遲 蘭，馬 燁，王迎春，李心海，王玉燕

（徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇徐州 221006）

五倍子廣泛分布于云貴川和陜西，是我國(guó)重要的中草藥資源（張亮亮，2020）。有研究認(rèn)為，五倍子中的主要活性成分為單寧酸和沒(méi)食子酸。此外，受產(chǎn)地、種質(zhì)及提純工藝等影響，其重要活性成分五倍子單寧酸分子結(jié)構(gòu)不等、活性不同（徐蘭程等，2021）。目前，關(guān)于五倍子提取物在畜禽生產(chǎn)上的研究結(jié)果并不一致。在草魚(yú)上的研究表明，過(guò)量使用單寧對(duì)其腸道的損傷作用顯著（Li 等，2020）。Lee 等（2010）在 仔 豬 上 的 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用鞣酸對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能有顯著負(fù)面影響，包括食欲減退和體重減輕。推測(cè)與單寧對(duì)畜禽消化吸收功能的負(fù)面影響和飼料適口性的降低有關(guān)（Palacios 等，2021）。但也有部分研究指出，單寧可通過(guò)對(duì)抗氧化、免疫等生理機(jī)能的正向調(diào)控作用促進(jìn)動(dòng)物健康和生長(zhǎng)發(fā)育。李軍輝等（2021）在肉雞上的研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充單寧酸可通過(guò)促進(jìn)肉雞腸道絨毛生長(zhǎng)提高其生長(zhǎng)性能。蘇成文等（2019）在生長(zhǎng)豬上的研究也檢測(cè)到類似結(jié)果。甘澤等（2021）研究發(fā)現(xiàn)，單寧酸處理能顯著抑制足腫脹模型小鼠的腫脹反應(yīng)，其抑制率可達(dá)40%以上。此外，Bensaad 等（2017）在細(xì)胞模型上的研究結(jié)果表明，沒(méi)食子酸能有效抑制脂多糖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞激活，調(diào)節(jié)炎癥因子表達(dá)，抑制細(xì)胞炎癥反應(yīng)?，F(xiàn)今，肉鴨是我國(guó)重要的畜產(chǎn)品，其生產(chǎn)和消費(fèi)量均處于世界前列。據(jù)此，本試驗(yàn)向日糧中梯度添加五倍子提取物，探究其對(duì)肉鴨生長(zhǎng)和免疫的影響。

1 材料與方法

1.1 材料 五倍子提取物購(gòu)置于貴陽(yáng)市某生物技術(shù)公司，其中活性成分單寧酸含量≥40%，沒(méi)食子酸含量≥3%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理 基礎(chǔ)日糧參考肉鴨飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，試驗(yàn)日糧分別在基礎(chǔ)日糧中添加0、100、200 和400 mg/kg五倍子提取物。試驗(yàn)將2 萬(wàn)只健康的1 日齡肉鴨隨機(jī)分為4 組，每組10 個(gè)重復(fù)，每重復(fù)500 只，分別飼喂各試驗(yàn)日糧，試驗(yàn)為期42 d。按照肉鴨場(chǎng)規(guī)定進(jìn)行清潔、消毒、免疫，所有肉鴨均采用籠養(yǎng)，每籠10 只。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定 試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束前肉鴨禁食過(guò)夜后以重復(fù)為單位稱重，期間記錄每日飼喂量和剩料量。計(jì)算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）。

1.3.2 免疫器官指數(shù) 試驗(yàn)第21 和42 天各組分別選擇10 只肉鴨進(jìn)行屠宰，分別摘取胸腺、脾臟和法氏囊，濾紙吸凈后稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)。

1.3.3 血清免疫指標(biāo) 試驗(yàn)第21 d 和42 天各組分別選取10 只肉鴨采血，分離血清后立即將血清樣本保存至超低溫冰箱中，使用試劑盒（南京建成），采用比色法，按照說(shuō)明將各檢測(cè)試劑點(diǎn)入96孔板中，并做標(biāo)準(zhǔn)曲線，在酶標(biāo)儀上進(jìn)行檢測(cè)，將各樣本OD 值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算免疫球蛋白A、M和G，補(bǔ)體C3 和C4 含量。

1.3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 采用SPSS 17.0 進(jìn)行方差分析，采用Ducan’s 法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示組間差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 五倍子提取物對(duì)肉鴨生長(zhǎng)性能的影響由表2 可知，在初重一致的前提下（P＞0.05），200 mg/kg 五倍子提取物添加劑量組肉鴨終末體重顯著提高3.56%（P＜0.05），料重比顯著降低4.51%（P＜0.05）；同時(shí)，五倍子提取物對(duì)肉鴨采食量和日增重均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表2 五倍子提取物對(duì)肉鴨生長(zhǎng)性能的影響

2.2 五倍子提取物對(duì)肉鴨免疫器官指數(shù)的影響由表3 可知，200 和400 mg/kg 五倍子提取物組肉鴨的21 d 胸腺和法氏囊指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；200 和400 mg/kg 組五倍子提取物組肉鴨的42 d 脾臟指數(shù)顯著高于其他組（P＜0.05）；此外，添加100 ～400 mg/kg 的五倍子提取物對(duì)肉鴨21 d 脾臟指數(shù)、42 d 胸腺和法氏囊指數(shù)均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表3 五倍子提取物對(duì)肉鴨免疫器官指數(shù)的影響

2.3 五倍子提取物對(duì)肉鴨血清免疫指標(biāo)的影響由表4 可知，添加100 ～400 mg/kg 五倍子提取物可顯著提高21 d 肉鴨血清IgM 和IgA 含量（P＜0.05），添 加200 ～400 mg/kg 五 倍 子 提 取 物可顯著提高21 d 肉鴨血清IgG 含量（P＜0.05），顯著提高42 d 肉鴨血清IgM 含量（P＜0.05）；添加100 ～400 mg/kg 五倍子提取物可顯著提高42 d 肉鴨血清IgA 和補(bǔ)體C3 含量（P＜0.05）。同時(shí)，五倍子提取物對(duì)21 d 肉鴨血清補(bǔ)體C3 和C4、42 d 肉鴨血清IgG 和補(bǔ)體C4 含量均無(wú)顯著影響。

表4 五倍子提取物對(duì)肉鴨血清免疫指標(biāo)的影響μg/mL

3 討論

李軍輝等（2021）在肉雞上的研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充400 mg/kg 的五倍子單寧酸能顯著降低飼料消耗，提高飼料轉(zhuǎn)化率。但也有研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充1000 mg/kg 單寧酸對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能無(wú)明顯改善作用（從光雷等，2021）。推測(cè)可能與單寧酸的來(lái)源不同有關(guān)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，日糧添加200 mg/kg 的五倍子提取物可顯著提高肉鴨的42 日齡體重，這與前人研究發(fā)現(xiàn)的最適添加量不一致，推測(cè)可能與動(dòng)物類型和五倍子提取物類型有關(guān)。此外，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，高達(dá)400 mg/kg 的五倍子提取物添加量對(duì)肉鴨采食量無(wú)顯著影響，這與前人研究并不一致，薛瑞婷和李棟（2020）指出，單寧酸味苦且澀味明顯，過(guò)量使用會(huì)嚴(yán)重影響動(dòng)物采食。其作用機(jī)制仍需進(jìn)一步探究。

在多器官、細(xì)胞及因子的共同調(diào)節(jié)作用下，畜禽免疫機(jī)能保持相對(duì)穩(wěn)態(tài)，以調(diào)節(jié)畜禽機(jī)體生理進(jìn)程和功能。其中，幼禽極易受免疫功能紊亂、免疫力降低的影響，嚴(yán)重?fù)p害其生長(zhǎng)性能（從光雷等，2021）。有研究指出，包括胸腺、脾臟和法氏囊在內(nèi)的免疫器官在調(diào)節(jié)肉鴨細(xì)胞和體液免疫過(guò)程中發(fā)揮重要作用。賈志新（2016）研究表明，重量或指數(shù)越大表明免疫器官發(fā)育質(zhì)量較好。本試驗(yàn)結(jié)果表明，五倍子提取物對(duì)肉鴨免疫器官發(fā)育影響顯著，特別是21 日齡，其胸腺和法氏囊的重量均有不同程度地提高，表明肉鴨免疫力增強(qiáng)。補(bǔ)體和免疫球蛋白等免疫功能因子是畜禽免疫器官發(fā)揮功能和作用的關(guān)鍵。孫澄慧（2022）在蛋雞上的研究結(jié)果表明，五倍子提取物對(duì)蛋雞血清炎癥因子的表達(dá)調(diào)控作用顯著，對(duì)免疫球蛋白無(wú)顯著調(diào)控作用。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充五倍子提取物后，肉鴨，特別是21 日齡血清免疫球蛋白A、G 和M含量均有不同程度的提升。這與孫澄慧等（2022）在蛋雞上的研究結(jié)果一致。補(bǔ)體是循環(huán)中免疫反應(yīng)的重要組成部分，其中以C3、C4 含量最高。其含量的提高通常與體液免疫水平的提升相關(guān)（賈志新，2016），本試驗(yàn)檢測(cè)到21 日齡肉鴨血清補(bǔ)體C3 含量顯著提高，提示其免疫力增強(qiáng)。

4 結(jié)論

綜上所述，日糧添加五倍子提取物可通過(guò)增強(qiáng)肉鴨免疫力來(lái)提高其生長(zhǎng)性能，綜合各項(xiàng)指標(biāo)認(rèn)為，五倍子提取物最佳添加量為200 mg/kg。