董以雷 姚啟蒙 李和朋 趙群峰 李寶華 朱應(yīng)波 劉雪蘭 伏春燕

關(guān)鍵詞：纖維飼糧：肉雞：生長性能：生化指標(biāo)；腸道發(fā)育

纖維是日糧的重要組成部分。近年來，隨著對纖維素營養(yǎng)研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)畜禽日糧中適量添加纖維可以維持腸道正常結(jié)構(gòu)，促進(jìn)腸道蠕動，改善腸道微生物區(qū)系，提高機(jī)體免疫力和抗病力。我國養(yǎng)殖業(yè)蛋白原料進(jìn)口依賴度高，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局《飼料中玉米豆粕減量替代工作方案》要求推進(jìn)使用谷物和雜粕實(shí)現(xiàn)對飼料中玉米豆粕的減量替代，增加畜禽日糧纖維素含量、降低蛋白含量、提高飼料轉(zhuǎn)化率，保障養(yǎng)殖業(yè)安全、穩(wěn)定發(fā)展。麩皮、米糠、玉米酒糟及其可溶物（DDGS）均為谷物加工副產(chǎn)物，富含粗纖維、粗蛋白、維生素等營養(yǎng)成分，常作為纖維原料添加在豬、禽、反芻動物的飼料中。研究顯示，日糧添加0.5%～1.5%麩皮提高了鵪鶉十二指腸、空腸、回腸的相對重量和絨隱比，增加體重，提高飼料利用率：用含18%全脂米糠的日糧飼喂28日齡四川鵝，對57～70日齡階段的生長性能有積極影響：日糧中添加34.8%米糠可促進(jìn)蘇淮豬十二指腸和空腸絨毛生長，增加空腸隱窩深度：飼喂含30%DDGS的日糧可降低斷奶仔豬十二指腸絨隱比。

雞可以耐受一定水平的日糧纖維。適宜的纖維水平，可以促進(jìn)肉雞的生長發(fā)育，但是超過耐受量后，受纖維本身抗?fàn)I養(yǎng)屬性的影響，會導(dǎo)致肉雞生產(chǎn)性能下降。彭涵等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加5%纖維能夠提高恒大肉雞的生產(chǎn)性能，但當(dāng)纖維水平提高到9%時，肉雞的日增重顯著降低、料重比顯著增加。當(dāng)肉雞日糧中添加15%DDGS時，需配合一定量的復(fù)合酶制劑使用。不同來源的纖維因其結(jié)構(gòu)和特性的差異，使其在腸道中的流通速率不同，進(jìn)而對畜禽采食量、腸道蠕動、腸道發(fā)育、微生物菌群等產(chǎn)生不同影響。目前，有關(guān)單一飼糧纖維的飼喂效果，或混合纖維飼料的適宜添加水平的研究較多，而不同來源纖維飼喂效果的比較，特別是對肉雞生長發(fā)育影響方面的研究相對較少。本研究以羅斯308肉雞為動物模型，探討麩皮、米糠、DDGS三種不同類型的飼糧纖維對肉雞生產(chǎn)性能、機(jī)體免疫功能、小腸發(fā)育、盲腸微生態(tài)平衡的影響，以期為肉雞生產(chǎn)中纖維原料的選擇與使用提供指導(dǎo)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)動物與分組

選取1日齡健康、發(fā)育良好的羅斯308肉仔雞480只，采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計，隨機(jī)分為4個處理組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)20只。

1.2試驗(yàn)設(shè)計與飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)在山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所試驗(yàn)基地開展。采用玉米一豆粕型基礎(chǔ)飼糧，飼糧營養(yǎng)水平參考《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T33-2004）進(jìn)行設(shè)計，并參考《中國飼料成分及營養(yǎng)價值表》（2018年第29版）核算飼糧營養(yǎng)水平。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別飼喂含2%的麩皮、米糠、DDGS的纖維飼糧。飼糧配方和營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)期42d，采用立體籠養(yǎng)。第1周每天光照24h，隨后每周遞減1～2h。試驗(yàn)期間，試驗(yàn)雞自由采食、飲水，按照常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫接種。

1.3測定指標(biāo)及方法

1.3.1生長性能試驗(yàn)期間觀察雞只的健康、采食與排泄物狀況，記錄死淘情況。試驗(yàn)后20d和41d晚9：00對所有試驗(yàn)雞禁食，次日早9：00以重復(fù)為單位稱量各組試驗(yàn)雞活重、剩余料重，計算各組平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.3.2血清生化指標(biāo)試驗(yàn)后21d和42d，每個重復(fù)選取接近平均體重的試驗(yàn)雞2只，稱重后翅靜脈采血2mL，靜置分層后3000r/min離心15min，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆?。紫外分光光度計法測定血清中總蛋白（TP）含量，酶標(biāo)儀法測定白蛋白（ALB）、膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）的含量。試劑盒均購自武漢基因美科技有限公司。

1.3.3免疫器官指數(shù)將1.3.2中選中的試驗(yàn)雞稱重后屠宰，取胸腺、脾臟、法氏囊等器官并稱重，計算免疫器官指數(shù)。

1.3.4消化酶活性取盲腸食糜置于凍存管中，迅速放人液氮中，后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中凍存待測。參照試劑盒（南京建成生物工程研究所）提供的方法用全自動酶標(biāo)儀測定盲腸食糜中纖維素酶和木聚糖酶活性。

1.3.5腸道活菌計數(shù)

使用無菌凍存管收集盲腸內(nèi)容物，液氮速凍后-80℃保存待測。取相同重量的內(nèi)容物，用生理鹽水進(jìn)行10倍梯度稀釋。取適當(dāng)稀釋倍數(shù)的梯度稀釋液10uL接種到相應(yīng)的培養(yǎng)基上，分別進(jìn)行大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸菌、雙歧桿菌的培養(yǎng)。培養(yǎng)條件見表2。培養(yǎng)結(jié)束后，采用平板計數(shù)法計算細(xì)菌數(shù)量，計算1g腸內(nèi)容物中各種細(xì)菌的數(shù)量，結(jié)果用lg（cfu/g）表示。

1.3.6腸道組織形態(tài)取十二指腸、空腸、回腸中段約1cm腸管，用4%多聚甲醛固定24h后，經(jīng)沖水、脫水、包埋處理后切片（厚度為5um），隨后進(jìn)行蘇木精一伊紅（HE）染色。用普通光學(xué)顯微鏡統(tǒng)計各腸段的絨毛高度（VH）和隱窩深度（CD），并計算絨隱比（絨毛高度／隱窩深度，V/C）。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，用SAS9.1.3統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用Dun-can's法做多重比較分析，P<0.05表示差異顯著。

2結(jié)果與分析

2.1不同纖維飼糧對肉雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，麩皮、米糠、DDGS飼糧對肉雞各生產(chǎn)性能指標(biāo)均無顯著影響，但可一定程度上增加肉雞的采食量，提高日增重，增加出欄體重，降低料重比。

2.2不同纖維飼糧對肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，與基礎(chǔ)日糧組相比，麩皮飼糧顯著降低42日齡肉雞血清TC水平（P<0.05）；米糠飼糧顯著降低42日齡血清TC、TG水平（P<0.05）；DDGS飼糧顯著降低21日齡血清TG水平和42日齡血清TC、TG水平，顯著提高42日齡血清TP水平（P<0.05）。不同類型纖維飼糧對21日齡肉雞血清TC、TP、ALB水平和42日齡ALB含量均無顯著影響。

2.3不同纖維飼糧對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

由表5可知，不同類型纖維飼糧對21日齡肉雞的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)．法氏囊指數(shù)，以及42日齡的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均無顯著影響。與基礎(chǔ)日糧組相比，米糠、DDGS飼糧顯著提高42日齡肉雞法氏囊指數(shù)（P<0.05）。

2.4不同纖維飼糧對肉雞腸道發(fā)育的影響

由表6可知，不同類型纖維飼糧對21日齡肉雞的十二指腸發(fā)育無顯著影響。42日齡時，米糠飼糧顯著提高十二指腸VH （P<0.05）；米糠、DDGS飼糧均顯著提高十二指腸CD和V/C值（P<0.05）；3種不同纖維飼糧相比，米糠組和DDGS組的VH、V/C均顯著高于麩皮組（P<0.05）。

由表7可知，米糠、DDGS飼糧對肉雞的空腸發(fā)育均無顯著影響。麩皮飼糧顯著降低21日齡肉雞空腸CD（P<0.05）。

由表8可知，不同類型纖維飼糧對21日齡肉雞回腸發(fā)育無顯著影響。42日齡時，麩皮飼糧顯著升高回腸VH、CD（P<0.05），DDGS顯著提高回腸CD（P<0.05），麩皮組回腸VH、CD均顯著高于米糠組（P<0.05）。

2.5不同纖維飼糧對肉雞盲腸消化酶活性的影響

如表9所示，不同類型纖維飼糧均顯著提高42日齡肉雞盲腸中纖維素酶和木聚糖酶的活性（P<0.05），且DDGS組兩酶活性最高（P<0.05），米糠組木聚糖酶活性顯著低于其他兩組（P<0.05）。

2.6不同纖維飼糧對肉雞盲腸微生物含量的影響

不同纖維飼糧對肉雞盲腸微生物含量的影響見表10。麩皮飼糧顯著降低21日齡肉雞盲腸大腸桿菌以及42日齡大腸桿菌、沙門氏菌和乳酸桿菌的數(shù)量（P<0.05）；米糠飼糧顯著提高21日齡時沙門氏菌的定植，減少42日齡大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸桿菌的定植（P<0.05）；DDGS顯著提高21日齡乳酸桿菌以及42日齡時各類微生物的定植（P<0.05）。

3種不同的飼糧纖維相比，麩皮組顯著降低21日齡肉雞盲腸中大腸桿菌的數(shù)量（P<0.05），米糠組增加21日齡沙門氏菌的數(shù)量（P<0.05），DDGS顯著增加21日齡乳酸桿菌，以及42日齡時大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量（P<0.05）。

3討論

3.1不同纖維飼糧對肉雞生產(chǎn)性能的影響

日糧纖維通過影響腸道內(nèi)食糜的流通速率、消化黏性、離子交換性能以及食糜的發(fā)酵效率，對雞的采食量、料重比產(chǎn)生影響。日糧纖維類型、添加水平和肉雞品種、日齡共同影響雞的生產(chǎn)性能。研究顯示，日糧中添加4%～8%的麩皮，對35日齡肉雞生產(chǎn)性能無負(fù)面影響。飼喂含5%麩皮或米糠的日糧，28日齡星布羅肉仔雞的體增重、采食量和料重比也沒有顯著變化。多項(xiàng)研究報道，肉仔雞日糧中DDGS的添加水平控制在10%以內(nèi)（前期料中不超過6%），對生產(chǎn)性能不會造成顯著影響。本研究中，日糧中添加2%的麩皮、米糠、DDGS對羅斯308肉雞生長全期的各生產(chǎn)性能指標(biāo)均沒有顯著影響，與上述研究結(jié)果一致。表明日糧中適量添加麩皮、米糠、DDGS不會對肉雞的消化系統(tǒng)、養(yǎng)分吸收能力、飼料利用率等造成負(fù)面影響，也不會影響肉雞的生產(chǎn)性能，說明羅斯308肉雞對日糧纖維具有一定的耐受力。但當(dāng)纖維劑量過高時，則會降低飼料的有效能，稀釋養(yǎng)分含量，對肉雞生產(chǎn)性能造成不利影響。這可能與纖維源的溶解性和內(nèi)在理化性質(zhì)有關(guān)。

3.2不同纖維飼糧對肉雞血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)反映了機(jī)體代謝、營養(yǎng)水平及健康狀況。研究顯示，日糧中添加纖維可調(diào)節(jié)肉雞血脂，提高機(jī)體氮利用率，促進(jìn)體內(nèi)蛋白質(zhì)合成。日糧中添加4%的苜蓿草顆粒顯著提高了蘇禽3號肉種雞血清TP含量，添加5%的粗纖維顯著降低20周齡固始雞血清TC、TG水平。而且，隨著日糧中纖維（苜蓿草粉與DDGS等比例混合）添加水平的增加（2%～6%），42日齡肉雞血清TG水平顯著線性降低，TP含量線性升高。本研究也發(fā)現(xiàn)，日糧添加2%米糠、DDGS均降低42日齡肉雞血清TG水平，而麩皮、米糠、DDGS則顯著降低42日齡肉雞血清TC水平。這可能與日糧添加纖維導(dǎo)致膽汁酸的分泌增加，促進(jìn)脂質(zhì)的乳化和釋放有關(guān)。另有學(xué)者揭示，日糧高纖維通過其果膠成分與膽固醇結(jié)合、木質(zhì)素與膽汁酸結(jié)合而使其隨糞排出，促進(jìn)肝臟中TC合成膽汁酸，減少了TC的積累。血清中TP、ALB水平與機(jī)體蛋白質(zhì)代謝密切相關(guān)，其一定程度上的升高，可促進(jìn)機(jī)體正向作用的加強(qiáng)。本研究中，麩皮、DDGS顯著提高42日齡肉雞血清TP水平，表明機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成能力提高了。這可能是由于日糧纖維的添加改善了消化道的消化能力，影響腸道微生物的繁殖，從而提高日糧中蛋白的消化率。

3.3不同纖維飼糧對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

在家禽體內(nèi)，胸腺、脾臟、法氏囊是重要的免疫器官，參與機(jī)體免疫過程，其發(fā)育與機(jī)體的免疫能力相關(guān)。研究顯示，日糧添加7%～9%苜蓿草粉可提高大恒優(yōu)質(zhì)肉雞的胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)：玉米豆粕型日糧中添加15%DDGS可在一定程度上提高肉雞的免疫機(jī)能：前期料中15%DDGS、后期料中25% DDGS均在一定程度上提高了肉雞的法氏囊指數(shù)。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加2%米糠、DDGS顯著升高42日齡肉雞法氏囊指數(shù)，這可能與米糠和DDGS中含有大量不可溶纖維有關(guān)。不可溶纖維主要在雞盲腸中被微生物發(fā)酵，該過程可促進(jìn)微生物菌群的生長。研究顯示，益生菌在腸道內(nèi)的繁殖，可合成益生元，促進(jìn)免疫器官的生長發(fā)育。

3.4不同纖維飼糧對肉雞小腸發(fā)育的影響

小腸是消化道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的主要部位，養(yǎng)分吸收是小腸絨毛的主要功能，隱窩深度反映了小腸上皮更新的速度。小腸黏膜結(jié)構(gòu)的良好狀態(tài)是養(yǎng)分消化吸收和動物正常生長的生理基礎(chǔ)。日糧纖維的類型和尺寸均影響著腸道的發(fā)育。研究顯示，日糧添加34.8%米糠（日糧粗纖維含量7.5%）顯著增加蘇淮豬十二指腸VH：添加5%苜蓿草粉提高仔豬小腸各段的VH：與玉米秸稈纖維相比，日糧添加23%黑麥草顯著提高吉林白鵝十二指腸、空腸的VH和CD，降低回腸VH、CD。本研究發(fā)現(xiàn)，不同纖維源對肉雞小腸形態(tài)發(fā)育有不同的影響。日糧添加米糠、DDGS影響出欄肉雞十二指腸的形態(tài)發(fā)育，而麩皮主要影響空腸和回腸的形態(tài)發(fā)育，表明不同纖維源對小腸不同腸段的影響不同。這可能與不同纖維源在不同腸段的理化性質(zhì)（溶解性、黏性、發(fā)酵性等）以及原料本身的酸性洗滌纖維、中性洗滌纖維含量有關(guān)。

3.5不同纖維飼糧對肉雞盲腸消化酶活性的影響

畜禽對纖維素的消化能力有賴于腸道內(nèi)微生物的發(fā)酵作用。日糧纖維通過影響腸道中微生物菌群的生長，提高腸內(nèi)纖維素酶和木聚糖酶等非淀粉多糖分解酶的活性，從而增強(qiáng)腸道對纖維素的消化能力。研究顯示，日糧添加高水平纖維使得固始雞盲腸內(nèi)容物的纖維素酶活性顯著升高。本研究結(jié)果也證實(shí)，飼糧添加2%的麩皮、米糠、DDGS均顯著提高42日齡肉雞盲腸中纖維素酶和木聚糖酶的活性。而3種不同的飼糧纖維相比，DDGS組肉雞盲腸中纖維素酶和木聚糖酶的活性最高，米糠組肉雞盲腸中木聚糖酶的活性顯著低于其他兩組，這可能與不同纖維中非淀粉多糖組成不同有關(guān)。麥麩和DDGS中的非淀粉多糖主要是纖維素和阿拉伯木聚糖，米糠中主要為阿拉伯木聚糖和少量纖維素。且DDGS是玉米生產(chǎn)酒精的副產(chǎn)物，蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪、維生素含量較高，這可能在一定程度上促進(jìn)了腸道中產(chǎn)纖維素酶、木聚糖酶微生物的定植和發(fā)酵活力。

3.6不同纖維飼糧對肉雞盲腸微生物含量的影響

日糧纖維在一定程度上對各種致病性棱狀芽孢桿菌能起到防疫屏障作用。日糧纖維能增強(qiáng)雞、豬胃腸功能，調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群繁殖數(shù)量。Ger-ritsen等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中不可溶性非淀粉多糖會降低斷奶仔豬回腸和盲腸中大腸埃希菌的數(shù)量。這可能與消化飼糧中纖維的菌群競爭性抑制大腸桿菌在腸道組織中的黏附有關(guān)，不可溶性非淀粉多糖縮短了食糜在腸道中的通過時間，并增加后端大腸微生物發(fā)酵底物。本研究也發(fā)現(xiàn)，日糧中添加麩皮、米糠有抑制42日齡肉雞盲腸中大腸桿菌、沙門氏菌定植的效果。但DDGS則有促進(jìn)腸道中各類細(xì)菌定植的效果，這可能與DDGS做為酒精發(fā)酵副產(chǎn)物，本身含有一定量的微生物有關(guān)。此外，麩皮組、DDGS組盲腸中乳酸菌數(shù)量高于米糠組，這可能與麩皮、DDGS提高木聚糖酶活性有關(guān)。研究顯示，木聚糖酶具有促進(jìn)雞盲腸中乳酸菌定植的潛力，通過產(chǎn)生一種新型的乳酸菌，與乳酸菌互補(bǔ)，從而降低致病菌株的定植，提高肉雞生產(chǎn)性能。

4結(jié)論

麩皮、米糠、DDGS雖然對肉雞各生產(chǎn)性能指標(biāo)沒有顯著影響，但可一定程度上增加肉雞的采食量、出欄體重，提高日增重，降低料重比。3種纖維相比，DDGS能有效降低肉雞血脂水平，提高出欄肉雞血清TP水平、盲腸消化酶活性和益生菌定植，也可促進(jìn)免疫器官發(fā)育，但DDGS也促進(jìn)了盲腸中有害菌的增殖，而麩皮可有效抑制肉雞盲腸中有害菌的增殖，米糠可有效促進(jìn)十二指腸發(fā)育。綜合以上結(jié)果，在肉雞日糧中推薦多種功能纖維配合使用，充分發(fā)揮其各自的優(yōu)勢，以保障機(jī)體免疫力和腸道健康，提高營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用效率。