貴書琪，鄭艷萍，成 俊，，趙開軍，彭 雲(yún)，黃 芳

（1.南京中山制藥有限公司，江蘇省中藥經(jīng)典名方工程技術(shù)研究中心，江蘇 南京 210046； 2.中國藥科大學(xué)中藥學(xué)院，江蘇 南京 211198； 3.江蘇弘典中藥產(chǎn)業(yè)研究院有限公司，南京市工程技術(shù)研究中心，江蘇 南京 210042）

脾胃病科學(xué)術(shù)帶頭人單兆偉教授四十余年來通過系列臨床及基礎(chǔ)研究總結(jié)提出慢性萎縮性胃炎胃黏膜癌前期病變的主要病機(jī)特點(diǎn)是“氣虛血瘀熱郁”，制定“益氣活血清熱” 為主要治療法則，開發(fā)仁術(shù)健胃顆粒［1］。該方由炙黃芪、酒黃芩、薏苡仁、莪術(shù)、麩炒白術(shù)、白花蛇舌草、半邊蓮、仙鶴草組成。大量文獻(xiàn)研究表明，仁術(shù)健胃顆粒治療慢性萎縮性胃炎胃黏膜癌前病變具有良好的療效，該藥作為江蘇省中醫(yī)院院內(nèi)制劑已有二十余年的應(yīng)用基礎(chǔ)［2-4］。

前期該藥已轉(zhuǎn)讓南京中山制藥有限公司，為了更加全面保留藥效成分，提高臨床藥效，經(jīng)進(jìn)一步制劑研究，增加了醇提、超微粉碎［5-7］、揮發(fā)油提取包合［8］、噴霧制粒［9］等先進(jìn)工藝制劑技術(shù)。與此同時(shí)還開展了Ⅱ期臨床試驗(yàn)和Ⅲ期臨床驗(yàn)證，證實(shí)其對慢性萎縮性胃炎胃黏膜癌前病變具有良好的臨床療效。目前，對仁術(shù)健胃顆粒質(zhì)量和工藝相關(guān)的研究很少，相關(guān)的成分定量分析只有黃芪甲苷的報(bào)道［10］，無量值傳遞方面的文章。本研究通過對生產(chǎn)過程中各個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)取樣，成分分析，研究飲片-中間體-成品藥效成分的轉(zhuǎn)移過程，并與原工藝生產(chǎn)顆粒（江蘇省中醫(yī)院院內(nèi)制劑仁術(shù)健胃顆粒） 進(jìn)行比較，以期為仁術(shù)健胃顆粒后續(xù)開發(fā)研究和相關(guān)制劑的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器 仁術(shù)健胃顆粒生產(chǎn)設(shè)備為南京中山制藥有限公司中試顆粒劑生產(chǎn)線，已通過《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GMP） 認(rèn)證，證書編號JS20191043。高效液相色譜系統(tǒng)，包括LC-20AT 泵、ELSD-16 蒸發(fā)光散射檢測器、LC-40D泵、SPD-M40 二極管陣列檢測器、Labsolutions 工作站等（日本島津公司）； KH-500E 超聲波清洗器（昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司）； PL602-L、ML104/02、XSR105DU/A、XPR2/A 電子分析天平（瑞士Mettler-Toledo 公司）； DK-98-ⅡA 電熱恒溫水浴鍋 （天津市泰斯特儀器有限公司）；FLBP-250 萬能高速粉碎機(jī)（上海菲力博食品機(jī)械有限公司）； RODI-220A1 純水機(jī)（廈門銳思捷水純化技術(shù)有限公司）； BT-9300H 激光粒度分布儀 （丹東百特儀器有限公司）。

1.2 試劑與藥物 黃芪甲苷（批號110715-202118，純度96.8%）、黃芩苷（批號110715-202122，純度94.2%）、甘油三油酸酯（批號111692-202007，純度99.6%）、吉馬酮（批號111665-201906，純度99.8%） 對照品均購自中國食品藥品檢定研究院。仁術(shù)健胃顆粒（蘇藥制藥Z04001773，批號2103004、2108014、2109017）。甲醇、磷酸、乙腈、二氯甲烷為色譜純； 其他試劑均為分析純； 水為純化水。

炙黃芪（批號200801）、酒黃芩（批號200902） 均購自安徽亳藥千草國藥股份有限公司； 薏苡仁 （批號200901）、白花蛇舌草（批號200801） 均購自國藥集團(tuán)北京華邈藥業(yè)有限公司； 莪術(shù)（批號200801） 購自廣西三豐現(xiàn)代農(nóng)業(yè)有限公司； 麩炒白術(shù)（批號200904） 購自安徽亳藥千草中藥飲片有限公司； 半邊蓮（批號201001）、仙鶴草（批號201001） 均購自安徽金國源中藥股份有限公司，經(jīng)南京中山制藥有限公司質(zhì)量部專家檢測均符合2020 年版《中國藥典》 規(guī)定，南京中山制藥有限公司趙開軍執(zhí)業(yè)藥師鑒定為正品。

2 方法與結(jié)果

2.1 生產(chǎn)工藝驗(yàn)證研究

2.1.1 生產(chǎn)工藝 在仁術(shù)健胃顆粒（批件號2003L04442）處方量基礎(chǔ)上，放大投料，連續(xù)生產(chǎn)3 批。處方中，薏苡仁、白術(shù)粉碎成超微粉； 莪術(shù)水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，β-環(huán)糊精包合，得到藥渣Ⅰ及水溶液另置，備用； 炙黃芪、半邊蓮、白花蛇舌草用乙醇回流提取，提取液過濾，回收乙醇，濾液濃縮至適量，得到清膏Ⅰ和藥渣Ⅱ； 藥渣Ⅱ、藥渣Ⅰ與酒黃芩、仙鶴草加水煎煮，與莪術(shù)油提取后的水溶液過濾，濃縮，得到清膏Ⅱ； 清膏Ⅰ與清膏Ⅱ合并，濃縮成清膏Ⅲ； 取清膏Ⅲ，加入薏苡仁和白術(shù)超微粉、莪術(shù)油β-環(huán)糊精包合物，得中間體； 中間體與適量糊精、甜菊糖苷混合，制成顆粒，干燥，整粒，包裝，即得。

2.1.2 生產(chǎn)結(jié)果 根據(jù)“2.1.1” 項(xiàng)下生產(chǎn)工藝流程進(jìn)行生產(chǎn)，得到生產(chǎn)數(shù)據(jù)，計(jì)算清膏密度（密度計(jì)測定）、清膏得率、干膏率、超微粉粒徑（激光粒度分布儀測定）、超微粉出率、包合物出率、成品率，公式為清膏得率＝（清膏Ⅲ數(shù)量/飲片投料量） ×100%、干膏率＝ （干膏質(zhì)量取樣/濕膏質(zhì)量取樣） ×100%、超微粉出率＝ （白術(shù)薏苡仁混合超微粉質(zhì)量/白術(shù)薏苡仁飲片總質(zhì)量） ×100%、包合物出率＝ ［揮發(fā)油包合物量/ （莪術(shù)揮發(fā)油量＋β-環(huán)糊精量） ］ ×100%、成品率＝ ［成品數(shù)量/理論產(chǎn)量（即固體輔料總量＋清膏Ⅲ折合干膏量） ］ ×100%，中間體批號分別為2102、2103、2104，顆粒相應(yīng)批號分別為210701、210702、210703，結(jié)果見表1，可知從提取、打粉、包合到制粒整個(gè)過程生產(chǎn)數(shù)據(jù)相對穩(wěn)定。

表1 生產(chǎn)數(shù)據(jù)結(jié)果

2.2 指標(biāo)成分檢測方法建立

2.2.1 色譜條件

2.2.1.1 條件1 （黃芪甲苷） Waters Symmetry ?色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）； 流動(dòng)相甲醇-水（76 ∶24）； 體積流量1.0 mL/min； 蒸發(fā)光散射檢測器； 漂移管溫度82 ℃； 載氣流量1.95 L/min； 柱溫30 ℃； 進(jìn)樣量20 μL。分離度大于1.5，理論塔板數(shù)按黃芪甲苷峰計(jì)，不低于5 000。

2.2.1.2 條件2 （黃芩苷） YMC-Pack ODS-A 色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）； 流動(dòng)相甲醇-水-磷酸 （47 ∶53 ∶0.2）； 體積流量1.0 mL/min； 柱溫35 ℃； 進(jìn)樣量10 μL； 檢測波長280 nm。分離度大于3.0，理論塔板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)，不低于8 000。

2.2.1.3 條件3 （甘油三油酸酯） YMC-Pack ODS-A 色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）； 流動(dòng)相乙腈-二氯甲烷（65 ∶35）； 體積流量1.0 mL/min； 蒸發(fā)光散射檢測器； 漂移管溫度82 ℃； 載氣流量1.95 L/min； 柱溫30 ℃； 進(jìn)樣量10 μL。分離度大于5.0，理論塔板數(shù)按甘油三油酸酯峰計(jì)，不低于30 000。

2.2.1.4 條件4 （吉馬酮） YMC-Pack ODS-A 色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）； 流動(dòng)相乙腈（A） -0.1% 磷酸水（B），梯度洗脫 （0 ～15 min，55% A； 15 ～40 min，55% ～70% A； 40 ～42 min，70% ～85% A）； 體積流量1.0 mL/min； 柱溫25 ℃； 進(jìn)樣量10 μL； 檢測波長215 nm。分離度大于6.0，理論塔板數(shù)按吉馬酮峰計(jì)，不低于60 000。

2.2.2 對照品溶液制備 取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定質(zhì)量，加甲醇制成每1 mL 含0.4、0.2 mg 的對照品溶液。取黃芩苷對照品適量，60 ℃下減壓干燥4 h，精密稱定質(zhì)量，加70%乙醇制成每1 mL 含20、60 μg 的對照品溶液。取甘油三油酸酯對照品適量，精密稱定，加乙腈-正丁醇（65 ∶35） 制成每1 mL 含50、150 μg 的對照品溶液。取吉馬酮對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL 含10、40 μg 的對照品溶液。

2.2.3 供試品溶液制備

2.2.3.1 黃芪甲苷 取仁術(shù)健胃顆粒約4 g，研細(xì)，平行2份，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇35 mL，冷浸過夜，再加甲醇適量，加熱回流4 h，提取液回收甲醇并濃縮至干，殘?jiān)铀?0 mL，微熱使溶解，用水飽和正丁醇振搖提取3 次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，氨液提取2次，每次20 mL，棄去氨液，將正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?～5 mL 溶解，放冷，通過D101 大孔吸附樹脂柱（內(nèi)徑1.5 cm，長12 cm），以50 mL 水洗脫，棄去水液，再用40%乙醇30 mL 洗脫，棄去40%乙醇洗脫液，再用70%乙醇50 mL 洗脫，收集洗脫液，蒸干，甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至2 mL 量瓶內(nèi)，加甲醇至刻度，搖勻，0.22 μm 微孔濾膜過濾，即得。精密稱取第1 次醇提液、第2 次醇提液、清膏Ⅰ、清膏Ⅲ適量，平行2 份，回收溶劑并濃縮至干，其余步驟同上，得相應(yīng)中間體的供試品溶液。取炙黃芪飲片適量，按照2020 年版《中國藥典》 炙黃芪黃芪甲苷含量測定項(xiàng)下方法制備。

2.2.3.2 黃芩苷 取仁術(shù)健胃顆粒約1 g，研細(xì)，平行2份，精密稱定，加70% 乙醇40 mL，加熱回流3 h，放冷，過濾，濾液置于100 mL 量瓶中，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘?jiān)匆簽V入同一量瓶中，加70% 乙醇至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置10 mL 量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻，0.22 μm 微孔濾膜過濾，即得。精密稱取第1 次水提液、第2 次水提液、清膏Ⅱ、清膏Ⅲ適量，平行2 份，分別加入適量70%乙醇超聲處理20 min，放冷，過濾，濾液置于100 mL 量瓶中，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘?jiān)?，洗液濾入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻（其中清膏Ⅲ在此基礎(chǔ)上稀釋10 倍后進(jìn)樣），0.22 μm 微孔濾膜過濾，即得。取酒黃芩飲片中粉約0.3 g，平行2 份，精密稱定，其余步驟同上，即得。

2.2.3.3 甘油三油酸酯 取仁術(shù)健胃顆粒約4 g，研細(xì)，平行2 份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙腈-正丁醇（65 ∶35） 50 mL，稱定質(zhì)量，浸泡2 h，超聲處理1 h，放冷，流動(dòng)相補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液過0.22 μm 微孔濾膜，即得。精密稱取白術(shù)薏苡仁混合超微粉和飲片粉末適量，平行2 份，其余步驟同上，即得。

2.2.3.4 吉馬酮 取仁術(shù)健胃顆粒約1 g，研細(xì)，平行2份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20 mL，稱定質(zhì)量，超聲提取45 min，放冷，甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液過0.22 μm 微孔濾膜，即得。精密稱取莪術(shù)揮發(fā)油、揮發(fā)油包合物及飲片粉末適量，平行2份，其余步驟同上，即得，其中揮發(fā)油續(xù)濾液稀釋50 倍后進(jìn)樣。

2.2.4 陰性樣品溶液制備 按照仁術(shù)健胃顆粒工藝，分別制備缺炙黃芪、缺酒黃芩、缺薏苡仁、缺莪術(shù)陰性顆粒的陰性樣品，再按“2.2.3” 項(xiàng)下方法處理，即得。

2.2.5 專屬性考察 精密吸取對照品、供試品（210701）、陰性樣品溶液適量，在“2.2.1” 項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣測定，結(jié)果見圖1，可知供試品溶液中各成分色譜峰分離度理想，陰性樣品溶液在相應(yīng)位置處未見色譜峰，表明該方法專屬性良好。

2.2.6 線性關(guān)系考察 精密稱取黃芪甲苷對照品適量，甲醇制成1.461 7 mg/mL 對照品溶液，依次稀釋至1.169 3、0.974 5、0.779 6、0.584 7、0.389 8、0.194 9、0.097 4、0.048 7 mg/mL，在“2.2.1.1” 項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣測定。以進(jìn)樣量自然對數(shù)值為橫坐標(biāo)（X），峰面積自然對數(shù)值［11］為縱坐標(biāo)（Y） 進(jìn)行回歸。

精密稱取黃芩苷對照品適量，70%乙醇制成152.886 6 μg/mL 對照品溶液，依次稀釋至129.953 6、76.443 3、57.332 5、38.221 7、19.110 8、9.555 4、4.777 7 μg/mL，在“2.2.1.2” 項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣測定。以對照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y） 進(jìn)行回歸。

精密稱取甘油三油酸酯對照品適量，乙腈-正丁醇（65 ∶35） 制成220.713 6 μg/mL 對照品溶液，依次稀釋至154.499 5、108.149 7、75.704 8、52.993 4、31.796 0、19.077 6 μg/mL，在“2.2.1.3” 項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣測定。以進(jìn)樣量自然對數(shù)值為橫坐標(biāo)（X），峰面積自然對數(shù)值為縱坐標(biāo)（Y） 進(jìn)行回歸。

精密稱取吉馬酮對照品適量，甲醇制成80.838 0 μg/mL對照品溶液，依次稀釋至40.419 0、10.104 8、5.052 4、2.021 0、1.010 5、0.505 2 μg/mL，在“2.2.1.4” 項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣測定。以對照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y） 進(jìn)行回歸。結(jié)果見表2，可知各成分在各自范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

表2 各成分線性關(guān)系

2.2.7 精密度試驗(yàn) 精密吸取同一份供試品溶液（210701），在“2.2.1” 項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣測定6 次，測得黃芪甲苷、黃芩苷、甘油三油酸酯、吉馬酮峰面積RSD 分別為2.58%、0.21%、1.72%、0.55%，表明儀器精密度良好。

2.2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一份供試品溶液（210701），于0、2、4、8、12、24 h 在“2.2.1” 項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣測定，測得黃芪甲苷、黃芩苷、甘油三油酸酯、吉馬酮峰面積RSD 分別為2.99%、0.35%、1.55%、1.09%，表明溶液在24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.9 重復(fù)性試驗(yàn) 取仁術(shù)健胃顆粒（210701） 適量，按“2.2.2” 項(xiàng)下方法平行制備供試品溶液6 份，在“2.2.1”項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣測定，測得黃芪甲苷、黃芩苷、甘油三油酸酯、吉馬酮含量RSD 分別為2.60%、0.66%、2.74%、1.44%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.2.10 加樣回收率試驗(yàn) 取各成分含量已知的仁術(shù)健胃顆粒（210701） 適量，按80%、100%、120% 水平加入對照品，按“2.2.2” 項(xiàng)下方法制備供試品溶液，平行3 份，在“2.2.1” 項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣測定，計(jì)算回收率。結(jié)果，黃芪甲苷、黃芩苷、甘油三油酸酯、吉馬酮平均加樣回收率分別為88.18%、100.39%、94.12%、101.30%，RSD 分別為2.03%、1.56%、2.76%、1.93%。

2.3 檢測分析結(jié)果 按“2.1” 項(xiàng)下生產(chǎn)工藝制備3 批仁術(shù)健胃顆粒生產(chǎn)過程各環(huán)節(jié)取樣樣品，按“2.2” 項(xiàng)下方法進(jìn)行相應(yīng)成分分析，圖2 ～5 為飲片、不同中間體以及江蘇省中醫(yī)院（簡稱“省中” ） 生產(chǎn)的仁術(shù)健胃顆粒色譜圖，南京中山制藥有限公司（簡稱“中山” ） 仁術(shù)健胃顆粒和陰性樣品色譜圖見圖1，表3 中山和省中成品顆粒含量比較結(jié)果及其計(jì)算所得服用量。由表3 可知，中山與省中仁術(shù)健胃顆粒對比，每次服用相同生藥量（中山本品每次服用量12 g 相當(dāng)于省中本品每次服用量20 g） 的情況下，黃芩苷每次服用量相近； 黃芪甲苷每次服用量中山為3.05 ～4.01 mg，省中為0.75～1.66 mg，差異較大； 在中山仁術(shù)健胃顆粒中檢測出甘油三油酸酯和吉馬酮，而在省中仁術(shù)健胃顆粒中則未檢測到。

圖2 黃芪甲苷HPLC 色譜圖

圖3 黃芩苷HPLC 色譜圖

圖4 甘油三油酸酯HPLC 色譜圖

圖5 吉馬酮HPLC 色譜圖

表3 不同批次顆粒含量比較及其每次服用量

2.4 生產(chǎn)過程控制研究

2.4.1 轉(zhuǎn)移率 炙黃芪飲片3 批投料量均為19.2 kg，白術(shù)、薏苡仁飲片用量比例1 ∶1，分別為白術(shù)、薏苡仁混合超微粉實(shí)際投料量/各批次超微粉出率×1/2，其他飲片3批投料量均為14.4 kg，計(jì)算成分總量、轉(zhuǎn)移率，公式為成分總量＝平均含量×投料量或產(chǎn)出量、轉(zhuǎn)移率＝ （當(dāng)前環(huán)節(jié)成分總量/轉(zhuǎn)移環(huán)節(jié)成分總量） ×100%，結(jié)果見表4。

表4 轉(zhuǎn)移率測定結(jié)果

2.4.2 結(jié)果分析 由表4 數(shù)據(jù)得到各指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率的變化趨勢，見圖6。仁術(shù)健胃顆粒生產(chǎn)過程中提取濃縮、打粉、包合、制粒各個(gè)環(huán)節(jié)轉(zhuǎn)移率均相對穩(wěn)定； 從清膏Ⅰ與清膏Ⅱ混合后濃縮到清膏Ⅲ黃芪甲苷轉(zhuǎn)移率穩(wěn)定，RSD 僅為0.61%，而此過程批號2102 黃芩苷轉(zhuǎn)移率僅為61.84%，其余批次均在77%以上，RSD 達(dá)13.34%； 從清膏Ⅲ到仁術(shù)健胃顆粒黃芩苷轉(zhuǎn)移率較平行，而該過程黃芪甲苷轉(zhuǎn)移率分別為71.89%、95.12%、85.01%； 制粒過程中甘油三油酸酯轉(zhuǎn)移率僅為45% ～55%； 莪術(shù)油提取階段吉馬酮的轉(zhuǎn)移率均小于50%。

圖6 黃芪甲苷（A）、黃芩苷（B）、甘油三油酸酯（C）、吉馬酮（D） 轉(zhuǎn)移率變化

3 討論

3.1 指標(biāo)成分選擇 就處方配伍組成而言，君藥黃芪益胃氣健脾； 黃芩清胃中濕熱； 薏苡仁消瘤抗癌； 莪術(shù)化瘀軟堅(jiān)。以上諸藥配伍，共奏補(bǔ)氣、活血、改善微循環(huán)之功，增強(qiáng)胃粘膜免疫力，阻斷胃癌前病變的發(fā)展，促進(jìn)腸化、異型增生的康復(fù)［12］。另外，黃芪、黃芩、薏苡仁、莪術(shù)分別代表醇提、水提、超微粉碎、揮發(fā)油包合4 個(gè)關(guān)鍵控制點(diǎn)。就成分選擇而言，4 種成分在相應(yīng)陰性樣品中無干擾，較穩(wěn)定，且黃芪甲苷、黃芩苷、甘油三油酸酯為2020 年版《中國藥典》 中規(guī)定的對應(yīng)飲片含量測定成分［13］。研究表明黃芪甲苷是黃芪發(fā)揮益氣功效的主要物質(zhì)［14］； 黃芩苷具有抑菌抗炎、解熱的功效［15］； 薏苡仁油中甘油三油酸酯具有抗腫瘤作用［16］； 吉馬酮具有改善血液流變性、抗血小板聚集等作用［17］。另外，4 種成分均能改善慢性萎縮性胃炎模型大鼠的胃黏膜病理病變，抑制胃癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡［18-23］。綜上所述，本研究選取的指標(biāo)成分可能為仁術(shù)健胃顆粒發(fā)揮藥效的物質(zhì)，并且能夠較為全面反映各個(gè)環(huán)節(jié)藥效成分的量值傳遞情況。

3.2 含量測定 本研究中4 種指標(biāo)成分極性差異較大，故供試品溶液制備過程及色譜條件等不一。對提取溶劑、提取時(shí)間進(jìn)行了考察，對洗脫條件、載氣流量等條件進(jìn)行了篩選，提高了檢測成分的分離度及方法的準(zhǔn)確度［24］。

本研究中，黃芪甲苷的回收率相對較低，主要是由于仁術(shù)健胃顆粒成分復(fù)雜，不適用2020 年版《中國藥典》 黃芪中測定黃芪甲苷的前處理方法。本研究方法供試品前處理步驟繁瑣，影響因素較多，處理過程中各個(gè)環(huán)節(jié)誤差疊加，導(dǎo)致回收率偏低。2020 年版《中國藥典》 規(guī)定，樣品中待測定成分含量在100 μg/g、1 mg/g、10 mg/g 時(shí)，加樣回收率限度分別為85% ～110%、90% ～108%、92% ～105%，結(jié)合表3 可知本研究結(jié)果滿足4 種成分的檢測需求。

3.3 轉(zhuǎn)移率 黃芪甲苷和黃芩苷提取過程轉(zhuǎn)移率均達(dá)到80%以上，而從總醇（水） 提液到清膏Ⅰ（Ⅱ） 的黃芪甲苷和黃芩苷轉(zhuǎn)移率均有所下降； 清膏Ⅰ與清膏Ⅱ混合濃縮到清膏Ⅲ過程中，批號2102 清膏Ⅲ黃芩苷的轉(zhuǎn)移率相比其余批次差異較大。導(dǎo)致上述結(jié)果的可能原因一方面是濃縮時(shí)溫度和壓力控制不當(dāng)，皂苷類成分如黃芪甲苷容易起泡，一部分成分隨著溶劑進(jìn)入回收溶劑罐內(nèi)。另一方面，在將濃縮液放出取樣稱重時(shí)，濃縮罐內(nèi)難免會(huì)殘留一部分清膏。因此濃縮作為一個(gè)關(guān)鍵控制點(diǎn)，應(yīng)該嚴(yán)格把控。

另外，從清膏Ⅰ與清膏Ⅱ混合后濃縮到清膏Ⅲ黃芪甲苷轉(zhuǎn)移率約為94%，相對于該步驟黃芩苷轉(zhuǎn)移率（61.84% ～79.62%） 明顯偏高，其原因可能為醇提后藥渣Ⅱ仍含有一部分的黃芪甲苷而后繼續(xù)水提最終轉(zhuǎn)移至清膏Ⅲ中。

甘油三油酸酯在超微粉碎過程轉(zhuǎn)移率達(dá)88%以上，影響的主要因素是超微粉出率。吉馬酮在莪術(shù)油包合過程中轉(zhuǎn)移率也不低，這也進(jìn)一步說明超微粉碎及揮發(fā)油包合這2種先進(jìn)的工藝技術(shù)能夠充分保留藥效成分。影響甘油三油酸酯總轉(zhuǎn)移率的關(guān)鍵步驟是制粒過程，而莪術(shù)油的提取過程是限制吉馬酮量值傳遞的首要因素。

制粒時(shí)藥液的黏度與流量、進(jìn)出風(fēng)口的溫度等控制不當(dāng)會(huì)發(fā)生粘壁現(xiàn)象，底料中的白術(shù)薏苡仁超微粉和莪術(shù)油包合物以及藥液中的清膏Ⅲ中成分的損耗是導(dǎo)致這一環(huán)節(jié)三批轉(zhuǎn)移率偏低和不太穩(wěn)定的主要原因，應(yīng)引起重視。

3.4 與省中院內(nèi)制劑比較 結(jié)果表明，在服用中山和省中顆粒時(shí)每次服用黃芩苷量相近，而黃芪甲苷差異較大，主要原因是省中在該制劑工藝中所有藥材均使用水提取，而中山根據(jù)藥材成分性質(zhì)，對酒黃芩使用水提，對炙黃芪使用醇提，提取更為完全。超微粉碎及莪術(shù)油的提取保留了一些不溶于水的極性比較小的成分如甘油三油酸酯和吉馬酮，所以在省中本品中檢測不到兩者。另外，中山工藝中對醇提后的藥渣和莪術(shù)藥渣還進(jìn)一步用水提取，工藝精細(xì)巧妙而又不失科學(xué)。

4 結(jié)論

本研究對仁術(shù)健胃顆粒采用量值傳遞規(guī)律的方法進(jìn)行研究，此種質(zhì)量控制模式依托各生產(chǎn)環(huán)節(jié)的銜接，每個(gè)環(huán)節(jié)設(shè)有“輸入質(zhì)量” 與“輸出質(zhì)量”［25］，加以科學(xué)合理的指標(biāo)進(jìn)行評估，強(qiáng)調(diào)了中藥復(fù)方研究過程的整體性和全程可追溯性。從與省中仁術(shù)健胃顆粒院內(nèi)制劑比較得出，中山在其基礎(chǔ)上對工藝進(jìn)行了深入研究，更大程度上保留了藥效成分，提高了臨床療效，是中藥現(xiàn)代化制劑研究的典范，對傳統(tǒng)復(fù)方中成藥二次開發(fā)具有指導(dǎo)作用。