李 穎，任麗萍，遠(yuǎn)永來

（1.濟(jì)南市動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟(jì)南 250099；2.西華縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河南周口 466600）

苜蓿是世界上栽種面積最廣的重要豆科草本植物，因其營養(yǎng)價值高，被譽(yù)為 “牧草之王” （劉玉鳳等，2014）。有研究發(fā)現(xiàn)，紫花苜蓿中粗蛋白質(zhì)含量可達(dá)18% 以上（孫振權(quán)等，2009），此外，除蛋氨酸含量略低外，其氨基酸種類及含量幾乎與理想蛋白一致（曲根，2019）。除營養(yǎng)豐富外，近年來，諸多研究發(fā)現(xiàn)，苜蓿中含有大量皂苷類、黃酮類等生物活性物質(zhì)（李林祥等，2016）。其中黃酮類化合物已被證實(shí)可清除氧自由基并顯著抑制脂質(zhì)過氧化（曲根，2019）。此外，有研究指出，黃酮類化合物可增強(qiáng)維生素C、維生素E 的抗氧化功能（左曉昕等，2015）。目前，憑借其極高的飼用價值，大量研究揭示了苜蓿草粉在提高多種動物生長和生產(chǎn)性能中的積極作用。蛋雞的研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充3% ～5% 的苜蓿草粉能有效提高蛋雞產(chǎn)蛋率（徐國銀，2007）。育肥豬的研究表明，補(bǔ)充苜蓿草粉能顯著改善生長豬的生長性能（王彥華，2009）。目前，關(guān)于苜蓿和動物腸道健康的研究較少，因此，本試驗(yàn)旨在探究苜蓿草粉對仔豬腸道抗氧化及形態(tài)的影響，以期為生產(chǎn)應(yīng)用提供參考。

1 材料方法

1.1 材料 苜蓿草粉購置于山東某日糧公司，經(jīng)檢測其中營養(yǎng)物質(zhì)含量為：Ash 8.75%、CP 14.78%、EE 2.84%、CF 22.46%、Ca 1.38%、P 0.17%。

1.2 試驗(yàn)日糧 按照NRC 建議標(biāo)準(zhǔn)，配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，分別使用0%、3%、6% 和9% 的苜蓿草粉替代麩皮為各試驗(yàn)組日糧，各組日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)將320 只日齡（28±2）相近、健康狀況良好的仔豬分為4 組，每組8 個重復(fù)，每重復(fù)10 頭，分別飼喂各組日糧。試驗(yàn)共計76 d，其中6 d 的適應(yīng)期和70 d 的正式試驗(yàn)。豬舍徹底消殺清潔后進(jìn)豬，試驗(yàn)期內(nèi)，仔豬自由采食和自由飲水，每天定時飼喂。

1.4 測定方法

1.4.1 生長性能 試驗(yàn)前后，以重復(fù)為單位，所有豬禁食過夜后記錄空腹體重，同時，每周記錄投喂和剩料量，具體計算公式如下：

1.4.2 腸道指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束后，每組選8 只豬測定腸道抗氧化指標(biāo)和腸道形態(tài)指標(biāo)，屠宰后小心摘取十二指腸、空腸和回腸樣本，使用預(yù)冷的PBS仔細(xì)清洗掉內(nèi)容物后，在相近位置，各取兩份腸道樣本，一份投入4% 多聚甲醛溶液中；一份轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的泡沫箱中，盡快帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行抗氧化相關(guān)指標(biāo)的測定。

1.4.3 抗氧化指標(biāo) 冰中保存腸道樣本取出后，準(zhǔn)確切取0.1 g 腸道切片樣本，按1 ∶9 的比例加入PBS，加入勻漿鋼珠進(jìn)行勻漿，勻漿后使用超低溫離心機(jī)離心（4℃，3000 r，10 min）后取上清，分別測定SOD、GSH-Px、CAT 活性及T-AOC 能力。同時，檢測各樣本總蛋白含量對酶活數(shù)據(jù)進(jìn)行校準(zhǔn)。

1.4.4 腸道切片 將保存于4% 多聚甲醛溶液中的腸道樣本取出，制備石蠟切片并進(jìn)行H ＆ E 染色，每個樣本選擇8 個絨毛結(jié)構(gòu)完整、平直的視野測定絨毛高度和隱窩深度，并計算V/C 值。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 所有數(shù)據(jù)整理后，使用SPSS（24.00）進(jìn)行單因素方差，采用LSD 進(jìn)行多重比較分析，P＜0.05 表示組間差異顯著。

2 結(jié)果分析

2.1 日糧添加苜蓿草粉對斷奶仔豬生長性能的影響 由表2 可知，日糧添加6% 和9% 的苜蓿草粉組仔豬終末體重顯著提高3.2% 和3.5%（P＜0.05），平均日增重顯著提高3.6% 和4.3%（P＜0.05）；日糧添加9% 的苜蓿草粉組仔豬料重比顯著降低6.1%（P＜0.05）；此外，苜蓿草粉對仔豬采食量無顯著影響（P＞0.05）。

表2 日糧添加苜蓿草粉對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 日糧添加苜蓿草粉對斷奶仔豬腸道抗氧化指標(biāo)的影響 由表3 可知，6% 和9% 的苜蓿草粉組仔豬十二指腸GSH-Px 酶活性顯著高于其他各組（P＜0.05），日糧添加苜蓿草粉顯著提高仔豬空 腸T-AOC 能 力（P＜0.05）；補(bǔ) 充6% 和9%的苜蓿草粉組顯著提高仔豬回腸GSH-Px 和SOD活性、提高T-AOC 能力（P＜0.05），此外，日糧添加苜蓿草粉對仔豬十二指腸SOD、CAT 活性和T-AOC 能力，對空腸GSH-Px、SOD 和CAT 活性，對回腸CAT 活性均無顯著影響（P＞0.05）。

表3 日糧添加苜蓿草粉對斷奶仔豬腸道抗氧化指標(biāo)的影響 U/mg prot

2.3 日糧添加苜蓿草粉對斷奶仔豬腸道形態(tài)的影響 由表4 可知，6% 和9% 的苜蓿草粉組仔豬十二指腸V/C 值顯著高于3% 的苜蓿草粉組（P＜0.05），空腸絨毛高度顯著高于其他各組（P＜0.05）；日糧添加6% 的苜蓿草粉組仔豬回腸絨毛高度和V/C 值顯著高于其他組（P＜0.05）；此外，日糧添加苜蓿草粉對仔豬十二指腸絨毛高度和隱窩深度，空腸隱窩深度，回腸隱窩深度均無顯著影響（P＞0.05）。

表4 日糧添加苜蓿草粉對斷奶仔豬腸道形態(tài)的影響

3 討論

目前，鮮有關(guān)于苜蓿草粉在仔豬上的應(yīng)用研究，徐向陽等（2006）在育肥豬上的研究表明，日糧添加10% 的苜蓿草粉能極顯著提高其日增重和日采食量，同時也能有效降低飼料消耗。但也有研究表明，日糧補(bǔ)充苜蓿草粉能在不影響育肥豬采食量的前提下可顯著促進(jìn)育肥豬生長。本試驗(yàn)結(jié)果表明，6%～9%的添加量促生長效果最佳。其中，9% 添加量組料重比最低，表明9% 的添加量組飼喂效果最佳，這與王彥華（2009）的研究結(jié)果并不一致，推測與豬的種質(zhì)不同有關(guān)。

目前，有研究認(rèn)為，養(yǎng)殖即是養(yǎng)腸道，腸道健康則動物健康。Placha 等（2022）將腸道健康總結(jié)定義為腸道屏障（物理、化學(xué)及機(jī)械）、腸道微生物（組成及豐度）及其分泌成分與機(jī)體內(nèi)外部應(yīng)激間的相互作用。其中抗氧化酶是腸道屏障的重要組成（王彥華，2009）。其中，SOD 和GSH-Px 被認(rèn)為是反映機(jī)體抗氧化機(jī)能最重要的指標(biāo)（王福香等，2009）。前人研究認(rèn)為，苜蓿能顯著提高生長豬的抗氧化酶活性（王彥華，2009）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧添加6%～9%的苜蓿草粉可顯著提高仔豬各腸段抗氧化酶活性，其中以回腸效果最佳，GSH-Px、SOD 活性和T-AOC 能力均有不同程度的提高。腸道中的絨毛和隱窩是腸道消化吸收的關(guān)鍵。仔兔上的研究表明，斷奶極易造成其絨毛萎縮和隱窩變深。計偉（2019）認(rèn)為，V/C 值越高，即絨毛越高，隱窩越淺代表較強(qiáng)的腸道吸收能力。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加6% 的苜蓿草粉后，仔豬十二指腸和回腸的V/C 值顯著提高，提示其消化吸收功能增強(qiáng)，推測這可能是其生長性能提高的主要原因。

4 結(jié)論

綜上所述，添加苜蓿草粉能有效增強(qiáng)仔豬腸道抗氧化性能，改善其腸道結(jié)構(gòu)，促進(jìn)其生長。在本試驗(yàn)條件下，苜蓿草粉最適替代量6%。