傅 航，李 軻，蘆榮華，賈 娟，楊雯雯

（漯河職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南漯河 462002）

黃芪含有多種活性成分，具有活血、增強(qiáng)免疫力等功效，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療保健方面，利用率高，產(chǎn)生的藥渣量較大。黃英等（2019）研究表明，黃芪藥渣中含有大量活性成分，可用于防治疾病，提高免疫力。黃芪的主要藥用成分是黃芪多糖，在提取加工后的黃芪藥渣中仍然含有少量黃芪多糖、黃酮類物質(zhì)、蟲草酸、脂肪、蛋白質(zhì)、粗纖維等成分（孫會(huì)輕，2013）。

枯草芽孢桿菌及植物乳桿菌是發(fā)酵中藥渣常使用的菌劑，有助于藥渣發(fā)酵后產(chǎn)生更多的活性物質(zhì)（劉倩，2023）。李秋月等（2021）通過相關(guān)研究證明，中藥渣在微生物作用下被酶解為小分子物質(zhì)，釋放更多功效。戴燊等（2013）使用復(fù)合菌劑發(fā)酵藥渣后，其中的脂肪與蛋白含量顯著提升，纖維含量顯著降低；陳華等（2016）使用黑曲霉聯(lián)合枯草芽孢桿菌發(fā)酵黃芪渣，可顯著提升酶活性。光合菌是目前與異養(yǎng)微生物共培養(yǎng)的研究熱點(diǎn)，中藥的發(fā)酵過程有利于光合菌的生長(zhǎng)，同時(shí)光合菌的發(fā)酵也可以有效提高中藥活性成分。目前常用的黃芪渣發(fā)酵菌劑主要是酵母菌、乳酸菌、枯草芽孢桿菌、米曲霉，可使用單一菌種發(fā)酵或復(fù)合菌種發(fā)酵，但光合菌在發(fā)酵黃芪渣中的應(yīng)用較少，因此，本文研究不同發(fā)酵劑對(duì)黃芪渣發(fā)酵及營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響，以期為黃芪的充分利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)使用的黃芪渣經(jīng)脫水烘干粉碎等加工后過60 目篩，黃芪渣由天芪生物科技有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試以黃芪渣分為發(fā)酵底料，稱取干燥后的黃芪渣100 g，添加3.0 g 玉米粉，1.0 g葡萄糖，0.3 g 硫酸銨分別作為發(fā)酵過程中的碳源、能源與氮源，含水量為50%，菌劑添加比例為質(zhì)量比，即枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌、光合菌添加量為0.1 g。分為空白對(duì)照組（CON 組）、枯草芽孢桿菌（BS 組，添加量為0.1%）、植物乳桿菌（LP組，添加量為0.1%）、光合菌（PSB 組，添加量為0.1%）、枯草芽孢桿菌+ 植物乳桿菌組（BS+LP，添加比例1 ∶1，均為0.1%）、枯草芽孢桿菌+ 光合菌（BS+PSB，添加比例1 ∶1，均為0.1%）、植物乳桿菌+ 光合菌（LP+PSB，添加比例1 ∶1，均為0.1%）、枯草芽孢桿菌+ 植物乳桿菌+ 光合菌（BS+LP+PSB，添加比例1 ∶1 ∶1，均為0.1%）共6 組，每個(gè)樣品3 個(gè)重復(fù)，將樣品及菌劑混合均勻裝入發(fā)酵袋中，37℃下發(fā)酵7 d，發(fā)酵完成后將樣品取出，按照以下測(cè)定方法檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 常規(guī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的測(cè)定 發(fā)酵后黃芪渣中干物質(zhì)含量采用恒溫烘干法測(cè)定，粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測(cè)定，粗脂肪含量采用索氏提取法測(cè)定，粗纖維含量采用濾袋法測(cè)定，粗灰分含量采用灼燒法測(cè)定。

1.3.2 活性物質(zhì)的測(cè)定 發(fā)酵后黃芪渣中多糖含量參照陳琪等（2022）方法進(jìn)行檢測(cè)；皂苷類物質(zhì)含量參照《中國(guó)藥典》檢測(cè)方法進(jìn)行測(cè)定；黃酮類物質(zhì)含量使用分光光度計(jì)法檢測(cè)。

1.3.3 黃曲霉B1以及嘔吐毒素的測(cè)定 黃曲霉B1和嘔吐毒素的含量使用試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 所有原始數(shù)據(jù)均使用Excel 進(jìn)行預(yù)處理，剔除異常值后使用Spss 26.0軟件進(jìn)行方差分析，使用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以 “平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差” 表示，P＜0.05表示組間差異顯著，0.05 ≤P＜0.10 表示有變化趨勢(shì)。

2 結(jié)果

2.1 不同發(fā)酵劑對(duì)黃芪渣發(fā)酵基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響 由表1 可知，與對(duì)照組相比，除BS 組以外其他各試驗(yàn)組干物質(zhì)含量均顯著下降（P＜0.05）；PSB、LP+PSB、BS+LP+PSB 組粗蛋白質(zhì)含量顯著高于其他組（P＜0.05）；BS、LP、BS+PSB 組的粗脂肪含量顯著低于對(duì)照組及其他試驗(yàn)組（P＜0.05）；BS、PSB 組粗灰分含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），LP、BS+LP、LP+PSB 與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P＞0.05），各組間粗纖維含量無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表1 不同發(fā)酵劑對(duì)黃芪渣發(fā)酵常規(guī)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響 %

2.2 不同發(fā)酵劑對(duì)黃芪渣發(fā)酵活性物質(zhì)的影響由表2 可知，LP、BS+PSB、LP+PSB、BS+LP+PSB組多糖含量顯著高于對(duì)照組及其他試驗(yàn)組（P＜0.05）；各組皂苷類物質(zhì)和黃酮類物質(zhì)無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表2 不同發(fā)酵劑對(duì)黃芪渣發(fā)酵基礎(chǔ)物質(zhì)的影響 %

2.3 不同發(fā)酵劑對(duì)黃芪渣發(fā)酵黃曲霉B1和嘔吐毒素的影響 由表3 可知，黃芪渣中添加不同菌劑或復(fù)合菌劑均未影響黃芪渣發(fā)酵后黃曲霉B1和嘔吐毒素含量，各組別之間的黃曲霉B1和嘔吐毒素均無(wú)顯著差異（P＞0.05），且處于合格范圍。

表3 不同發(fā)酵劑對(duì)黃芪渣發(fā)酵黃曲霉B1 以及嘔吐毒素的影響 ppb

3 討論

李國(guó)紅等（2006）證實(shí)了枯草芽孢桿菌可以對(duì)50 種中藥的發(fā)酵及抗菌活性產(chǎn)生影響；劉湧濤（2015）在探究枯草芽孢桿菌用于中藥發(fā)酵的研究中提出三七發(fā)酵過程中加入枯草芽孢桿菌可有效提升皂苷獲得量。王世榮和劉利平（2019）提出，在黃芪的發(fā)酵過程中加入枯草芽孢桿菌可有效提升多糖產(chǎn)量，顯著增強(qiáng)免疫功能。植物乳桿菌也是目前常用于中藥渣發(fā)酵的菌種，厲恒等（2023）研究證實(shí)，植物乳桿菌在黃芪渣發(fā)酵中可顯著提高黃酮含量，并提出植物乳桿菌與黃芪在固態(tài)發(fā)酵模式中具有互作作用，范陽(yáng)等（2021）使用枯草芽孢桿菌聯(lián)合植物乳桿菌發(fā)酵豆渣，顯著降低了pH，且營(yíng)養(yǎng)成分得到改善。張傳濤等（2021）在飼料中添加植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌顯著提高了對(duì)半滑舌鰨的抗氧化能力。光合菌常應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖體系中，可有效降解水體中的亞硝酸鹽、硫化物等有害物質(zhì)，在黃芪渣發(fā)酵過程中也可能會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，如黃曲霉B1和嘔吐毒素，因此，添加光合菌是為了防止發(fā)酵過程中有害物質(zhì)的產(chǎn)生。

在本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，除BS 組以外，其他各試驗(yàn)組干物質(zhì)含量顯著下降（P＜0.05），說(shuō)明添加菌劑后提高了黃芪渣的降解效率，提高了生物利用度，陳華（2016）在優(yōu)化黃芪藥渣發(fā)酵工藝的研究中提出，添加芽孢桿菌后，纖維素酶活力升高，黃芪渣中纖維素降解增多。PSB、LP+PSB、BS+LP+PSB 組粗蛋白質(zhì)含量顯著高于其他組；BS、LP、BS+PSB 組的粗脂肪含量顯著低于對(duì)照組及其他試驗(yàn)組（P＜0.05）；陳琪（2022）等發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌活菌劑發(fā)酵黃芪渣后，粗蛋白質(zhì)含量出現(xiàn)較大波動(dòng)。BS、PSB 組粗灰分含量顯著高于對(duì)照組，LP、BS+PSB、LP+PSB、BS+LP+PSB組多糖含量顯著高于對(duì)照組及其他試驗(yàn)組，相關(guān)研究顯示，黃芪藥渣在菌劑作用下發(fā)酵可得葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖等，并且隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，多糖含量隨之增高（陳琪等，2022）。因此，添加了枯草芽孢桿菌的組別具有粗灰分高、粗蛋白高、粗脂肪低、多糖含量高等特點(diǎn)，復(fù)合了植物乳桿菌的組別多糖含量也顯著提高，說(shuō)明二者復(fù)合有助于多糖含量的提升，在本試驗(yàn)中，皂苷類物質(zhì)和黃酮類物質(zhì)在不同組別中無(wú)顯著變化，可能是由于添加菌劑的濃度及比例還有待改進(jìn)，光合菌的使用無(wú)法通過試驗(yàn)判定光合菌有效抑制有害物質(zhì)（即黃曲霉B1和嘔吐毒素）的產(chǎn)生，可能是由于發(fā)酵時(shí)間較短，對(duì)照組未產(chǎn)生超過合格范圍的有害物質(zhì)，因此，在本試驗(yàn)基礎(chǔ)上，為了更好地使用菌劑，可進(jìn)一步探討菌劑添加濃度、比例及發(fā)酵時(shí)間。

4 結(jié)論

在黃芪渣中添加比例為1 ∶1 ∶1 且相對(duì)含量為0.1% 的枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌、光合菌可有效提升黃芪渣發(fā)酵后粗蛋白質(zhì)及多糖含量，顯著降低粗脂肪含量。