

2.3 S2突變菌株發(fā)酵條件的響應(yīng)面優(yōu)化

2.3.1 響應(yīng)面試驗 S2突變菌株發(fā)酵條件的三因素三水平響應(yīng)面試驗結(jié)果如表5所示。采用Design Expert 8.0.6軟件對表5中的試驗結(jié)果進行回歸分析，其回歸模型分析結(jié)果見表6。結(jié)果表明，整體模型極顯著（P=0.000 4）；其中麥麩和米糠基質(zhì)比的一次項和二次項對產(chǎn)孢量的影響在0.01水平上均具有統(tǒng)計學(xué)意義；麥麩和米糠基質(zhì)比與無機鹽含量交互作用、無機鹽含量與接種量交互作用、無機鹽含量的二次方以及接種量的二次方對產(chǎn)孢量的影響在0.05水平上具有統(tǒng)計學(xué)意義。通過回歸分析，得到以產(chǎn)孢量為響應(yīng)值（Y）與麥麩和米糠質(zhì)量比（A）、無機鹽含量（B）、接種量（C）之間的回歸方程式，Y=3.42－0.31A+0.034B－0.04C+0.13AB+0.061AC+0.15BC－0.40A²－0.14B²－0.16C²。

由回歸方程得到的響應(yīng)面圖及等高線（圖8），可以直觀地反映麥麩和米糠質(zhì)量比、無機鹽含量和接種量3個因素交互作用對球孢白僵菌產(chǎn)孢量的影響。根據(jù)響應(yīng)面圖并結(jié)合表6可以看出，3個因素對產(chǎn)孢量的影響大小順序為麥麩米糠質(zhì)量比gt;接種量gt;無機鹽含量。

2.3.2 最佳培養(yǎng)條件的確定及驗證 由上述回歸模型可以得出，最優(yōu)培養(yǎng)基配方為麥麩和米糠質(zhì)量比為1.34∶1.00，無機鹽含量為0.26%，接種量為9.32%，預(yù)測在此培養(yǎng)條件下的S2突變菌株產(chǎn)孢量為12.196×10⁸個/g。在培養(yǎng)溫度26"℃，含水量50%的條件下，對上述優(yōu)化的培養(yǎng)條件進行驗證試驗，三組平行試驗得到S2突變菌株的產(chǎn)孢量平均值為11.762×10⁸個/g，其與預(yù)測值擬合度達到96.44%，表明優(yōu)化模型可靠。

3 結(jié)論與討論

紫外誘變技術(shù)的主要生物學(xué)效應(yīng)是引發(fā)DNA結(jié)構(gòu)的變化，特別是導(dǎo)致DNA鏈斷裂^[15]。然而，其主要作用是使同鏈DNA的相鄰嘧啶間形成胸腺嘧啶二聚體，阻礙堿基間的正常配對，從而誘發(fā)微生物基因的突變^[16]。靳磊等^[17]采用紫外誘變技術(shù)處理球孢白僵菌403001的孢子，獲得了毒力較高且性能穩(wěn)定的突變菌株403001-38。本研究通過紫外誘變獲得的球孢白僵菌突變菌株S2較原始菌株產(chǎn)孢量提高了3倍，此外，突變菌株對小菜蛾毒力較原始菌株強，半致死時間較短，且表現(xiàn)出較高的遺傳穩(wěn)定性。這表明采用紫外誘變技術(shù)選育高性能的球孢白僵菌具有實際可行性。

在工業(yè)生產(chǎn)上，生防制劑的生產(chǎn)需要考慮成本效益。本研究利用農(nóng)業(yè)廢棄物，如麥麩和米糠作為發(fā)酵培養(yǎng)基，不僅降低了生產(chǎn)成本，還促進了農(nóng)業(yè)廢棄物的資源化利用^[18]。麥麩和米糠作為球孢白僵菌固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基質(zhì)的優(yōu)勢在于其富含淀粉和蛋白質(zhì)，能夠為微生物生長提供必要的碳源和氮源；另外，米糠還能改善發(fā)酵基質(zhì)通氣量，避免因麥麩加水后黏性過大而導(dǎo)致的發(fā)酵基質(zhì)通氣量不足，從而影響產(chǎn)孢量^[19-20]。在固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中添加微量的硝酸鉀，不僅調(diào)節(jié)了基質(zhì)pH，還有效防止培養(yǎng)物基質(zhì)的黏連，增加菌絲的生長空間^[21]。然而，過高的硝酸鉀含量會影響細胞的有絲分裂，從而影響菌絲的生長和產(chǎn)孢量^[22]。接種量顯著影響微生物進入對數(shù)生長期的速度，接種量不足會導(dǎo)致發(fā)酵時間延長，生產(chǎn)成本增加^[11]；而接種量過大可能導(dǎo)致培養(yǎng)基質(zhì)無法提供足夠營養(yǎng)物質(zhì)，從而減少孢子產(chǎn)量^[23]。較低的基質(zhì)含水量會降低營養(yǎng)物質(zhì)傳輸，阻礙微生物生長，影響酶的穩(wěn)定性和基質(zhì)膨脹，進而影響真菌生長；而較高的含水量會導(dǎo)致發(fā)酵基質(zhì)顆粒結(jié)塊、通氣不暢以及基質(zhì)黏性增加，進而影響真菌的生長^[24]。

本研究通過紫外誘變技術(shù)篩選出產(chǎn)孢量高、致病力強且遺傳穩(wěn)定的球孢白僵菌突變菌株S2，并對其進行固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化。該突變菌株的最佳固態(tài)發(fā)酵工藝條件為麥麩和米糠基質(zhì)比1.34∶1.00，無機鹽含量0.26%，接種量9.32%，含水量50%，培養(yǎng)溫度26"℃；在此條件下實際產(chǎn)孢量為11.762×10⁸個/g。本研究結(jié)果為球孢白僵菌殺蟲劑的生產(chǎn)提供了試驗基礎(chǔ)。

參考文獻

[1] 蔣春先，田亞靜，李慶，等. 殺螨劑對朱砂葉螨的毒力測定和對加州新小綏螨的安全性評價[J]. 中國生物防治學(xué)報，2020，36（4）：551-557.

[2] 田晶，孟豪，楊忠欽，等. 玫煙色蟲草和球孢白僵菌對朱砂葉螨和二斑葉螨的致病力評價[J]. 植物保護學(xué)報，2023，50（4）：1072-1081.

[3] TOFFA J，LOKO Y L E，KPINDOU O K D，et al. Endophytic colonization of tomato plants by Beauveria bassiana"vuillemin （Ascomycota：Hypocreales）"and leaf damage in Helicoverpa Armigera"（Hübner）"（Lepidoptera：Noctuidae）"larvae[J]. Egyptian journal of biological pest control，2021，31（1）：82.

[4] WEI G，LAI Y L，WANG G D，et al. Insect pathogenic fungus interacts with the gut microbiota to accelerate mosquito mortality[J]. Proceedings of the national academy of sciences of the United States of America，2017，114（23）：5994-5999.

[5] 張嘯，劉佳，楊亦樺，等. 球孢白僵菌侵染中黑盲蝽致病過程的電鏡觀察[J]. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報，2021，58（5）：1190-1198.

[6] NI X P，LI H J，XIA Y D，et al. Breeding of highly virulent Beauveria bassiana"strains for biological control of the leaf-eating pests of Dalbergia odorifera[J]. Forests，2023，14（2）：316.

[7] MINORETTI P，EMANUELE E，GARCíA MARTíN á，et al. Exploring the protective efficacy of topical products for actinic keratosis against ultraviolet-induced DNA and protein damage：an experimental，double-blind irradiation study[J]. Cureus，2023，15（8）：e44065.

[8] 蘇筱雨，王婧，任曉婧，等. 美國白蛾高毒力白僵菌菌株的紫外線誘變選育[J]. 林業(yè)科學(xué)，2016，52（7）：165-169.

[9] 陳孟，李英，王雪菲，等. 大米固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)白僵菌孢子粉的條件優(yōu)化[J]. 林業(yè)與生態(tài)科學(xué)，2019，34（4）：414-418.

[10] 劉晨浩，李維宏，楊寧. 一株感染家蠶的高致病性白僵菌的篩選及復(fù)合誘變[J]. 微生物學(xué)通報，2023，50（8）：3495-3505.

[11] 黃玉，尼瑪扎西，薛正蓮，等. ARTP與紫外線復(fù)合誘變選育高性能綠僵菌菌株[J]. 食品工業(yè)科技，2021，42（4）：60-64，70.

[12] VAN BREUKELEN F R，HAEMERS S，WIJFFELS R H，et al. Bioreactor and substrate selection for solid-state cultivation of the malaria mosquito control agent Metarhizium anisopliae[J]. Process biochemistry，2011，46（3）：751-757.

[13] 李華靜，王曉東. 酵母菌0939-5產(chǎn)揮發(fā)性抑菌物質(zhì)固態(tài)發(fā)酵工藝優(yōu)化[J]. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，2023，60（7）：1773-1779.

[14] 黎光楊，王之盛，胡瑞，等. 解淀粉芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵對全棉籽營養(yǎng)價值和體外發(fā)酵特性的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報，2023，35（9）：6100-6110.

[15] RUSSO J A，XIANG T T，JINKERSON R E. Protocol for the generation of Symbiodiniaceae mutants using UV mutagenesis[J]. STAR protocols，2023，4（4）：102627.

[16] SUN Y X，ZHANG B X，ZHANG W T，et al. UV-induced mutagenesis of Beauveria bassiana"（Hypocreales：Clavicipitaceae）"yields two hypervirulent isolates with different transcriptomic profiles[J]. Pest management science，2023，79（8）：2762-2779.

[17] 靳磊，賀月林，劉紅，等. 紫外誘變選育球孢白僵菌高產(chǎn)菌株[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011（11）：30-31，35.

[18] WANG Y X，YE F Y，ZHOU B，et al. Comparative analysis of different rice substrates for solid-state fermentation by a citrinin-free Monascus purpureus"mutant strain with high pigment production[J]. Food bioscience，2023，56：103245.

[19] 李尊華，袁志輝，郭曉賢，等. 球孢白僵菌固態(tài)發(fā)酵及產(chǎn)孢條件的研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（12）：5302-5304，5308.

[20] 韋濤，周啟靜，陸兆新，等. 納豆芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵小米糠產(chǎn)抗氧化肽工藝優(yōu)化[J]. 食品科學(xué)，2017，38（10）：66-73.

[21] 王定鋒，李良德，李慧玲，等. 一株對茶麗紋象甲高毒力白僵菌菌株的篩選、鑒定與培養(yǎng)研究[J]. 茶葉科學(xué)，2021，41（1）：101-112.

[22] 高立紅，江志陽，尹微. 淡紫擬青霉固體發(fā)酵工藝研究[J]. 微生物學(xué)雜志，2020，40（6）：36-43.

[23] CHEN J M，CAI Y F，WANG Z，et al. Construction of a synthetic microbial community based on multiomics linkage technology and analysis of the mechanism of lignocellulose degradation[J]. Bioresource technology，2023，389：129799.

[24] YUAN X S，GAO S，TAN Y D，et al. Production of red yeast rice rich in monacolin K by variable temperature solid fermentation of Monascus purpureus[J]. RSC advances，2023，13（39）：27303-27308.

（責任編輯：何""艷）

基金項目"安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院委托項目“毒力綠（白）僵菌菌株的ARTP誘變選育及殺蟲懸浮劑研制”（KH10000633）。

作者簡介"錢森和（1978—），男，安徽懷寧人，博士，副教授，從事生物技術(shù)與工程研究。

通信作者"侯樹敏（1970—），男，安徽阜陽人，碩士，研究員，從事油菜蟲害防控及抗蟲育種研究。