［摘要］目的探討過敏性紫癲（HSP）患兒外周血單個核細胞中炎性體凋亡相關斑點樣蛋白（ASC） mRNA和核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3（NLRP3） mRNA表達水平及其與并發(fā)腎炎的關系。方法選擇2020年7月至2022年12月于菏澤市立醫(yī)院就診的76例HSP患兒為觀察組，收集其臨床資料；以同期在院體檢的48例健康兒童為對照組。根據(jù)患兒是否并發(fā)腎炎，將觀察組分為過敏性紫癜腎炎（HSPN）組22例與HSP組54例。比較觀察組與對照組、HSPN組和HSP組及對照組的臨床資料，采用Logistic回歸模型分析HSP患兒并發(fā)腎炎的危險因素，采用限制性立方樣條模型分析ASC mRNA和NLRP3 mRNA與HSP患兒并發(fā)腎炎的關系。利用y=1-1/（1+e-z）回歸方程建立HSP患兒并發(fā)腎炎的預測模型，以十字交叉驗證法驗證模型的穩(wěn)定性。結果

觀察組與對照組的體質量指數(shù)（BMI）、白細胞（WBC）、血小板（PLT）、紅細胞（RBC）、中性粒細胞（NEU）、C反應蛋白（CRP）、甘油三酯（TG）、血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿微量白蛋白（mALB）、纖維蛋白原（FIB）、纖維蛋白原降解產(chǎn)物（FDP）、D－二聚體（D-D）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、免疫球蛋白（Ig）A、IgG、IgM、白細胞介素（IL）-16、IL-18、胰島素樣生長因子－1（IGF-1）、胰島素樣生長因子結合蛋白－3（IGFBP-3）、胱抑素（CysC）、腫瘤標志物（TM）、血管性血友病因子（vWF）、血管細胞間黏附分子－Ⅰ（sVCAM-Ⅰ）、結締組織生長因子（CTGF）、基質金屬蛋白酶9（MMP9）、ASC mRNA、NLRP3 mRNA比較，差異均有統(tǒng)計學意義（t=2.587～22.473，P＜0.05）。調整相關混雜因素后，按照總HSP切點將ASC mRNA轉化為二分類變量后，與低ASC mRNA表達水平比較，高ASC mRNA表達水平與HSP有關聯(lián)（OR=0.723，95%CI：0.672～0.831，P＜0.001）；按照總HSP切點將NLRP3 mRNA轉化為二分類變量后，與低NLRP3 mRNA表達水平比較，高NLRP3 mRNA表達水平與HSP有關聯(lián)（OR=0.642，95%CI：0.611～0.791，P＜0.001）。HSPN組、HSP組和對照組的BMI、WBC、PLT、RBC、NEU、CRP、TG、Scr、BUN、mALB、FIB、FDP、D-D、IgA、IgG、IgM、IL-16、IL-18、IGF-1、IGFBP-3、CysC、TM、vWF、sVCAM-Ⅰ、CTGF、MMP9、ASC mRNA、NLRP3 mRNA比較，差異均有統(tǒng)計學意義（t=2.461～27.327，P＜0.05）。多因素Logistic回歸模型分析顯示，Scr≥92.16μmol/L、BUN≥7.74mmol/L、mALB≥0.58mg/L、D-D≥1.12mg/L、IgA≥2.54g/L、IGF-1≥0.77ng/L、IGFBP-3≥0.74ng/L、CysC≥2.23ng/L、sVCAM-Ⅰ≥111.37ng/L、MMP9≥23.71ng/L、ASC mRNA≥22.55和NLRP3 mRNA≥21.98均是HSP患兒并發(fā)腎炎的危險因素（P＜0.05）。限制性立方樣條模型分析ASC mRNA和NLRP3 mRNA與HSP患兒并發(fā)腎炎的關系顯示，ASC mRNA、NLRP3 mRNA均與HSP患兒并發(fā)腎炎存在非線性的劑量-反應關系。以HSP患兒并發(fā)腎炎的危險因素建立預測模型，并對其穩(wěn)定性進行驗證，模型具有良好的預測精準度。結論HSP患兒外周血單個核細胞中ASC mRNA、NLRP3 mRNA表達水平與患兒并發(fā)腎炎均存在關聯(lián)。臨床上應加強對ASC和NLRP3的監(jiān)測，以減少HSP患兒并發(fā)腎炎的發(fā)生。

［關鍵詞］過敏性紫癲；過敏性紫癜腎炎；凋亡相關斑點樣蛋白；核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3；患兒

Doi：10.3969/j.issn.1673-5293.2024.11.004

［中圖分類號］R179［文獻標識碼］A

［文章編號］1673-5293（2024）11-0020-12

Expression levels of ASC mRNA and NLRP3 mRNA in peripheral blood monocytes of

children with HSP and their relationships with complication of HSP nephritis

FU Zhongying YANG Yanling SU Yuehua YU Hanshu LI Man ZHU Fengqin CHANG Hong

（1.Department of Pediatrics，Heze Municipal Hospital，Shandong Heze 274000，China;

2.Physical Examination Center of Heze Municipal Hospital，Shandong Heze 274000，China;

3.Department of Pediatrics，The Affiliated Hospital of Qingdao University，Shandong Qingdao 266000，China）

［Abstract］ Objective To investigate expression levels of inflammasome apoptosis-associated speck-like caspases （ASC） mRNA and nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3 （NLRP3） mRNA in peripheral blood monocytes of children with allergic purpura ［Hench-Schenlein purpura （HSP）］ and their relationships with HSP complicated nephritis （HSPN）. Methods 76 children with HSP who were treated in Heze Municipal Hospital from July 2020 to December 2022 were included in observation group.48 healthy children who underwent physical examination in the hospital during the same period were selected as control group.According to whether the child had HSP complicated nephritis，the children in the observation group were divided into HSPN group （n=22 ） and HSP group （n=54）.The clinical data of the children in HSPN group，HSP group and the control group were collected，analyzed and compared.Logistic regression model was used to analyze risk factors of complication of HSPN in the children with HSP.Restricted cubic spline （RCS） model was used to analyze correlations of ASC mRNA and NLRP3 mRNA with HSPN.The prediction model of HSPN was established by using y=1-1/ （1+e-z） regression equation，and stability of the model was verified by cross-validation method. Results There were significant differences in body mass index （BMI），white blood cell count （WBC），platelet count （PLT），red blood cell count （RBC），neutrophilic granulocyte count （NEU），C-reactive protein （CRP），triglyceride （TG），serum creatinine （Scr），blood urea nitrogen （BUN），micro-albumin （mALB），fibrinogen （FIB），fibrinogen degradation products （FDP），D-dimer （D-D），low density lipoprotein cholesterol （LDL-C），immunoglobulin A （IgA），immunoglobulin G （IgG），immunoglobulin M （IgM），interleukin-16 （IL-16），interleukin-18 （IL-18），insulin-like growth factors-1 （IGF-1），insulin-like growth factor binding protein-3 （IGFBP-3），cystatin C （CysC），tumor marker （TM），von Willebrand factor （vWF），vascular intercellular adhesion molecule-Ⅰ（sVCAM-Ⅰ），connective tissue growth factor （CTGF），metalloproteinase 9 （MMP9），ASC mRNA and NLRP3 mRNA of the children between the observation group and the control group （t=2.587-22.473，all Plt;0.05）.After adjusting for relevant confounders，and after ASC mRNA was converted into binary variables according to the total HSP cut-off point，higher ASC mRNA level was associated with HSP as compared with lower ASC mRNA level （OR=0.723，95%CI：0.672-0.831，Plt;0.001）.After converting NLRP3 mRNA into a binary variable according to the total HSP cut-off point，higher NLRP3 mRNA level was associated with HSP as compared with lower NLRP3 mRNA level （OR=0.642，95%CI：0.611-0.791，Plt;0.001）.In BMI，WBC，PLT，RBC，NEU，CRP，TG，Scr，BUN，mALB，F(xiàn)IB，F(xiàn)DP，D-D，IgA，IgG，IgM，IL-16，IL-18，IGF-1，IGFBP-3，CysC，TM，vWF，sVCAM-I，CTGF，MMP9，ASC mRNA and NLRP3 mRNA，there were statistically significant differences among HSPN group，HSP group and the control group （t=2.461-27.327， all Plt;0.05）.Multivariate Logistic regression model analysis showed that Scr≥92.16 μmol/L，BUN≥7.74 mmol/L，mALB≥0.58 mg/L，D-D≥1.12mg/L，IgA≥2.54g/L，IGF-1≥0.77ng/L，IGFBP-3≥0.74ng/L，CysC≥2.23ng/L，sVCA M-I≥111.37ng/L，MMP9≥23.71ng/L，ASC mRNA≥22.55 and NLRP3 mRNA≥21.98 were all risk factors for HSP complicated with nephritis in children （all Plt;0.05）.The RCS model analysis results showed that there were nonlinear dose-response relationships of ASC mRNA and NLRP3 mRNA with HSPN in the children with HSP （both Plt;0.001）.The prediction model of HSP complicated with nephritis （HSPN） based on the risk factors was verified and showed that it had a good stability and a good prediction accuracy. Conclusion The expression levels of ASC mRNA and NLRP3 mRNA in peripheral blood monocytes of HSP children are associated with HSPN.Clinical monitoring for ASC and NLRP3 should be strengthened to reduce incidence of HSPN in children with HSP.

［Key words］ Hench-Schenlein purpura;Hench-Schenlein purpura nephritis;apoptosis-associated speck-like caspase;nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3；children

過敏性紫癜（Hench-Schenlein purpura，HSP）又稱自限性急性出血癥，是一種由毛細血管變態(tài)反應引起的自身免疫性疾病，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、關節(jié)痛、腹痛、紫癜、血尿等［1-2］。目前HSP的發(fā)病機制尚不明確，相關研究表明，其發(fā)病可能與遺傳、病原體感染、過敏原、蟲蚊叮咬、某些藥物的副作用等因素有關［3-4］。HSP發(fā)病涉及機體的多個器官，包括皮膚、胃、腸、腎臟、關節(jié)等［5］。過敏性紫癜腎炎（Hench-Schenlein purpura nephritis，HSPN）是HSP最為常見的并發(fā)癥之一，其發(fā)病迅速、病情兇險，多見于7～14歲的學齡期兒童［6］。據(jù)報道，30%～80%的患兒在HSP發(fā)病半年內會并發(fā)腎炎［7］。核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3，NLRP3）炎癥體是凋亡相關斑點樣蛋白（apoptosis-associated speck-like caspases，ASC）等多種蛋白質的復合體，具有激活機體炎癥反應的作用［8］。目前，關于ASC、NLRP3與HSPN關系的研究鮮有報道?；诖?，本研究以76例HSP患兒為研究對象，以同期體檢的48例健康兒童為對照組，探討外周血單個核細胞中ASC mRNA和NLRP3 mRNA表達水平與HSP患兒并發(fā)腎炎的關系，以期為臨床醫(yī)師準確評估患兒病情和制定治療方案提供理論參考。

1研究對象與方法

1.1研究對象

選擇2020年7月至2022年12月于菏澤市立醫(yī)院就診的76例HSP患兒為觀察組，男39例，女37例，收集臨床資料；根據(jù)患兒是否并發(fā)腎炎，將其分為HSPN組22例和HSP組54例。在HSPN組中，男9例，女13例；年齡為6～13歲，平均（9.47±1.96）歲；體質量指數(shù)（body mass index，BMI）為18～24kg/m2，平均（20.15±1.86）kg/m2。在HSP組中，男30例，女24例；年齡為7～13歲，平均（9.81±1.65）歲；BMI為16～26kg/m2，平均（20.27±2.03）kg/m2。以同期在院體檢的48例健康兒童為對照組，男24例，女24例；年齡為4～14歲，平均（9.25±2.22）歲；BMI為14～26kg/m2，平均（20.66±2.74）kg/m2。

觀察組均納入訓練集，同期選擇38例HSP患兒納入驗證集（訓練集和驗證集的比例是2：1），男24例，女14例；年齡為3～13歲，平均（9.16±2.28）歲；BMI為14～27kg/m2，平均（20.75±2.68）kg/m2。

1.2納入與排除標準

納入標準：①年齡在3～14歲；②符合《諸福棠實用兒科學》［9］中對HSP的相關診斷標準；③均為初次發(fā)??；④納入本研究前未接受過任何治療；⑤臨床資料完整；⑥患兒及其監(jiān)護人均知情同意且自愿加入本研究。

排除標準：①合并免疫系統(tǒng)疾病者；②合并器官功能障礙者；③合并感染性疾病者；④合并凝血功能障礙者；⑤合并精神類疾病者；⑥近3個月內服用過激素類藥物者。

本研究已經(jīng)通過菏澤市立醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審批（編號：2020-YKL12）。

1.3資料的收集

收集患兒的臨床資料，包括性別、年齡、BMI、收縮壓（systolic blood pressure，SBP）、舒張壓（diastolic blood pressure，DBP）、心率（heart rate，HR）等指標。

1.4實驗室檢查

血常規(guī)檢查包括：白細胞（white blood cell，WBC）、血小板（platelet，PLT）、血紅蛋白（hemoglobin，Hb）、紅細胞（red blood cells，RBC）、中性粒細胞（neutrophile granulocyte，NEU）、血清白蛋白（se-rum albumin，ALB）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）。炎癥反應檢查包括：C反應蛋白（C-reactive protein，CRP）。腎功能檢查包括：血清肌酐（serum creatinine，Scr）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、尿微量白蛋白（micro-albumin，mALB）。血常規(guī)、炎癥反應、腎功能檢查均應用AU5800全自動生化分析儀（美國Beckman-Coulter公司）檢測。

凝血功能檢查包括：纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)IB）、纖維蛋白原降解產(chǎn)物（fibrinogen degradation products，F(xiàn)DP），D-二聚體（D-dimer，D-D）；分別由SYSMEX CS5100血凝分析儀-3（日本SYSMEX公司）和COBAS E411全自動電化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)（德國Roche公司）檢測。

免疫學檢查包括：免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM、白細胞介素（interleukin，IL）-16、IL-18、胰島素樣生長因子-1（insulin-like growth factors-1，IGF-1）、胰島素樣生長因子結合蛋白-3（insulin-like growth factor binding protein-3，IGFBP-3）。其他血清學檢查包括：胱抑素（serum cystatin-C，CysC）、腫瘤標志物（tumor marker，TM）。血管內皮功能及細胞黏附檢查包括：血管性血友病因子（von willebrand factor，vWF）、血管細胞間黏附分子-Ⅰ（vascular intercellular adhesion molecule-Ⅰ，sVCAM-Ⅰ）。組織修復與纖維化檢查包括：結締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）、基質金屬蛋白酶9（metalloproteinase 9，MMP9）。

免疫學檢查、其他血清學檢查、血管內皮功能及細胞黏附檢查、組織修復與纖維化檢查均嚴格按照試劑盒（美國Ramp;D公司）說明書操作進行檢測。

1.5 ASC mRNA和NLRP3 mRNA表達水平的檢測

采用Trizol試劑盒提取總RNA，根據(jù)PCR試劑盒操作將其逆轉錄為cDNA。反應體系為20μL，條件為95℃預變性5min、95℃變性10s、63℃退火50s、72℃延伸30s，50個循環(huán)。以β-actin為內參，利用2-ΔΔCt法分別計算ASC mRNA和NLRP3 mRNA表達水平。

引物設計：由上海invitrogen公司完成，所用試劑盒及試劑均購自美國Thermo公司。

β-actin：上游5′-TGAGAGGGAAATCGTGCG TGAC-3′；下游5′-GCTCGTTGCCAATAGTGATG ACC-3′；ASC：上游5′-TGACAGTGCAACTGCGA GAA-3′，下游5′-GTGAGCTCCAAGCCATACGA-3′；NLRP3：上游5′-GGCTGCTATCTGGAGGAA CTT-3′，下游5′-CATCTTCAGCAGCAGCCCTT-3′。

1.6統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學軟件分析數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差（x-±s）表示，組間比較進行t檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)（百分率）［n（%）］表示，組間比較進行χ2檢驗；多組間比較采用單因素方差分析；采用Logistic回歸模型分析HSP患兒并發(fā)腎炎的危險因素；采用限制性立方樣條模型分析ASC mRNA和NLRP3 mRNA與HSP患兒并發(fā)腎炎的關系；以y=1-1/（1+e-z）回歸方程建立預測模型，采用十字交叉驗證法對模型的穩(wěn)定性進行驗證。以Plt;0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1觀察組與對照組基線資料的對比

觀察組與對照組的BMI、WBC、PLT、RBC、NEU、CRP、TG、Scr、BUN、mALB、FIB、FDP、D-D、LDL-C、IgA、IgG、IgM、IL-16、IL-18、IGF-1、IGFBP-3、CysC、TM、vWF、sVCAM-Ⅰ、CTGF、MMP9、ASC mRNA、NLRP3 mRNA比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；觀察組與對照組的性別分布及年齡、SBP、DBP、HR、Hb、ALB、TC、HDL-C比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

2.2 ASC mRNA和NLRP3 mRNA與HSP的相關性分析

將表1中經(jīng)比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）的指標納入多因素Logistic回歸模型中，排除有共線性的混雜因素，不同程度地（未校準模型、模型1、模型2、模型3、模型4、模型5）矯正性別、年齡、BMI、SBP、DBP、HR、WBC、PLT、Hb、RBC、NEU、CRP、ALB、TC、TG、Scr、BUN、mALB、FIB、FDP、D-D、HDL-C、LDL-C、IgA、IgG、IgM、IL-16、IL-18、IGF-1、IGFBP-3、CysC、TM、vWF、sVCAM-Ⅰ、CTGF、MMP9協(xié)變量后，ASC mRNA、NLRP3 mRNA與HSP仍有關聯(lián)；為了更深入地探究這種關聯(lián)性，按照總HSP切點將ASC mRNA和NLRP3 mRNA分別轉化為二分類變量，并比較高、低表達水平ASC mRNA和NLRP3 mRNA與HSP的關聯(lián)性。此外，將ASC mRNA和NLRP3 mRNA分別分為五等份（五分位數(shù)），每份代表一個表達水平區(qū)間，并分別與最低五分位數(shù)（Q1）相比較，觀察ASC mRNA和NLRP3 mRNA表達水平升高與HSP的關聯(lián)性，見表2。

按照總HSP切點將ASC mRNA轉化為二分類變量后，與低ASC mRNA表達水平比較，高ASC mRNA表達水平與HSP有關聯(lián)（OR=0.723，95%CI：0.672～0.831，P＜0.001）；與ASC mRNA五分位數(shù)的Q1比較，隨著ASC mRNA表達水平升高（Q2～Q5），相關性效應值分別為（OR=0.712，95%CI：0.672～0.841，P=0.985）、（OR=0.672，95%CI：0.651～0.782，P=0.674）、（OR=0.642，95%CI：0.613～0.821，P=0.045）、（OR=0.592，95%CI：0.563～0.703，P＜0.001），見表2。

按照總HSP切點將NLRP3 mRNA轉化為二分類變量后，與低NLRP3 mRNA表達水平比較，高NLRP3 mRNA表達水平與HSP有關聯(lián)（OR=0.642，95%CI：0.611～0.791，P＜0.001）；與NLRP3 mRNA五分位數(shù)Q1比較，隨著NLRP3 mRNA表達水平升高（Q2～Q5），相關性效應值分別為（OR=0.633，95%CI：0.611～0.832，P=0.725）、（OR=0.592，95%CI：0.542～0.823，P=0.476）、（OR=0.582，95%CI：0.533～0.702，P=0.031）、（OR=0.523，95%CI：0.512～0.642，P＜0.001），見表2。

2.3 HSPN組和HSP組及對照組患兒臨床資料的對比

HSPN組、HSP組和對照組的BMI、WBC、PLT、RBC、NEU、CRP、TG、Scr、BUN、mALB、FIB、FDP、D-D、IgA、IgG、IgM、IL-16、IL-18、IGF-1、IGFBP-3、CysC、TM、vWF、sVCAM-Ⅰ、CTGF、MMP9、ASC mRNA、NLRP3 mRNA比較，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），而在性別分布及年齡、SBP、DBP、HR、Hb、ALB、TC、HDL-C、LDL-C比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表3。

2.4影響HSP患兒并發(fā)腎炎的多因素Logistic回歸分析

將表3中經(jīng)比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）的指標納入多因素Logistic回歸模型分析，結果顯示，Scr≥92.16μmol/L、BUN≥7.74mmol/L、mALB≥0.58mg/L、D-D≥1.12mg/L、IgA≥2.54g/L、IGF-1≥0.77ng/L、IGFBP-3≥0.74ng/L、CysC≥2.23ng/L、sVCAM-Ⅰ≥111.37ng/L、MMP9≥23.71ng/L、ASC mRNA≥22.55和NLRP3 mRNA≥21.98均是HSP患兒并發(fā)腎炎的危險因素（P＜0.05），見圖1。

2.5 ASC mRNA和NLRP3 mRNA與HSP患兒并發(fā)腎炎的關系

利用限制性立方樣條模型分析ASC mRNA和NLRP3 mRNA與HSP患兒并發(fā)腎炎的關系，結果顯示，ASC mRNA、NLRP3 mRNA均與HSP患兒并發(fā)腎炎存在非線性的劑量-反應關系，見圖2。

2.6 HSP患兒并發(fā)腎炎預測模型的構建及驗證

利用Logistic回歸模型對HSP患兒并發(fā)腎炎的影響因素進行預測，并將上述結果代入回歸方程y=1-1/（1+e-z）中，得到預測HSP患兒并發(fā)腎炎的公式為：

概率（P）=1-1/（1+e*）

式中*表示：2.985+1.083Scr+0.759BUN+1.245mALB+1.346D-D+1.813IgA+0.900IGF-1+1.612IGFBP-3+1.418CysC+1.355sVCAM-Ⅰ+0.893MMP9+1.125ASC mRNA+1.459NLRP3 mRNA。

利用回歸方程計算HSP患兒并發(fā)腎炎的可能性，結果顯示，概率（P）=0.70時，約登指數(shù)最大，為79.85，提示模型預測效果較好。當概率（P）≥0.70時，表示HSP患兒并發(fā)腎炎；模型預測準確度為90.13%，靈敏度為89.72%，特異度為87.66%，見表4。

通過十字交叉驗證法對上述模型的穩(wěn)定性進行驗證，結果顯示，上述模型的訓練集、驗證集參數(shù)非常接近，提示模型具有良好的預測性能。利用Nagelkerke R2對模型的擬合程度進行評價，結果顯示，當Nagelkerke R2=0.493時，模型的擬合程度最優(yōu)，見表5。

3討論

3.1 HSP的研究背景

HSP是一種由食物、藥物、病原體感染、遺傳等因素引起的血管炎疾病，以循環(huán)免疫復合物異常累積為主要特征，常見于兒童和青少年時期［10-11］。根據(jù)發(fā)病部位和癥狀表現(xiàn)，臨床上將HSP分為單純型、混合型、關節(jié)型、腹型、腎型等多種類型［12］。近年來，HSP的發(fā)病率逐漸增加，這與現(xiàn)代人的日常生活和飲食習慣密不可分［13］。在HSP發(fā)病初期，相關病癥不會表現(xiàn)在皮膚上，臨床上診斷比較困難，極易出現(xiàn)誤診的情況，導致患兒錯過最佳治療時機，嚴重者會引發(fā)腎損傷［14］。HSPN是HSP最為嚴重的并發(fā)癥之一，癥狀表現(xiàn)為全身不適、發(fā)熱、頭痛、皮膚紫癜、血尿、蛋白尿等［15］。HSPN早期癥狀較為隱匿，臨床上僅檢測尿常規(guī)和血常規(guī)難以診斷［16］。目前，多數(shù)HSPN患兒的治療效果比較理想，但仍有部分患兒腎損傷程度較大，導致臨床療效和預后較差［17］。ASC、NLRP3是炎癥體的重要組成部分［18-19］。本研究進一步探討了外周血單個核細胞中ASC mRNA和NLRP3 mRNA表達水平與HSP患兒并發(fā)腎炎的關系，以期為提高HSP臨床治愈率和改善患兒預后提供理論依據(jù)。

3.2 ASC mRNA和NLRP3 mRNA與HSP患兒并發(fā)腎炎的關聯(lián)性分析

本研究顯示，觀察組與對照組的BMI、WBC、PLT、RBC、NEU、CRP、TG、Scr、BUN、mALB、FIB、FDP、D-D、LDL-C、IgA、IgG、IgM、IL-16、IL-18、IGF-1、IGFBP-3、CysC、TM、vWF、sVCAM-Ⅰ、CTGF、MMP9、ASC mRNA、NLRP3 mRNA比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），提示對于HSP患兒并發(fā)腎炎，除血常規(guī)和尿常規(guī)外，臨床上還需監(jiān)測免疫球蛋白、炎癥性細胞因子、腎炎標志物等指標的變化情況。本研究顯示，ASC mRNA、NLRP3 mRNA與HSP均存在關聯(lián)，提示臨床可通過藥物治療，抑制ASC mRNA和NLRP3 mRNA表達水平，以減緩HSP的發(fā)生。本研究中進一步分析顯示，高ASC mRNA和高NLRP3 mRNA表達水平均與HSP存在明顯關聯(lián)。ASC和NLRP3作為炎癥體的重要組成部分，在機體炎癥反應中發(fā)揮著關鍵作用。本研究結果進一步證實了其在HSP發(fā)病過程中的重要作用，提示抑制ASC和NLRP3表達可能成為治療HSP的新靶點。

本研究顯示，HSPN組、HSP組和對照組的BMI、WBC、PLT、RBC、NEU、CRP、TG、Scr、BUN、mALB、FIB、FDP、D-D、IgA、IgG、IgM、IL-16、IL-18、IGF-1、IGFBP-3、CysC、TM、vWF、sVCAM-Ⅰ、CTGF、MMP9、ASC mRNA、NLRP3 mRNA比較，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。多因素Logistic回歸模型分析顯示，Scr≥92.16μmol/L、BUN≥7.74mmol/L、mALB≥0.58mg/L、D-D≥1.12mg/L、IgA≥2.54g/L、IGF-1≥0.77ng/L、IGFBP-3≥0.74ng/L、CysC≥2.23ng/L、sVCAM-Ⅰ≥111.37ng/L、MMP9≥23.71ng/L、ASC mRNA≥22.55和NLRP3 mRNA≥21.98均是HSP患兒并發(fā)腎炎的危險因素（P＜0.05）。這些危險因素主要涉及蛋白質代謝、凝血纖溶系統(tǒng)、炎癥反應和腎炎標志物等方面，為HSP患兒并發(fā)腎炎的預測和干預提供了重要依據(jù)。Scr和BUN是蛋白質的主要代謝產(chǎn)物。HSP是由IgA介導的自限性免疫疾病，在HSP病程發(fā)展中，凝血纖溶系統(tǒng)具有重要意義［20］。IGF-1和IGFBP-3是細胞分泌的蛋白多肽物質，能夠促進細胞增殖、分化，刺激炎癥反應［21］。CysC、sVCAM-Ⅰ、MMP9是腎炎標志物，其與HSP密切相關［22］。此外，ASC和NLRP3也被證實參與了機體發(fā)熱炎癥反應［23］。本研究采用限制性立方樣條模型分析顯示，ASC mRNA、NLRP3 mRNA均與HSP患兒并發(fā)腎炎存在關聯(lián)，且存在非線性的劑量-反應關系。這提示ASC mRNA、NLRP3 mRNA可作為HSP患兒并發(fā)腎炎的預測指標。本研究結果與其他相關研究結果存在一定的相似性和差異性。有研究表明，ASC和NLRP3在機體炎癥反應中具有重要作用［24］，這與本研究的結果一致。然而，對ASC和NLRP3在HSP發(fā)病過程中的具體作用機制方面，有研究認為ASC和NLRP3主要參了與HSP的炎癥反應過程［25］，而本研究則進一步揭示了ASC mRNA和NLRP3 mRNA與HSP患兒并發(fā)腎炎的關聯(lián)性。本研究以HSP患兒并發(fā)腎炎的危險因素構建了預測模型，并對其穩(wěn)定性進行了驗證，模型具有良好的預測精準度。

綜上所述，HSP患兒外周血單個核細胞中ASC mRNA、NLRP3 mRNA表達水平與患兒并發(fā)腎炎有關聯(lián)。臨床上應加強對ASC mRNA、NLRP3 mRNA表達水平的監(jiān)測，以減少HSP患兒并發(fā)腎炎的發(fā)病率，改善患兒預后。本研究的樣本量較小，且樣本數(shù)據(jù)來源于單中心，具有一定的局限性，因此后續(xù)研究應增加樣本量以支撐研究結果。

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［專業(yè)責任編輯：肖延風］

［中文編輯：王懿；英文編輯：楊周岐］