祝麗雙,王浩

(1.河南中醫(yī)藥大學(xué)第五臨床醫(yī)學(xué)院/鄭州人民醫(yī)院 輸血科,河南 鄭州 450000;2.河南省人民醫(yī)院 眼科,河南 鄭州 450000)

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine transaminase,ALT)主要存在于肝細(xì)胞中[1],也存在于腎、心、胰腺等組織細(xì)胞中,其在肝細(xì)胞中的水平是血清中的1 000～3 000倍,當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí),其血清水平迅速上升[2],可作為反映肝功能的重要指標(biāo)之一[3]。由于很多因素可引起ALT升高,因此ALT只能作為肝功能檢測的非特異性指標(biāo)[4]。ALT可從側(cè)面反映肝細(xì)胞受損的情況,間接提示部分“窗口期”的病毒性肝炎;同時(shí),有助于鑒別輸血相關(guān)肝炎病毒攜帶者,可有效預(yù)防肝炎傳播[5],因此ALT成為獻(xiàn)血前的常規(guī)檢測指標(biāo)之一。在未開展ALT初篩前,單一ALT升高是各采供血機(jī)構(gòu)無償獻(xiàn)血者血液報(bào)廢率居高不下的主要原因之一[6]。隨著ALT初篩的開展,血液報(bào)廢率顯著下降[7]。降低血液報(bào)廢率固然重要,但同時(shí)也增加了因ALT初篩不合格而導(dǎo)致的無償獻(xiàn)血者流失。面對當(dāng)今血液資源供不應(yīng)求的緊張局勢,如能在保證用血安全的前提下采取有效措施提高ALT初篩合格率而不增加血液報(bào)廢率將一定程度上緩解這一局面。本研究通過對2022年1—6月所有ALT初篩結(jié)果>45 U·L-1且乙肝和血紅蛋白初篩合格的無償獻(xiàn)血者制定相應(yīng)補(bǔ)救策略,探討其在提高獻(xiàn)血合格率,緩解臨床用血緊張中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集河南省某血站2022年1—6月份11 913名獻(xiàn)血者的ALT初篩結(jié)果,獻(xiàn)血者年齡為18～55歲。所有獻(xiàn)血者均為自愿無償獻(xiàn)血,且符合2012年7月1日實(shí)施的國家標(biāo)準(zhǔn)《獻(xiàn)血者健康檢查要求》的相關(guān)規(guī)定。本研究已通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理審查批準(zhǔn)。

1.2 主要試劑與儀器

1.2.1主要試劑

谷丙轉(zhuǎn)氨酶測試劑條(艾康生物技術(shù)杭州有限公司,批號201809280),丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒(上海榮盛生物藥業(yè)有限公司,批號20181104109)。

1.2.2主要儀器

C-300小型干式生化分析儀(艾康生物技術(shù)杭州有限公司),CB178半自動(dòng)生化儀(上海合意檢驗(yàn)設(shè)備有限公司)。

1.3 方法

1.3.1獻(xiàn)血前初篩ALT

在無償獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前,采用干化學(xué)法對其進(jìn)行ALT初篩。該方法操作簡便、檢測速度快。詳細(xì)操作步驟如下:分析儀開機(jī)預(yù)熱后,將隨試劑條攜帶的調(diào)碼卡插到儀器上,核對調(diào)碼卡的編號與測試條筒上的編號是否相符;從試劑筒內(nèi)取出測試條,用移液槍或玻璃毛細(xì)管吸取30 μL樣本滴加到測試條加樣區(qū)的中央(注意:吸取樣本時(shí)應(yīng)避免氣泡,滴加樣本時(shí)毛細(xì)管應(yīng)垂直不應(yīng)接觸到加樣區(qū))。將待測測試條置于測試槽內(nèi),立即關(guān)上檢測艙蓋,此時(shí)進(jìn)入120 s倒計(jì)時(shí),120 s結(jié)束測試,屏幕上即顯示ALT的測定值。結(jié)果判讀:0～45 U·L-1為合格,>45 U·L-1為不合格。

1.3.2獻(xiàn)血后復(fù)檢ALT

在獻(xiàn)血完成后,采用速率法檢測獻(xiàn)血者ALT。具體操作如下:取初篩合格的無償獻(xiàn)血者EDTA抗凝血20 μL加入反應(yīng)小室,在對應(yīng)小室側(cè)室加入400 μL緩沖液,將測試盤裝入半自動(dòng)生化儀進(jìn)行檢測,檢測前儀器自動(dòng)混勻。結(jié)果判斷:0～50 U·L-1為合格,>50 U·L-1為不合格。

1.3.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組方法

本研究納入2022年1—6月份11 913名獻(xiàn)血者的初篩ALT結(jié)果作為研究對象,對ALT >45 U·L-1且乙肝和血紅蛋白初篩合格的獻(xiàn)血者,應(yīng)用獻(xiàn)血補(bǔ)救策略:囑其靜坐休息30 min,進(jìn)行第1次ALT復(fù)測;對復(fù)測后ALT仍> 45 U·L-1的獻(xiàn)血者囑其注意休息、清淡飲食、避免飲酒和熬夜5～7 d后,進(jìn)行第2次ALT初篩檢測。

在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)上為了減少隨機(jī)誤差的干擾,選取實(shí)驗(yàn)樣本量較大,初篩ALT檢測時(shí)對每位獻(xiàn)血員平行進(jìn)行3次檢測,取平均值,另外實(shí)驗(yàn)全程要求同一位操作人員、同一臺(tái)儀器,并定期對初篩ALT儀進(jìn)行校準(zhǔn)。

對2022年1—6月份所有參加無償獻(xiàn)血的人員進(jìn)行ALT初篩,根據(jù)第1次ALT初篩結(jié)果將獻(xiàn)血者分為:正常組(ALT ≤ 45 U·L-1)、ALT輕度偏高組(<45～50 U·L-1)、中度偏高組(<50～60 U·L-1)、重度偏高組(> 60 U·L-1)。

1.3.4干式化學(xué)法參考區(qū)間

通過每種樣本類型各至少200例臨床樣本的驗(yàn)證,得出以下參考區(qū)間:<45 U·L-1或者<0.68 μkat·L-1(37 ℃)(1 μkat·L-1=1/60 IU·L-1)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,率和構(gòu)成比的比較采用χ2檢驗(yàn),P<0.05說明差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2022年1—6月份無償獻(xiàn)血者ALT初篩結(jié)果

2022年1—6月份參加血站無償獻(xiàn)血人員共11 913名,對此期間所有無償獻(xiàn)血人員進(jìn)行ALT初步篩查檢測,其中7 942名初篩ALT合格,追蹤復(fù)檢ALT合格率為99.6%。對ALT>45 U·L-1并且初篩乙肝和血紅蛋白合格的獻(xiàn)血者給予相應(yīng)的補(bǔ)救措施后有3 868名參與第1次初篩ALT復(fù)測,其中340名初篩ALT合格,追蹤復(fù)檢ALT合格率為99.9%;有1 250名獻(xiàn)血者參與第2次初篩ALT復(fù)測,經(jīng)一般體格檢查后有1 170名進(jìn)行ALT初篩檢測,其中430名初篩ALT合格,追蹤復(fù)檢ALT合格率為99.7%。檢測統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表1。

表1 2022年1—6月份無償獻(xiàn)血者ALT初篩結(jié)果 區(qū)間分布情況表

2.2 復(fù)測ALT合格率

對ALT輕度偏高組實(shí)施獻(xiàn)血補(bǔ)救策略后復(fù)測其水平,初篩ALT為<45～46 U·L-1的獻(xiàn)血者囑其靜坐休息30 min后復(fù)測ALT,約65%的獻(xiàn)血者結(jié)果恢復(fù)正常;同樣的<46～47 U·L-1組約50%恢復(fù)正常;<47～48 U·L-1組約15%恢復(fù)正常;<48～49 U·L-1組約7%恢復(fù)正常;<49～50 U·L-1組約1%恢復(fù)正常。復(fù)測ALT合格率的比較采用SPSS軟件交叉表χ2檢驗(yàn)法比較各組之間合格率有無差異。見圖1。

ALT為谷丙轉(zhuǎn)氨酶。

2.3 2020—2022年1—6月份同期復(fù)檢ALT不合格血液報(bào)廢率比較

2021年1—6月因復(fù)檢ALT不合格導(dǎo)致血液報(bào)廢率較2020年1—6月份升高0.31%。而2022年1—6月份對初篩ALT不合格獻(xiàn)血者施行補(bǔ)救措施后,復(fù)檢ALT不合格導(dǎo)致血液報(bào)廢率比2021年同期下降0.13%。見圖2。

ALT為谷丙轉(zhuǎn)氨酶。

3 討論

ALT是肝細(xì)胞損傷的指標(biāo)之一,在評價(jià)肝細(xì)胞損傷方面有較好的靈敏度[8],也是目前獻(xiàn)血者健康篩查的必檢指標(biāo)之一[9]。雖然目前世界范圍內(nèi),很多國家已經(jīng)不再檢測ALT,有些國家的ALT上限標(biāo)準(zhǔn)也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于我國目前的50 U·L-1。但基于我國是肝炎大國的國情,目前我國仍保留獻(xiàn)血員ALT檢測項(xiàng)目。ALT檢測也許對隱匿性肝炎或其他輸血傳播性肝炎有一定意義,但也有研究認(rèn)為ALT檢測目前在其他肝炎病毒及隱匿性肝炎感染方面意義不大。就目前現(xiàn)狀看,結(jié)合我國國情,為保障采供血安全,保留獻(xiàn)血員ALT檢測有一定意義。

在未開展初篩ALT檢測前,單一ALT升高是各采供血機(jī)構(gòu)血液報(bào)廢的主要原因[6]。開展初篩ALT檢測雖然降低了因ALT復(fù)檢不合格導(dǎo)致的血液報(bào)廢率,但也增加了獻(xiàn)血員流失的風(fēng)險(xiǎn)[10]。初篩ALT升高的原因有很多,分為病理性和非病理性因素,情緒激動(dòng)、肥胖、疲勞、劇烈運(yùn)動(dòng)、飲酒以及某些藥物影響等非病理性因素[11],在獻(xiàn)血員經(jīng)適當(dāng)休整、停藥一定時(shí)間后往往可降至正常水平,因此單純按照1次或者連續(xù)2次的初篩ALT結(jié)果來判斷能否獻(xiàn)血并不完全合理。為既能適應(yīng)當(dāng)前國情又能最大程度挽救合格獻(xiàn)血員,本研究提出獻(xiàn)血補(bǔ)救策略,即對初篩ALT不合格而乙肝和血紅蛋白合格的獻(xiàn)血者采取安靜休息30 min及以上或清淡飲食、避免飲酒、熬夜5～7 d,可通過動(dòng)員肥胖獻(xiàn)血者增加增加運(yùn)動(dòng)改善體重指數(shù)的方式[12]再次參與獻(xiàn)血等宣教措施,鼓勵(lì)回歸獻(xiàn)血,并在回歸獻(xiàn)血后對復(fù)測ALT合格率及ALT報(bào)廢率做了相關(guān)研究。

研究結(jié)果表明,2022年1—6月共成功挽救合格獻(xiàn)血員770名,其中第1次初篩復(fù)測ALT有340人降至正常水平,復(fù)測仍偏高的獻(xiàn)血員采取進(jìn)一步獻(xiàn)血補(bǔ)救措施后有430名ALT降至正常水平,占總回歸獻(xiàn)血人數(shù)的19.9%。就該血站而言,2022年1—6月采取補(bǔ)救策略后,可挽救19.9%合格獻(xiàn)血員,這對保障匱乏的血液資源意義重大。

在對第1次初篩ALT為45～50 U·L-1的獻(xiàn)血者采取補(bǔ)救措施后獻(xiàn)血合格率的研究中發(fā)現(xiàn),這部分獻(xiàn)血員在安靜休息30 min后,初篩ALT檢測值越低,復(fù)測ALT合格率越高,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,<45～46 U·L-1組、<46～47 U·L-1組比<47～48 U·L-1組復(fù)測ALT合格率高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;<47～48 U·L-1組、<48～49 U·L-1組比<49～50 U·L-1組復(fù)測ALT合格率高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對比2020—2022年1—6月份血液報(bào)廢率情況發(fā)現(xiàn),2022年1—6月份第1次初篩ALT偏高獻(xiàn)血者采取補(bǔ)救措施后,因ALT不合格導(dǎo)致血液報(bào)廢的比率并沒有隨之升高,反而較2021年同期有所下降,雖然跟2020年和2021年同期相比差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但也足以說明采取獻(xiàn)血補(bǔ)救策略并不會(huì)導(dǎo)致血液報(bào)廢率上升。因此,在保障采供血安全的前提下,是否也可以將獻(xiàn)血初篩ALT的上限標(biāo)準(zhǔn)適當(dāng)提高,盡最大可能保留合格獻(xiàn)血員,還有待進(jìn)一步探討。

另外,初篩獻(xiàn)血員ALT合格后復(fù)檢不合格導(dǎo)致血液報(bào)廢的原因可能是由于獻(xiàn)血前精神過度緊張[11]、ALT初復(fù)檢方法靈敏度不同、操作過程中隨機(jī)誤差的存在等等。

4 結(jié)論

雖然ALT初篩降低了血液采集后報(bào)廢率,但是增加了潛在的獻(xiàn)血員流失,除定期校正儀器和維護(hù)保養(yǎng)、加強(qiáng)檢測人員技術(shù)水平外,制定相應(yīng)的獻(xiàn)血補(bǔ)救策略既有利于提高獻(xiàn)血積極性,減少獻(xiàn)血員的流失,并且不會(huì)增加ALT復(fù)檢不合格的血液報(bào)廢率,有著較高的社會(huì)意義和臨床價(jià)值。