摘" 要：優(yōu)選黑龍江地產(chǎn)藥材防風(fēng)產(chǎn)地加工與飲片炮制一體化（簡稱“一體化”）工藝。采用正交試驗(yàn)法對鮮防風(fēng)飲片烘干溫度、切片厚度、烘干時(shí)間3個(gè)因素進(jìn)行考察，以醇浸出物、升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷和防風(fēng)多糖含量為考察指標(biāo)，通過綜合加權(quán)評分法結(jié)合層次分析法對防風(fēng)一體化工藝進(jìn)行研究并確定最佳工藝；按照優(yōu)選出的最佳工藝加工一體化飲片，同時(shí)加工防風(fēng)傳統(tǒng)工藝飲片，并比較二者質(zhì)量。結(jié)果顯示，鮮防風(fēng)一體化最佳工藝為烘干溫度50 ℃，切5 mm厚片，干燥箱內(nèi)烘干3 h，2種工藝飲片質(zhì)量接近，且一體化工藝飲片中醇浸出物、5-O-甲基維斯阿米醇苷和多糖含量較高。得出結(jié)論，優(yōu)選的防風(fēng)產(chǎn)地加工與炮制一體化工藝簡單可行、節(jié)能環(huán)保，且防風(fēng)中活性成分含量較高。

關(guān)鍵詞：防風(fēng)；一體化；產(chǎn)地加工；層次分析法；藥材

中圖分類號：R283" " " 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A" " " " " 文章編號：2095-2945（2024）36-0051-04

Abstract： To optimize the integration technology on field processing and processing crude drugs of Sposhnikovia divaricata. Orthogonal method was used to investigate the three significant influencing factors， which were drying temperature， slice thickness， drying time. Based on the comprehensive scores of extractable， prim-O-glucosylcimifugin， 4'-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol and polysaccharide of Sposhnikovia divaricata， the integrated process was selected by multi index comprehensive evaluation and analytic hierarchy process. Three batches of integrated slices were processed according to the optimized integrated process; and three batches of corresponding traditional slices were processed ， and the quality of the two kinds of slices was compared. The results show that the optimum integrated process was as follows： cutting 5 mm thick slices， drying at 50℃ in drying box（about 3 hours）. The quality of integrated slices was close to that of traditional slices. The preferred integrated processing technology was simple and feasible， energy-conservatingt， and environment-protecting， with high content of active ingredients.

Keywords： Sposhnikovia divaricata; integration technology; origin processing; analytic hierarchy process; medicinal materials

防風(fēng)為傘形科防風(fēng)屬植物防風(fēng)Saposhnikovia divaricata （Turcz.） Schisck.的干燥根，味辛、微甘，性溫[1]，具有解表、祛風(fēng)和止痛等功效[2]，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，且被譽(yù)為上品之藥[3-4]。防風(fēng)在我國種植范圍廣泛，黑龍江作為主產(chǎn)區(qū)，在全省均有分布。本文通過正交試驗(yàn)法優(yōu)選黑龍江地產(chǎn)藥材防風(fēng)一體化工藝[5-6]，對比了防風(fēng)傳統(tǒng)加工工藝與一體化加工工藝的工序及對指標(biāo)的影響[7-10]。防風(fēng)作為黑龍江的道地藥材，研究其一體化炮制工藝，可以為進(jìn)一步開發(fā)利用防風(fēng)提供參考和理論依據(jù)。

1" 材料與方法

1.1" 材料

1.1.1" 試藥與試劑

防風(fēng)鮮藥材購自黑龍江大慶，經(jīng)牡丹江醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院天然藥物學(xué)教研室鑒定為傘形科鮮防風(fēng)（Saposhnikovia divaricata（Turcz） Schisck.），升麻素苷對照品（批號：RP220122），5-O-甲基維斯阿米醇苷（批號：RP220520），水為娃哈哈，其他試劑均為分析純。

1.1.2" 儀器

Agilent-1260型高效液相色譜儀（安捷倫儀器設(shè)備有限公司），UV2300型紫外分光光度計(jì)（上海天美天平儀器有限公司），DF-101S型集熱式恒溫加熱磁力攪拌器（廣州市予華儀器有限公司），TDL-80-IB低速臺式離心機(jī) （上海安亭科學(xué)儀器廠），C-1玻璃儀器氣流烘干器（上海隆拓儀器設(shè)備有限公司），F(xiàn)A1004N型電子分析天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司），KQ-250型高功率數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），DHG-9140AS型立式電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（嘉興市中新醫(yī)療儀器有限公司），JP-500C型高速粉碎機(jī)（永康市久品工貿(mào)有限公司）。

1.2" 方法

1.2.1" 外觀性狀檢查

根據(jù)《中華人民共和國藥典（2020年版）》（簡稱“《藥典》（2020年版）”）一部對防風(fēng)飲片的描述，對外觀性狀進(jìn)行檢查。

1.2.2" 水分含量測定

根據(jù)《藥典》（2020年版）四部通則0832項(xiàng)第二法烘干法測定。

1.2.3" 總灰分的測定

根據(jù)《藥典》（2020年版）四部通則2302項(xiàng)總灰分測定法測定。

1.2.4" 醇浸出物的測定

稱取過二號篩濾的防風(fēng)粉末，按《藥典》（2020年版）四部通則2201項(xiàng)下的醇溶性浸出物測定法，即用乙醇作溶劑的熱浸法測定。

1.2.5" 升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷含量的測定

1）色譜條件。色譜柱：依利特Supersil ODS2（4.6 mm×250 mm，5 μm）。流動相：甲醇（A）-水（B），梯度洗脫，0～20 min，30%A；20～25 min，45%A；25～50 min，60%A；50～55 min，90%A；55～60 min，100%A。流速為1.0 mL/min；檢測波長為254 nm；柱溫為30 ℃；進(jìn)樣量為10 μL。

2）混合對照品溶液制備。取升麻素苷對照品10.0 mg，5-O-甲基維斯阿米醇苷對照品15.5 mg加甲醇制備成每1 mL分別含升麻素苷2 mg，5-O-甲基維斯阿米醇苷3.1 mg的混合溶液，即得。

3）供試品溶液制備。取過二號篩的防風(fēng)粉末1 g于錐形瓶中，加入30 mL甲醇溶液，超聲提取60 min，放冷，加入甲醇補(bǔ)足質(zhì)量，搖勻后用0.22 μm濾膜濾過，即得。

4）標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程的確立，分別取1，2，4，8， 16 μL混合對照品溶液進(jìn)樣。以溶液濃度為橫坐標(biāo)X，峰面積為縱坐標(biāo)Y，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得線性回歸方程。升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的回歸方程分別為Y=1 485.3X-227.65（r=0.999 9）和Y=1 350.3 X+548.57（r=0.999 6），線性范圍分別為2～32 mg·mL-1和3.1～49.6 mg·mL-1。

1.2.6" 多糖含量的測定

1）標(biāo)準(zhǔn)溶液制備。精密稱取烘干至恒重葡萄糖25.30 mg，加水定容至250 mL，配制成101.2 μg·mL-1的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2）供試品溶液制備。稱取5 g防風(fēng)粉末，加入40 mL蒸餾水，超聲溫度60 ℃，超聲功率70 W，超聲69 min，濾液于50 ℃旋蒸至體積為10～15 mL，加入4倍量的無水乙醇，使之成80%的乙醇溶液，靜置過夜，離心，沉淀用無水乙醇、丙酮、乙醚進(jìn)行洗滌，凍干后得防風(fēng)多糖，取凍干的防風(fēng)多糖5.0 mg，溶解，定容至100 mL，即得[11-12]。

3）葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的確立。精密吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1，0.3，0.7，1.2，1.6，2.0 mL分別置于試管中，照苯酚-硫酸法[11]，以蒸餾水為空白溶液，測定葡萄糖含量。按照《藥典》（2020年版）通則0401紫外-可見分光光度法，在490 nm波長處分別測定吸光度值A(chǔ)。以葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)X，A為縱坐標(biāo)Y，繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程Y=0.032 X+0.213 1（r=0.999 3），線性范圍為1.012～20.24 μg·mL-1。

1.2.7" 防風(fēng)一體化最佳工藝的確定

正交試驗(yàn)。按照炮制規(guī)范，采用正交試驗(yàn)法，以L9（34）正交因素水平表為依據(jù)，對防風(fēng)一體化工藝進(jìn)行研究。以防風(fēng)的醇浸出物、升麻素苷含量、5-O-甲基維斯阿米醇苷含量及多糖含量作為評價(jià)指標(biāo)，以飲片烘干溫度（A）、切片厚度（B）、烘干時(shí)間（C）為參考因素設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，因素及水平見表1。

1.2.8" 不同炮制工藝對比

1）防風(fēng)傳統(tǒng)工藝試驗(yàn)。取防風(fēng)藥材3份，各50 g，洗凈，采用布包悶潤法即用干凈濕布每隔1h噴濕一次，噴濕24次之后切5 mm厚片，在40 ℃干燥箱內(nèi)干燥5 h，得到樣品Ⅰ。

2）防風(fēng)一體化最佳工藝驗(yàn)證試驗(yàn)。取含水率為40%左右的新鮮防風(fēng)藥材3份，各50 g，按照正交試驗(yàn)得到最佳條件試驗(yàn)，得到樣品Ⅱ。

1.2.9" 數(shù)據(jù)分析

根據(jù)層次分析法[13]，運(yùn)用SPSSAU應(yīng)用軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2" 結(jié)果

2.1" 外觀性狀

傳統(tǒng)加工工藝及產(chǎn)地加工炮制一體化工藝的防風(fēng)藥材飲片的外觀性狀如圖1所示，均符合《藥典》（2020年版）防風(fēng)項(xiàng)下外觀性狀的規(guī)定。

2.2" 多指標(biāo)綜合加權(quán)評分法

根據(jù)層次分析法，運(yùn)用SPSSAU應(yīng)用軟件，通過判斷矩陣率CR=0.025＜0.1，則表明分析結(jié)果一致性較好，即數(shù)據(jù)合理，無邏輯矛盾，結(jié)果見表2。權(quán)重系數(shù)賦值為升麻素苷含量47.706%、5-O-甲基維斯阿米醇苷含量29.048%、醇浸出物含量13.276%、多糖含量9.970%。利用加權(quán)法計(jì)算綜合OD值，計(jì)算公式為：OD＝（0.477 06 X/Xmax+0.290 48 Y/Ymax+0.132 76 M/Mmax+0.099 70 N/Nmax）×100，OD值越高越好，其中X、Y、M和N分別表示升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、醇浸出物和多糖的含量，Xmax、Ymax、Mmax、Nmax分別表示以上4種成分含量的最大值。

防風(fēng)一體化工藝正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案及結(jié)果見表3。

由正交試驗(yàn)結(jié)果可以看出，A2gt;A3gt;A1，B3gt;B1gt;B2，C1gt;C2gt;C3對結(jié)果影響最大的因素是烘干溫度，其次切片厚度、烘干時(shí)間。最終得到防風(fēng)一體化工藝為A2B3C1，即烘干溫度50 ℃、切片厚度5 mm、烘干時(shí)間3 h。

2.3" 不同炮制工藝對防風(fēng)藥材指標(biāo)的影響

通過檢測，2種不同炮制工藝下防風(fēng)藥材中的指標(biāo)結(jié)果見表4。

由表4可知，2種不同炮制工藝下的水分含量均不超過10.0%，總灰分均不超過6.5%，醇浸出物測定結(jié)果均不少于13.0%，升麻素苷與5-O-甲基維斯阿米醇苷的總量均不少于0.24%，即符合《藥典》（2020年版）防風(fēng)項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。樣品Ⅰ醇浸出物、5-O-甲基維斯阿米醇苷和多糖的含量均小于樣品Ⅱ的測量值，可能是由于一體化工藝炮制方法減少了操作步驟和反復(fù)浸潤，減少了損失。

3" 結(jié)論

本研究通過正交試驗(yàn)確定了龍江道地藥材防風(fēng)一體化最佳工藝：烘干溫度為50 ℃、切片厚度為5 mm、烘干時(shí)間為3 h。初步對比了防風(fēng)傳統(tǒng)加工工藝與一體化加工工藝對指標(biāo)的影響，優(yōu)選的防風(fēng)產(chǎn)地加工與炮制一體化工藝簡單可行、節(jié)能環(huán)保，且防風(fēng)中活性成分含量較高，闡明了防風(fēng)一體化炮制具有可行性的優(yōu)勢，為進(jìn)一步研究一體化工藝參數(shù)提供了基礎(chǔ)，對進(jìn)一步開發(fā)防風(fēng)提供理論依據(jù)。另外，本研究評價(jià)了《藥典》（2020年版）規(guī)定的指標(biāo)并加入了活性物質(zhì)防風(fēng)多糖的測定，至于防風(fēng)一體化炮制飲片的藥效學(xué)研究后續(xù)還將進(jìn)一步進(jìn)行研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[M]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020．

[2] 竇紅霞，高玉蘭.防風(fēng)的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息，2009，26（2）：15-17.

[3] 吳普.神農(nóng)本草經(jīng)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：96.

[4] 鞏麗虹，吳英俊，李孟全.防風(fēng)傳統(tǒng)炮制方法與現(xiàn)代炮制工藝的研究進(jìn)展[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2024，31（10）：190-193.

[5] 楊俊杰，李平，郝敏，等.中藥材產(chǎn)地加工與炮制一體化的現(xiàn)代研究進(jìn)展[J].中草藥，2018，49（20）：4726-4730.

[6] 張振凌，吳若男，于文娜，等.生地黃產(chǎn)地加工炮制一體化工藝研究[J].中草藥，2018，49（20）：4767-4772.

[7] 于迪.防風(fēng)產(chǎn)地加工與炮制一體化研究[D].長春：長春中醫(yī)藥大學(xué)，2022.

[8] 趙君，孫樂明，章啟東.黃精產(chǎn)地加工與炮制一體化初步研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2020，16（9）：61-63.

[9] 吳情梅，劉曉芬，連艷，等.川芎產(chǎn)地加工與飲片炮制一體化工藝研究[J].中草藥，2019，50（16）：3808-3814.

[10] 吳梅青，羅栩強(qiáng)，陳丹，等.荷葉產(chǎn)地加工與飲片炮制一體化工藝研究[J].中國現(xiàn)代中藥，2024，26（3）：487-493.

[11] 鞏麗虹，李文超，徐紅納，等.響應(yīng)面優(yōu)化酶法提取防風(fēng)多糖的工藝研究[J].實(shí)驗(yàn)室科學(xué)，2020，23（3）：25-29，33.

[12] 鞏麗虹，李孟全，劉佳維.響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助提取防風(fēng)多糖的工藝研究[J].中藥材，2018，41（3）：682-685.

[13] 王艾琳，謝瑜，王青，等.多指標(biāo)綜合評價(jià)結(jié)合層次分析法優(yōu)化防風(fēng)炭炮制工藝研究[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2023，29（5）：48-52.