摘要 ［目的］基于不同三葉青突變體的農(nóng)藝性狀、品質(zhì)和抗氧化活性，系統(tǒng)分析地下部分、地上部分表型和活性成分，以期通過表型和葉片數(shù)據(jù)快速篩選優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的三葉青品種（系）。［方法］以ZQ1、ZQ2、ZQ3、ZQ4、ZQ5、ZQ6、ZQ7、ZQ8為試驗材料，分別測量三葉青突變體葉片數(shù)、葉片鮮重、塊根產(chǎn)量、塊根數(shù)量、圓球形數(shù)量、塊根長gt;4 cm數(shù)量等農(nóng)藝性狀及三葉青突變體葉片和塊根中總黃酮、總酚和DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率，并分析地上部分與地下部分表型、化學成分和抗氧化活性的相關關系。［結(jié)果］ZQ2、ZQ7塊根產(chǎn)量、葉片數(shù)、葉片鮮重均高于ZQ1，塊根產(chǎn)量分別為108.7和137.2 g/盆；ZQ2塊根性狀長條形數(shù)量增多；ZQ3葉片顏色變淺，葉緣變銀白色；ZQ3塊根浸出物含量最高，為11.38%，ZQ6塊根總黃酮含量最高，達6.79 mg/g，ZQ5塊根總酚含量最高，達14.82 mg/g；ZQ6葉片總黃酮含量最高，為47.87 mg/g，ZQ6葉片總酚含量最高，為37.17 mg/g；ZQ5塊根的抗氧化能力最好，ZQ6葉片的抗氧化能力最好，單盆葉片的鮮重、數(shù)量與單盆塊根產(chǎn)量呈極顯著正相關，塊根總黃酮含量與抗氧化活性呈顯著正相關。［結(jié)論］不同三葉青突變體地上部分表型、化學成分、抗氧化活性與地下部分存在相關性，能通過地上部分表型和葉片數(shù)據(jù)快速篩選優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的三葉青品種（系）。

關鍵詞 三葉青；突變體；品質(zhì)；抗氧化活性；相關性

中圖分類號 R 284.1 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2025）05-0143-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2025.05.030

Analysis of Quality and Antioxidant Activity of Different Tetrastigma hemsleyanum Mutants

DING Lan1， SUN Jian2， WU Ji-lai1 et al

（1.Lin’an District Agricultural and Forestry Technology Promotion Center， Hangzhou，Zhejiang 311399; 2. Zhejiang Institute of Traditional Chinese Medicine Co.， Ltd.， Hangzhou， Zhejiang 310023）

Abstract ［Objective］ Based on the agronomic traits， quality and antioxidant activity of different Tetrastigma hemsleyanum mutants， the phenotypes and active components of the underground and aboveground parts were systematically analyzed in order to quickly screen high-quality and high-yield T. hemsleyanum varieties （lines） through phenotype and leaf data. ［Method］Using ZQ1， ZQ2， ZQ3， ZQ4， ZQ5， ZQ6， ZQ7 and ZQ8 as experimental materials， agronomic traits such as leaf number， leaf fresh weight， root yield， root number， spherical number and number of tubers with a length greater than 4 cm of T. hemsleyanum mutant were measured， as well as total flavonoids， total phenols， DPPH free radical scavenging rate， ABTS+ free radical scavenging rate in the leaves and roots of T. hemsleyanum mutant. The correlation between aboveground and underground phenotypes， chemical composition and antioxidant activity was analyzed.［Result］The root yield， leaf number and leaf fresh weight of ZQ2 and ZQ7 were higher than those of ZQ1， with root yields of 108.7 and 137.2 g/pot， respectively; the number of elongated tubers in ZQ2 had increased; the color of ZQ3 leaves became lighter， and the leaf edges turned silver white;among them， the extract content of ZQ3 root was the highest at 11.38%， the total flavonoid content of ZQ6 root was the highest at 6.79 mg/g， and the total phenolic content of ZQ5 root was the highest at 14.82 mg/g; the total flavonoid content in ZQ6 leaves was the highest at 47.87 mg/g， and the total phenolic content in ZQ6 leaves was the highest at 37.17 mg/g.Among them， ZQ5 had the best antioxidant capacity in its roots， while ZQ6 had the best antioxidant capacity in its leaves. The fresh weight and quantity of single pot leaves were significantly positively correlated with the yield of single pot roots， and the total flavonoid content of roots was significantly positively correlated with antioxidant activity.［Conclusion］There is a correlation between the aboveground phenotype， chemical component， antioxidant activity and underground part of different T. hemsleyanum mutants， which can quickly screen high-quality and high-yield three leaf green varieties （lines） through aboveground phenotype and leaf data.

Key words Tetrastigma hemsleyanum;Mutant;Quality;Antioxidant activity;Correlation

三葉青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）是葡萄科崖爬藤屬多年生常綠草質(zhì)蔓生藤本植物，為三出復葉，無毛，邊緣鋸齒較疏且淺，塊莖呈橢球形或不規(guī)則塊狀［1］。野生三葉青在馴化選育和種植過程中，各種源農(nóng)藝性狀存在一定的差異，浙江千島湖、富陽等地塊根表現(xiàn)為短橢圓形或顆粒狀、江西上饒塊根多為長橢圓形或長條形［2］。三葉青中最主要的有效成分總黃酮、總酚、多糖等對細胞、機體的作用機制已被逐步闡明［3-4］。熊艷［5］采用DPPH法、ABTS+法、FRAP法測定三葉青各萃取物的抗氧化活性，結(jié)果表明三葉青塊根萃取物具有較強的抗氧化活性。現(xiàn)代藥理研究表明，三葉青主要藥用部位為地下部塊根，具有抗炎、鎮(zhèn)痛的作用［6］，還具有抗腫瘤、抗病毒、保肝和提高免疫力等功能［7］，被稱為“植物抗生素”。近年來，三葉青因其藥用價值和經(jīng)濟價值已成為我國珍貴的藥材。隨著三葉青進入市場，野生三葉青被過度采挖，導致野生資源變得稀少。目前三葉青采用扦插、塊莖等無性繁殖［8］，長期無性繁殖使其品種性狀退化，嚴重影響三葉青品質(zhì)和藥效，因此三葉青資源保護開發(fā)、品種選育有重要意義。

三葉青富含黃酮和多酚類成分，具有較好的抗氧化活性。然而成分和抗氧化活性的相關關系研究較少。與此同時，三葉青以塊根入藥，塊根性狀只有生長3年以上采收時才可以統(tǒng)計，地上表型和地下表型的相關性也研究較少。筆者應用相同遺傳背景的三葉青突變株系，分別測量三葉青突變體農(nóng)藝性狀及抗氧化活性，并分析地上部分與地下部分表型、化學成分和抗氧化活性的相關關系，以期通過表型和葉片數(shù)據(jù)快速篩選優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的三葉青品種（系）。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試材。試驗材料為三葉青突變體澤青1號（ZQ1）、ZQ2、ZQ3、ZQ4、ZQ5、ZQ6、ZQ7、ZQ8，突變體采用60Co-γ射線輻照ZQ1扦插苗的單個腋芽培育成穩(wěn)定的無性繁殖株系，幼苗株系于2020年2月栽培在直徑30 cm、高40 cm的控根器內(nèi)，栽培后統(tǒng)一管理。幼苗規(guī)格為苗高10 cm左右，有葉片2張，長5 cm以上的須根3～5條。采集日期為2023年10月下旬，采集后拍照，清洗干凈塊根和地上部全部葉片，去掉污漬、泥沙，用吸水紙輕輕拭干表面水分稱重并觀察農(nóng)藝性狀。三葉青塊根和葉片在50 ℃下干燥后稱重、磨粉，-20 ℃冷凍貯藏備用。

1.1.2

試劑。無水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、蘆丁標準品、沒食子酸標準品購于國藥集團化學試劑有限公司；維生素E標準品購于美國Sigma-Aldrich公司；ABTS+、DPPH自由基清除能力測定試劑盒均購自蘇州格銳思生物科技有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1

浸出物含量測定。取三葉青塊根和葉片粉末各約4 g，放于250 mL圓底燒瓶中，加入100 mL蒸餾水，充分混勻，稱重，塞緊，放在室溫，靜置1 h后，連接到冷凝管，調(diào)節(jié)水浴鍋溫度，加熱至微沸，并保持1 h，放冷后，取下圓底燒瓶，再稱定重量，用蒸餾水補足失去的重量，充分搖勻，用干燥濾器過濾，取25 mL濾液置于恒重的蒸發(fā)皿中，放在烘箱于105 ℃干燥3 h，取出蒸發(fā)皿放在室溫冷卻30 min，迅速稱重，以干燥品計算供試品中浸出物含量（W/W，%），計算公式：浸出物含量=浸出物質(zhì)量（g）/25 mL×100 mL/取樣量（g）×100%。

1.2.2

總黃酮含量測定。

1.2.2.1

標準溶液的配制。用分析天平稱取蘆丁標準品約10 mg，放入避光燒杯中，加入甲醇溶解，在遮光環(huán)境下?lián)u勻定容至10 mL，得到濃度為1 mg/mL的蘆丁標準品溶液，避光保存。

1.2.2.2

標準曲線的繪制。吸取蘆丁標準品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL分別加入遮光試管中，后依次加入5%亞硝酸鈉0.5 mL，充分搖勻，靜置5 min，加入10%硝酸鋁溶液0.5 mL，充分搖勻，靜置5 min，再加入5 mL的4%氫氧化鈉溶液充分混合，搖勻，在室溫靜置15 min后，用蒸餾水定容至10 mL混合，搖勻靜置10 min后，在最大吸收波長510 nm處測得吸光度。以質(zhì)量濃度為橫坐標、吸光度為縱坐標繪制標準曲線。

1.2.2.3

總黃酮含量測定。參考鄭瑞昌等［9］的方法并稍微改進：準確稱取三葉青樣品約0.5 g，置于50 mL離心管中，加入一定體積的甲醇溶液，搖勻，放在250 W、40 kHz的超聲儀內(nèi)，提取30 min后，放入離心機內(nèi)，7 000 r/min、4 ℃離心20 min，取上清液，濾渣用以上步驟再提取一次，合并2次提取的上清液后，用甲醇溶液定容至10 mL。吸取0.5 mL提取液，依次加入5%亞硝酸鈉0.5 mL，充分搖勻，靜置5 min，加入10%硝酸鋁溶液0.5 mL，充分搖勻，靜置5 min，再加入5 mL的4%氫氧化鈉溶液混合，充分搖勻，在室溫靜置15 min后，用蒸餾水定容至10 mL混合，搖勻靜置10 min，在最大吸收波長510 nm處測得吸光度。通過以下公式計算出各樣品中總黃酮含量（mg/g）。

總黃酮含量=C×V1×V2/m/V3

式中：C為由標準曲線中得出的總黃酮濃度（mg/mL）；V1為稀釋體積（mL）；V2為樣品體積（mL）；V3為取樣體積（mL）；m為樣品質(zhì)量（g）。

1.2.3 總酚含量測定。

1.2.3.1

標準溶液的配制。稱取0.1 g沒食子酸，用蒸餾水溶解，定容至100 mL，得到濃度為1 mg/mL的沒食子酸標準品溶液。

1.2.3.2

標準曲線的繪制。吸取沒食子酸標準品溶液0、2.5、5.0、7.5、10.0、20.0 mL分別置于試管中，依次加入1 mL福林酚顯色劑、3 mL的20%碳酸鈉，混勻，于50 ℃水浴反應30 min，在最大吸收波長760 nm處測得吸光度。以質(zhì)量濃度為橫坐標、吸光度為縱坐標繪制標準曲線。

1.2.3.3

總酚含量測定。參考曹艷萍等［10］的方法并稍微改進：準確稱取三葉青樣品約0.5 g置于50 mL離心管中，加入一定體積的甲醇溶液，搖勻，放在250 W、40 kHz的超聲儀內(nèi)，提取30 min后，放入離心機內(nèi)，7 000 r/min、4 ℃離心20 min，取上清液，濾渣用以上步驟再提取一次，合并2次提取的上清液后，用甲醇溶液定容至10 mL。吸取1 mL提取液，加入1 mL福林酚顯色劑、3 mL的20%碳酸鈉，用蒸餾水定容至10 mL，充分混勻，于50 ℃水浴反應30 min，在最大吸收波長760 nm處測得吸光度。通過以下公式計算出各樣品中總酚含量（mg/g）。

總酚含量=C×V1×V2/m/V3

式中：C為由標準曲線中得出的總酚濃度（mg/mL）；V1為稀釋體積（mL）；V2為樣品體積（mL）；V3為取樣體積（mL）；m為樣品質(zhì)量（g）。

1.2.4 抗氧化能力的測定。

1.2.4.1

樣品處理。準確稱取三葉青樣品約0.5 g置于50 mL離心管中，加入一定體積的80%乙醇溶液，搖勻，放在250 W、40 kHz的超聲儀內(nèi)，提取30 min后，放入離心機內(nèi)，7 000 r/min、4 ℃離心20 min，取上清液，濾渣用以上步驟再提取一次，合并2次提取的上清液后，用80%乙醇溶液定容至10 mL。

1.2.4.2

ABTS+自由基清除率。于96孔板的測定孔中依次加入10 μL三葉青提取液溶液、190 μL的ABTS溶液，在相應的對照孔中依次加入10 μL三葉青提取液溶液、190 μL的80%乙醇溶液，在空白孔中依次加入10 μL的80%乙醇溶液、190 μL的ABTS溶液，全部混勻后，在室溫25 ℃下，避光靜置6 min，然后在765 nm處測定吸光度。通過以下公式計算出各樣品中ABTS+自由基清除率：

清除率＝［1-（A1-A2）/A3］×100%

式中：A1為測定孔吸光度；A2為對照孔吸光度；A3為空白孔吸光度。

1.2.4.3

DPPH自由基清除率。在離心管中依次加入200 μL三葉青提取液溶液、200 μL的DPPH溶液，即為測定管；在離心管中依次加入200 μL三葉青提取液溶液、200 μL的80%乙醇溶液，即為相應的對照管；在離心管中依次加入200 μL的80%乙醇溶液、200 μL的DPPH溶液，即為空白管；全部混勻后，在室溫下避光靜置30 min，然后在517 nm處測定吸光度。同時以維生素E作為陽性對照，通過以下公式計算出各樣品中DPPH自由基清除率。

清除率＝［1-（A1-A2）/A3］×100%

式中：A1為測定管吸光度；A2為對照管吸光度；A3為空白管吸光度。

1.3 數(shù)據(jù)分析

使用Excel 2010軟件對試驗數(shù)據(jù)進行整合處理，并利用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析。運用單因素方差分析法（one-way ANOVA）和最小顯著差數(shù)法（LSD）進行方差分析和多重比較（α=0.05）。運用chiplot.online進行相關性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同三葉青突變體塊根產(chǎn)量和農(nóng)藝性狀分析

從表1和圖1可以看出，8個不同三葉青突變體的塊根產(chǎn)量為41.3～137.2 g/盆，不同三葉青突變體塊根產(chǎn)量差異大，其中，ZQ3產(chǎn)量最低，但其塊根數(shù)量最多，而且短橢圓形數(shù)量居多，葉片數(shù)和葉片鮮重均最低；ZQ4、ZQ5、ZQ8塊根產(chǎn)量較低，均低于ZQ1的塊根產(chǎn)量。ZQ2、ZQ7塊根產(chǎn)量較高，均高于ZQ1的塊根產(chǎn)量，ZQ7塊根產(chǎn)量最高。從不同三葉青突變體塊根數(shù)量和外形來看，ZQ7塊根數(shù)量與ZQ3相近，而且葉片數(shù)和葉片鮮重均最高，ZQ5、ZQ8塊根數(shù)量最少，ZQ4、ZQ5、ZQ6、ZQ7的塊根形狀均為短橢圓形，ZQ8塊根短橢圓形數(shù)量最少。從圖2可以看出，ZQ3葉片顏色變淺綠，葉緣突變成銀色，葉片較?。籞Q6、ZQ8葉片顏色偏黃，ZQ7葉片為深綠色，ZQ1有5片葉子。

2.2 不同三葉青突變體浸出物、總黃酮、總酚含量分析

從圖3可以看出，相對于塊根而言，ZQ3塊根浸出物含量最高，為11.38%，總黃酮和總酚含量處于中等水平；ZQ2、ZQ4、ZQ5、ZQ6、ZQ7、ZQ8塊根浸出物含量均低于ZQ1。8個三葉青突變體塊根總黃酮含量為3.26～6.79 mg/g，其中ZQ6塊根總黃酮含量最高，ZQ8最低；8個三葉青突變體塊根總酚含量為5.28～14.82 mg/g，其中ZQ5塊根總酚含量最高，ZQ4最低。

相對于葉片而言，ZQ2、ZQ3、ZQ4、ZQ5、ZQ6、ZQ7、ZQ8葉片浸出物含量相近，均比ZQ1含量高，三葉青突變體葉片浸出物含量均高于塊根；8個三葉青突變體葉片總黃酮含量為18.28～47.87 mg/g，其中ZQ6葉片總黃酮含量最高，ZQ2最低，三葉青突變體葉片總黃酮含量均高于塊根；8個三葉青突變體葉片總酚含量為9.05～37.17 mg/g，其中ZQ6葉片總酚含量最高，ZQ1最低。

2.3 不同三葉青突變體抗氧化活性分析

從表2可以看出，相對于塊根而言，不同三葉青突變體塊根DPPH自由基清除能力表現(xiàn)不同，其中ZQ5的DPPH自由基清除率最高，ZQ4的DPPH自由基清除率與ZQ1相近，自由基清除率均比其他三葉青突變體塊根清除率低；不同三葉青突變體塊根ABTS+自由基清除能力表現(xiàn)不同，ZQ5的ABTS+自由基清除率最高，ZQ1的ABTS+自由基清除率最低。相對于葉片而言，不同三葉青突變體葉片DPPH自由基清除能力表現(xiàn)不同，其中ZQ6的DPPH自由基清除率最高，ZQ8的DPPH自由基清除率最低；不同三葉青突變體葉片ABTS+自由基清除能力表現(xiàn)不同，ZQ6的ABTS+自由基清除率最高，ZQ8的ABTS+自由基清除率最低。三葉青突變體葉片中的DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除能力均比塊根的清除率高。

2.4 不同三葉青突變體地上部分與地下部分表型、化學成分、抗氧化活性相關性分析

通過Pearson相關性分析，結(jié)果如表3所示，不同三葉青突變體中單盆葉片的鮮重、數(shù)量與單盆塊根產(chǎn)量呈極顯著正相關；不同三葉青突變體中葉片浸

出物與塊根浸出物含量、塊根總黃酮含量呈顯著負相關；不同三葉青突變體中葉片總黃酮含量、葉片總酚含量與塊根總黃酮含量呈極顯著正相關；不同三葉青突變體中葉片DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率與塊根總黃酮含量、塊根ABTS+自由基清除率呈極顯著正相關，與塊根總酚含量呈顯著正相關。

2.5 不同三葉青突變體塊根中浸出物、總黃酮、總酚以及抗氧化活性相關性分析

通過Pearson相關性分析，結(jié)果如圖4所示，不同三葉青突變體塊根中浸出物含量與總黃酮含量呈極顯著正相關（r=0.840，Plt;0.01），與DPPH自由基清除率呈顯著正相關（r=0.809，Plt;0.05），與ABTS+自由基清除率呈顯著正相關（r=0.807，Plt;0.05）。不同三葉青突變體塊根中總黃酮含量與總酚含量呈顯著正相關（r=0.785，Plt;0.05），與DPPH自由基清除率呈極顯著正相關（r=0.937，Plt;0.01），與ABTS+自由基清除率呈極顯著正相關（r=0.946，Plt;0.01）。不同三葉青突變體塊根中總酚含量與DPPH自由基清除率呈顯著正相關（r=0.807，Plt;0.05），與ABTS+自由基清除率呈顯著正相關（r=0.819，Plt;0.05）。不同三葉青突變體中DPPH自由基清除率與ABTS+自由基清除率呈極顯著正相關（r=0.998，Plt;0.01）。

3 討論

輻射誘變技術作為種質(zhì)開發(fā)的重要手段之一，目前在重要植物的產(chǎn)量、農(nóng)藝性狀方面的改變得到廣泛應用［11-13］。該試驗采用150 Gy 60Co-γ射線輻照處理三葉青扦插苗的單個腋芽培育成穩(wěn)定的無性繁殖株系，三葉青突變體農(nóng)藝性狀變異明顯，如在塊根產(chǎn)量、葉片顏色方面均發(fā)生改變，主要農(nóng)藝性狀表現(xiàn)出較豐富的多樣性，為產(chǎn)量提高和觀賞方面的定向育種提供基礎。該研究按照《浙江省中藥飲片炮制規(guī)范》［14］的要求，測定不同三葉青突變體的浸出物含量，發(fā)現(xiàn)葉片中浸出物含量明顯高于塊根。根據(jù)《臺灣藥用植物圖鑒》中記載三葉青鮮葉搗碎可以治皮膚病，且三葉青葉采收加工方便、價格優(yōu)惠，因此可以采用三葉青葉片開展一些新的產(chǎn)品。前人關于不同品種三葉青化學成分的研究多以總黃酮含量、總酚含量、抗氧化活性為差異指標［15-18］，該研究通過檢測不同三葉青突變體的總黃酮含量、總酚含量、抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)不同突變體間差異明顯，其中ZQ6的塊根總黃酮含量最高，達6.79 mg/g，ZQ5的塊根總酚含量最高，達14.82 mg/g。有研究表明各品種中多項指標間存在潛在的相互制約關系［19-20］。該研究相關性分析結(jié)果顯示，地上部分表型、化學成分、抗氧化活性在一定程度上與地下部分存在相關性，運用地上部分數(shù)據(jù)可以快速篩選優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的三葉青品種，不同三葉青突變體三葉青塊根的浸出物含量、總黃酮含量、抗氧化活性之間存在顯著正相關，為三葉青的品種選育提供參考依據(jù)。

4 結(jié)論

選取三葉青突變體ZQ1、ZQ2、ZQ3、ZQ4、ZQ5、ZQ6、ZQ7、ZQ8為試驗材料，分別測量三葉青突變體葉片數(shù)、葉片鮮重、塊根產(chǎn)量、塊根數(shù)量、短橢圓形數(shù)量、塊根長gt;4 cm數(shù)量等農(nóng)藝性狀及三葉青突變體葉片和塊根中總黃酮、總酚、DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率，并分析地上部分與地下部分表型、化學成分和抗氧化活性的相關關系。結(jié)果表明：ZQ7塊根產(chǎn)量、葉片數(shù)、葉片鮮重最高，分別為137.2 g/盆、411片/盆、85.7 g/盆；ZQ3葉片顏色變淺，葉緣變銀色；ZQ3塊根浸出物含量最高，為11.38%，ZQ6塊根總黃酮含量最高，達6.79 mg/g，ZQ5塊根總酚含量最高，達14.82 mg/g；ZQ6葉片總黃酮含量最高，為47.87 mg/g，ZQ6葉片總酚含量最高，為37.17 mg/g；ZQ5塊根的抗氧化能力最好，ZQ6葉片的抗氧化能力最好，為三葉青的進一步開發(fā)利用提供優(yōu)質(zhì)材料。不同三葉青突變體中地上部分表型、化學成分、抗氧化活性與地下部分存在相關性，塊根總黃酮含量與抗氧化活性呈顯著正相關，可以通過表型和葉片數(shù)據(jù)快速篩選優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的三葉青品種（系）。

參考文獻

［1］ 徐旻，尹海日，張寧，等.三葉青種質(zhì)資源評價與創(chuàng)制研究進展［J］.藥物生物技術，2016，23（5）：457-461.

［2］ 蔡曉郡，孫晗靖，陳雨姍，等.三葉青種質(zhì)資源農(nóng)藝性狀比較及聚類分析［J］.分子植物育種，2022，20（16）：5444-5453.

［3］ 林婧，黃澤豪，許文，等.不同產(chǎn)地三葉青總黃酮含量及對肝癌細胞增殖的抑制率比較［J］.福建中醫(yī)藥大學學報，2014，24（5）：40-41.

［4］ 王斌，成亞飛，武杰，等.三葉青根多糖對HepG2細胞增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響［J］.暨南大學學報（自然科學與醫(yī)學版），2020，41（5）：444-454.

［5］ 熊艷．三葉青萃取物的生物活性及其誘導HeLa細胞凋亡機理研究［D］.長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學，2015.

［6］ 廖淑彬，蔡韋煒，陳丹，等.閩產(chǎn)三葉青地上部分提取物體內(nèi)抗炎鎮(zhèn)痛作用研究［J］.中國現(xiàn)代應用藥學，2017，34（3）：319-324.

［7］ 陳洪濤.三葉青藥物有效成分抗腫瘤實驗研究進展［J］.廣東化工，2022，49（16）：82-85.

［8］ 闕建勇，葉邦宣，江麗娟，等.浙西南地區(qū)三葉青扦插育苗技術研究［J］.廣西林業(yè)科學，2020，49（4）：560-564.

［9］ 鄭瑞昌，黃阿根，錢建亞.水芹黃酮提取工藝的研究［J］.揚州大學學報（自然科學版），2001，4（4）：50-51.

［10］ 曹艷萍，代宏哲，曹煒，等.Folin-Ciocaileu比色法測定紅棗總酚［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學，2008，36（4）：1299，1302.

［11］ 陳光堯，王國槐，羅峰，等.60Co-γ輻照對甘藍型油菜農(nóng)藝性狀和品質(zhì)的影響［J］.華北農(nóng)學報，2007，22（5）：56-59.

［12］ 董云哲，金澤蘭，林宏峻，等.三葉青突變體的理化成分評價與分子鑒定［J］.核農(nóng)學報，2022，36（10）：1907-1919.

［13］ 李瑜，王萍，耿興敏，等.60Co-γ輻射對桂花幼苗生長及生理指標的影響［J］.西北農(nóng)業(yè)學報，2017，26（1）：61-69.

［14］ 浙江省食品藥品監(jiān)督管理局.浙江省中藥飲片炮制規(guī)范［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2016：32-33.

［15］ 李春華，袁桂平，王誠遠，等.UPLC-MS/MS法同時測定三葉青中13種黃酮類成分的含量［J］.江西中醫(yī)藥大學學報，2021，33（6）：73-77.

［16］ 李春華，王誠遠，何倌發(fā)，等.不同生長環(huán)境三葉青中總黃酮提取工藝及含量比較［J］.江西中醫(yī)藥大學學報，2021，33（5）：78-83.

［17］ 陳喜根，孫晗靖，楊麗君，等.基于不同種源的三葉青化學成分及抗氧化能力對比分析：以浙江省杭州市富陽區(qū)為例［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學，2024，65（2）：320-324.

［18］ 王向東，王永存，馬艷芝，等.不同生姜品種抗氧化活性的比較［J］.中國果菜，2018，38（5）：14-18.

［19］ 徐世浩，孟凡旭，趙宏光，等.決明農(nóng)藝性狀與其種子中蒽醌類物質(zhì)含量之間的相關性分析［J］.山西農(nóng)業(yè)大學學報（自然科學版），2021，41（1）：40-47.

［20］ 曾吳靜，許玲，何秋伶，等.穿心蓮農(nóng)藝性狀及其與二萜內(nèi)酯成分相關性研究［J］.中國中藥雜志，2019，44（15）：3233-3238.

基金項目 杭州市農(nóng)業(yè)科技協(xié)作與創(chuàng)新攻關項目（202209TD20）；寧波市科技計劃項目（2019B10008）；杭州市農(nóng)業(yè)和社會發(fā)展項目（202203A05）。

作者簡介 丁蘭（1981—），女，浙江臨安人，高級農(nóng)藝師，從事中藥材生產(chǎn)技術推廣研究。*通信作者，初級農(nóng)藝師，碩士，從事中藥材植物遺傳育種研究。

收稿日期 2024-05-23