周博武，張 鑫，俸祥仁*，胡庭俊，李鳳梅，熊 飆，張業(yè)懷，陸晶瑩

（1.廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)大學(xué)，廣西南寧 530007；2.南寧市動(dòng)物園，廣西南寧 53000；3.廣西大學(xué)，廣西南寧 530000）

葡萄糖氧化酶是一種需氧脫氫酶制劑，屬于氧化還原酶（趙曉芳和張宏福，2007），能把葡萄糖氧化分解成葡萄糖酸，降低腸道pH，可以提高動(dòng)物免疫力，調(diào)整腸道健康（卓衛(wèi)杰和王彥麗，2022）。糖萜素是一種從山茶科植物種子中提取的純天然混合物，主要由糖類、三萜皂苷類和有機(jī)酸等組成，研究表明，乳酸提取糖萜素能提高母豬繁殖能力，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)，有益于保護(hù)機(jī)體組織免受氧化損害，提升母豬健康狀況，可調(diào)節(jié)斷奶仔豬體內(nèi)氨基酸水平，降低肝臟轉(zhuǎn)氨酶活性，提高機(jī)體部分免疫功能（龐繼達(dá)等，2016）?？莶菅挎邨U菌具有提高豬生長(zhǎng)性能，改善腸道健康和提升肉品質(zhì)的作用，研究結(jié)果表明，在基礎(chǔ)日糧中添加0.05% 的枯草芽孢桿菌制劑能顯著提升生豬日增重，降低料重比，促進(jìn)生豬生長(zhǎng)（馮曼等，2020）。劉沛堯等（2022）報(bào)道，基礎(chǔ)日糧添加芽孢桿菌、非淀粉多糖酶制劑與大蒜素能起到與抗生素相似的作用，能提高黑羽肉雞的生產(chǎn)性能，但會(huì)對(duì)黑羽肉雞免疫能力及抗氧化指標(biāo)造成影響。目前大多數(shù)研究局限于使用一種或兩種無(wú)抗添加劑對(duì)豬生長(zhǎng)性能的影響，鮮見(jiàn)報(bào)道 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑在巴馬香豬生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)等方面影響的研究，本試驗(yàn)初步驗(yàn)證 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑在巴馬香豬生產(chǎn)應(yīng)用的可行性，為深入研究 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑的運(yùn)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 試驗(yàn)管理

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 試驗(yàn)選取3 月齡健康狀況相近的巴馬香豬60 頭，平均體重15 kg 左右，公母隨機(jī)，分為對(duì)照組、試驗(yàn)1 組和試驗(yàn)2 組，每組4 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5 頭。

1.2 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)用植物提取物，以糖萜素、黃芪等為主要原料，同時(shí)添加微生物菌劑和酶制劑，通過(guò)枯草芽孢桿菌等密封發(fā)酵加工而獲得； “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑原料從南寧市飼料獸藥禽苗市場(chǎng)購(gòu)買，由葡萄糖氧化酶、糖萜素和枯草芽孢桿菌等按照每噸飼料添加50 g、200 g、500 g 的配比 1 ∶4 ∶10 獲得。

1.3 試驗(yàn)方法 試驗(yàn)于2022 年5 月在南寧某規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)共計(jì)35 d，其中，預(yù)飼期7 d，正試期28 d。試驗(yàn)嚴(yán)格遵照豬場(chǎng)生產(chǎn)管理規(guī)程及正常免疫程序施行，試驗(yàn)前徹底消毒欄舍，空置7 d 后轉(zhuǎn)入試驗(yàn)豬。試驗(yàn)期間每天08 ：00 和17 ：00 飼喂，各組試驗(yàn)豬充分飼喂且自由飲水，次日清除料槽剩料并稱重，同時(shí)保持飼料新鮮、欄舍清潔、防寒保暖。預(yù)飼期7 d 結(jié)束后進(jìn)行空腹稱重，依次為對(duì)照組、試驗(yàn)1 組、試驗(yàn)2 組，每組4 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5 頭，進(jìn)行28 d 正式試驗(yàn)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1 組飼喂基礎(chǔ)日糧+100 g/kg 植物提取物，試驗(yàn)2 組飼喂基礎(chǔ)日糧+100 g/kg “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑。正式期28 d 結(jié)束后進(jìn)行空腹稱重，各組隨機(jī)選擇10 頭豬只空腹前腔靜脈采血5 mL，采得血樣靜置1 h 后3000 r/min 離心10 min，分離血清并儲(chǔ)存于-20℃冰箱，測(cè)定巴馬香豬各項(xiàng)血清生化指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)。

1.4 試驗(yàn)日糧 基礎(chǔ)日糧參照NRC（2012）飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，其日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平詳見(jiàn)表1。

1.5 測(cè)定指標(biāo) 生長(zhǎng)性能：詳細(xì)記錄試驗(yàn)豬只始末重量、耗料量，計(jì)算日均增重、日均采食量、料重比；血清生化指標(biāo)：總蛋白（TP）、堿性磷酸酶（AKP）、溶菌酶（LZM）、總膽固醇（T-CHO）、甘油三酯（TG）；抗氧化指標(biāo)：總超氧化物歧化酶（T-SOD）、總抗氧化能力（T-AOC）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）、丙二醛（MDA）。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)通過(guò)Excel 2003 進(jìn)行處理，采用DPS 進(jìn)行方差分析，采用Duncan's 法進(jìn)行多重比較，P＜0.05 表示組間差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑對(duì)巴馬香豬生長(zhǎng)性能的影響 由表2 可知，組間平均始末重量差異不顯著（P＞0.05），但日均增重、日均采食量、料重比差異顯著（P＜0.05）。其中試驗(yàn)2 組日均增重最高，分別高出對(duì)照組71.87%、試 驗(yàn)1 組48.67%，差 異 顯 著（P＜0.05）；試驗(yàn)1 組日均增重比對(duì)照組顯著提高15.61%（P＜0.05）。試驗(yàn)2 組日均采食量最高，分別比對(duì)照組顯著提高15.06%，比試驗(yàn)1 組顯著提高13.34%（P＜0.05）；試驗(yàn)1 組日均采食量略高于對(duì)照組1.52%，差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)2 組料重比最低，分別顯著低于對(duì)照組和試驗(yàn)1組32.95%、23.78%（P＜0.05）；試驗(yàn)1 組料重比顯著低于對(duì)照組12.03%（P＜0.05）。

表2 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑對(duì)巴馬香豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑對(duì)巴馬香豬血清生化指標(biāo)的影響 由表3 可知，試驗(yàn)組豬只的總蛋白、堿性磷酸酶、溶菌酶含量均高于對(duì)照組，且試驗(yàn)2 組最高；總膽固醇、甘油三酯含量均低于對(duì)照組，且試驗(yàn)2 組最低。其中試驗(yàn)2 組總蛋白、堿性磷酸酶、溶菌酶含量分別比對(duì)照組顯著提高49.12%、32.29%、101.38%（P＜0.05）；試驗(yàn)1 組總蛋白略高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)2 組堿性磷酸酶含量略高于試驗(yàn)1 組，但差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)1 組溶菌酶含量顯著高于對(duì)照組36.18%（P＜0.05）。各組之間總膽固醇含量差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)2 組甘油三酯含量顯著低于對(duì)照組39.73%（P＜0.05）；試驗(yàn)1 組甘油三酯含量略高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）。

表3 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑對(duì)巴馬香豬血清生化指標(biāo)的影響

2.3 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑對(duì)巴馬香豬抗氧化指標(biāo)的影響 由表4 可知，試驗(yàn)組豬只總超氧化歧化酶、總抗氧化能力、過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽過(guò)氧化酶含量均高于對(duì)照組，且試驗(yàn)2 組最高。其中試驗(yàn)2 組總超氧化歧化酶、總抗氧化能力、過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽過(guò)氧化酶分別比對(duì)照組顯著提高16.65%、42.25%、25.58%、25.58%（P＜0.05）；試驗(yàn)1 組總超氧化歧化酶、總抗氧化能力、谷胱甘肽過(guò)氧化酶含量略高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)組之間過(guò)氧化氫酶差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)2 組和試驗(yàn)1 組丙二醛含量分別低于對(duì)照組9.84%、9.29%，其中試驗(yàn)2 組最低，但差異均不顯著（P＞0.05）。

表4 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑對(duì)巴馬香豬抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑對(duì)巴馬香豬生長(zhǎng)性能的影響 葡萄糖氧化酶在動(dòng)物消化道中可以酶解葡萄糖生成葡萄糖酸和過(guò)氧化氫，降低機(jī)體消化道pH，抑制有害菌，促進(jìn)有益菌生長(zhǎng)，進(jìn)而促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能（侯振平等，2017）。糖萜素中富含三萜皂苷、多糖、有機(jī)酸等多種活性物質(zhì)，能促進(jìn)動(dòng)物消化液的分泌，增強(qiáng)消化和內(nèi)分泌功能，促進(jìn)新陳代謝，加快蛋白質(zhì)的合成，從而促進(jìn)動(dòng)物的快速生長(zhǎng)（劉宗新等，2017）?？莶菅挎邨U菌抗逆性強(qiáng)，在不利因素下以芽孢形式存在環(huán)境中，進(jìn)入消化道后可復(fù)活，將淀粉轉(zhuǎn)化成單糖，再由消化道中的其他有益菌將單糖轉(zhuǎn)化成乳酸等有機(jī)酸，從而促進(jìn)乳酸菌等菌群的生長(zhǎng)繁殖，抑制大腸桿菌的生長(zhǎng)繁殖，調(diào)節(jié)消化道微生態(tài)平衡（張廣民和孫文志，2002）。湯海鷗等（2014）在斷奶仔豬日糧添加100 g/t 葡萄糖氧化酶，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，仔豬飼料利用率和轉(zhuǎn)化率顯著提高。黃曉玲（2010）在仔豬基礎(chǔ)日糧添加糖萜素，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，糖萜素能顯著提高仔豬的生長(zhǎng)性能。黃雪泉（2010）在仔豬基礎(chǔ)日糧添加枯草芽孢桿菌制劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌能有效提高仔豬生產(chǎn)性能，可完全替代日糧中的金霉素。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)2 組巴馬香豬日均增重、日均采食量和料重比均優(yōu)于試驗(yàn)1 組和對(duì)照組。其機(jī)制很可能是 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑的聯(lián)合使用使各種物質(zhì)之間產(chǎn)生協(xié)同作用，在葡萄糖氧化酶提供酸性的腸道環(huán)境下，糖萜素中的活性物質(zhì)在酸性環(huán)境中活性更強(qiáng)，同時(shí)枯草芽孢桿菌能抑制有害菌和促進(jìn)有益菌的生長(zhǎng)，復(fù)方制劑各物質(zhì)之間多重協(xié)同作用可有效提高飼料利用率和轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)巴馬香豬的生產(chǎn)性能。

3.2 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑對(duì)巴馬香豬血清生化指標(biāo)的影響 血清生化指標(biāo)的變化可以反映出動(dòng)物機(jī)體新陳代謝的功能和機(jī)體健康狀況。如血清中總蛋白含量能反映機(jī)體蛋白質(zhì)吸收和體液免疫水平。血清中的堿性磷酸酶能反映機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的代謝效率，在堿性條件下能催解磷酸單酯，其活性高低與動(dòng)物的生長(zhǎng)性能呈正相關(guān)（唐曉玲等，2005）。溶菌酶產(chǎn)生于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，是一種存在于機(jī)體具有抗菌、抗病毒和抗腫瘤等作用的非特異性免疫物質(zhì)，其活性高低反映機(jī)體的免疫水平（白東英等，2009）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組豬只堿性磷酸酶含量高于對(duì)照組，試驗(yàn)2 組效果更顯著，進(jìn)一步證實(shí)了 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑可以提高巴馬香豬的生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)2 組和試驗(yàn)1 組血清中總蛋白和溶菌酶含量均高于對(duì)照組，試驗(yàn)2 組效果更明顯，表明巴馬香豬日糧中添加復(fù)方制劑有助于提高機(jī)體蛋白質(zhì)的代謝能力和免疫能力。血清中總膽固醇、甘油三酯等水平反映了機(jī)體脂類物質(zhì)代謝的狀況。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧添加復(fù)方制劑能降低巴馬香豬血清總膽固醇、甘油三酯水平，說(shuō)明復(fù)方制劑可以提高巴馬香豬對(duì)脂肪的利用率，提高生長(zhǎng)性能。分析其結(jié)果，可能是在復(fù)方制劑各活性物質(zhì)之間的協(xié)同作用下可以提高巴馬香豬代謝水平和肝、腎功能，其作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

3.3 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑對(duì)巴馬香豬抗氧化指標(biāo)的影響 研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體氧化還原平衡是依靠氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)的共同作用。正常生理?xiàng)l件下，自由基的產(chǎn)生和清除同時(shí)發(fā)生在動(dòng)物機(jī)體的新陳代謝過(guò)程中，處于動(dòng)態(tài)平衡，但當(dāng)動(dòng)物機(jī)體清除自由基的能力降低時(shí)，機(jī)體氧化與抗氧化系統(tǒng)之間的平衡狀態(tài)被打破，游離的自由基含量增加，從而誘發(fā)氧化應(yīng)激（尤婷，2020）。實(shí)際生產(chǎn)中，豬只在斷奶、轉(zhuǎn)欄、疫苗注射過(guò)程中抗病力下降，非常容易引起氧化應(yīng)激，從而導(dǎo)致豬只采食量下降，影響生長(zhǎng)速度。T-AOC、CAT、T-SOD、GSH-PX 是反映機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo)。T-AOC 反映動(dòng)物機(jī)體防御體系的總抗氧化水平。T-SOD、GSH-PX、CAT 是重要的抗氧化酶，GSH-PX 可以特異地催化還原動(dòng)物體內(nèi)過(guò)氧化物來(lái)保護(hù)機(jī)體細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)及功能的完整性，T-SOD 能把機(jī)體內(nèi)有害的超氧自由基轉(zhuǎn)化為H2O2，體內(nèi)T-SOD 和GSH-PX 活性間接反映機(jī)體對(duì)超氧自由基的消除能力（洪偉彬，2016）。T-SOD 與CAT 可協(xié)同清除體內(nèi)多余的自由基，從而降低自由基對(duì)機(jī)體的損傷。MDA 是脂質(zhì)過(guò)氧化降解后的主要產(chǎn)物，其濃度直接決定機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化程度，是機(jī)體評(píng)價(jià)脂質(zhì)氧化損傷的重要指標(biāo)，同時(shí)也可間接反映腸黏膜細(xì)胞的損傷程度，其濃度與脂質(zhì)氧化損傷程度呈負(fù)相關(guān)（劉慧娟等，2023）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在巴馬香豬基礎(chǔ)日糧中添加復(fù)方制劑可以提高T-AOC、T-SOD、CAT、GSH-PX 等抗氧化酶的活性，降低MDA 含量，說(shuō)明在基礎(chǔ)日糧中添加 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑可以提高巴馬香豬的抗氧化指標(biāo)。但 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑因其組合的物質(zhì)繁多，相互作用復(fù)雜，目前尚未有研究記載，其抗氧化指標(biāo)的機(jī)理目前尚不清楚，還需進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

基礎(chǔ)日糧中添加 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑能提高巴馬香豬的生長(zhǎng)性能，改善血清生化指標(biāo)，增強(qiáng)機(jī)體免疫力和抗氧化能力。本試驗(yàn)初步證實(shí) “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑在巴馬香豬生產(chǎn)中應(yīng)用的可行性，為 “酶、植物提取物和益生菌” 復(fù)方制劑的應(yīng)用提供了新的研究思路和科學(xué)依據(jù)。