亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        納米酶增強(qiáng)免疫層析法定量檢測血液中的降鈣素原

        2024-09-19 00:00:00鄭玥林童熊勇華許夢碩嚴(yán)喜鸞郭徐靜楊磊郭亮
        分析化學(xué) 2024年8期
        關(guān)鍵詞:快速檢測降鈣素原

        摘要 建立了一種以金、鉑納米粒子修飾的金屬有機(jī)框架材料(MAP)為標(biāo)記物的降鈣素原(Procalcitonin,PCT)快速定量免疫層析檢測方法。本方法以靜電吸附法制備的MAP-抗PCT 單克隆抗體偶聯(lián)物為檢測探針,將抗PCT 多克隆抗體和羊抗鼠IgG 分別噴涂硝酸纖維素(NC)膜構(gòu)建試紙條的檢測線和質(zhì)控線,采用基于信號放大的夾心免疫法定量檢測PCT。結(jié)果表明, MAP 免疫層析試紙條具有靈敏度高、特異性強(qiáng)和穩(wěn)定性好等優(yōu)點,利用其檢測PCT 的動態(tài)檢測范圍為0.61 pg/mL~320 ng/mL,檢出限為0.25 pg/mL,日內(nèi)和日間精密度(RSD)均小于15%。實際樣品檢測結(jié)果表明,本方法僅需微量樣本即可檢測全血中PCT 的濃度,對于炎癥反應(yīng)的早期診斷、監(jiān)測治療及預(yù)后判斷具有重要意義。

        關(guān)鍵詞 側(cè)流免疫層析法;降鈣素原;快速檢測;納米酶

        生物標(biāo)志物的高靈敏和快速檢測對于疾病診斷具有重要意義。目前,生物標(biāo)志物的臨床檢測方法主要為儀器分析法,具有檢測靈敏度高、可自動化以及適合高通量檢測等優(yōu)勢[1]。但是,儀器分析法通常需要大型儀器設(shè)備,價格昂貴、檢測時間長,難以滿足欠發(fā)達(dá)地區(qū)對生物標(biāo)志物快速檢測的需求,也無法用于家庭自檢[2]。免疫層析試紙條法(Lateral flow immunoassay, LFIA)具有操作簡單、檢測結(jié)果直觀、耗時少以及成本低等優(yōu)點[3],適于大規(guī)??焖俸Y查,是目前發(fā)展最快的一種即時診斷方法。

        金納米顆粒(Au nanoparticles, AuNPs)基于局域表面等離子體共振效應(yīng)可產(chǎn)生鮮艷的顏色,因而被廣泛用作LFIA 方法的信號探針。然而,傳統(tǒng)的30~40 nm AuNPs 探針因摩爾消光系數(shù)較低、顏色信號偏弱,用于試紙條檢測時靈敏度有限,無法滿足痕量待測物以及微量樣本的檢測需求。基于AuNPs 有序組裝的信號放大策略可有效提高試紙條的檢測靈敏度。該策略通常利用鏈霉親和素-生物素[4]、互補(bǔ)核酸鏈[5]或抗原與抗體間[6]的特異性結(jié)合使更多的AuNPs 在檢測線(T 線)區(qū)域二次富集,從而實現(xiàn)檢測信號放大。然而,該策略雖然可將試紙條檢測靈敏度提升1~2 個數(shù)量級,但因二次富集效率存在差異,易導(dǎo)致檢測結(jié)果變異系數(shù)變大。將大量AuNPs 負(fù)載至大粒徑載體(細(xì)菌[7]、碳納米管[8]和一維硅納米棒[9]等)上以增強(qiáng)探針顏色信號的強(qiáng)度,也是提高試紙條檢測靈敏度的有效策略。但是,當(dāng)所用載體粒徑過大時,其遷移速率變慢,這將帶來探針在T 線上非特異性駐留的風(fēng)險,從而使假陽性結(jié)果的可能性增加。此外,使用熒光微球、染料聚苯乙烯微球[10]以及磁性熒光微球[11]等探針也可提高試紙條的檢測靈敏度,但通常只能提高一個數(shù)量級左右。

        酶催化信號放大是一種被廣泛應(yīng)用于提高各類分析方法靈敏度的有效策略[12]。Zhang 等[13]以辣根過氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)和抗體共標(biāo)記AuNPs 作為LFIA 探針,利用HRP 的高催化活性催化底物顯色,從而提高了試紙條的檢測靈敏度。但是, HRP 等天然酶的催化活性高度依賴于蛋白質(zhì)的構(gòu)象,易受溫度、pH 值和離子強(qiáng)度等環(huán)境因素的影響[14],從而限制了基于天然酶的信號探針在檢測中的應(yīng)用。納米酶是一類具有類天然酶活性的納米材料[15],與天然酶相比具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、環(huán)境耐受性強(qiáng)、成本低以及長期穩(wěn)定性好等優(yōu)勢[16]。相比于大部分金屬基納米酶,鉑納米粒子(Platinumnanoparticles, PtNPs)具有更優(yōu)越且穩(wěn)定的類過氧化物酶(POD)催化活性,通過調(diào)控PtNPs 的尺寸、形貌、晶面和組成成分等可進(jìn)一步增強(qiáng)其催化活性[17]。就尺寸因素而言,小粒徑的PtNPs 具有更大的比表面積,因此更容易暴露催化活性位點,從而具有更高的催化活性。但是,小粒徑PtNPs 在使用過程中因表面能過高而易發(fā)生團(tuán)聚,導(dǎo)致催化活性下降[18]。將小粒徑PtNPs 固定在多孔納米材料的表面或孔隙中,理論上可以改善其分散性,獲得穩(wěn)定的高催化活性。金屬有機(jī)框架材料(Metal-organic frameworks,MOFs)是一類以金屬離子或金屬團(tuán)簇為節(jié)點,與有機(jī)配體自組裝形成的多孔材料[19],具有高比表面積、可調(diào)節(jié)的孔徑、可調(diào)控的化學(xué)成分和嚴(yán)格定義的金屬節(jié)點,因而可作為限域負(fù)載或原位生長納米材料的優(yōu)良載體[20-21]。

        降鈣素原(Procalcitonin, PCT)是血清降鈣素的前體肽[22],被認(rèn)為是診斷和檢測細(xì)菌感染的理想生物標(biāo)志物[23]。準(zhǔn)確測定血液中的PCT 濃度對于輔助診斷細(xì)菌性感染具有重要意義[24]。在健康人血液中,PCT 濃度一般低于0.1 ng/mL[25-26];當(dāng)血液中PCT 的濃度大于0.5 ng/mL 時,患者發(fā)生嚴(yán)重敗血癥或敗血性休克的風(fēng)險大大增加[27-28]。受限于檢測靈敏度,采用常規(guī)膠體金試紙條檢測PCT 時,通常需要靜脈穿刺采血獲得足夠量的樣本[29],而對于難以進(jìn)行靜脈穿刺的人群,例如嬰幼兒及老年患者,樣本收集存在一定困難。本研究以鋯基金屬有機(jī)框架納米材料(Zr-MOF)[30]為載體,通過在MOF 上原位生長AuNPs 獲得具有強(qiáng)比色信號的MOF@AuNPs 納米復(fù)合物(MA);在MA 上繼續(xù)生長PtNPs,獲得了具有高類POD活性的MOF@AuNP@PtNPs 復(fù)合物(MAPs)??疾炝艘訫APs 為探針的LFIA(MAP-LFIA)對PCT 的檢測性能。由于MAPs 不僅具有較強(qiáng)的比色信號,還具有非常高的類POD 活性,因此通過酶催化信號放大可以實現(xiàn)PCT 的靈敏檢測。本研究開發(fā)的MAP-LFIA 可快速、超靈敏定量檢測稀釋后血樣中的痕量PCT,對嬰幼兒及老年患者僅需從足底或指部獲取微量血樣(2 μL)即可滿足檢測需求。

        猜你喜歡
        快速檢測降鈣素原
        基于近紅外光譜法的藜麥脂肪含量快速檢測
        降鈣素原在成人心臟術(shù)后感染的監(jiān)測價值
        急性心力衰竭合并感染患者降鈣素原及C反應(yīng)蛋白水平變化的臨床意義
        C反應(yīng)蛋白、D—二聚體及降鈣素原評估急性胰腺炎嚴(yán)重程度的臨床價值
        體外循環(huán)與非體外循環(huán)冠脈搭橋術(shù)對比研究
        PCT、CRP及WBC在小兒發(fā)熱疾病中的應(yīng)用效果研究
        降鈣素原在外科感染性疾病中的臨床應(yīng)用價值
        利福平和異煙肼耐藥基因突變快速檢測方法在結(jié)核病中的應(yīng)用
        淺談化學(xué)發(fā)光免疫分析方法與應(yīng)用進(jìn)展
        淺析食品安全檢測中關(guān)于微生物快速檢測的方法
        国产偷国产偷高清精品| 丰满少妇被猛烈进入高清播放| 国产午夜福利久久精品| 曰本女人牲交全视频免费播放| 国产成人亚洲合集青青草原精品 | 少妇裸体性生交| 国产剧情麻豆女教师在线观看 | 四虎成人精品国产一区a| 我也色自拍俺也色自拍| 中文字幕无码中文字幕有码| 国产99久久精品一区二区| 久久久国产精品福利免费| 偷拍一区二区三区黄片| 国产成人精品优优av| 老司机在线精品视频网站| 国产精品18久久久久久首页| 狼人精品剧情av在线观看| 国产强被迫伦姧在线观看无码| 亚洲成a人片在线观看天堂无码| 亚洲无码vr| 亚洲女同同性一区二区| 中文字幕乱码亚洲精品一区| 久久亚洲精品成人| 国产青春草在线观看视频| 久草青青91在线播放| 内谢少妇xxxxx8老少交| 久热爱精品视频在线观看久爱| 国产精品美女主播一区二区| 扒开腿狂躁女人爽出白浆| 国际无码精品| 精品专区一区二区三区| 国产国产精品人在线视| 性色av 一区二区三区| 久久亚洲精彩无码天堂| 少妇被黑人嗷嗷大叫视频 | 精品国精品国产自在久国产应用| 免费人成视频网站在线| 森中文字幕一区二区三区免费| 久久国产精品精品国产色婷婷| 亚洲是图一区二区视频| 九九精品国产亚洲av日韩|