安 浩,吳鑫明,操家順,李 超,*,劉偉京

(1.中國五冶集團(tuán)有限公司,四川成都 610000;2.河海大學(xué)環(huán)境學(xué)院,江蘇南京 210098;3.河海大學(xué)淺水湖泊綜合治理與資源開發(fā)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇南京 210098;4.江蘇省環(huán)境科學(xué)研究院,江蘇南京 210036)

近年來,隨著人類生產(chǎn)及生活活動的增加,工農(nóng)業(yè)廢水及生活污水大量排放,嚴(yán)重污染了水生態(tài)環(huán)境,極易引起水體富營養(yǎng)化[1]。目前,許多生物處理技術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到了市政污水的處理中,包括傳統(tǒng)活性污泥(CAS)技術(shù)[2]、人工濕地技術(shù)[3]、植物修復(fù)技術(shù)[4]、生物膜技術(shù)[5]和微生物燃料電池技術(shù)[6]等。此外,高級氧化技術(shù)也可實(shí)現(xiàn)對有機(jī)物和氮磷的高效去除[7]。雖然這些工藝取得了良好的污染物去除效果,但它們?nèi)源嬖谀茉聪拇蠛蜏厥覛怏w(例如:CO2、CH4)排放等缺點(diǎn),不滿足當(dāng)前低碳發(fā)展的要求。因此,開發(fā)既能實(shí)現(xiàn)污水處理同時(shí)又能減少溫室氣體排放的處理技術(shù)迫在眉睫。

菌藻共生技術(shù)作為一種能實(shí)現(xiàn)同步處理污水和固定CO2的綠色處理技術(shù)引起了越來越多的關(guān)注[8]。細(xì)菌和微藻通過二者間的相互作用和協(xié)同增效來提高污水處理過程中的污染物去除率(圖1)。微藻能有效同化CO2同時(shí)產(chǎn)生O2來代替外部曝氣,而O2又被細(xì)菌用來氧化有機(jī)物產(chǎn)生CO2。在這個(gè)過程中,光作為菌藻系統(tǒng)處理廢水的能量來源,可以減少曝氣電能消耗,并且光合作用吸收CO2可以減少溫室氣體排放[9]。微藻吸收污水中氮磷等污染物并將其轉(zhuǎn)化為生物質(zhì),細(xì)菌自身代謝產(chǎn)生信號分子、微量元素和無機(jī)碳源等供微藻生長。微藻被證明可以和硝化細(xì)菌的相互作用來改變氮轉(zhuǎn)化效率[10-11],并影響磷酸鹽吸收的微生物群落豐度[12]。作為一種綠色工藝,菌藻共生技術(shù)為未來的城市污水處理實(shí)現(xiàn)“碳達(dá)峰”和“碳中和”目標(biāo)提供了可能。然而,目前研究都集中在菌藻共生系統(tǒng)處理廢水和固定CO2的菌種和藻種篩選上,重點(diǎn)關(guān)注菌藻共生系統(tǒng)對污染物的去除效率和CO2的固定效率:Xu等[13]研究了微藻與內(nèi)生細(xì)菌(S395-2)共生系統(tǒng)凈化沼氣,當(dāng)菌藻比例為10∶1時(shí)取得最佳凈化效果,COD、氮、磷和CO2的去除效率分別為88.29%±5.03%、88.31%±4.29%、88.21%±4.51%和68.13%±1.69%。這忽略了細(xì)菌和微藻在處理廢水和固定CO2過程中二者相互作用機(jī)理的研究。

圖1 菌藻共生系統(tǒng)凈水固碳作用

本文綜述了菌藻共生系統(tǒng)在減污固碳過程中的作用效能,并從脫氮除磷以及CO2固定的角度闡述了菌藻共生系統(tǒng)的相互作用機(jī)制,最后對菌藻共生體系實(shí)際應(yīng)用中的現(xiàn)存問題進(jìn)行了總結(jié),并對未來的研究方向提出了建議,為今后菌藻共生體系的工程應(yīng)用提供了理論支持。

1 菌藻共生系統(tǒng)去除氮

1.1 菌藻共生系統(tǒng)去除氨氮

圖2 菌藻共生系統(tǒng)脫氮機(jī)理

硝化作用并不是菌藻共生系統(tǒng)中去除氨氮的唯一途徑。微藻和部分異養(yǎng)細(xì)菌將氨氮作為營養(yǎng)物質(zhì)吸收,然后將其同化為細(xì)胞組分,從而實(shí)現(xiàn)水中氨氮的去除。氨氮通過微藻細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的轉(zhuǎn)運(yùn)器轉(zhuǎn)運(yùn)到微藻細(xì)胞中,在谷氨酰胺合成酶和谷氨酸脫氫酶等酶的作用下,氨氮可以很容易地被同化為氨基酸,成為微藻生物質(zhì)的一部分[17]。Bankston等[12]發(fā)現(xiàn),通過微藻同化作用去除的氨氮幾乎是硝化作用去除的2倍。細(xì)菌可以促進(jìn)微藻生物質(zhì)吸收同化較高濃度的氨氮。Bankston等[8]發(fā)現(xiàn),投加活性污泥后的菌藻共生系統(tǒng)與微藻單獨(dú)作用時(shí)相比,既可以促進(jìn)微藻對氨氮的同化吸收,還能使微藻保持較高的生長速率。

水中氨氮濃度是影響菌藻間作用關(guān)系的重要參數(shù)。在低氨氮濃度下,由于缺乏氨氮,微藻和硝化細(xì)菌之間為競爭關(guān)系,二者相互釋放具有抑制作用的物質(zhì)(例如藻毒素、植物激素等),對微藻和細(xì)菌間關(guān)系產(chǎn)生負(fù)面影響[18]。Choi等[19]在一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn),當(dāng)水中氨氮含量不足,微藻的存在抑制了菌群77%的硝化作用。當(dāng)氨氮濃度高時(shí),可供硝化細(xì)菌反應(yīng)和微藻同化的氮源充足,微藻和硝化細(xì)菌之間是互利共生關(guān)系。Su等[20]發(fā)現(xiàn),在氨氮含量充足的條件下,小球藻和細(xì)菌共同培養(yǎng)與藻類、細(xì)菌分別單獨(dú)培養(yǎng)相比,氨氮的去除率明顯提高。

1.2 菌藻共生系統(tǒng)去除硝態(tài)氮

反硝化過程主要發(fā)生在缺氧條件下,但在菌藻共生系統(tǒng)中,微藻通過光合作用產(chǎn)生O2會抑制反硝化過程相關(guān)酶的活性,進(jìn)而影響反硝化進(jìn)程[20]。Petrovi等[24]發(fā)現(xiàn),菌藻共生系統(tǒng)中反硝化過程的反應(yīng)速率低于反硝化細(xì)菌單獨(dú)作用時(shí)的反應(yīng)速率。此外,在菌藻共生系統(tǒng)中,夜間藻類呼吸會消耗大量的DO[25],從而進(jìn)一步強(qiáng)化了反硝化過程所需的厭氧環(huán)境。白天微藻通過光合作用制造O2提高DO含量,有助于硝化作用的發(fā)生;黑暗條件下微藻通過呼吸代謝進(jìn)一步消耗DO,為反硝化作用創(chuàng)造了良好的缺氧環(huán)境。廢水中有機(jī)碳源的存在有助于黑暗條件下微藻和細(xì)菌呼吸代謝進(jìn)一步消耗廢水中DO,為反硝化過程構(gòu)建缺氧環(huán)境。Rezvani等[26]證明,菌藻共生體系中微藻可以利用光照期間產(chǎn)生的O2,在黑暗條件下降解廢水中有機(jī)物。

菌藻間的協(xié)同作用可以實(shí)現(xiàn)二者代謝產(chǎn)物的交換,以滿足二者各自的營養(yǎng)需求[27]。例如,微藻光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物可以為低有機(jī)負(fù)荷廢水中的細(xì)菌提供有機(jī)碳源,細(xì)菌反過來可以通過自身代謝活動降解微藻產(chǎn)生的有機(jī)物,抑制廢水中COD含量的增長[28]。另外,某些微藻可以為自養(yǎng)反硝化細(xì)菌在硝酸鹽還原過程中提供其所需的氫氣。微藻黑暗條件下產(chǎn)生氫氣,為反硝化的進(jìn)行提供物質(zhì)保障;在白天,微藻通過光合作用重建碳儲備,為后期氫氣的產(chǎn)生提供動力。Rezvani等[29]比較了耗氫脫硝器(HCD)-菌藻共生系統(tǒng)與HCD-單獨(dú)細(xì)菌作用下的硝酸鹽去除效率,在不注入外部氫氣的情況下,HCD-菌藻共生系統(tǒng)具有更高的硝酸鹽去除率。菌藻間可以通過群體感應(yīng)(QS)信號分子實(shí)現(xiàn)胞間通訊,從而調(diào)節(jié)各種生命活動與代謝過程。Ji等[30]研究發(fā)現(xiàn),地衣芽孢桿菌產(chǎn)生的一種信號分子AIP可被QS受體感知,細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的c-di-GMP受體接收并放大信號,誘導(dǎo)細(xì)菌產(chǎn)生某些物質(zhì),刺激普通小球藻細(xì)胞中葉綠素代謝相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),共生系統(tǒng)中的葉綠素a濃度隨著干細(xì)胞重量的顯著增加而增加。當(dāng)初始菌藻比例為3∶1時(shí),共生系統(tǒng)的相互作用和協(xié)同效應(yīng)最為明顯,COD、TP、TN的去除率分別為86.55%、80.28%、88.95%,此時(shí)c-di-GMP的質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到了3.85 μg/g,AIP的質(zhì)量濃度達(dá)到了2.81 mg/L。

2 菌藻共生系統(tǒng)去除磷

圖3 菌藻共生系統(tǒng)除磷機(jī)理

聚磷菌是污水處理廠中起主要作用的除磷菌[32]。聚磷菌在厭氧-好氧交替條件下將廢水中吸收的正磷酸鹽以多磷酸鹽的形式儲存在細(xì)胞內(nèi)[33],在厭氧條件下,聚磷菌利用聚磷酸鹽水解產(chǎn)生的能量吸收廢水中的碳源,并以聚羥基烷酸(PHAs)和聚羥基丁酸(PHBs)的形式儲存在細(xì)胞內(nèi),同時(shí)水解產(chǎn)生的正磷酸鹽釋放到水中。在好氧條件下,聚磷菌利用細(xì)胞內(nèi)的PHAs和PHBs為碳源,過量吸收廢水中的正磷酸鹽合成聚磷酸鹽儲存在細(xì)胞內(nèi),將廢水中的磷轉(zhuǎn)移到聚磷菌體內(nèi)。最終,聚磷菌體內(nèi)的聚磷酸鹽隨著剩余污泥的排放而去除[34-35]。微藻可以與聚磷菌相互作用,促進(jìn)對磷的去除,甚至微藻可以直接吸收積累聚磷酸鹽[36]。Ji等[37]研究了非曝氣菌藻顆粒污泥工藝中磷的去除,結(jié)果表明,進(jìn)水中近86%的磷酸鹽在6 h內(nèi)被去除,其中包括在黑暗條件下反應(yīng)2 h和光照條件下反應(yīng)4 h,觀察到菌藻顆粒污泥在黑暗階段有少量的磷釋放,在光照條件下廢水中的聚磷酸鹽被大量吸收。

微藻還可以通過同化作用從廢水中去除磷酸鹽。正磷酸鹽被吸附在細(xì)胞表面[38],然后被運(yùn)送進(jìn)細(xì)胞內(nèi)同化與供細(xì)胞生長[39]。根據(jù)Rezvani等[29]的一項(xiàng)研究,微藻對磷酸鹽的同化是菌藻共生系統(tǒng)中磷酸鹽去除的主要機(jī)制。磷是微藻光合作用所需的重要元素,其平均含量占微藻干重的1%[18],磷的缺乏會降低光合作用卡爾文循環(huán)中底物的合成和再生速率,從而抑制微藻光合作用的進(jìn)行[18]。菌藻共生系統(tǒng)是提高除磷效率的一種可持續(xù)方法。Rezvani等[29]表明,與單一微藻[4.5 mg/(L·d)]和細(xì)菌[2.6 mg/(L·d)]除磷效率相比,菌藻共生系統(tǒng)[6.34 mg/(L·d)]擁有更高的磷酸鹽去除率。菌藻共生系統(tǒng)的同化率主要由藻類生長率決定,并且細(xì)菌的存在可以促進(jìn)微藻的生長。細(xì)菌可以通過提供維生素[40]和植物激素[41](例如,生長素和發(fā)光色素)來促進(jìn)微藻的生長。細(xì)菌提供的維生素等輔助因子已被證明可以改善藻類生長和廢水養(yǎng)分吸收[40],例如,生長素可以促進(jìn)植物和微藻細(xì)胞生長[42],同時(shí)抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)[43]。此外﹐Liu等[44]在研究菌-藻生物膜EPS時(shí)發(fā)現(xiàn),由于菌-藻生物膜表面含有蛋白質(zhì)和多聚糖等組分﹐其具有豐富的含氧官能團(tuán),有機(jī)磷可以與EPS發(fā)生配位作用結(jié)合,通過剩余污泥沉淀去除。

3 菌藻共生系統(tǒng)固定CO2

微藻具有從空氣中固定CO2的能力,并將CO2作為無機(jī)碳源供其生長和代謝[45]。據(jù)報(bào)道,每生產(chǎn)1 t微藻類生物質(zhì)可以固定1.83 t CO2,其固碳效率是陸生植物的10～15倍[46]。表1總結(jié)了不同種類的菌藻共生系統(tǒng)減污降碳性能。

表1 不同種類的菌藻共生系統(tǒng)減污降碳性能

微藻有3種固碳模式,分別為光合自養(yǎng)固碳、異養(yǎng)固碳和兼養(yǎng)固碳[17]。光合自養(yǎng)固碳是指微藻通過光合作用,在葉綠素或其他光合色素的作用下將CO2和H2O轉(zhuǎn)化為三磷酸腺苷(ATP)和還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)等光反應(yīng)產(chǎn)物的過程[51],微藻細(xì)胞光合作用固碳機(jī)理如圖4所示。微藻細(xì)胞中的光合作用分光反應(yīng)和暗反應(yīng)兩個(gè)階段進(jìn)行。光反應(yīng)由光驅(qū)動,利用光能將煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)和二磷酸腺苷(ADP)轉(zhuǎn)化為儲存能量的NADPH和ATP。暗反應(yīng)不需光參與,且與光反應(yīng)同時(shí)發(fā)生,微藻細(xì)胞利用光反應(yīng)過程中產(chǎn)生的NADPH和ATP固定大氣中CO2。暗反應(yīng)中,微藻通過卡爾文循環(huán)的羧化、還原和再生三階段來實(shí)現(xiàn)CO2捕獲。羧化階段,在核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶(RuBisCo)的催化作用下,CO2與核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)結(jié)合生成3-磷酸甘油酯(3-PGA),從而實(shí)現(xiàn)CO2固定。還原階段,在3-磷酸甘油酯激酶的催化下,3-PGA被ATP磷酸化形成1,3-二磷酸甘油酯;然后在甘油醛磷酸脫氫酶的催化下,1,3-二磷酸甘油酯被NADPH還原生成3-磷酸甘油醛(G-3-P)。在最后的再生階段,G-3-P經(jīng)過一系列反應(yīng)生成核酮糖-5-磷酸,在核酮糖磷酸激酶的作用下生產(chǎn)RuBP,重新進(jìn)入羧化階段,開啟下一個(gè)卡爾文循環(huán)[51-52]。微藻異養(yǎng)固碳是指在沒有外加無機(jī)碳源條件下,以有機(jī)碳作為電子供體,微藻通過光合自養(yǎng)生長過程將自身呼吸代謝產(chǎn)生的所有CO2全部吸收[53]。微藻兼養(yǎng)固碳時(shí),藻細(xì)胞會優(yōu)先進(jìn)行光自養(yǎng)過程[53],通過光自養(yǎng)途徑產(chǎn)生的O2不斷積累,在微藻細(xì)胞內(nèi)形成高濃度DO環(huán)境時(shí)促進(jìn)微藻的異養(yǎng)過程的發(fā)生。

注:Pi為游離的磷酸基團(tuán)。

4 結(jié)論與展望

針對水生態(tài)環(huán)境污染嚴(yán)重、現(xiàn)有水處理工藝能耗高、溫室氣體大量排放等問題,菌藻共生系統(tǒng)為去除廢水中氮磷污染物以及減少溫室氣體排放提供了一種綠色可持續(xù)的解決方案。文章綜述了菌藻共生體系提高減污固碳的作用效能及作用機(jī)制,微藻可為硝化細(xì)菌提供O2促進(jìn)對氨氮的轉(zhuǎn)化,菌藻共生系統(tǒng)生成的EPS能夠減輕強(qiáng)光照射對菌藻共生系統(tǒng)細(xì)胞活性的抑制作用,保證氨氮相關(guān)轉(zhuǎn)化菌的活性。夜間藻類呼吸會消耗大量的DO有利于營造缺氧環(huán)境,有助于反硝化作用的進(jìn)行。微藻對磷酸鹽的同化是菌藻共生系統(tǒng)中磷酸鹽去除的主要機(jī)制,細(xì)菌通過提供維生素和植物激素來促進(jìn)微藻生長,從而有助于磷的去除。微藻利用光合作用通過光反應(yīng)和暗反應(yīng)兩個(gè)階段來實(shí)現(xiàn)CO2固定,提高CA和RuBisCO羧化酶的活性可以提高微藻固定CO2的效率。菌藻共生系統(tǒng)在降解水中氮磷污染物及CO2固定上展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景。

目前,菌藻共生系統(tǒng)在減污降碳領(lǐng)域的研究仍處于起步階段,菌藻共生系統(tǒng)的規(guī)模化應(yīng)用及微藻生物燃料的資源化回收面臨一些障礙。筆者認(rèn)為未來菌藻共生系統(tǒng)在減污降碳領(lǐng)域的發(fā)展可能主要分為以下幾個(gè)方向:(1)高效減污降碳菌藻的篩選,各種現(xiàn)有菌藻之間按照不同物質(zhì)、比例、方式、條件進(jìn)行復(fù)合,調(diào)配出高性能減污降碳的菌藻共生系統(tǒng);(2)開發(fā)附著生長的菌藻生物膜系統(tǒng),使其易于從水中分離沉降、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,并實(shí)現(xiàn)規(guī)?；瘧?yīng)用;(3)新型菌藻共生催化劑的開發(fā),隨著化工和材料科學(xué)的發(fā)展,越來越多的人工和天然材料作為菌藻共生系統(tǒng)高效減污降碳的催化劑供人們研究開發(fā)。總之,構(gòu)建高效可靠的菌藻共生系統(tǒng),降低實(shí)際運(yùn)行維護(hù)及回收成本,將進(jìn)一步加速菌藻共生系統(tǒng)在去除污水中氮磷污染物和固定CO2領(lǐng)域的實(shí)際應(yīng)用。