袁 靖

(蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院血栓室,江蘇 蘇州 215000)

急性髓系白血病是一種高度異質(zhì)性的造血干、祖細胞腫瘤,其占白血病病例的58.7%,存活期較短,5年存活率僅為24%[1]。急性髓細胞性白血病對健康構(gòu)成嚴重威脅[2]。免疫療法已被證明可治療多種癌癥,但多發(fā)性骨髓瘤的免疫抑制微環(huán)境現(xiàn)象阻礙了免疫療法的療效,導(dǎo)致治療進展緩慢。多發(fā)性骨髓瘤細胞與骨髓微環(huán)境之間的相互作用在多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病機制中起著關(guān)鍵作用,逃避免疫防御和耐藥性,增加Treg細胞數(shù)量,抑制效應(yīng)T細胞的殺傷作用。針對特定腫瘤抗原或逆轉(zhuǎn)免疫抑制性骨髓微環(huán)境的免疫療法可能有助于了解疾病的發(fā)展并改善預(yù)后[3]。多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)抗原(MMSA)-8與該病的病理特征和急性髓系白血病療效密切相關(guān),臨床可將目光轉(zhuǎn)移在MMSA-8診斷急性髓系白血病[4]。MMSA-1也是一種細胞膜基因,其可監(jiān)測腫瘤細胞的增殖情況[5]。但我國關(guān)于MMSA-8、MMSA-1在急性髓系白血病患者中表達的意義研究過少,無法為臨床提供依據(jù),本研究分析MMSA-8、MMSA-1在急性髓系白血病患者骨髓單個核細胞中的水平及臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取2021年1月～2022年12月蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院收治的急性髓系白血病30例患者為觀察組,其中男20例,女10例;年齡56～75歲,平均(68.46±3.15)歲。再選擇同期被診斷為單純?nèi)辫F性貧血的患者25例為對照組,其中男15例,女10例;年齡57～75歲,平均(68.66±3.25)歲。對比兩組患者一般資料,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),組間可進行比較。對觀察組患者進行隨訪1年,根據(jù)隨訪預(yù)后療效(預(yù)后良好標準為:癥狀和體征完全消失,原始、幼稚細胞比例<5%,紅系和巨核細胞系外觀正常,染色體和免疫學(xué)的檢查基本正常)將其分為良好組(n=25)和不良組(n=5)。納入標準:①觀察組患者符合《中國慢性髓系白血病診斷與治療指南(2011年版)》[6]中的診斷標準;②患者之前未進行過藥物、放射治療;③患者無自身感染性疾病。排除標準:①凝血功能障礙;②合并肝、腎功能障礙;③為淋巴細胞白血病。本研究在實施前已經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準,患者及家屬均知情同意。

1.2方法:患者入院后,采集10 ml骨髓進行活檢,使用2%乙二胺四乙酸(湖北鑫宇宏生物提供)進行抗凝,使用淋巴細胞分離液(湖北鑫宇宏生物提供)分離單個核細胞,使用紅細胞裂解液(長沙艾貝生物提供)去除紅細胞,然后用磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗樣品,再將加入TRIzol的樣品置于-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。用TRIzol法提取總RNA,用cDNA第一鏈合成試劑盒(TIANGEN北京提供)合成cDNA,用RT-qPCR儀(賽默飛世爾)檢測骨髓單個核細胞中MMSA-8和MMSA-1 mRNA的水平。

1.3觀察指標:①比較兩組MMSA-8和MMSA-1 mRNA的水平差異。②急性髓系白血病患者1年生存情況。③急性髓系白血病患者預(yù)后與MMSA-8和MMSA-1 mRNA水平相關(guān)性。④運用受試者工作特征(ROC)曲線分析MMSA-8和MMSA-1 mRNA水平預(yù)測急性髓系白血病的效能。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析:應(yīng)用SPSS26.0軟件進行t檢驗、χ2檢驗或Fisher精確概率計算。運用ROC曲線MMSA-8和MMSA-1 mRNA水平預(yù)測急性髓系白血病的效能。

2 結(jié)果

2.1MMSA-8、MMSA-1 mRNA 檢測:觀察組MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。

表1 兩組MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平比較

2.2生存情況:30例急性髓系白血病患者術(shù)后均隨訪1年,預(yù)后良好25例,預(yù)后不良5例,良好率為83.33%(25/30)。

2.3不同預(yù)后急性髓系白血病患者MMSA-8、MMSA-1 mRNA檢測:不良組的MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平明顯高于良好組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。

表2 不同預(yù)后急性髓系白血病患者MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平比較

2.4預(yù)測效能:ROC曲線分析結(jié)果顯示,MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平預(yù)測急性髓系白血病的曲線下面積為0.880、0.840,95%CI為0.709～0.969、0.661～0.948,預(yù)測效能較好,見表3。

表3 MMSA-8、MMSA-1 mRNA 水平預(yù)測急性髓系白血病的效能

3 討論

急性髓系白血病是一種由原始髓細胞克隆性增殖引起的疾病,可發(fā)生于任何年齡,患者通常在數(shù)周或數(shù)月內(nèi)發(fā)病[7]。此外,急性髓系白血病患者會因腫瘤細胞浸潤而出現(xiàn)輕度淋巴結(jié)腫大、肝腫大和脾腫大,骨痛也是白血病患者的常見表現(xiàn)。晚期白血病患者會出現(xiàn)惡性病變,死亡主要由多器官衰竭和繼發(fā)感染引起,尤其是機會性致病菌感染,嚴重影響患者的預(yù)后[8]。由于急性髓系白血病和骨髓微環(huán)境的改變息息相關(guān),盡管患者會產(chǎn)生許多適應(yīng)性免疫反應(yīng)來排斥疾病,患者的預(yù)后還是會受到多種因素的影響。研究表明,骨髓瘤細胞不僅可通過瘤內(nèi)和瘤外機制破壞宿主免疫監(jiān)視,抵制當(dāng)前的治療策略[9];還會下調(diào)細胞免疫識別的抗原,并調(diào)節(jié)骨髓微環(huán)境,促進腫瘤介導(dǎo)的增殖和凋亡抵抗,進而阻礙抗腫瘤免疫,因此,腫瘤微環(huán)境和骨髓細胞表面抗原是當(dāng)前臨床研究的熱點。

趙慧芳等[10]的研究表明,80%及以上的急性髓系白血病患者存在異常染色體核型結(jié)構(gòu)異常。MMSA-8和MMSA-1在惡性髓系相關(guān)疾病患者中具有高表達水平和相對特異性,與惡性腫瘤細胞表達密切相關(guān)。此外,周萌等[11]的研究還發(fā)現(xiàn)MMSA-1的表達水平與另一個急性髓系白血病相關(guān)基因DKK1的表達水平呈正相關(guān)。DKK1是一種用于晚期惡性實體瘤的重組人源化單克隆抗DKK1抗體,與急性髓系白血病的病情發(fā)展息息相關(guān)。因此,我們推測MMSA-1可能在急性髓系白血病的發(fā)病機制和骨質(zhì)流失中發(fā)揮重要作用,并且是多發(fā)性骨髓瘤的新型腫瘤標志物和免疫治療靶抗原[12]。本研究結(jié)果顯示,觀察組的MMSA-8、MMSA-1 mRNA 水平明顯高于對照組,和趙蓮等[13]的研究結(jié)果一致。

本研究中預(yù)后不良組MMSA-8、MMSA-1 mRNA 水平明顯高于預(yù)后良好組,分析其原因在于,MMSA-1廣泛參與免疫反應(yīng)、癌癥、新陳代謝、轉(zhuǎn)錄、神經(jīng)生物學(xué)和信號轉(zhuǎn)導(dǎo),特別是突觸傳遞、先天性免疫反應(yīng)、GPCR和酪氨酸激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及轉(zhuǎn)錄因子功能等。此外,張亞朋等[14]還發(fā)現(xiàn),ZDHHC9在腫瘤細胞中呈高水平表達,可在一定程度上促進腫瘤細胞生長。ROC曲線分析結(jié)果顯示,MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平預(yù)測急性髓系白血病的預(yù)測效能較好,且與臨床療效和預(yù)后密切相關(guān)。分析MMSA-1的功能可能與ZDHHC9相似,其活性異常增高被認為是腫瘤發(fā)生的重要機制。還有研究表明,MMSA-8和MMSA-1與白細胞密切相關(guān)[15],而急性白血病的病因是細胞分化停滯在原始細胞和幼稚細胞階段,導(dǎo)致這類細胞不斷增殖,從而在骨髓中積累大量原始細胞和幼稚細胞,并像血液循環(huán)一樣不斷釋放到外周血中,使外周血中白血病細胞的生成速度超過其破壞速度,導(dǎo)致外周血中白血病細胞數(shù)量增加。

綜上所述,MMSA-8和MMSA-1 mRNA在急性髓系白血病中呈高水平表達,預(yù)測急性髓系白血病的效能較好。