摘 要：色譜分析技術(shù)是食品分析中的重要方法之一，在食品檢測(cè)中占有重要地位。本文概述色譜分析技術(shù)及其優(yōu)勢(shì)，闡述常見的色譜分析技術(shù)，綜述色譜分析技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用，旨在為保證食品的安全與質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：色譜分析技術(shù)；食品檢測(cè)；離子色譜；薄層色譜

Application of Chromatographic Analysis Technology in Food Testing

LIN Yuhao

（Shenzhen Institute of Metrology and Quality Inspection， Shenzhen 518131， China）

Abstract： Chromatographic analysis technology is one of the important methods in food analysis and plays an important role in food detection. This paper summarizes the chromatographic analysis technology and its advantages， expounds the common chromatographic analysis technology， and summarizes the application of chromatographic analysis technology in food detection， aiming at providing scientific basis for ensuring the safety and quality of food.

Keywords： chromatographic analysis technology; food testing; ion chromatography; thin layer chromatography

色譜分析技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于化學(xué)、環(huán)境、制藥和食品等領(lǐng)域。色譜分析技術(shù)在食品檢測(cè)中的重要性隨著人們對(duì)食品安全和質(zhì)量要求的提高而日益凸顯。常見的色譜分析技術(shù)有氣相色譜、液相色譜、離子色譜和薄層色譜等。色譜分析技術(shù)既可以進(jìn)行定性、定量分析，又可以對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行分離、提純，在各種實(shí)驗(yàn)室中已成為必不可少的工具?；诖?，本文綜述色譜分析技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用。

1 色譜分析技術(shù)概述

1.1 色譜分析技術(shù)

色譜分析技術(shù)作為一種重要的分離與分析方法，在化學(xué)、環(huán)境、醫(yī)藥和食品等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。其基本原理是利用固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)差異，實(shí)現(xiàn)樣品中各組分的分離。色譜分析技術(shù)主要包括氣相色譜法、液相色譜法、離子色譜法和薄層色譜法。氣相色譜法適用于揮發(fā)性好、熱穩(wěn)定性好的樣品。液相色譜法適用于非揮發(fā)性或熱穩(wěn)定性差的樣品。離子色譜法除了選擇性好、分析速度快等特點(diǎn)外，其最大的優(yōu)點(diǎn)是能夠?qū)崿F(xiàn)多種離子的同時(shí)分析。薄層色譜法的設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便，具有較快的分離速度。色譜分析技術(shù)不僅可以對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量分析，還可以對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行分離和純化，在各種實(shí)驗(yàn)室中具有重要作用[1]。

1.2 色譜分析技術(shù)的優(yōu)勢(shì)

色譜分析技術(shù)是一種有效的食品檢測(cè)手段。色譜分析技術(shù)具有超高的分離能力。通過固定相和流動(dòng)相之間的分配作用，色譜技術(shù)可適用于中等極性和非極性化合物的分析，能夠快速、有效地分離食品樣品中的小分子和大分子復(fù)雜成分，從而滿足食品中微量有害物質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的檢測(cè)需求，實(shí)現(xiàn)食品中微量有害物質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的準(zhǔn)確定性定量分析。同時(shí)，色譜分析技術(shù)還具有極高的檢測(cè)靈敏度，能夠檢測(cè)到樣品中的微量甚至痕量組分，可實(shí)現(xiàn)對(duì)濃度要求極低的農(nóng)藥、獸藥、重金屬、食品添加劑及天然毒素等組分的檢測(cè)。另外，色譜分析技術(shù)適用范圍廣，可用于食品中各種組分的分析。色譜儀器具有高度自動(dòng)化、操作簡(jiǎn)單、快速等特點(diǎn)，可滿足食品高通量檢測(cè)要求，特別是在食品安全監(jiān)測(cè)方面有明顯優(yōu)勢(shì)。與此同時(shí)，色譜分析技術(shù)的進(jìn)步也極大地促進(jìn)了樣品前處理與數(shù)據(jù)處理技術(shù)的進(jìn)步，提高了整個(gè)分析過程的效率與可靠性。例如，固相萃取、QuEChERS等樣品預(yù)處理方法，可簡(jiǎn)化復(fù)雜樣品前處理過程，提高分析效率。色譜分析技術(shù)在食品質(zhì)量控制、食品安全監(jiān)控等方面具有廣闊的應(yīng)用前景[2]。

2 常見的色譜分析技術(shù)

2.1 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)被廣泛應(yīng)用于檢測(cè)食品中的農(nóng)藥殘留量、毒素及食品添加劑等。其應(yīng)用步驟通常包括樣品前處理、液相色譜分離以及質(zhì)譜檢測(cè)。樣品前處理是去除干擾物質(zhì)并濃縮目標(biāo)分析物。常用的前處理方法有蛋白沉淀法、固相提取、液液萃取法和QuEChers法。處理后的樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器注入液相色譜系統(tǒng)，根據(jù)目標(biāo)化合物的極性、疏水性等化學(xué)特性分離樣品溶液。隨后，經(jīng)過分離的化合物進(jìn)入質(zhì)譜檢測(cè)儀，在離子源中電離成帶電離子。通過多級(jí)質(zhì)譜分析，質(zhì)譜檢測(cè)器可以提高檢測(cè)的靈敏度和選擇性。最后通過數(shù)據(jù)分析軟件對(duì)質(zhì)譜圖進(jìn)行處理和解析，從而對(duì)食品中的目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行定量和定性分析[3]。

2.2 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在食品中廣泛應(yīng)用，可用于食品中農(nóng)藥殘留、環(huán)境污染物及香味物質(zhì)的檢測(cè)。具體實(shí)施過程包括樣品預(yù)處理、氣相色譜分離以及質(zhì)譜分析。首先，采用頂空進(jìn)樣、固相微萃取及吹掃捕集等方法對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行富集純化。預(yù)處理后的樣品經(jīng)氣相色譜儀高溫氣化，在載氣（如氦、氮）的驅(qū)動(dòng)下進(jìn)入色譜柱中進(jìn)行分離。

由于樣品各組分在色譜柱中的揮發(fā)性、極性等存在差異，通過這種差異可實(shí)現(xiàn)對(duì)混合物的高效分離。分離完成后，化合物依次進(jìn)入質(zhì)譜檢測(cè)器。在質(zhì)譜檢測(cè)裝置中，電子轟擊離子源使化合物電離，生成帶電離子。然后通過質(zhì)荷比（m/z）對(duì)這些離子進(jìn)行質(zhì)譜分析。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)具有靈敏度高、分辨率高等優(yōu)點(diǎn)，在復(fù)雜混合物分析中具有良好的應(yīng)用前景。尤其是在食品安全檢驗(yàn)領(lǐng)域，更是被廣泛采用。例如，它可以準(zhǔn)確地檢測(cè)出食品中的農(nóng)藥殘留、食品添加劑以及其他有害物質(zhì)，從而保證食品安全。同時(shí)，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)食品組分進(jìn)行定性定量分析，可為食品品質(zhì)控制提供科學(xué)依據(jù)[4]。

2.3 超高效液相色譜技術(shù)

超高效液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用步驟與傳統(tǒng)的高效液相色譜相似，但其分離速度更快，分析效率更高，因?yàn)樗捎昧烁叩闹鶋海盍项w粒也更小。超高效液相色譜技術(shù)通過固相萃取、液液萃取或QuEChERS等方法對(duì)樣品進(jìn)行前處理，以去除雜質(zhì)，使目標(biāo)化合物得到濃縮。將經(jīng)過處理的樣品注入超高效液相色譜系統(tǒng)，通過高壓泵向超高效色譜柱輸送流動(dòng)相和樣品混合物，使目標(biāo)化合物在柱內(nèi)高效分離。分離后的化合物通過光學(xué)檢測(cè)儀、質(zhì)譜檢測(cè)儀檢測(cè)，并進(jìn)行定量分析。由于具有快速、高效的特點(diǎn)，超高效液相色譜技術(shù)在食品中微量有害物質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)素及添加劑等的檢測(cè)中應(yīng)用廣泛。

2.4 薄層色譜技術(shù)

薄層色譜技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，在食品初篩與定性分析中得到了廣泛的應(yīng)用。為了得到適用于點(diǎn)樣的樣品溶液，樣品前處理一般包括溶解、提取、過濾等步驟。將已處理過的樣品用毛細(xì)點(diǎn)涂于預(yù)先制備好的硅膠或其他吸附劑的薄層上，精確控制樣品點(diǎn)的尺寸及位置。點(diǎn)樣結(jié)束后，將薄層板放置于圓筒內(nèi)，并在圓筒中預(yù)加適量展開劑（流動(dòng)相）。在毛細(xì)力作用下，展開劑沿層板上升，將試樣帶到吸附劑表面。由于樣品中各組分在固定相和流動(dòng)相間的分配系數(shù)不同，從而達(dá)到分離效果。然后采用合適的顯色手段（如紫外燈照射或噴顯色劑），以樣品點(diǎn)運(yùn)動(dòng)距離與展開劑前鋒運(yùn)動(dòng)距離的比值定性分析。薄層色譜法是一種簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)的快速初篩檢測(cè)方法，在食品中廣泛應(yīng)用。

3 色譜分析技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用

3.1 反式脂肪酸檢測(cè)

研究表明，過量的攝入反式脂肪酸對(duì)人體健康會(huì)產(chǎn)生不利影響[5]。2003年世界衛(wèi)生組織建議反式脂肪酸日攝入量不超過2.2 g。我國《食品國家安全標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品營(yíng)養(yǎng)標(biāo)簽通則》（GB 28050—2011）則要求反式脂肪酸含量不超過0.3 g/100 g時(shí)，食品包裝方可標(biāo)示為0。因此，對(duì)食品中反式脂肪酸含量的日常監(jiān)測(cè)至關(guān)重要。氣相色譜法是檢測(cè)反式脂肪酸最為常用和有效的方法之一。伍劍等[6]采用柱前衍生-氣相色譜法對(duì)烘焙食品、巧克力及糖類、膨化食品、含油小吃、肉及肉制品和奶及奶制品等

6類食品中的反式脂肪酸含量進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，氣相色譜法不僅分辨率高，選擇性好，還縮短了檢測(cè)時(shí)間，能夠很好地完成食品中反式脂肪酸含量的檢測(cè)，對(duì)于評(píng)估健康風(fēng)險(xiǎn)、保障食品質(zhì)量安全有著重要意義。

3.2 膽固醇檢測(cè)

膽固醇主要存在于肉類、蛋類和乳制品中。人體長(zhǎng)期攝入高膽固醇食品會(huì)導(dǎo)致人體血液中膽固醇含量升高，進(jìn)而引發(fā)多種疾病，包括高血壓、腎臟疾病、前列腺癌、骨質(zhì)疏松、牙周病、耳鳴或耳悶，以及缺血性心臟病、腦梗死、間歇性跛行癥和膽結(jié)石等。這些疾病嚴(yán)重威脅人體健康。因此，保持合理的膽固醇水平對(duì)于預(yù)防這些疾病具有重要意義。氣相色譜法和高效液相色譜法因其高效、快速、靈敏度高以及重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于食品中膽固醇的檢測(cè)。我國《食品國家安全標(biāo)準(zhǔn) 食品中膽固醇的測(cè)定》（GB 5009.128—2016）中，氣相色譜法和高效液相色譜法作為第一法和第二法，適用于肉及肉制品、蛋及蛋制品、乳及乳制品等各類動(dòng)物性食品中膽固醇的測(cè)定。而這一標(biāo)準(zhǔn)的建立，為食品中膽固醇的檢測(cè)提供了標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的方法[7]。

3.3 唾液酸檢測(cè)

唾液酸主要存在于燕窩和母乳之中。此外，在牛奶、雞蛋等食物中也含有少量唾液酸。唾液酸可以促進(jìn)大腦和認(rèn)知發(fā)育，促進(jìn)消化，提高腸道的抗菌、排毒能力。色譜分析技術(shù)在復(fù)雜食品基質(zhì)分析中，如母乳、嬰兒配方奶粉以及燕窩唾液酸含量檢測(cè)中表現(xiàn)出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。例如，趙梓棋等[8]通過優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，建立一種以高效液相色譜法為基礎(chǔ)，用于檢測(cè)唾液酸原樣及乳制品中唾液酸含量的方法，成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)N-乙酰神經(jīng)氨酸的高效、精確檢測(cè)。結(jié)果顯示，該方法操作簡(jiǎn)便，精密度良好，不僅提高了檢驗(yàn)人員的技術(shù)操作性，還在指定濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系和穩(wěn)定的加標(biāo)回收率，適用于唾液酸原樣及乳制品中唾液酸含量的準(zhǔn)確分析。王勇等[9]建立一種高效陰離子交換色譜-脈沖安培法對(duì)燕窩進(jìn)行測(cè)定，通過鹽酸水解處理燕窩樣品，結(jié)合特定保護(hù)柱和分析柱，利用特定流動(dòng)相等度洗脫及脈沖安培檢測(cè)器檢測(cè)，成功實(shí)現(xiàn)了燕窩中唾液酸含量的精確測(cè)定。結(jié)果表明，該方法在測(cè)定范圍內(nèi)線性良好，回收率高且穩(wěn)定，可用于燕窩中唾液酸的含量分析。

3.4 維生素檢測(cè)

維生素是一類有機(jī)化合物的統(tǒng)稱，可分為水溶性維生素（如維生素B1、B2、B6、B12和維生素C）和脂溶性維生素（如維生素A、D、E和K）兩大類。維生素具有調(diào)節(jié)人體代謝的功能，在人體發(fā)揮著重要的作用。高效液相色譜技術(shù)在食品維生素檢測(cè)領(lǐng)域展現(xiàn)出卓越能力。牛燦杰等[10]成功建立了一種高效液相色譜-二極管陣列-熒光聯(lián)用法，可同時(shí)檢測(cè)營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化淀粉類食品中7種水溶性維生素的含量。該方法通過酶解和pH值調(diào)整提取樣品，利用特定洗脫液進(jìn)行梯度洗脫，并結(jié)合不同波長(zhǎng)下的二極管陣列和熒光檢測(cè)技術(shù)，精準(zhǔn)地定量分析了維生素B1、煙酸、維生素B2、吡哆醛、吡哆醇和吡哆胺等7種水溶性維生素的含量。結(jié)果表明，這些維生素在各自的線性范圍內(nèi)均表現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，加標(biāo)回收率高，且方法具有快速、高效的特點(diǎn)，適用于大批量強(qiáng)化淀粉類食品中7種水溶性維生素的同時(shí)測(cè)定。

4 結(jié)語

近年來，色譜技術(shù)在食品檢測(cè)領(lǐng)域得到了越來越廣泛的應(yīng)用。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)因其靈敏度高、選擇性好等優(yōu)點(diǎn)，已成為食品添加劑等檢測(cè)的重要手段。超高效液相色譜因其柱壓大、填料粒徑小等優(yōu)點(diǎn)，在痕量有害物質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用。薄層層析法具有操作簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)，在食品初篩及定性分析中得到廣泛應(yīng)用。色譜法是一種新的分析方法，可以用于測(cè)定脂肪酸、膽固醇、唾液酸和維生素等。隨著色譜技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展與完善，該技術(shù)必將在食品檢測(cè)領(lǐng)域得到更廣泛、更深入的應(yīng)用，為食品安全與質(zhì)量控制提供更可靠、更有效的技術(shù)手段。

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作者簡(jiǎn)介：林宇豪（1994—），男，廣東河源人，本科，助理工程師。研究方向：食品營(yíng)養(yǎng)檢測(cè)。