黃 巖,王明麗,邊玉婷,劉元元

1.石家莊市婦幼保健院口腔科,河北石家莊 050000;2.石家莊市第二醫(yī)院口腔科,河北石家莊 050000

復發(fā)性口腔潰瘍是常見口腔黏膜疾病之一,表現(xiàn)為孤立的、圓形或橢圓形潰瘍,潰瘍表面覆蓋黃色假膜、中央凹陷、外周充血紅腫、疼痛明顯,反復發(fā)作于唇部、舌部、頰黏膜,嚴重者發(fā)作于咽部、軟腭[1]。輕型復發(fā)性口腔潰瘍發(fā)作期為7～15 d,數(shù)量1～5個,直徑5 mm左右;重型發(fā)作期為1～3個月,數(shù)量1～2個,直徑10 mm以上,具有一定的自限性,能夠不治而愈,也可使用消炎、緩解疼痛或促進愈合的藥物進行治療[2-3]。口腔潰瘍病因不明,可能是由遺傳、環(huán)境、免疫、飲食、內(nèi)分泌紊亂等多種因素綜合作用而導致[4]。有研究發(fā)現(xiàn),干擾素調(diào)節(jié)因子5(IRF5)、可溶性髓樣細胞觸發(fā)受體1(sTREM-1)與炎癥和感染類疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān),然而IRF5和sTREM-1在復發(fā)性口腔潰瘍患兒血清中的表達情況尚不清楚[5-7]。因此,本研究通過檢測復發(fā)性口腔潰瘍患兒血清IRF5和sTREM-1表達水平,分析血清IRF5和sTREM-1對復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的預測價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取石家莊市婦幼保健院于2021年7月至2022年12月收治的146例復發(fā)性口腔潰瘍患兒作為觀察組,其中男77例、女69例,平均年齡(10.63±2.62)歲,平均體重指數(shù)(18.57±2.73)kg/m2。納入標準:(1)符合《口腔黏膜病學》中復發(fā)性口腔潰瘍的診斷標準[8];(2)病史至少為半年;(3)每月至少發(fā)病1次;(4)近1個月內(nèi)未進行系統(tǒng)治療。排除標準:(1)合并其他口腔黏膜疾病;(2)合并重要器官功能不全;(3)合并惡性腫瘤;(4)合并自身免疫系統(tǒng)疾病或血液性疾病;(5)合并感染性疾病。另選取同期138例健康志愿者作為對照組,其中男70例、女68例,平均年齡(10.85±2.81)歲,平均體重指數(shù)(18.72±2.65)kg/m2。與觀察組與對照組年齡、性別等比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究經(jīng)患兒監(jiān)護人知情同意,并經(jīng)石家莊市婦幼保健院倫理委員會批準通過(審批號:2020120059)。

1.2方法

1.2.1血清IRF5表達水平檢測 采集所有研究對象空腹靜脈血4 mL并分為2份,分別離心10 min并將上清液保存于-80 ℃,一份用于血清IRF5表達水平檢測,另一份用于血清sTREM-1、白細胞介素(IL)-6和IL-10水平檢測。采用實時熒光定量PCR(qPCR)檢測血清IRF5 mRNA表達水平。Trizol試劑提取總RNA,之后逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,使用7500型RT-qPCR儀(美國ABI公司)進行擴增,擴增體系25 μL。IRF5上游引物為5′-CCAGGGCTTCAATGGGTCAA-3′,下游引物為5′-CATCCACGCCTTCGGTGTAT-3′,GAPDH上游引物為5′-CTATAAATTGAGCCCGCAGC-3′,下游引物為5′-GACCAAATCCGTTGACTCCG-3′。以GAPDH為內(nèi)參,采用2-ΔΔCt法計算IRF5 mRNA相對表達水平。

1.2.2血清sTREM-1、IL-6和IL-10水平檢測 取待測血清,采用ML-dr3518型酶標分析儀(上海酶聯(lián)生物有限公司)檢測血清sTREM-1、IL-6和IL-10表達水平。sTREM-1酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(貨號:E-EL-H1596c)購自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司;IL-6 ELISA試劑盒(貨號:SEKH-0013)購自北京索萊寶科技有限公司;IL-10 ELISA試劑盒(貨號:E-EL-R0016c)購自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司。嚴格按照試劑盒說明進行檢測,獲取450 nm波長下的吸光度值,繪制標準曲線并計算sTREM-1、IL-6和IL-10水平。

1.2.3隨訪 對患兒進行為期3個月的隨訪,最晚截至2023年3月,將3個月內(nèi)復發(fā)的患兒歸為復發(fā)組(n=45),未復發(fā)的歸為未復發(fā)組(n=101)。

2 結(jié) 果

2.1觀察組、對照組血清IRF5和sTREM-1水平比較 與對照組比較,觀察組血清IRF5水平明顯降低(P<0.05),sTREM-1水平明顯升高(P<0.05)。見表1。

表1 觀察組、對照組血清IRF5和sTREM-1水平比較

2.2觀察組、對照組血清IL6和IL10水平比較 相比于對照組,觀察組血清IL-6和IL-10水平均明顯升高(P<0.05)。見表2。

表2 觀察組、對照組血清IL-6和IL-10水平比較

2.3復發(fā)性口腔潰瘍患兒血清IRF5和sTREM-1水平與IL-6、IL-10的相關(guān)性 Pearson分析結(jié)果顯示,復發(fā)性口腔潰瘍患兒血清IRF5與IL-6、IL-10水平呈負相關(guān)(r=-0.531、-0.462,P<0.05),血清sTREM-1水平與IL-6、IL-10水平呈正相關(guān)(r=0.435、0.480,P<0.05)。

2.4復發(fā)組、未復發(fā)組血清IRF5和sTREM-1水平比較 相比于未復發(fā)組,復發(fā)組患兒血清IRF5水平明顯降低(P<0.05),sTREM-1水平明顯升高(P<0.05)。見表3。

表3 復發(fā)組、未復發(fā)組血清IRF5和sTREM-1水平比較

2.5血清IRF5和sTREM-1水平對復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的預測價值 將IRF5和sTREM-1水平作為檢驗變量,將復發(fā)性口腔潰瘍患兒是否復發(fā)作為因變量繪制ROC曲線,結(jié)果顯示,血清IRF5水平單獨預測復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的曲線下面積(AUC)為0.823(95%CI:0.752～0.882),最佳cut-off值為0.85,靈敏度、特異度分別為75.56%、84.16%;血清sTREM-1水平單獨預測復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的AUC為0.833(95%CI:0.763～0.890),靈敏度、特異度分別為68.89%、88.12%,最佳cut-off值為84.08 pg/mL;二者聯(lián)合預測復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的AUC為0.915(95%CI:0.858～0.955),靈敏度、特異度分別為88.89%、82.18%,二者聯(lián)合預測的AUC顯著大于IRF5單獨預測的AUC(Z=2.455,P=0.014)和sTREM-1單獨預測的AUC(Z=2.790,P=0.005)。見圖1和表4。

圖1 血清IRF5和sTREM-1水平預測復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的ROC曲線

表4 血清IRF5和sTREM-1水平對復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的預測價值

3 討 論

復發(fā)性口腔潰瘍發(fā)病率較高,易發(fā)于10～30歲人群,復發(fā)性口腔潰瘍造成的疼痛不僅影響進食、影響消化系統(tǒng),也會對患者的情緒、學習、工作及生活造成一定影響[9]。尋找與復發(fā)性口腔潰瘍發(fā)生發(fā)展相關(guān)的血清指標,對其防治具有一定積極意義。

IRF家族包含IRF 1～9共9個成員,已有研究發(fā)現(xiàn),IRF能夠誘導并調(diào)節(jié)干擾素的表達,并且IRF水平與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性炎癥性疾病、腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[10]。王梅葉等[11]研究發(fā)現(xiàn),與健康人群相比較,IRF5在潰瘍性結(jié)腸炎患者血清中的表達較低,且與該疾病嚴重程度和預后相關(guān)。也有研究發(fā)現(xiàn),IRF5介導著巨噬細胞的極化和炎癥反應的誘發(fā)[12]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),血清IRF5在復發(fā)性口腔潰瘍患兒血清中的表達水平低于健康兒童(P<0.05),提示IRF5可能與復發(fā)性口腔潰瘍的發(fā)生有關(guān);且治療后復發(fā)的患兒血清IRF5水平低于治療后未復發(fā)患兒(P<0.05),提示IRF5可能在一定程度上影響復發(fā)性口腔潰瘍的發(fā)展。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn),血清IRF5水平單獨預測復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的AUC為0.823,最佳cut-off值為0.85,靈敏度和特異度均在75%以上,表明血清IRF5水平對復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)具有一定的預測價值,當患兒血清IRF5水平低于0.85時,復發(fā)的可能性較大。

sTREM-1編碼基因位于人6號染色體上,屬于免疫球蛋白超家族成員,是多種疾病的潛在標志物[13-14]。羊丹等[15]研究表明,潰瘍性結(jié)腸炎患者血清sTREM-1水平明顯高于健康者,且血清sTREM-1水平對患者臨床結(jié)局具有一定的預測價值。劉德義等[16]研究發(fā)現(xiàn),急性發(fā)作期慢性阻塞性肺疾病患者血清sTREM-1水平高于緩解期患者,且隨著疾病嚴重程度而升高。本研究結(jié)果顯示,健康兒童血清sTREM-1水平低于復發(fā)性口腔潰瘍患兒,推測sTREM-1水平參與復發(fā)性口腔潰瘍的發(fā)生;隨訪發(fā)現(xiàn)治療后未復發(fā)患兒的血清sTREM-1水平低于復發(fā)患兒,推測sTREM-1水平或參與復發(fā)性口腔潰瘍的發(fā)展。ROC曲線分析結(jié)果表明,血清sTREM-1水平單獨預測復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的AUC為0.833,靈敏度和特異度也較高,最佳cut-off值為84.08 pg/mL,推測患兒血清sTREM-1水平高于84.08 pg/mL時,有可能復發(fā);血清IRF5和sTREM-1水平聯(lián)合預測復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的AUC和靈敏度顯著高于二者單獨預測的AUC和靈敏度,表明血清IRF5和sTREM-1水平聯(lián)合預測復發(fā)性口腔潰瘍患兒復發(fā)的價值更高,建議臨床上將二者聯(lián)合檢測。

IL-6和IL-10常用來作為評價機體炎癥反應和免疫反應的指標。解碧晶等[17]研究表明,復發(fā)性口腔潰瘍治療后血清IL-6和IL-10水平均低于治療前。也有研究顯示,機體在病毒感染后IRF5會誘導促炎因子IL-6表達[18]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),復發(fā)性口腔潰瘍患兒血清IL-6和IL-10水平均明顯高于健康兒童,表明患兒體內(nèi)存在炎癥,臨床上可通過觀察患兒血清IL-6和IL-10評價體內(nèi)炎癥反應程度。此外,復發(fā)性口腔潰瘍患兒血清IRF5、sTREM-1水平與IL-6、IL-10水平存在相關(guān)性,推測IRF5、sTREM-1有可能通過影響患兒體內(nèi)炎癥反應影響潰瘍的發(fā)生與發(fā)展,具體信號通路仍待研究。

綜上所述,復發(fā)性口腔潰瘍患兒血清IRF5水平較低、sTREM-1水平較高,二者聯(lián)合預測復發(fā)性口腔潰瘍患兒再復發(fā)具有較高價值。但本研究病例數(shù)較少,且未研究IRF5及sTREM-1影響復發(fā)性口腔潰瘍發(fā)生發(fā)展的具體作用機制,血清IRF5和sTREM-1水平對復發(fā)性口腔潰瘍患兒是否復發(fā)的預測價值仍需大樣本研究進一步驗證。