蘇汝彬 褚朝 馮英苗 趙斌

摘要 牛大力為豆科植物美麗崖豆藤的干燥根，具有補(bǔ)虛潤(rùn)肺、強(qiáng)筋活絡(luò)之效，為嶺南地區(qū)著名的藥食兩用植物。綜述了牛大力質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載情況、品種鑒別、檢查、有效成分測(cè)定方法研究及指紋圖譜質(zhì)量評(píng)價(jià)等方面的研究進(jìn)展，分析了已有牛大力質(zhì)量研究方法的優(yōu)勢(shì)與不足，提出了建立牛大力質(zhì)量綜合評(píng)價(jià)體系的方法，為牛大力藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)研究與質(zhì)量控制提供參考。

關(guān)鍵詞 牛大力；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；指紋圖譜；含量測(cè)定

中圖分類號(hào) R 284.1/R 285? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A? 文章編號(hào) 0517-6611（2024）12-0016-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.12.004

Research Advance on Quality Standards of the Lingnan Genuine Material of Millettia speciosa

SU Ru-bin， CHU Zhao， FENG Ying-miao et al

（Guangdong Jiangmen Chinese Medicine College/Jiangmen Health Products Branch， National Engineering Research Center for Modernization of Traditional Chinese Medicine， Jiangmen，Guangdong 529000）

Abstract Millettia speciosa is the dry root of the leguminous plant， which has the effect of tonifying the lung， strengthening the tendons and activating the collaterals. It is a famous dual-purpose plant for medicine and food in Lingnan area. In this paper， the research progress of the quality standard collection， variety identification， inspection， determination of effective ingredients and fingerprint quality evaluation of Millettia speciosa was reviewed. The advantages and disadvantages of the existing quality evaluation methods of Millettia speciosa were analyzed. The method of establishing the comprehensive quality evaluation system of Millettia speciosa was proposed， which can be used as a reference for the quality evaluation and quality control of? Millettia speciosa.

Key words Millettia speciosa;Quality standard;Fingerprint;Determination of content

基金項(xiàng)目 廣東省普通高校特色創(chuàng)新類項(xiàng)目（2021KTSCX319）；廣東省普通高校青年創(chuàng)新人才類項(xiàng)目（2023KQNCX254）;廣東江門中醫(yī)藥職業(yè)學(xué)院科學(xué)研究項(xiàng)目［（科）JMZYYKY20232007）］。

作者簡(jiǎn)介 蘇汝彬（1994—），男，廣東惠州人，助教，碩士，從事中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。*通信作者，教授，博士，從事中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

收稿日期 2023-07-18；修回日期 2023-12-12

牛大力為豆科植物美麗崖豆藤M(fèi)illettia speciosa Champ.的干燥根［1］，廣泛分布于江西、湖南、廣東、廣西、海南、貴州等地［2］，具有強(qiáng)筋活絡(luò)、健腎壯腰、潤(rùn)肺補(bǔ)虛等臨床療效，可有效治療慢性支氣管炎、肺結(jié)核、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腰肌勞損等疾病［3］，常用于制作藥膳、藥酒等，也是“壯腰健腎丸”“桂龍藥膏”“舒筋健腰丸”等多種中成藥的重要原料，為嶺南地區(qū)著名的藥食兩用中藥材。目前牛大力尚未被2020年版中國(guó)藥典收錄，各省地方標(biāo)準(zhǔn)收載的牛大力質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)大部分是簡(jiǎn)單的理化鑒別，加之以前的標(biāo)準(zhǔn)多是以野生牛大力為試驗(yàn)材

料，不足以較好地控制牛大力藥材和飲片質(zhì)量。為推動(dòng)牛大

力的開發(fā)利用，保證藥材品質(zhì)，有必要建立一套全面有效的

牛大力質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)?；诖?，筆者總結(jié)近年國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)牛大力質(zhì)

量標(biāo)準(zhǔn)的研究情況，以期為牛大力質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的修訂完善提供參考。

1 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載情況

牛大力質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)收載于廣東、廣西、河北、福建、山西、北京6個(gè)?。▍^(qū)、市）的中藥材標(biāo)準(zhǔn)或中藥飲片炮制規(guī)范中，各地標(biāo)準(zhǔn)所收錄的質(zhì)量控制指標(biāo)情況見表1［1，4-11］ 。其中廣

東省和山西省的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容比較全面，包括性狀、顯微鑒別、薄層鑒別、水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物測(cè)定。而北京、河北、廣西的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅有性狀鑒別項(xiàng)。各地的質(zhì)

量標(biāo)準(zhǔn)均無含量測(cè)定、重金屬檢查等內(nèi)容，不能很好地控制牛大力藥材和飲片的質(zhì)量。

2 鑒別研究

2.1 性狀鑒別

藥材性狀是藥材質(zhì)量的外觀體現(xiàn)，各地方標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)研究對(duì)牛大力的性狀描述基本一致，具體描述為：該品呈圓柱形或似多個(gè)紡錘形連接在一起，常切成不規(guī)則的塊片，大小不一。表面黃白色或褐黃色，粗糙，有環(huán)狀橫紋。質(zhì)硬，難折斷，斷面皮部灰白色，放射狀紋理明顯，纖維性，中間灰白色而略松泡，富粉性。氣微，味微甜［1，3-19］。黎瑞汝等［3，12，15，18］發(fā)現(xiàn)苦大力常作為牛大力的混偽品，其性狀為：根為圓柱形，不呈結(jié)節(jié)狀，表面青黃色，皮孔較細(xì)、較長(zhǎng)，斷面可見放射紋理，木質(zhì)，較平滑，味極苦。

2.2 顯微鑒別

2.2.1 ?橫切面顯微鑒別。

牛大力藥用部位為根部，其橫切面顯微特征符合雙子葉植物根的特征。廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)研究對(duì)牛大力橫切面的顯微特征描述基本一致［1，14-15，19-20］，具體描述為：木栓層為4～18列細(xì)胞，淺黃色。栓內(nèi)層細(xì)胞含草酸鈣方晶。外皮層石細(xì)胞環(huán)帶有3～16列石細(xì)胞。韌皮部較寬，薄壁細(xì)胞含黃棕色或紅棕色物；纖維淺黃色，單個(gè)散在或數(shù)個(gè)成束；射線寬1～9列細(xì)胞。形成層明顯。木質(zhì)部淺黃色；導(dǎo)管較大，圓形或橢圓形，多單個(gè)散在，有的內(nèi)含黃棕色或黃色物；木纖維成束，壁厚，紋孔不明顯；木射線明顯，1～9列細(xì)胞。薄壁細(xì)胞含眾多淀粉粒。其混偽品苦牛大力與甜牛大力根橫切面的區(qū)別在于其皮層外側(cè)無石細(xì)胞環(huán)，皮層內(nèi)側(cè)有棕色塊斷續(xù)排列，射線細(xì)胞3～7列稍切向排列，其余兩者基本相似［3，12，15］。

2.2.2 粉末顯微鑒別。

廣東省、福建省和山西省等標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)牛大力粉末的顯微特征進(jìn)行了規(guī)定，此外許多學(xué)者也對(duì)此進(jìn)行了相關(guān)研究，研究結(jié)果與各地標(biāo)準(zhǔn)描述基本一致［1，6-7，9，14-15，20］。具體內(nèi)容包括：該品粉末淺黃白色，淀粉粒眾多，臍點(diǎn)稍明顯，十字狀、點(diǎn)狀。木栓細(xì)胞成片，淺黃色或淺棕色，表面觀呈長(zhǎng)方形類二角形或不規(guī)則形，薄壁細(xì)胞含黃棕色紅棕色或棕黃色物，纖維淺黃色壁厚，胞腔線狀。石細(xì)胞黃色，類圓形、類方形、橢圓形或不規(guī)則形，壁厚，孔溝明顯，單個(gè)散在或成群。網(wǎng)紋導(dǎo)管較大淺黃色，多不完整，草酸鈣方晶眾多。其混偽品苦牛大力的粉末顯微特征基本同牛大力，區(qū)別于棕色塊較多，無石細(xì)胞［3，12，15］。

2.3 薄層色譜鑒別

薄層鑒別法是中藥材和飲片鑒別最常用的方法之一，其方法簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)可行，能夠快速地對(duì)中藥有效成分進(jìn)行鑒別。目前各地地方標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)研究中，牛大力薄層色譜所采用的色譜條件略有不同（表2）。

3 檢查研究

3.1 水分、灰分、浸出物測(cè)定

水分、灰分、浸出物限量為中藥材儲(chǔ)存和優(yōu)劣辨別的重要質(zhì)控指標(biāo)。北京市、福建省、廣東省和山西省等標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)牛大力的檢查項(xiàng)進(jìn)行了規(guī)定，但檢查項(xiàng)目多不全面。有學(xué)者收集了多批次樣品，依據(jù)《中國(guó)藥典》測(cè)定方法，對(duì)牛大力的水分、灰分和浸出物進(jìn)行了測(cè)定，初步確定了檢查指標(biāo)的范圍，但測(cè)定結(jié)果之間差別較大。牛大力的水分、灰分、浸出物測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)收載與研究情況見表3。

3.2 重金屬及農(nóng)殘檢測(cè)研究

牛大力藥用部位為根，屬于多年生中藥，由于土壤和水源污染，自身蓄積或伴生，種植、加工、貯藏方式不當(dāng)?shù)仍颍斐傻闹亟饘俸娃r(nóng)藥殘留污染嚴(yán)重影響中藥材用藥安全，引起國(guó)內(nèi)外廣泛關(guān)注［23］。馬留輝等［24］通過ICP-MS法測(cè)定牛大力中砷、汞、鉛、鎘、銅5 種重金屬元素，結(jié)果發(fā)現(xiàn)各個(gè)產(chǎn)區(qū)牛大力藥材5種重金屬的單因子指數(shù)均小于1，綜合污染水平均屬于安全水平。蔣珍藕等［25］采用按照2015版《中國(guó)藥典》方法測(cè)定牛大力中重金屬總量、有害元素、有機(jī)氯農(nóng)藥的含量，結(jié)果表明10批牛大力樣品中重金屬總量均小于20 mg/kg，有機(jī)氯農(nóng)藥含量均未檢出。郭鵬［14］采用ICP-MS測(cè)得牛大力中鉛、鎘、砷、汞、銅5項(xiàng)重金屬元素含量，結(jié)果表明新會(huì)沙堆鎮(zhèn)牛大力鉛含量超標(biāo)（6.26 mg/kg），廣西欽州靈山縣武利鎮(zhèn)牛大力鉛含量和鎘含量均較高，分別為3.54和0.29 mg/kg，可能受農(nóng)家肥影響導(dǎo)致其綜合污染指數(shù)最高，但是其單項(xiàng)重金屬含量均未超標(biāo)。陳晨等［21］采用ICP-MS法測(cè)定海南不同產(chǎn)地6批次的牛大力中重金屬含量，根據(jù)王孝輝等［26］的測(cè)定方法和謝慧等［27］的測(cè)定方法進(jìn)行吡蟲啉和毒死蜱的含量測(cè)定，結(jié)果所有批次牛大力中重金屬元素含量均未超標(biāo)，農(nóng)藥毒死蜱和吡蟲啉均未檢出。

4 含量測(cè)定研究

為了全面反映藥材質(zhì)量狀況，必須引入量化數(shù)據(jù)，才能達(dá)到質(zhì)量控制目的。目前根據(jù)藥材中單體或某幾類成分的含量來評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量的方法被普遍使用。

4.1 總多糖、總黃酮和總生物堿等含量測(cè)定

多糖、黃酮、生物堿、皂苷等為牛大力的主要化學(xué)成分類型，這些成分均具備相應(yīng)的生物活性，比如牛大力多糖具有較明顯的抗炎、免疫調(diào)節(jié)作用，并且具有一定抗氧化和清除自由基作用［28-29］。許多學(xué)者從不同產(chǎn)地、不同藥用部位及不同生長(zhǎng)周期等多種維度分析了牛大力的總多糖、總黃酮、總生物堿、總皂苷含量，研究方法及測(cè)定結(jié)果見表4。

4.2 指標(biāo)成分測(cè)定

牛大力主要指標(biāo)成分為刺桐堿、芒柄花素、高麗槐素、槲皮素、甘草素、異甘草素、毛蕊異黃酮等［13-14，20-21，29，37-48］。許多學(xué)者通過建立高效液相色譜法對(duì)牛大力的刺酮堿、高麗槐素、芒柄花素等成分進(jìn)行含量測(cè)定，為牛大力質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供了參考，具體的方法和結(jié)果見表5。由表5可知，因?yàn)楦髦笜?biāo)成分均有相應(yīng)的紫外吸收，所以采用HPLC-UV均可以實(shí)現(xiàn)成分的檢測(cè)和分離，而液質(zhì)聯(lián)用法可以實(shí)現(xiàn)更多成分的同時(shí)定量分析［45，47］，提取溶劑使用不同濃度的甲醇和乙醇均可，色譜條件多采用C18色譜柱、乙腈-0.1%冰醋酸水溶液等度或梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)多采用280或310 nm。由測(cè)定結(jié)果可知，牛大力中指標(biāo)成分含量較高的是刺酮堿、高麗槐素、芒柄花素等，各批次牛大力指標(biāo)成分的含量差異較大，其中刺酮堿含量約為藥材量的千分之一，高麗槐素約為藥材量的萬分之一，而其他黃酮類成分含量更低。刺酮堿屬于生物堿類化合物，而高麗槐素、芒柄花素等屬于黃酮類，且這兩類成分含量差異較大，針對(duì)此問題有學(xué)者利用了聚酰胺小柱凈化、富集的前處理方法，并結(jié)合 UPLC法同時(shí)測(cè)定了甘草素、異甘草素、芒柄花素和高麗槐素4種黃酮類成分，該方法準(zhǔn)確度高、選擇性好，具有較好的重復(fù)性和精密度［48］。

4.3 微量元素測(cè)定

韋燕燕等［49］采用微波消解和電感耦合等離子體質(zhì)譜方法測(cè)定不同產(chǎn)地的牛大力中Fe、Mn、Cu等共8種金屬元素含量，結(jié)果不同產(chǎn)地的牛大力中含有的Fe、Mn、Cu等含量略有差異，F(xiàn)e、Mn、Cu和Zn 4種元素的含量均>1.0 mg/kg，Pd、Cd、As和Se 4種元素含量大多<1.0 mg/kg。鄭元生［28］用等離子體發(fā)射光譜儀測(cè)定牛大力藥材中無機(jī)元素含量，其中Ca、K、Mg、Al、Fe和 Mn等含量較高。徐曉銘等［50］采用濕法消解樣品后用 ICP-AES 法測(cè)定牛大力藥材中 Al、Ba、Ca等12種元素的含量，經(jīng)測(cè)定12 種元素的線性良好，說明該分析方法可用于測(cè)定牛大力中多元素同時(shí)測(cè)定。曾慶錢等［33］采用ICP-MS測(cè)定10個(gè)不同產(chǎn)地牛大力中20種微量元素的含量，數(shù)據(jù)表明牛大力中的K、Ca含量較高，最高含量均超過了300 mg/kg；有9 個(gè)以上產(chǎn)地牛大力中Mg、Sr、Zn 含量超過了10 mg/kg。

5 指紋圖譜研究

蘇志恒等［51］建立牛大力的HPLC指紋圖譜鑒別方法，以0.05%磷酸水溶液-乙腈為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為220 nm，對(duì)13批牛大力指紋圖譜進(jìn)行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以高麗槐素為參照峰，共有15個(gè)共有峰，13批牛大力藥材的HPLC指紋圖譜相似度在0.782～0.994。張劍光等［52］通過建立牛大力HPLC指紋圖譜，確定了13個(gè)共有峰，26批樣品相似度為0.847～0.998，表明不同產(chǎn)地牛大力藥材質(zhì)量相對(duì)穩(wěn)定，聚類分析及主成分分析均能將不同產(chǎn)地牛大力樣品分為2類。

6 其他成分的測(cè)定

賴富麗等［53］采用GC-MS法對(duì)牛大力藤葉片脂溶性成分進(jìn)行測(cè)定，共鑒定了41個(gè)化學(xué)成分，其相對(duì)含量為81.22％，其中含量較高的成分依次為維生素E（11.52％）、亞麻酸乙酯（10.26％）、γ-谷甾醇（8.53％）等。李程勛等［54］通過回流法提取牛大力精油，并利用固相微萃取技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)行采集，GC-MS法對(duì)樣品成分進(jìn)行測(cè)定，共測(cè)得牛大力精油化學(xué)成分65種，利用藥理學(xué)分析平臺(tái)（TCMSP）篩選出13種活性成分，其總相對(duì)含量為48.35%;其中醛類相對(duì)含量最高，達(dá)到27.20%，酸類含量為13.64%。

7 總結(jié)

綜上所述，現(xiàn)有各省標(biāo)準(zhǔn)均不能很好地控制牛大力質(zhì)量，不少學(xué)者針對(duì)牛大力的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了探索，進(jìn)一步明確了各省（區(qū)、市）標(biāo)準(zhǔn)中性狀、鑒別、檢查的相關(guān)要求，并對(duì)重金屬及農(nóng)殘檢測(cè)、含量測(cè)定、指紋圖譜等項(xiàng)目進(jìn)行了補(bǔ)充，為完善牛大力的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了參考。

但是現(xiàn)有研究仍存在不足，如：目前的牛大力規(guī)格等級(jí)主要根據(jù)外觀因素進(jìn)行劃分，其內(nèi)在品質(zhì)是否與外觀性狀相一致，還有待于大批量進(jìn)一步的驗(yàn)證研究；牛大力含量測(cè)定的指標(biāo)成分是否為其藥效成分，相關(guān)的物質(zhì)基礎(chǔ)仍需深入研究；含量測(cè)定是中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要內(nèi)容，但由于牛大力化學(xué)成分的復(fù)雜性，以及不同類別的成分含量的差異較大，難以對(duì)所有的成分進(jìn)行測(cè)定。

針對(duì)牛大力質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的不足之處，可以從以下幾個(gè)方面深入研究：應(yīng)用互聯(lián)網(wǎng)+、大數(shù)據(jù)等現(xiàn)代信息技術(shù)，建立數(shù)字化導(dǎo)向的牛大力標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)查詢平臺(tái)，并利用電子眼、電子鼻、電子舌等方式對(duì)牛大力的性狀特征進(jìn)行客觀準(zhǔn)確地識(shí)別，規(guī)范牛大力市場(chǎng)混亂的現(xiàn)象［55］；利用代謝組學(xué)、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)等方法進(jìn)一步確定牛大力的藥效成分，并結(jié)合其植物來源的特征性、傳統(tǒng)藥性、炮制過程化學(xué)成分的變化等方面，明確其質(zhì)量標(biāo)志物［56-57］；針對(duì)不同類型成分含量差異較大的問題，可以采用多種前處理方法對(duì)不同類別的成分分類表征；針對(duì)不同產(chǎn)地牛大力品質(zhì)的差異，可以其質(zhì)量標(biāo)志物為指標(biāo)，利用一測(cè)多評(píng)、多波長(zhǎng)指紋圖譜、液質(zhì)聯(lián)用等方式綜合評(píng)價(jià)牛大力的化學(xué)成分，建立一個(gè)更加全面、合理、科學(xué)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系，從而保證牛大力藥材的質(zhì)量。

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