康翠偉 閆利鵬 劉寧 賈向波

肺癌是全球發(fā)病率、死亡率最高的癌癥，隨著工業(yè)化發(fā)展，國內(nèi)肺癌發(fā)病率呈上升趨勢［1］。多數(shù)肺癌患者確診時(shí)已處于晚期，易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，常見轉(zhuǎn)移部位為脊柱、骨盆及股骨，以溶骨性為主。據(jù)數(shù)據(jù)顯示，30%～40%肺癌患者會(huì)出現(xiàn)骨轉(zhuǎn)移，1 年生存率約達(dá)40%［2］。肺癌骨轉(zhuǎn)移可出現(xiàn)劇烈疼痛，嚴(yán)重者無法入睡，生活質(zhì)量遭受嚴(yán)重干擾。臨床診斷骨轉(zhuǎn)移以組織活檢、影像學(xué)檢測等方法為主，但上述方法存在有創(chuàng)、費(fèi)用高等缺點(diǎn)。因此，尋找其他有效、經(jīng)濟(jì)、無創(chuàng)的檢查手段診斷骨轉(zhuǎn)移極為重要。已有學(xué)者證實(shí)，肺癌骨轉(zhuǎn)移可致機(jī)體骨代謝紊亂，造成溶骨性骨代謝標(biāo)志物水平改變［3］。血Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽（Type I collagen crosslinked carboxy-terminal peptide，ⅠCTP）、血抗酒石酸酸性磷酸酶5b（Tartrate-resistant acid phosphatase 5b，TRACP-5b）均是常見的溶骨性骨代謝標(biāo)志物。另外，近年越來越多研究認(rèn)為，微小RNA-107（Micrornas-107，miR-107）與肺癌、乳腺癌等多數(shù)腫瘤生長、轉(zhuǎn)移相關(guān)［4-5］。對此，本文旨在分析ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 檢測在肺癌骨轉(zhuǎn)移中的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 一般資料

1.1 資料與方法

選取2020 年10 月至2022 年12 月于河南省人民醫(yī)院醫(yī)治的中晚期肺癌患者122 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理檢查、影像學(xué)檢查確診為肺癌，且符合《中華醫(yī)學(xué)會(huì)肺癌臨床診療指南（2018 版）》［6］相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；②既往無其他骨代謝疾??；③近期未服用對骨代謝指標(biāo)有影響的藥品；④年齡＞18 歲；排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不齊全；②無法正常言語交流；③合并其他惡性腫瘤者。

根據(jù)是否發(fā)生骨轉(zhuǎn)移分為（骨轉(zhuǎn)移標(biāo)準(zhǔn)［7］：99mTc-MDP SPECT/CT 全身骨掃像確診為陽性、臨床癥狀表現(xiàn)為骨疼痛、病理性骨折等。）骨轉(zhuǎn)移組58 例，非骨轉(zhuǎn)移組64 例。其中骨轉(zhuǎn)移組男40 例，女18 例，平均年齡（64.33±8.24）歲，腺癌34 例、小細(xì)胞肺癌13 例、鱗狀細(xì)胞癌11 例。非骨轉(zhuǎn)移組男42例，女22 例，平均年齡（65.01±8.37）歲，腺癌38 例、小細(xì)胞肺癌14 例、鱗狀細(xì)胞癌12 例。兩組臨床資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。本研究經(jīng)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過，受試者或家屬已簽署知情同意書。

1.2 方法

所有研究對象均空腹抽取靜脈血3 mL，室溫靜置30 min，離心（3 500 r/min、15 min、離心半徑10 cm），取血清，采用瑞士羅氏Cobas601 全自動(dòng)免疫發(fā)光儀測定ⅠCTP、酶聯(lián)免疫吸附法測定TRACP-5b，熒光定量PCR 測定miR-107，采 用2 Δ ct 分析miR-107的相對表達(dá)量。ⅠCTP、TRACP-5b 試劑盒來自上海江萊生物科技有限公司，miR-107試劑盒來自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.3 觀察指標(biāo)

比較骨轉(zhuǎn)移組病灶不同分級ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 水平，對骨轉(zhuǎn)移組病灶行分級［7］，0 級：骨顯像表示正常或良性；Ⅰ級：病灶轉(zhuǎn)移數(shù)目小于6 個(gè)，Ⅱ級：病灶轉(zhuǎn)移數(shù)目6～20 個(gè)；Ⅲ級：病灶轉(zhuǎn)移數(shù)目20 個(gè)以上，且未見超級骨顯像；Ⅳ級：肋骨、椎骨和骨盆轉(zhuǎn)移占全部轉(zhuǎn)移≥75%，且見超級骨顯像。分析ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 對肺癌骨轉(zhuǎn)移的診斷價(jià)值，三者聯(lián)合診斷方式為并聯(lián)試驗(yàn)，凡一項(xiàng)檢測為陽性者則判為陽性，所有檢測均為陰性才可判為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS2 1.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用（）描述，兩兩間使用t檢驗(yàn)；多組間采用F檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料通過n（%）表示，并采用χ2檢驗(yàn)；均以P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 骨轉(zhuǎn)移組、非骨轉(zhuǎn)移組ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 水平

骨轉(zhuǎn)移組ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 水平均高于非骨轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 骨轉(zhuǎn)移組、非骨轉(zhuǎn)移組ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b水平比較（）Table 1 Comparison of ICTP，miR-107 and TRACP-5b levels between bone metastasis group and non bone metastasis group（）

表1 骨轉(zhuǎn)移組、非骨轉(zhuǎn)移組ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b水平比較（）Table 1 Comparison of ICTP，miR-107 and TRACP-5b levels between bone metastasis group and non bone metastasis group（）

2.2 骨轉(zhuǎn)移組病灶不同分級ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 水平

ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 水平：Ⅲ-Ⅳ級＞Ⅰ～Ⅱ級＞0 級，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 骨轉(zhuǎn)移組不同肺癌類型ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b水平比較（）Table 2 Comparison of levels of CTP，miR-107 and TRACP-5b among different lung cancer types in bone metastasis group（）

表2 骨轉(zhuǎn)移組不同肺癌類型ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b水平比較（）Table 2 Comparison of levels of CTP，miR-107 and TRACP-5b among different lung cancer types in bone metastasis group（）

注：與0 級比較，aP＜0.05；與Ⅰ～Ⅱ級比較，bP＜0.05。

2.3 骨轉(zhuǎn)移組不同骨轉(zhuǎn)移累及數(shù)目ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 水平

≥3 處以上轉(zhuǎn)移組ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b水平高于≤2 處轉(zhuǎn)移組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 骨轉(zhuǎn)移組不同骨轉(zhuǎn)移累及數(shù)目ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 水平比較（）Table 3 Comparison of the levels of ⅠCTP，miR-107 and TRACP-5b in different bone metastasis groups（）

表3 骨轉(zhuǎn)移組不同骨轉(zhuǎn)移累及數(shù)目ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 水平比較（）Table 3 Comparison of the levels of ⅠCTP，miR-107 and TRACP-5b in different bone metastasis groups（）

2.4 ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 對肺癌骨轉(zhuǎn)移的診斷價(jià)值

ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 聯(lián)合診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移靈敏度為96.42%，特異度為93.93%，準(zhǔn)確度為95.08%，均高于上述指標(biāo)單一檢查（P＜0.05）。見表4。

表4 ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 單一及聯(lián)合對肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度Table 4 Sensitivity，specificity，and accuracy of CTP，miR-107，TRACP-5b single and combined therapy for bone metastasis in lung cancer

3 討論

放射性核素骨掃描（ECT）、X 線、CT 及MRI 等影像學(xué)檢查是診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的基本檢查手段，但上述檢查手段具有費(fèi)用昂貴等弊端，在臨床應(yīng)用中受到一定限制。臨床資料顯示，大多數(shù)人類骨骼主要由膠原蛋白組成，在破骨細(xì)胞吸收骨質(zhì)過程中，膠原纖維能對溶骨性骨代謝標(biāo)志物起到降解作用，而破骨細(xì)胞吸收骨是惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移的根源［8］。因此，認(rèn)為溶骨性骨代謝標(biāo)志物與惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移有關(guān)聯(lián)。溶骨性骨代謝標(biāo)志物主要包含ⅠCTP、TRACP 等。其中ⅠCTP 在骨的有機(jī)質(zhì)中，是骨吸收的重要生化標(biāo)志物，其水平可反映破骨細(xì)胞活性及溶骨活動(dòng)程度。據(jù)報(bào)道，ⅠCTP 水平升高程度與破骨細(xì)胞活性增高的程度相一致［9］。TRACP 主要來源于破骨細(xì)胞，由同工酶a 及同工酶b 構(gòu)成，其中工酶b 與骨代謝關(guān)系緊密，其水平可反映骨吸收、破骨細(xì)胞活性。國內(nèi)外有文獻(xiàn)顯示，TRACP-5b 進(jìn)入血清中后可快速形成碎片，活性下降，此變化使TRACP-5b 穩(wěn)定存在于血清中，且不受機(jī)體、代謝等外界因素干擾［10-11］。本次研究提示兩者在肺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)生過程中具有重要意義，與既往多數(shù)研究相似［12］。分析原因在于：肺癌骨轉(zhuǎn)移主要以破骨性損傷方式存在，可導(dǎo)致轉(zhuǎn)移部位破骨細(xì)胞活性上升，致使ⅠCTP、TRACP-5b 分泌增加。

腫瘤發(fā)生骨轉(zhuǎn)移需經(jīng)與原發(fā)灶分離、進(jìn)入細(xì)胞外基質(zhì)、沖破包膜、穿過血液或淋巴細(xì)胞系統(tǒng)等步驟，而外泌體在其中起著參與作用［13］。外泌體是包含RNA 和蛋白質(zhì)的小囊泡，miR則是短鏈非編碼RNA，對于多數(shù)細(xì)胞生長、分化、凋亡等過程具有調(diào)控作用［14］。有國外研究認(rèn)為，miR-107富集于代謝相關(guān)通路，在調(diào)節(jié)細(xì)胞能量代謝、糖酵解、三羧酸循環(huán)等關(guān)鍵代謝過程中發(fā)揮重要作用，可為腫瘤的生長和擴(kuò)散提供必要的能量和物質(zhì)基礎(chǔ)［15］。本次研究結(jié)果結(jié)合國外研究［15］，提示，miR-107可能與肺癌骨轉(zhuǎn)移相關(guān)。同時(shí)本次研究顯示：ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 單一診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移靈敏度分別為84.00%、81.63%、84.31%，特異度分別為77.77%、75.34%、78.87%，準(zhǔn)確度分別為80.32%、77.86%、81.14%。ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 單一診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移中，TRACP-5b 靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度最高，原因可能是肺癌發(fā)生骨轉(zhuǎn)移過程中，往往可產(chǎn)生嚴(yán)重的疼痛或病理性骨折，導(dǎo)致破骨細(xì)胞活性大幅度上升，使大量TRACP-5b進(jìn)入血清，進(jìn)而導(dǎo)致血清中TRACP-5b 水平升高。另研究顯示ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 聯(lián)合診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移靈敏度為96.42%，特異度為93.93%，準(zhǔn)確度為95.08%，均高于上述指標(biāo)單一檢查，說明聯(lián)合檢測可進(jìn)一步提高診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)確性，從而為早期治療和管理提供依據(jù)。

綜上所述，ⅠCTP、miR-107、TRACP-5b 水平與肺癌骨轉(zhuǎn)移發(fā)生具有緊密關(guān)聯(lián)，其中TRACP-5b檢測肺癌骨轉(zhuǎn)移靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度最高，三者聯(lián)合檢測可有效提高肺癌骨轉(zhuǎn)移診斷價(jià)值。