張瑜 郭軻 劉道路

人巨細(xì)胞病毒(HCMV)主要在人體內(nèi)傳播,大部分人群都存在HCMV感染,但多呈潛伏性感染,幾乎沒有臨床癥狀,也基本不會發(fā)生長期攜帶、反復(fù)感染的情況[1]。當(dāng)合并免疫抑制疾病或免疫力下降時,自然殺傷(NK)細(xì)胞功能減弱,可能引發(fā)HCMV活動性感染[2]。HCMV可存在于血液、尿液、唾液腺、乳汁等中,嬰幼兒感染HCMV主要是通過母嬰傳播、哺乳等途徑[3]。HCMV活動性感染患兒可能會出現(xiàn)呼吸道感染、腹瀉、心肌損傷、皰疹性咽峽炎等癥狀,損害肝膽、中樞神經(jīng)、呼吸系統(tǒng)等,而肝臟是其主要靶器官[4]。本研究旨在探討HCMV活動性感染患兒NK細(xì)胞及γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)水平與HCMV-核酸(DNA)的相關(guān)性。

資料與方法

一、納入標(biāo)準(zhǔn)

(一)巨細(xì)胞病毒活動性感染參照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷[5];(二)均為1歲以下的嬰兒;(三)患兒家屬簽署知情同意書。

二、排除標(biāo)準(zhǔn)

(一)合并自身免疫性疾病;(二)其它病毒感染,如流感、肝炎、皰疹、風(fēng)疹等病毒感染;(三)有遺傳代謝性疾病;(四)近期服用過影響肝功能的藥物。

三、一般資料

選取2021年6月—2022年6月濉溪縣醫(yī)院收治的150例HCMV活動性感染患兒納入研究對象,根據(jù)HCMV DNA水平將患兒分為低載量組(n=52)、中載量組(n=64)、高載量組(n=34),另外選取我院同期50名健康嬰兒作為對照組。在研究開始前上報至我院醫(yī)學(xué)倫理委員會,經(jīng)開會討論后批準(zhǔn)實施(2021-21號)。

四、方法

比較低載量、中載量、高載量HCMV活動性感染患兒及健康嬰兒的一般資料。入院后采集所有嬰兒空腹靜脈血,檢測天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽汁酸(TBA)、GGT,檢測儀器為盛世東唐DT480全自動生化分析儀,試劑盒由阿里生物技術(shù)泰州有限公司提供;采用廈泰生物Cytek Aurora流式細(xì)胞儀檢測NK細(xì)胞百分比;收集嬰兒新鮮尿液,采用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測HCMV DNA載量。

五、統(tǒng)計學(xué)方法

結(jié) 果

一、4組一般資料比較

4組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 4組一般資料比較[n(%),±s]

二、4組肝功能指標(biāo)及NK細(xì)胞比較

4組AST、ALT、ALP、TBA比較無明顯差異(P>0.05);GGT、NK隨HCMV DNA載量升高而上升(P<0.05)。見表2。

表2 4組肝功能指標(biāo)及NK細(xì)胞比較(±s)

三、肝功能指標(biāo)及NK細(xì)胞與HCMV DNA的相關(guān)性分析

經(jīng)相關(guān)性分析,AST、ALT、ALP、TBA與HCMV DNA無明顯相關(guān)性(P>0.05);NK細(xì)胞、GGT與HCMV DNA呈正相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 肝功能指標(biāo)及NK細(xì)胞與HCMV DNA的相關(guān)性分析

討 論

HCMV具有親肝特性,HCMV感染可促使花生四烯酸分泌,經(jīng)環(huán)氧合酶催化生成反應(yīng)性氧物質(zhì),激活非活性狀態(tài)的核因子-κΒ,并促進(jìn)其與免疫、炎癥相關(guān)的病毒、基因表達(dá),導(dǎo)致炎癥反應(yīng)發(fā)生,損害肝細(xì)胞[6]。病毒復(fù)制活躍程度可通過HCMV DNA載量這一指標(biāo)體現(xiàn),HCMV DNA異常升高是病毒活動期的體現(xiàn)[7]。本研究結(jié)果顯示,HCMV活動性感染患兒肝功能指標(biāo)均有一定程度的升高,提示HCMV活動性感染患兒存在肝功能損傷,進(jìn)一步探討肝功能指標(biāo)與HCMV DNA的相關(guān)性發(fā)現(xiàn),AST、ALT、ALP、TBA與HCMV DNA無明顯相關(guān)性,表明肝損傷程度與HCMV復(fù)制的活躍程度不相關(guān),與李迪等[8]的研究結(jié)果較為一致。GGT反映的是患兒的膽汁淤積情況,較為靈敏,也可以用于HCMV活動性感染患兒預(yù)后的判斷[9]。GGT與HCMV DNA呈正相關(guān),謝而付等[10]的研究也得出了相似的結(jié)果,這可能是因為HCMV侵犯網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)后,肝細(xì)胞、膽管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生變性水腫,使膽道被阻塞,GGT無法經(jīng)膽道排泄出體內(nèi),逆流進(jìn)入血液中,從而使血液GGT水平上升。

HCMV的發(fā)病與免疫功能相關(guān),機體免疫系統(tǒng)不成熟時,HCMV容易被激活,引起HCMV感染,嬰幼兒免疫力較低,體內(nèi)NK細(xì)胞數(shù)較正常人明顯偏低,因此發(fā)生HCMV活動性感染的風(fēng)險較高。NK細(xì)胞在細(xì)胞免疫和抗HCMV感染中具有重要作用,NK細(xì)胞可以檢測主要組織相容性復(fù)合物Ⅰ類的下調(diào),對于細(xì)胞因子的表達(dá)也有促進(jìn)作用,產(chǎn)生穿孔素、蛋白酶顆粒B等細(xì)胞毒性顆粒來清除產(chǎn)生感染的細(xì)胞,終止HCMV感染。HCMV感染反過來又可以影響NK細(xì)胞的功能,且有研究顯示[11],HCMV特有的免疫逃避機制對免疫應(yīng)答有抑制作用,機體內(nèi)的病毒不能被完全清除,形成HCMV潛伏感染。HCMV與Toll樣受體3有一定的關(guān)系,可能通過激活這一通路使炎癥反應(yīng)加重,并引起免疫應(yīng)答,這可能是HCMV影響免疫功能的一個新的方向[12]。本研究中,4組NK細(xì)胞水平存在顯著差異,且NK細(xì)胞與HCMV DNA呈正相關(guān),與陳友華等[13]的研究結(jié)果有一定不同,該研究顯示,正常對照組、HCMV DNA陰性及陽性組NK細(xì)胞比較均無明顯差異,病毒載量與疾病嚴(yán)重程度相關(guān),分析原因可能是與病例的選擇及分組方式有關(guān)。

綜上所述,HCMV活動性感染患兒存在肝損傷及免疫抑制,但HCMV復(fù)制活躍程度與肝損傷程度無關(guān),與免疫功能有關(guān)。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。