摘 要：非洲豬瘟（African swine fever，ASF）是一種侵襲家豬和野豬的傳染性疾病，對(duì)全球養(yǎng)豬業(yè)和許多國(guó)家的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)構(gòu)成了重大威脅。盡管對(duì)該病進(jìn)行了大量的研究，但尚未研制出有效的疫苗。自2007年以來(lái)，非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）一直在東歐和中歐的豬群中流行，覆蓋范圍越來(lái)越大。截至2018年，ASF還在東南亞以前所未有的規(guī)模蔓延，幾乎摧毀了一些國(guó)家的養(yǎng)豬業(yè)，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。ASFV對(duì)環(huán)境有高度的耐受性，加上缺乏合法的疫苗，這些因素對(duì)ASF的傳播發(fā)揮了關(guān)鍵性作用。因此，豬場(chǎng)的生物安全和消毒是防止ASFV侵入的唯一有效手段。選擇有效的消毒劑并正確使用，同時(shí)考慮環(huán)境條件、接觸時(shí)間、pH范圍和溫度等因素，對(duì)消毒結(jié)果有至關(guān)重要的影響。ASF在家畜流行病中很重要，但關(guān)于不同消毒劑對(duì)ASFV殺滅效果的信息很少。在本綜述中，我們利用生物安全原則，特別是消毒原則，總結(jié)了ASF的傳播、蔓延和疫情控制的最新知識(shí)，包括基于波蘭對(duì)ASF防控方面的經(jīng)驗(yàn)和觀點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：非洲豬瘟；消毒；生物安全

中圖分類號(hào)：S858. 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1001-0769（2024）05-0001-10

養(yǎng)豬業(yè)是波蘭畜牧業(yè)中重要的分支之一，對(duì)該國(guó)的糧食經(jīng)濟(jì)做出了重大貢獻(xiàn)。2017年，波蘭的豬肉產(chǎn)量占其肉類總產(chǎn)量的35％以上，僅次于禽肉產(chǎn)量（占肉類總產(chǎn)量48％以上）。根據(jù)波蘭中央統(tǒng)計(jì)局的數(shù)據(jù)，2021年12月該國(guó)生豬存欄量為10 242.4萬(wàn)頭，比上一年度同期下降了12.7％。存欄量的減少發(fā)生在所有生產(chǎn)階段的豬群上，尤其是母豬群，其減少幅度達(dá)20.6％。導(dǎo)致波蘭養(yǎng)豬缺乏盈利能力的主要原因之一是傳染性疾病的發(fā)生，特別是那些依據(jù)職權(quán)控制的疾病，如非洲豬瘟（African swine fever，ASF）。

ASF是影響家豬和野豬最危險(xiǎn)的傳染性病毒病之一。雖然ASF的傳播速度較慢，但與經(jīng)典豬瘟（classical swine fever，CSF）不同，ASF會(huì)不斷擴(kuò)大影響范圍。在受感染的豬群中，ASF能夠影響很大比例的個(gè)體，但不會(huì)影響大多數(shù)動(dòng)物，這使在感染早期對(duì)ASF的診斷研究變得復(fù)雜。在沒有其他人為因素的情況下，在受感染的野豬群中，ASF以每年10～12 km的速度傳播；除其他因素外，在波蘭和其他動(dòng)物流行病國(guó)家中疾病的長(zhǎng)距離（長(zhǎng)達(dá)幾百公里）傳播中起著關(guān)鍵作用。

ASF由世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（world organisation for animal health，WOAH）進(jìn)行官方控制和通報(bào)。ASF會(huì)影響全球許多生豬和豬肉出口國(guó)的經(jīng)濟(jì)，以及當(dāng)?shù)氐纳i生產(chǎn)。

2014年，波蘭暴發(fā)了ASF疫情，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)達(dá)8年。在靠近白俄羅斯共和國(guó)邊境處，野豬暴發(fā)了ASF，隨后ASF在野豬群中傳播，并在豬場(chǎng)中暴發(fā)。為了控制ASF，該國(guó)的養(yǎng)豬方式發(fā)生了重大變化。這一變化包括關(guān)閉許多小型和庭院式豬場(chǎng)，因?yàn)檫@些豬場(chǎng)無(wú)法引入所需的生物安全措施。值得一提的是，2015年，波蘭大約有25萬(wàn)家豬場(chǎng)；到2021年，僅剩下約8.47萬(wàn)家。隨著時(shí)間的推移，盡管養(yǎng)豬生產(chǎn)者不斷提高對(duì)生物安全的認(rèn)識(shí)，認(rèn)為這是保護(hù)豬群免受ASF侵害的主要措施。但根據(jù)Gobarto S A分析師匯編的數(shù)據(jù)，波蘭的ASF疫情并沒有得到明顯改善。2021年第一季度，波蘭約有23 000個(gè)工作崗位被撤銷，占全國(guó)養(yǎng)豬業(yè)崗位總數(shù)的20％以上；同時(shí)，在2021年的前四個(gè)月，生豬存欄量與1月份（2021年）相比減少了10％，約為1.020億頭。據(jù)波蘭農(nóng)業(yè)食品行業(yè)的分析師稱，與ASF相關(guān)的對(duì)波蘭豬肉出口的限制，以及由此導(dǎo)致的重要出口市場(chǎng)（如中國(guó)、韓國(guó)和日本）的丟失，導(dǎo)致豬肉出口量減少了14％。這一減少導(dǎo)致該行業(yè)每年平均損失近6.270億歐元。

ASFV結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因型多樣，環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)，因此給疫苗開發(fā)帶來(lái)了巨大困難，使該病的傳播難以得到有效的控制。由于缺乏安全有效的疫苗及有效的治療方法，ASF不斷使疫區(qū)國(guó)家的豬群大量死亡，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失?？紤]到豬肉在肉類生產(chǎn)中的重要性，保持養(yǎng)豬業(yè)適當(dāng)?shù)纳a(chǎn)水平是糧食經(jīng)濟(jì)的一個(gè)戰(zhàn)略目標(biāo)，而保持豬場(chǎng)擁有足夠高的福利和生物安全水平可以確保這一目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)。目前，似乎有必要對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行生物安全和消毒培訓(xùn)。

1 ASF的歷史概況與流行情況

Eustace Montgomery于1921年首次描述了在肯尼亞發(fā)生的一種高度傳染性、致命性的豬病，該病被稱為ASF。多年來(lái)，ASF只在撒哈拉以南的非洲地區(qū)流行，但在1957年，由于人類活動(dòng)，該病傳入葡萄牙。這是ASF首次傳入歐洲，由基因Ⅰ型ASFV毒株引發(fā)。在接下來(lái)的幾年中，其他國(guó)家也暴發(fā)了ASF：西班牙（1960年）、法國(guó)（1986年）、意大利（1967、1969和1993年）、馬耳他（1978年）、比利時(shí)（1985年）和荷蘭（1986年）。伊比利亞半島花了將近40年才根除ASF。自該病首次傳入歐洲以來(lái)，ASF一直在撒丁島流行。2021年，撒丁島總統(tǒng)Francesco Pigliaru通過控制放養(yǎng)的布拉多豬場(chǎng)成功根除了基因Ⅰ型ASFV毒株引發(fā)的疾病，宣布該島根除ASF。不幸的是，2022年1月，在意大利西北部皮埃蒙特地區(qū)一頭死亡的野豬中分離到了基因Ⅱ型ASFV毒株。這次疫情暴發(fā)地距離歐洲（德國(guó)東部）最近暴發(fā)的疫情暴發(fā)地大約800 km，隨后該地又暴發(fā)過三次疫情。不幸的是，最近的報(bào)告已證實(shí)，撒丁島上的Dorgali豬場(chǎng)首次暴發(fā)了ASF疫情（基因Ⅱ型）。

歐洲首次發(fā)生ASF疫情后，2007年，格魯吉亞暴發(fā)了ASF疫情（基因Ⅰ型）。ASFV從東非傳入歐洲的原因可能是部分國(guó)家接收了被病毒污染的豬或廢棄泔水，這些廢棄泔水在到達(dá)格魯吉亞波季港后被喂給豬，ASFV從當(dāng)?shù)匮杆賯鞑サ狡渌麌?guó)家，包括亞美尼亞、阿塞拜疆（2007年）、俄羅斯（2008年）、烏克蘭（2012年）和白俄羅斯（2013年）。隨后，2014年，歐盟內(nèi)部證實(shí)了ASF的存在，包括立陶宛、拉脫維亞、愛沙尼亞和波蘭。隨后幾年，ASF傳播蔓延至羅馬尼亞（2017年）、捷克共和國(guó)（2017年）、摩爾多瓦、比利時(shí)、保加利亞（2018年）、斯洛伐克（2019年）、塞爾維亞（2019年）、德國(guó)（2020年）、希臘（2020年），最近又傳播至多米尼加共和國(guó)和海地（2021年）。2022年，意大利也確診了ASF，在此之前，ASF在該國(guó)已消失40年之久。2022年1月，北馬其頓和泰國(guó)首次報(bào)道發(fā)生了ASF；2022年3月，尼泊爾也首次報(bào)道發(fā)生了ASF。目前，在波斯尼亞和黑塞哥維那、克羅地亞和科索沃共和國(guó)的豬場(chǎng)以及新加坡的野豬和進(jìn)口生豬中首次確診ASF。

2018年，亞洲多個(gè)國(guó)家首次報(bào)道了ASF疫情。這導(dǎo)致該病向其他鄰國(guó)或地區(qū)傳播蔓延：柬埔寨、中國(guó)香港、印度尼西亞、越南、老撾、蒙古、中國(guó)臺(tái)灣、朝鮮、韓國(guó)、緬甸、東帝汶、菲律賓和俄羅斯。

自2005年以來(lái)，非洲、歐洲和亞洲已超過74個(gè)國(guó)家發(fā)生了ASF，美洲和大洋洲再次出現(xiàn)了該病。根據(jù)2021年WOAH發(fā)布的一份報(bào)告，ASF在36個(gè)國(guó)家仍處于流行狀態(tài)，其中歐洲13個(gè)、亞洲16個(gè)、非洲3個(gè)、拉丁美洲2個(gè)和大洋洲2個(gè)。迄今為止，歐盟只有兩個(gè)國(guó)家成功根除了野豬群中的ASF。捷克共和國(guó)是在2018年4月最后一次發(fā)現(xiàn)野豬感染ASF，而比利時(shí)是在2020年3月。根據(jù)WOAH的報(bào)告，這兩個(gè)國(guó)家都重新恢復(fù)到無(wú)ASF的狀態(tài)。然而，捷克共和國(guó)于2022年12月再次暴發(fā)ASF，迄今為止未能控制該病。

波蘭于2014年2月首次在靠近白俄羅斯共和國(guó)邊境的波德拉斯基省東部地區(qū)發(fā)現(xiàn)了ASF，是由位于波德拉斯基省的波蘭國(guó)家獸醫(yī)研究所（PIWet PIB）ASF國(guó)家參考實(shí)驗(yàn)室人員在一頭野豬尸體中檢測(cè)到的。

到2016年，ASF在波蘭全國(guó)范圍內(nèi)緩慢但持續(xù)地傳播，覆蓋了另外兩個(gè)東部地區(qū)——波德拉斯基省和盧貝爾斯基省——以及位于中部的馬佐維亞省。馬佐維亞省出現(xiàn)的ASF很可能是由人類活動(dòng)造成的，因?yàn)樵摰貐^(qū)距離最近暴發(fā)ASF疫情的野豬群至少100 km。2018年，ASF越過了瓦米安-馬蘇里安省和次喀爾巴阡省的北部邊界。據(jù)估計(jì)，2019年，即首次確診野豬暴發(fā)ASF疫情后的5年，波蘭近25％的地區(qū)處于疫區(qū)。野豬和家豬暴發(fā)ASF的次數(shù)逐漸增加，分別在2020年和2021年達(dá)到了最大值，隨后出現(xiàn)了一定程度的減少（圖1）。

2019年，在盧布斯基省（距離最近的ASF疫區(qū)約300 km）發(fā)現(xiàn)首例野豬感染ASF病例后，波蘭加強(qiáng)了被動(dòng)監(jiān)測(cè)（搜索因ASF而死亡的野豬）和主動(dòng)監(jiān)測(cè)，包括在盧布斯基省、大波蘭地區(qū)和下西里西亞省進(jìn)行獵殺。因此，截至2020年2月底，在“發(fā)現(xiàn)死亡”和“獵殺死亡”的野豬中，確認(rèn)發(fā)生了878起ASF疫情。波蘭從2014年暴發(fā)ASF到2022年底，共發(fā)現(xiàn)了502例家豬病例，15 307例野豬病例。盡管養(yǎng)豬業(yè)實(shí)施了嚴(yán)格限制和生物安全措施，但ASF繼續(xù)傳播蔓延，并對(duì)豬肉生產(chǎn)構(gòu)成了真正的風(fēng)險(xiǎn)。同樣重要的是，由于人類活動(dòng)ASFV有可能遠(yuǎn)距離傳播，傳入以前沒有發(fā)生過ASF的地區(qū)和國(guó)家。

2 病原體

ASFV是一種大型有包膜的DNA病毒，其復(fù)制周期發(fā)生在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中[核質(zhì)大型DNA病毒（nucleocytoplasmic large DNA viruses，NCLDV）]。ASFV隸屬于ASFV科ASFV屬，病毒粒子呈二十面體，直徑為260～300 nm。病毒粒子的中央是含有遺傳物質(zhì)的核球，其形式為雙鏈DNA（dsDNA），由核蛋白核心、內(nèi)部脂質(zhì)包膜、衣殼和外部脂質(zhì)包膜所裹。病毒粒子最外層的衣殼由2 760個(gè)六聚體和12個(gè)五聚體蛋白衣殼組成。外部脂質(zhì)包膜是在離開受感染的單核巨噬細(xì)胞譜系宿主細(xì)胞后形成的。

ASFV基因組是一個(gè)長(zhǎng)170～193 kb的雙鏈DNA，共有151～167個(gè)開放閱讀框（open reading frame，ORF）。基因組的中心部分是中央保守區(qū)（central conservative region，CCR），長(zhǎng)約125 kb，其中包含一個(gè)400 bp長(zhǎng)的可變片段，稱為中央可變區(qū)（central variable region，CVR）。CCR由左可變區(qū)（left variable region，LVR）和右可變區(qū)（right variable region，RVR）組成。它們的特點(diǎn)是遺傳變異性高，可決定基因組的最終長(zhǎng)度。

3 宿主范圍和ASFV載體

易感染ASFV的物種隸屬于豬科（Suidae），包括家豬（Sus scrofa f. domestica）、野豬（Sus scrofa）、疣豬（Phacochoerus aethiopicus）、紅河豬（Potamochoerus porcus）和野生灌叢豬（Hylochoerus meinertzhageni）。此外，在亞太地區(qū)的地方性野生物種也被證實(shí)感染了ASFV，包括須豬（Sus barbatus）和菲律賓疣豬（Sus philippensis）。

ASFV傳入家豬或野豬群后臨床表現(xiàn)出的特征是高傳染性和高死亡率，但該病也可能從流行病轉(zhuǎn)變?yōu)榈胤讲?，如目前在拉脫維亞和愛沙尼亞以及20世紀(jì)70年代的撒丁島發(fā)生的情況一樣。盡管撒丁島在2018年和2019年分別最后一次報(bào)告了家豬和野豬ASF疫情，但其無(wú)ASF疫情的地位尚未得到正式確認(rèn)。在其他動(dòng)物（疣豬、河豬和野生灌叢豬）中，ASF可能呈亞臨床型，因此，這些物種是環(huán)境中ASFV的宿主。Frant等（2017）證實(shí)，ASFV存在于非洲和歐洲南部（葡萄牙、西班牙、意大利和希臘）常見的鈍緣蜱屬（Ornithodoros spp. genus）中的軟蜱中，并能夠復(fù)制。在已證實(shí)發(fā)生在非洲的所謂森林循環(huán)中，蜱蟲因攝入受感染疣豬的血液而成為病毒的宿主。蜱蟲也可以是一種生物媒介，通過子宮、卵巢或性途徑在節(jié)肢動(dòng)物體內(nèi)傳播。在上述節(jié)肢動(dòng)物中，ASFV的傳染性可持續(xù)數(shù)月到8年，因此軟蜱是環(huán)境中病毒的天然宿主。

在歐洲，ASFV的主要宿主是歐亞野豬，可通過兩種方式傳播：一是感染動(dòng)物之間的直接接觸，二是接觸野豬的尸體或感染動(dòng)物的其他肉品來(lái)源，如垃圾箱。ASFV還可以通過氣溶膠進(jìn)行短距離的傳播。由于種豬的感染存在季節(jié)性，最近Fila等（2020）和Olesen等（2018）分別研究了昆蟲在ASF傳播中所起的作用。迄今為止，ASFV通過在波蘭和中歐國(guó)家中發(fā)現(xiàn)的硬蜱（蓖麻硬蜱和網(wǎng)狀革蜱）傳播的可能性尚未得到證實(shí)，但在采血后8周內(nèi)仍可在這些硬蜱中檢測(cè)到ASFV的遺傳物質(zhì)。同樣，對(duì)于歐洲自然界中常見的蒼蠅和蚊子，例如穩(wěn)定蒼蠅（Stomoxys calcitrans）、家蠅（Musca domestica）、果蠅屬的蒼蠅和蚊子（Culicidae），盡管在這些昆蟲體表檢測(cè)到了ASFV的遺傳物質(zhì)，但豬要感染ASFV只能通過采食在12 h內(nèi)吸食了含有ASFV血液的昆蟲才發(fā)生。因此，可以得出結(jié)論，在溫帶氣候中，蒼蠅和蚊子不是ASFV傳播的重要媒介。人的因素在疾病的傳播中可能發(fā)揮著重要作用，如以前無(wú)ASF疫區(qū)的野豬暴發(fā)ASFV的病例所證明的那樣，距離最近的野豬或家豬ASF暴發(fā)地?cái)?shù)百千米（馬佐維亞和盧布斯基），因此，可以合理地推斷導(dǎo)致ASF在如此遠(yuǎn)的距離上傳播的原因是，例如，運(yùn)輸動(dòng)物卡車的車輪受污染或殘留在森林中的肉類受污染，野豬曾以這些肉類為食。根據(jù)與這些動(dòng)物的行為和活動(dòng)相關(guān)的數(shù)據(jù)，可以知道它們遷移到20 km或更遠(yuǎn)的地區(qū)是不現(xiàn)實(shí)的。

4 ASFV對(duì)物理和化學(xué)試劑的敏感性

多年來(lái)，許多科學(xué)家一直在研究ASFV的易感性和穩(wěn)定性。研究證明，ASFV對(duì)環(huán)境條件具有很高的抵抗力，在低于0 ℃的溫度下仍能長(zhǎng)時(shí)間保持傳染性。同樣，在－70 ℃條件下，ASFV能夠存活數(shù)年，且滴度和傳染性不會(huì)顯著下降。當(dāng)ASFV污染的肉類保存在－20 ℃時(shí)，觀察到ASFV滴度系統(tǒng)性降低，但仍至少可保持2年的傳染性。此外，ASFV還可以在多次凍融循環(huán)條件下存活，并且在pH 4～13的范圍內(nèi)保持穩(wěn)定，在56 ℃下數(shù)小時(shí)內(nèi)仍具有傳染性。將ASFV污染的肉類腌制或晾干（類似于帕爾馬、伊比利亞或塞拉諾火腿所經(jīng)歷的過程），病毒仍可存活一年以上。ASFV具有高度的穩(wěn)定性，能夠在肉類或泔水中長(zhǎng)期存活，因此這些物質(zhì)在ASF的長(zhǎng)距離傳播中發(fā)揮載體作用。這是ASFV進(jìn)入非疫區(qū)的常見途徑之一。例如，2007年在格魯吉亞暴發(fā)的ASF疫情就是由從非洲運(yùn)來(lái)受污染的食物泔水飼喂豬引起的。ASFV在感染野豬尸體中持續(xù)存在是一個(gè)值得討論的主題。然而，由于野豬尸體中的病毒載量很高，其在ASF傳播中的作用不容忽視。由于需要積極尋找野豬尸體等因素，控制該病的傳播極為困難。此外，研究證明，一年四季的溫度對(duì)野豬尸體的腐爛速度有相當(dāng)大的影響。隨著環(huán)境溫度的升高，殘骸分解的時(shí)間會(huì)變短，從夏季的8 d到冬季的37 d。這可能會(huì)影響野豬發(fā)生ASF的季節(jié)性，其中冬季的暴發(fā)次數(shù)最多。ASFV高存活率也是影響豬場(chǎng)豬群的一個(gè)重要因素。研究證明，排出的ASFV仍保持傳染性，4 ℃下，糞便中病毒的傳染性可保持8 d，37 ℃下可保持3～4 d；尿液中的病毒，在4 ℃下可保持15 d，在21 ℃下可保持5 d，在37 ℃下可保持2～3 d。

此外，Olesen等通過一項(xiàng)研究證實(shí)，移除病死豬一天后，新進(jìn)入豬圈的豬仍可能會(huì)感染ASFV。在這種情況下，豬接觸被含ASFV的排泄物污染的環(huán)境可能是間接感染的原因。例如，在西班牙，Pejsak等（2017）在4個(gè)月前撲殺過患病豬的豬舍中檢測(cè)到了ASFV。Mazur-Panasiuk等（2019）指出，含有ASFV的排泄物應(yīng)該是病毒傳播的一個(gè)重要因素，特別是在豬群和豬場(chǎng)內(nèi)。

Cycle（2013）證明，通過高溫（60 ℃ 20 min或56 ℃ 70 min）、改變pH（小于3.9或大于11.5）或使用已被證明有效的消毒劑，可有效滅活A(yù)SFV。

5 疾病控制：通過行政手段防治ASF

ASF被認(rèn)為是最危險(xiǎn)的豬病之一，會(huì)嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)，因此被列入WOAH的疾病清單；歐盟和歐洲以外的多個(gè)國(guó)家對(duì)其控制進(jìn)行了嚴(yán)格的規(guī)定。所采取的措施包括監(jiān)測(cè)、流行病學(xué)調(diào)查和控制豬群的流動(dòng)（家豬和野豬），以撲殺野豬和受ASF疫情影響的家豬。嚴(yán)格落實(shí)檢疫和遵守生物安全原則，以及使用經(jīng)過證實(shí)有效的消毒劑是必不可少的。由于發(fā)現(xiàn)因ASF而死亡的豬尸體的地方不同（野豬往往死于森林或豬場(chǎng)中，家豬常病死于豬場(chǎng)），對(duì)發(fā)現(xiàn)疫情的區(qū)域（環(huán)境）采用的消毒方法沒有通用的方案。如果豬場(chǎng)確診暴發(fā)了ASF，則要對(duì)所有豬進(jìn)行撲殺和處理，同時(shí)對(duì)飼養(yǎng)動(dòng)物的設(shè)施進(jìn)行清洗和消毒，使用對(duì)ASFV具有殺滅作用的消毒劑。獸醫(yī)檢查后應(yīng)采取相應(yīng)的措施，以減少將疾病傳播到更多豬場(chǎng)或其他實(shí)體（如肉類加工廠和飼料公司）的可能性。還應(yīng)核實(shí)每個(gè)案例是否遵循了生物安全原則，因?yàn)檫@是獲得賠償金所必需的。根據(jù)歐盟委員會(huì)的指導(dǎo)方針，已經(jīng)出臺(tái)了一些與ASF區(qū)域標(biāo)識(shí)有關(guān)的規(guī)定。目前，與控制疾病暴發(fā)有關(guān)的條例沒有改變，Ⅰ區(qū)以藍(lán)色標(biāo)示，Ⅱ區(qū)以粉色標(biāo)示，Ⅲ區(qū)以紅色標(biāo)示。在ASF暴發(fā)周圍劃定紅色區(qū)域（最小半徑為3 km）和粉色區(qū)域（在紅色區(qū)域外至少7 km）（圖2）。這些地區(qū)內(nèi)的豬場(chǎng)分別被禁止在40 d和30 d內(nèi)運(yùn)送豬，在此之后，只有在獲得當(dāng)?shù)孬F醫(yī)的許可后，才能將豬群從豬場(chǎng)中轉(zhuǎn)運(yùn)出去。此外，在限制區(qū)域，必須在計(jì)劃移動(dòng)豬群前15 d內(nèi)對(duì)豬群進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，并在屠宰前24 h進(jìn)行臨床檢查（針對(duì)藍(lán)區(qū)和紅區(qū)內(nèi)的豬群）；粉色區(qū)豬群在轉(zhuǎn)出和屠宰前進(jìn)行檢測(cè)即可。在完成消毒程序40 d后，可以重新安置之前確診暴發(fā)ASF的豬場(chǎng)，但在重新安置后，新入的豬群必須進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，以檢測(cè)ASFV抗體。

6 野豬群中ASF的預(yù)防、監(jiān)測(cè)和調(diào)控

行政行動(dòng)必須得到項(xiàng)目支持，以監(jiān)測(cè)家豬和野豬群的流行病學(xué)情況。檢測(cè)ASF的經(jīng)驗(yàn)表明，被動(dòng)監(jiān)測(cè)，即尋找和檢查野豬尸體，是最有效的。在紅色區(qū)（限制區(qū)Ⅲ），ASFV遺傳物質(zhì)陽(yáng)性的胴體比例超過60.0％，而主動(dòng)監(jiān)測(cè)（檢查被射殺的野豬）在同一區(qū)域顯示的陽(yáng)性結(jié)果約0.8％，證明這種方法對(duì)確定野豬群中與ASF相關(guān)的當(dāng)前流行狀況的用處并不大。然而，主動(dòng)監(jiān)測(cè)是ASF全面監(jiān)測(cè)計(jì)劃的重要組成部分，因?yàn)樵跊]有臨床體征的野豬體內(nèi)檢測(cè)到病毒，可以及早發(fā)現(xiàn)疾病，隨后進(jìn)行快速干預(yù)，從而降低病毒傳播到其他地方的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)被射殺的野豬進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測(cè)也很重要，以確定ASF在豬群中的病程特征（例如，從流行病到地方性疾病的轉(zhuǎn)變）。在出現(xiàn)ASF超過8年的國(guó)家（愛沙尼亞和拉脫維亞），野豬血清陽(yáng)性的比例超過20.0％，這與波蘭的情況不同，波蘭的血清陽(yáng)性保持在1.5％～2.0％。

野豬是環(huán)境中ASFV的主要儲(chǔ)存庫(kù)，野豬數(shù)量的不斷增長(zhǎng)增加了病毒傳播到新的地理區(qū)域的機(jī)會(huì)，也增加了ASF在野外長(zhǎng)期持續(xù)存在的可能性，從而增加了引入家豬群中的風(fēng)險(xiǎn)。捷克共和國(guó)的例子表明，通過有針對(duì)性地減少疫區(qū)周圍的野豬數(shù)量，疫區(qū)很快恢復(fù)無(wú)ASF狀態(tài)（自2018年以來(lái)），這說明對(duì)野豬進(jìn)行密集撲殺能夠迅速消滅ASF。不幸的是，2022年12月，ASF重返捷克共和國(guó)，在野豬群中再次檢測(cè)到了ASFV。因此，這些措施只有在病原體“定點(diǎn)”引入野豬群的情況下才有效。比利時(shí)（自2020年起成為無(wú)ASF國(guó)家）實(shí)施的組合式控制措施，包括圍欄、狙擊射擊和誘捕野豬，以及最重要的尋找和處理野豬尸體，其強(qiáng)度與流行病學(xué)情況相適應(yīng)，目前被認(rèn)為是控制ASF的有效措施。盡管對(duì)野豬進(jìn)行徹底射殺存在爭(zhēng)議，但這是歐洲食品安全局（European Food Safety Authority，EFSA）等機(jī)構(gòu)推薦的從野生動(dòng)物種群中根除ASF的有效措施之一。然而，考慮到受ASF影響的國(guó)家的經(jīng)驗(yàn)，不可能采用完全有效的野豬滅絕策略。

7 開發(fā)ASF疫苗的前景

盡管針對(duì)ASF的疫苗已經(jīng)研究了幾十年，但尚未成功研制出一種安全的商業(yè)化疫苗。難以開發(fā)出有效的疫苗與ASFV擁有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)、能夠逃避宿主的免疫應(yīng)答以及受感染或接種疫苗的豬缺乏誘導(dǎo)產(chǎn)生完全中和病毒的抗體有關(guān)。另一項(xiàng)挑戰(zhàn)是通過開發(fā)出一套策略，基于兼容的診斷測(cè)試（分子學(xué)和血清學(xué)），可靠地區(qū)分接種疫苗的動(dòng)物和自然感染的動(dòng)物（DIVA策略，區(qū)分自然感染的動(dòng)物和接種疫苗的動(dòng)物）。如使用感染ASFV的細(xì)胞培養(yǎng)物的勻漿、含有被感染的外周血白細(xì)胞的上清液、純化的滅活A(yù)SFV病毒顆粒、含或不含佐劑的滅活毒株。在實(shí)驗(yàn)接種和自然感染豬中，減毒株和基于肽結(jié)構(gòu)的疫苗未能使豬獲得針對(duì)ASF的充分保護(hù)。最有希望的結(jié)果是利用經(jīng)過基因修飾的減毒株獲得，因?yàn)樗鼈兛烧T導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。

2020年，ASF疫苗的研發(fā)取得了突破性進(jìn)展。來(lái)自美國(guó)普拉姆島的研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表了基于177L基因缺失的病毒株疫苗（ASFV-G-DⅠ177L）的研究結(jié)果。目前，這種ASFV基因缺失株是開發(fā)ASF疫苗最有希望的候選株，因?yàn)樗烧T導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生對(duì)ASFV亞洲和歐洲變異株的免疫力。在研究期間，觀察到三分之一的受試豬在接種ASF疫苗后的第2周表現(xiàn)出對(duì)ASFV的免疫力，而在應(yīng)用實(shí)驗(yàn)疫苗后的第4周，所有的豬都達(dá)到了完全免疫。2021年，該研究團(tuán)隊(duì)還進(jìn)行了一項(xiàng)通過口-鼻途徑接種實(shí)驗(yàn)性疫苗的研究。結(jié)果證明，通過這種途徑接種疫苗的豬對(duì)ASFV感染具有免疫力，為未來(lái)開發(fā)有效的野豬用疫苗帶來(lái)了希望。另外，至少還有兩種重要的候選疫苗株。第一種候選疫苗“ASFV-G-DMGF”被用于野豬的口服接種和家豬的肌內(nèi)免疫。然而，在家豬中，候選疫苗在接種兩次后可誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生完全免疫；在口服的野豬中，50％的野豬出現(xiàn)了血清轉(zhuǎn)換；在剩余的一組野豬中，2頭發(fā)生了急性致死性感染，2頭出現(xiàn)了輕度和短暫的病程。另一種原型疫苗ASFV HLJ/18-7GD是通過敲除7個(gè)基因獲得的，接種后可對(duì)致死性ASF感染產(chǎn)生完全免疫力。此外，在家豬上沒有觀察到候選疫苗株毒力可能恢復(fù)的跡象，但該原型疫苗株仍需在野豬上進(jìn)行測(cè)試，因?yàn)橐柏i是ASF在歐洲豬群中傳播的一個(gè)主要問題。盡管結(jié)果令人興奮，但開發(fā)出來(lái)的候選疫苗株仍需通過一系列安全性、副作用、潛在的穩(wěn)定性測(cè)試，最重要的是在田間條件下的功效測(cè)試，然后才能上市。此外，要將疫苗推向市場(chǎng)，必須修改歐盟禁止治療和接種ASF疫苗的現(xiàn)行立法。然而，最近有新聞報(bào)道稱，越南政府已將兩種國(guó)產(chǎn)ASF疫苗商業(yè)化：基于ASFV-G-ΔⅠ177L株的NAVET-ASFVAC疫苗和基于ASFV-G-Δ-MGF株的AVAC ASF LIVE疫苗。遺憾的是，發(fā)現(xiàn)三種新的基因Ⅰ型和Ⅱ型ASFV重組體的報(bào)道并不令人樂觀，因?yàn)樗鼈兛赡軙?huì)對(duì)疫苗的效力造成額外的重大問題。因此，目前，疾病的早期識(shí)別、可靠和快速的實(shí)驗(yàn)室診斷、對(duì)感染ASFV的豬群進(jìn)行行政撲殺，以及采用官方根除方法所規(guī)定的生物安全措施，在控制ASF方面發(fā)揮了關(guān)鍵作用。

8 豬群的生物安全

在缺乏有效的商業(yè)疫苗的情況下，生物安全極為重要，事實(shí)上，這是防止ASFV感染傳播的唯一有效措施。除了限制疾病在環(huán)境中的傳播外，遵守生物安全原則，可以加強(qiáng)對(duì)豬場(chǎng)的保護(hù)，防止豬群感染。多年的觀察以及先前開發(fā)的生物安全模型表明，即使是基本的生物安全標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用也可顯著減少和限制ASFV的傳播。生物安全不僅廣義地定義為與建筑物、設(shè)施內(nèi)的移動(dòng)規(guī)則和農(nóng)業(yè)設(shè)備有關(guān)的生物安全，而且更重要的是，還定義為人們和公眾對(duì)與傳染性疾病發(fā)生相關(guān)的威脅規(guī)模和可能后果的認(rèn)識(shí)。準(zhǔn)確、易理解的指南、培訓(xùn)和支持是正確應(yīng)用生物安全原則和規(guī)則的基礎(chǔ)。在豬場(chǎng)保護(hù)方面，有兩種類型的生物安全，即外部生物安全和內(nèi)部生物安全。外部生物安全是指旨在確保豬場(chǎng)不從外部環(huán)境引入病原體的措施，其中包括用柵欄圍住豬場(chǎng)，豬場(chǎng)與豬場(chǎng)之間保持適當(dāng)?shù)木嚯x，在有針對(duì)性地將新動(dòng)物引入畜群之前進(jìn)行必要的檢疫，最大限度地減少未經(jīng)許可的人進(jìn)入豬場(chǎng)，清洗和消毒每輛進(jìn)入豬場(chǎng)的車輛，防止動(dòng)物進(jìn)入飼料，保護(hù)窗戶，防止野生動(dòng)物、嚙齒動(dòng)物、家禽甚至昆蟲進(jìn)入，這些動(dòng)物偶爾會(huì)成為疾病傳播的媒介。內(nèi)部生物安全包括旨在限制疾病在豬場(chǎng)區(qū)域內(nèi)傳播的管理，包括對(duì)設(shè)施進(jìn)行消毒，根據(jù)“全進(jìn)全出”原則管理動(dòng)物的流動(dòng)，將臟區(qū)和凈區(qū)分開，更換防護(hù)服，凈區(qū)和臟區(qū)使用單獨(dú)的設(shè)備，以及實(shí)施預(yù)防計(jì)劃對(duì)豬群進(jìn)行預(yù)防性接種和管理。有效的生物安全的關(guān)鍵原則之一是使用有效的消毒技術(shù)，豬場(chǎng)工作人員和豬場(chǎng)訪客（包括獸醫(yī)）遵守既定的消毒規(guī)程。

9 消毒

在機(jī)械清洗的支持下，消毒是滅活豬病原體、防止傳染性疾病傳播的基礎(chǔ)，也是疫情暴發(fā)后豬場(chǎng)重新飼養(yǎng)前所必需的。完整的消毒過程應(yīng)包括徹底的機(jī)械清洗和正確的消毒兩步。應(yīng)清除和處理可能受到污染的物質(zhì)，如糞便、墊料、稻草和飼料，用洗滌劑徹底清洗豬舍的地板和墻壁表面，然后干燥和消毒。最佳的消毒劑應(yīng)具有作用快速、穩(wěn)定、無(wú)毒性和耐環(huán)境的特點(diǎn)，重要的是，它應(yīng)具有盡可能廣泛的殺菌和殺毒譜，可以對(duì)抗細(xì)菌、病毒和真菌。消毒時(shí)使用的參數(shù)選擇不當(dāng)（如濃度、接觸時(shí)間和應(yīng)用范圍），可能會(huì)導(dǎo)致消毒無(wú)效和失敗。應(yīng)根據(jù)制造商的說明書，使用經(jīng)過驗(yàn)證對(duì)ASFV有效的授權(quán)消毒產(chǎn)品。

由于缺乏有關(guān)抗ASFV消毒劑的準(zhǔn)確描述和詳細(xì)數(shù)據(jù)，難以推薦理想的消毒劑。不過，一些歐盟成員國(guó)已制定了一份對(duì)ASFV有效的授權(quán)消毒劑清單。這一分類是基于使用消毒劑對(duì)付包膜病毒，如馬動(dòng)脈炎病毒（equine arteritis virus，EVAV）、偽狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）和經(jīng)典豬瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）的常識(shí)和經(jīng)驗(yàn)。迄今為止，被認(rèn)為可有效滅活A(yù)SFV的化合物包括：

-1％甲醛；

-次氯酸鈉（0.007 5％～0.03％）；

-2％燒堿溶液（最強(qiáng)的消毒劑）；

-戊二醛、甲醛；

-1％氫氧化鈉或氫氧化鈣（在4 ℃懸浮液中滅活病毒）；

-酚類，如來(lái)蘇兒和克勒奧林；

-基于脂質(zhì)溶劑的化學(xué)品；

-多組分化合物，如衛(wèi)可（1∶100）、溶雙胍、德素芳（Desoform）和OD 20—表面活性劑、活性物質(zhì)、有機(jī)酸、糖醛等。

雖然以前從未測(cè)試過上述化合物對(duì)ASFV的殺滅功效，但仍被推薦為有效的化合物，通常用于生產(chǎn)市售的消毒劑。根據(jù)對(duì)其他病毒的殺滅經(jīng)驗(yàn)來(lái)假定某種消毒劑對(duì)ASFV的殺滅功效，可能會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤，導(dǎo)致災(zāi)難性后果，是因?yàn)殛P(guān)鍵的生物安全消毒過程無(wú)效，從而增加ASF傳播的風(fēng)險(xiǎn)。盡管它們?cè)诳刂萍膊鞑シ矫婢哂兄匾饬x，但直到最近，關(guān)于化合物對(duì)殺滅ASFV有效性的信息仍然很少。多年來(lái)發(fā)表的相關(guān)研究結(jié)果主要涉及所選活性物質(zhì)對(duì)不同類型物體表面上的ASFV的效力。為了澄清對(duì)迄今為止使用的消毒劑有效性的疑問，并確認(rèn)它們對(duì)ASFV的殺毒活性，Juszkiewicz等（2020）、Juszkiewicz等（2019）、Pan等（2021）、Pan等 （2021）、Paliy等（2020）分別開展了相關(guān)研究。Juszkiewicz等（2020）、Juszkiewicz等（2019）發(fā)現(xiàn)，次氯酸鈉對(duì)ASFV的殺滅效果最高，即使在濃度為0.3％和高污染條件下也有效。事實(shí)證明，氯在其組成中起關(guān)鍵作用，必須在0.5％的范圍內(nèi)，如果長(zhǎng)期儲(chǔ)存會(huì)降低活性氯的含量，從而降低次氯酸鈉的消毒效果。對(duì)ASFV有同樣高的滅活作用的化合物是燒堿，據(jù)Juszkiewicz等（2020）的研究報(bào)告，燒堿能使ASFV滅活的最終濃度為1％、2％和3％，但在高污染條件下的最低濃度除外。然而，氫氧化鈣對(duì)ASFV的滅活功效與消毒過程中的溫度范圍有關(guān)。在22 ℃下，0.2％、0.5％和1.0％的氫氧化鈣對(duì)ASFV的殺滅效果都很好；而在4 ℃下，只有0.5％和1.0％的氫氧化鈣才有效。在相同濃度（0.5％、1.0％和2.0％）下測(cè)試過氧硫酸鉀、苯酚和苯扎氯銨，不論污染水平如何，這3種化合物在濃度為1.0％時(shí)均有效，但苯扎氯銨在檢測(cè)的最高濃度（1.0％）時(shí)僅在低污染水平下才顯示出殺滅病毒的活性。在所有測(cè)試濃度下，戊二醛對(duì)ASFV具有很強(qiáng)的殺毒作用。Juszkiewicz等 （2019）、Pan等（2021）證明，ASFV能被基于碘、次氯酸鈉和過氧硫酸鉀的商用消毒劑滅活。消毒領(lǐng)域的一項(xiàng)重大創(chuàng)新是研究植物提取物及其對(duì)ASFV的殺滅能力。Juszkiewicz等（2021）證實(shí)了薄荷對(duì)ASFV有良好的滅活效果。未來(lái)，天然植物提取物的抗病毒活性可能有助于開發(fā)出生態(tài)友好型的消毒劑。

WOAH推薦了一系列滅活A(yù)SFV的消毒劑： 0.8％氫氧化鈉（30 min）、2.3％次氯酸鹽（3 min）、0.3％福爾馬林（30 min）、3％ n-苯基酚和碘化合物（30 min）。盡管WOAH提出了建議，但Juszkiewicz等（2020）的研究未能評(píng)估甲醛對(duì)ASFV的有效性，原因是甲醛對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物具有較高的細(xì)胞毒性。

除化學(xué)消毒外，在60 ℃下30 min、在pH＜ 3.9或＞11.5的無(wú)血清培養(yǎng)基中，ASFV可被滅活。Zhang等（2020）在一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)，臭氧水對(duì)ASFV也有殺滅作用。然而，只有5 mg/L的臭氧水能夠?qū)⒉《镜味冉档偷剿璧南緲?biāo)準(zhǔn)4log10。

10 小結(jié)

由于ASF的持續(xù)蔓延，截至2023年7月底，波蘭共確診523例家豬病例和17 391 502例野豬病例，造成的經(jīng)濟(jì)損失難以估計(jì)。缺乏商業(yè)化的ASF疫苗，通過行政手段控制ASF傳播的能力受到了限制，即對(duì)發(fā)病豬的撲殺和處理。目前，預(yù)防ASF的唯一措施包括執(zhí)行和遵守嚴(yán)格的生物安全措施，正確實(shí)施生物安全的關(guān)鍵要素之一是有效消毒。雖然一些國(guó)家已經(jīng)列出了一份可用于預(yù)防ASF的殺毒產(chǎn)品清單，但它們的有效性大多是間接估計(jì)獲得的，僅基于它們對(duì)其他包膜病毒的測(cè)試結(jié)果。到目前為止，由于缺乏消毒劑對(duì)ASFV殺滅效果評(píng)估的數(shù)據(jù)，導(dǎo)致人們普遍使用對(duì)ASFV的殺滅功效未經(jīng)證實(shí)的消毒劑，這可能會(huì)導(dǎo)致ASF失控傳播。不過，近年來(lái)，一些研究試圖解決這一問題。根據(jù)現(xiàn)有的研究，甲醛、次氯酸鈉、燒堿、戊二醛、苯酚、苯扎氯銨、過氧硫酸鉀、乙酸這8種物質(zhì)對(duì)ASFV具有殺滅效果。這些化學(xué)試劑中的大多數(shù)在WOAH推薦的濃度下可以使ASFV失活，其中次氯酸鈉、戊二醛、燒堿和過氧硫酸鉀的殺毒效果最高。對(duì)ASFV最無(wú)效的消毒劑為苯扎氯銨。此外，在實(shí)際消毒之前，預(yù)清潔步驟對(duì)于去除污染物的重要性已得到證實(shí)。長(zhǎng)期接觸化學(xué)消毒劑可能會(huì)對(duì)人和動(dòng)物的健康造成嚴(yán)重的后果，因此需要進(jìn)一步研究植物提取物在殺滅病毒上的有效性，以找到一種安全有效的植物替代品。Juszkiewicz等（2021）選取了14種植物提取物，研究它們對(duì)ASFV的滅活效果，結(jié)果表明只有薄荷提取物對(duì)ASFV具有較高的殺病毒活性。

上述研究首次確定了最有效的化學(xué)物質(zhì)和消毒條件，以確保消毒過程對(duì)ASFV的有效性。這一創(chuàng)新的另一個(gè)要素是確定了天然植物提取物的殺病毒活性，這些提取物將來(lái)可能成為生態(tài)消毒劑的成分之一。

在針對(duì)ASF的安全疫苗獲得批準(zhǔn)之前，生物安全和有效消毒是防止ASF傳播的重要措施。培訓(xùn)豬場(chǎng)工作人員嚴(yán)格遵守生物安全規(guī)則，并指導(dǎo)他們有效使用消毒劑是至關(guān)重要的。為飼養(yǎng)人員提供這方面的知識(shí)，可以加強(qiáng)對(duì)ASF等疾病的控制，保障相關(guān)動(dòng)物的健康和福利。實(shí)施正確的生物安全措施和使用有效的消毒劑，可顯著降低疾病傳播的風(fēng)險(xiǎn)，確保養(yǎng)豬業(yè)的穩(wěn)定和可持續(xù)發(fā)展。

原題名：African swine fever： transmission，spread，and control through biosecurity and disinfection，including Polish trends（英文）

原作者：Ma?gorzata Juszkiewicz，Marek Walczak，Grzegorz Wo?niakowski和Katarzyna Podgórska