王 誠，王艷萍，熊 毅，朱 萍2，，饒高雄，*

（1.云南中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，云南 昆明 650500； 2.云南省高校藥食同用資源養(yǎng)生產(chǎn)品工程研究中心，云南 昆明 650500； 3.云南昊辰制藥有限公司，云南 宜良 652100）

人參果是一種茄科茄屬多年生蔬菜、水果兼觀賞型草本植物，原產(chǎn)于南美的安第斯山北麓［1］，又名香瓜茄，香瓜梨、艷果、香艷茄、香艷梨、茄瓜、甜茄等，果實呈梨狀、橢圓形、乳黃色漿果，果實皮薄、肉厚且多汁，成熟時果皮呈淡綠色至黃色，并常帶有紫色或紫紅色條紋［2］，其富含人體必需的氨基酸、維生素C，不僅含有硒、鈷等微量元素，同時也是人體中鈣的良好來源［3］。從人參果中分離得到的主要次生代謝產(chǎn)物為生物堿類、黃酮類、酚酸類等［4］。目前國內(nèi)對人參果化學(xué)成分及藥理作用研究的報道較少，為更合理地開發(fā)利用該資源，擴大其保健和藥用價值的應(yīng)用，本研究對人參果水提物及85%乙醇提取物進行了抗氧化活性測定［5］。實驗表明，人參果提取物顯示了一定的抗氧化能力，85%乙醇提取物的抗氧化能力高于人參果水提物的抗氧化能力。對85% 乙醇提取物進行劃段處理，其中的30%甲醇部分抗氧化活性較好，抗氧化活性依次為30% 甲醇部分、甲醇部分、60%甲醇部分、水部分。同時對人參果85%乙醇提取物進行系統(tǒng)的化學(xué)成分分離和結(jié)構(gòu)鑒定，共分離得到25 個化合物，其中化合物1～7、9～25 均為首次從人參果中分離得到。

1 材料

Bruker AvanceⅢ400 MHz 核磁共振儀（德國Bruker 公司）； Agilent 6545 LC／Q-TOF 四極桿串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜儀（美國Agilent 公司）； 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本EYELA 公司）； WJX-A1000 型粉碎機（上海緣沃工貿(mào)有限公司）； JY1002 型電子天平（上海浦春計量儀器有限公司）； ZF8 紫外分析儀（上?？等A生化儀器制造有限公司）； 紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）； Sephadex LH-20 型葡聚糖柱（瑞典Pharmacia 公司）； MCI Gel CHP-20 （日本三菱公司）； RP-C18（日本富士硅化學(xué)株式會社）； 氧化鋁填料（成都金山化學(xué)試劑有限公司）； 薄層硅膠GF254、硅膠柱（青島海洋化工有限公司）； DPPH·、L-抗壞血酸（上海易恩化學(xué)技術(shù)有限公司）。試劑為分析純。

人參果采自云南石林，經(jīng)云南中醫(yī)藥大學(xué)陳紹田研究員鑒定為茄科茄屬植物人參果SolanummuricatumAit.的成熟果實，標(biāo)本存放于云南省高校藥食同用資源養(yǎng)生產(chǎn)品工程研究中心實驗室。

2 提取與分離

人參果干品80.0 kg 粉碎至粗粉，10 倍量85%乙醇加熱提取2 次，每次2 h，合并提取液，減壓濃縮至稠浸膏（60.0 kg）。浸膏用1 倍量95%乙醇揉捏放置5 h，揉捏2 次，過濾，回收乙醇，得到浸膏（10.0 kg），濾渣舍棄，經(jīng)HP-20 柱，依次用水、95% 乙醇洗脫，得水洗脫部分 （7.7 kg）、95%乙醇洗脫部分（1.8 kg），水洗脫部分點板對照后主要為多糖及蛋白質(zhì)類成分，故舍棄。95%乙醇洗脫部分加少量水溶解后調(diào)節(jié)pH 至4，經(jīng)MCI柱，依次用水、甲醇洗脫，用丙酮沖洗柱子，得水洗脫部分（Fr.A，233.0 g）、第二份水洗脫部分（51.0 g）、甲醇洗脫部分（Fr.B，602.0 g），丙酮洗柱后的溶液回收溶劑得干膏（16.0 g），點板后與第二份水洗脫部分相同，將這兩部分合并，得Fr.C （67.0 g）。人參果粗粉用3%酸水提取后，二氯甲烷萃取，得到浸膏（Fr.D，60.0 g）。

Fr.A 點板后與果糖對照，還含有大量果糖，用少量純化水溶解，經(jīng)MCI 柱，用水、甲醇依次洗脫，TLC 檢識，得甲醇部分（154.0 g），再經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，得到Fr.A1 ～Fr.A2。Fr.A1 （2.9 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，合并相同組分，得到Fr.A1-1 ～Fr.A1-2。Fr.A1-1 經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物2 （4.0 mg）、4 （4.2 mg）。Fr.A2 （33.0 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，得到Fr.A2-1～Fr.A2-2。Fr.A2-1 （1.9 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物3 （70.0 mg）。Fr.A2-2 （1.4 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物1（36.9 mg）。

Fr.B 經(jīng)MCI 柱，用水、甲醇依次洗脫，TLC檢識，得甲醇部分（240.0 g），再經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，得到Fr.B1～Fr.B2。Fr.B1（7.4 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，得到化合物5 （406.0 mg）、6 （200.5 mg），合并剩余相同組分，得到Fr.B1-1。Fr.B1-1 （2.1 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物7 （1.8 g）、8 （533.0 mg）。Fr.B2 （30.3 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，合并相同組分，得到Fr.B2-1 ～Fr.B2-4。Fr.B2-1 （1.8 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以氯仿-甲醇（1 ∶1）洗脫，再經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，得到化合物10 （2.0 mg）、11 （2.0 mg）。Fr.B2-2 （2.1 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，再經(jīng)甲醇重結(jié)晶，得到化合物12 （256.2 mg）、13 （4.0 mg）。Fr.B2-3 （4.5 g）經(jīng)重結(jié)晶，得到化合物9 （1.6 g）。Fr.B2-4 （1.5 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物14 （2.0 mg）。

Fr.C 經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，得到Fr.C1～Fr.C3。Fr.C1 （1.1 g）經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物16 （630.3 mg）、17 （300.2 mg）。Fr.C2 （0.6 g）經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，合并相同組分，再經(jīng)重結(jié)晶，得到化合物15（181.0 mg）。Fr.C3 （4.6 g）析出白色結(jié)晶，經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物18 （786.1 mg），剩余部分經(jīng)硅膠柱，以氯仿-甲醇（1 ∶0 ～0 ∶1）梯度洗脫，得到化合物19 （2.1 mg）。

Fr.D 用中性氧化鋁硅膠拌樣，裝柱，以環(huán)己烷-丙酮 （1 ∶ 1）洗脫，得到Fr.D1 ～Fr.D3。Fr.D1 （3.0 g）析出白色結(jié)晶，經(jīng)氯仿重結(jié)晶，得到化合物20 （43.0 mg），剩余部分經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物24 （480.0 mg）。Fr.D2 （2.5 g）析出淡黃色結(jié)晶，經(jīng)甲醇重結(jié)晶，得到化合物21 （33.7 mg），剩余部分經(jīng)Sephadex LH-20 純化，以甲醇洗脫，得到化合物25 （1.0 g）。Fr.D3 （18.0 g）經(jīng)Sephadex LH-20純化，以甲醇洗脫，合并相同組分，再經(jīng)Sephadex LH-20 分離，以甲醇洗脫，得到化合物22 （109.8 mg）、23 （942.9 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：179［M＋H］＋，分子式C9H8O4。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：7.05 （1H，d，J＝2.1 Hz，H-2），6.78 （1H，d，J＝8.2 Hz，H-5），6.94 （1H，dd，J＝8.2，2.0 Hz，H-6），7.54 （1H，d，J＝16.2 Hz，H-7），6.21 （1H，d，J＝16.2 Hz，H-8）；13CNMR （ 100 MHz，CD3OD）δ：127.7 （ C-1），115.0 （ C-2），146.8 （ C-3），149.4 （ C-4），116.4 （ C-5），122.8 （ C-6），147.0 （ C-7），115.5 （C-8），171.0 （C-9）。以上數(shù)據(jù)與文獻［6］報道基本一致，故鑒定為咖啡酸。

化合物2：無色結(jié)晶（甲醇），ESI-MSm／z：165 ［M ＋Na］＋，分子式C6H6O4。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：7.87 （1H，s，H-2），2.33（3H，s，-CH3）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：145.8 （ C-2），142.9 （ C-3），170.2 （ C-4），140.3 （C-5），151.8 （C-6），14.5 （-CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［7］報道基本一致，故鑒定為5-羥基麥芽酚。

化合物3：無色油狀物（氯仿），ESI-MSm／z：155 ［M ＋Na］＋，分子式C5H8O4。1H-NMR （400 MHz，CDCl3）δ：2.68 （2H，m，H-2），2.64（2H，m，H-3），3.71 （3H，s，4-OCH3）；13CNMR （100 MHz，CDCl3）δ：177.4 （-COOH），172.8 （-COO-），52.0 （4-OCH3），28.8 （C-2），28.7 （C-3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［8］報道基本一致，故鑒定為琥珀酸單甲酯。

化合物4：白色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：124 ［M ＋H］＋，分子式C6H5NO2。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：9.14 （1H，d，J＝1.4 Hz，H-2），8.72 （1H，dd，J＝4.9，1.4 Hz，H-3），8.39 （1H，dt，J＝7.9，1.4 Hz，H-4），7.55（1H，dd，J＝7.9，4.9 Hz，H-6）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：152.3 （C-2），127.3 （C-3），137.8 （ C-4），123.8 （ C-5），149.8 （ C-6），166.3 （C-7）。以上數(shù)據(jù)與文獻［9］報道基本一致，故鑒定為煙酸。

化合物5：白色無定型粉末（DMSO），ESI-MSm／z：599 ［M ＋Na］＋，分子式C35H60O6。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ：5.33 （1H，s，H-6），4.42 （1H，t，J＝5.8 Hz，H-1′），0.83 （3H，m，H-21），0.66 （3H，s，H-18）；13C-NMR （ 100 MHz，DMSO-d6）δ：37.3 （C-1），29.7 （C-2），71.0 （C-3），38.8 （C-4），140.9 （C-5），121.6（C-6），31.8 （C-7），31.9 （C-8），50.1 （C-9），36.6 （C-10），21.0 （C-11），41.3 （C-12），42.3（C-13），56.0 （C-14），24.3 （C-15），28.2 （C-16），56.6 （C-17），12.1 （C-18），19.5 （C-19），35.9 （C-20），19.0 （C-21），33.8 （C-22），25.9（C-23），45.6 （C-24），29.2 （C-25），19.4 （C-26），20.1 （C-27），23.1 （C-28），12.2 （C-29），101.3 （C-1′），77.4 （C-2′），77.2 （C-3′），73.9（C-4′），70.6 （C-5′），61.5 （C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［10］報道基本一致，故鑒定為胡蘿卜苷。

化合物6：白色片狀結(jié)晶 （DMSO），EI-MSm／z：574 ［M］＋，分子式C35H58O6。1H-NMR （400 MHz，DMSO-d6）δ：5.32 （1H，brs，H-7），0.50（3H，d，J＝6.8 Hz，18-CH3），0.66 （3H，s，19-CH3），0.83 （3H，s，21-CH3），4.86 （2H，m，H-23 ～24），0.92 （3H，d，J＝6.4 Hz，26-CH3），0.95 （3H，d，J＝6.8 Hz，27-CH3），0.79（3H，t，J＝5.6 Hz，29-CH3），3.64 （1H，dd，J＝5.6，6.0 Hz，H-3′）；13C-NMR （100 MHz，DMSO-d6）δ：36.7 （C-1），29.2 （C-2），77.2（C-3），35.0 （C-4），42.4 （C-5），29.2 （C-6），116.9 （C-7），140.9 （C-8），50.1 （C-9），33.9（C-10），19.3 （C-11），38.8 （C-12），45.7 （C-13），55.8 （C-14），21.1 （C-15），28.9 （C-16），55.9 （C-17），12.3 （C-18），13.0 （C-19），35.8（C-20），19.6 （C-21），138.5 （C-22），129.3（C-23），50.1 （C-24），31.8 （C-25），19.1 （C-26），18.6 （C-27），23.1 （C-28），12.1 （C-29），101.3 （C-1′），73.9 （C-2′），77.2 （C-3′），70.6（C-4′），77.2 （C-5′），61.6 （C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［11］報道基本一致，故鑒定為α-菠甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物7：淺黃色粉末（DMSO），ESI-MSm／z：673 ［M ＋Na］＋，分子式C30H34O16。1H-NMR （400 MHz，DMSO-d6）δ：4.24 （1H，d，J＝8.0 Hz，H-1），3.07 （1H，m，H-2），3.27 （1H，m，H-3），3.17 （1H，m，H-4），3.36 （1H，m，H-5），4.40 （1H，m，H-6a），4.16 （1H，m，H-6b），7.12 （1H，d，J＝1.2 Hz，H-2′），7.04 （1H，d，J＝8.0 Hz，H-5′），6.99 （1H，dd，J＝8.0，1.5 Hz，H-6′），7.41 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-7′），7.33 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-8′），4.88 （1H，d，J＝8.0 Hz，H-1″），3.32 （1H，m，H-2″），3.27 （1H，m，H-4″），3.72 （1H，m，H-5″），4.40 （1H，m，H-6″a），4.21 （1H，m，H-6″b），7.56 （2H，d，J＝8.0 Hz，H-2?，6?），6.79（2H，d，J＝8.0 Hz，H-3?，5?），7.52 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-7?），6.35 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-8?）；13C-NMR （100 MHz，DMSO-d6）δ：100.0（C-1），74.2 （C-2），76.7 （C-3），70.4 （C-4），73.6 （C-5），63.8 （C-6），128.4 （C-1′），114.4（C-2′），147.2 （ C-3′），147.4 （ C-4′），115.5（C-5′），120.7 （ C-6′），144.2 （ C-7′），116.8（C-8′），166.9 （C-9′），101.5 （C-1″），73.6 （C-2″），76.0 （C-3″），70.3 （C-4″），74.4 （C-5″），63.8 （ C-6″），125.4 （ C-1?），130.8 （ C-2?），115.5 （C-3?），160.4 （C-4?），116.3 （C-5?），130.2 （C-6?），145.3 （C-7?），114.4 （C-8?），166.8 （C-9?）。以上數(shù)據(jù)與文獻［12］報道基本一致，故鑒定為susaroyside A。

化合物8：無色針狀結(jié)晶 （甲醇），ESI-MSm／z：193 ［M-H］＋，分子式C10H10O4。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.19 （1H，d，J＝1.9 Hz，H-2），6.84 （1H，d，J＝8.2 Hz，H-5），7.10 （1H，dd，J＝1.9，8.3 Hz，H-6），7.63（1H，d，J＝15.9 Hz，H-7），6.35 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8），3.90 （3H，s，-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：127.7 （C-1），115.9 （C-2），150.4 （C-3），149.3 （C-4），116.4 （C-5），123.9 （ C-6），146.9 （ C-7），111.6 （ C-8），171.0 （C-9），56.4 （-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［13］報道基本一致，故鑒定為阿魏酸。

化合物9：白色結(jié)晶（丙酮），ESI-MSm／z：163［M＋H］＋，分子式C9H8O3。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6）δ：7.57 （2H，d，J＝8.5 Hz，H-2，6），6.90 （2H，d，J＝8.6 Hz，H-3，5），7.60（1H，d，J＝15.9 Hz，H-7），6.33 （H，d，J＝15.9 Hz，H-8）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：127.0 （C-1），130.8 （C-2，6），116.6 （C-3，5），160.4 （C-4），145.5 （C-7），115.7 （C-8），168.1 （C-9）。以上數(shù)據(jù)與文獻［14］報道基本一致，故鑒定為對香豆酸。

化合物10：白色粉末（丙酮），ESI-MSm／z：195 ［M ＋H］＋，分子式C10H10O4。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6）δ：7.05 （1H，d，J＝2.0 Hz，H-2），6.87 （1H，d，J＝7.3 Hz，H-5），6.90（1H，dd，J＝7.5，2.0 Hz，H-6），6.28 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-7），7.53 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-8），3.73 （3H，s，-OCH3）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：127.5 （C-1），115.7 （C-2），148.7 （C-3），149.8 （C-4），116.3 （C-5），122.5 （C-6），148.7 （C-7），115.0 （C-8），51.5（-OCH3），167.8 （-COOH）。以上數(shù)據(jù)與文獻［15］報道基本一致，故鑒定為咖啡酸甲酯。

化合物11：白色粉末（丙酮），ESI-MSm／z：207 ［M-H］-，分子式C11H12O4。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6）δ：7.05 （1H，d，J＝2.0 Hz，H-2），6.87 （1H，d，J＝7.3 Hz，H-5），6.90（1H，dd，J＝7.5，2.0 Hz，H-6），7.53 （1H，d，J＝15.8 Hz，H-7），6.28 （1H，d，J＝15.9 Hz，H-8），4.20 （2H，q，J＝7.1 Hz，H-1′），1.30（3H，t，J＝7.1 Hz，H-2′）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：145.5 （ C-1），127.5 （ C-2），148.7 （ C-3），149.8 （ C-4），122.5 （ C-5），116.3 （ C-6），115.2 （ C-7），115.0 （ C-8），167.8 （C-9），60.4 （C-1′），14.6 （C-2′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［16］報道基本一致，故鑒定為咖啡酸乙酯。

化合物12：白色結(jié)晶（甲醇），ESI-MSm／z：187 ［M＋H］＋，分子式C9H16O4。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：1.48 （2H，t，J＝7.1 Hz，H-2，6），2.17 （2H，t，J＝7.0 Hz，H-3，5），1.21 （3H，s，H-8 ～9）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：176.3（C-1，7），28.6 （C-2，6），33.2 （C-3，5），28.6（C-4），24.4 （C-8～9）。以上數(shù)據(jù)與文獻［17］報道基本一致，故鑒定為4，4-二甲基-庚二酸。

化合物13：白色結(jié)晶（丙酮），ESI-MSm／z：285 ［M ＋H］＋，分子式C16H12O5。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6）δ：8.20 （1H，s，H-2），8.10（1H，d，J＝8.8 Hz，H-5），6.91 （1H，dd，J＝8.6，2.2 Hz，H-6），7.00 （1H，d，J＝3.2 Hz，H-2′），9.68 （1H，s，3′-OH），6.98 （1H，d，J＝8.8 Hz，H-5′），7.08 （1H，dd，J＝8.3，2.1 Hz，H-6′），3.79 （3H，s，-OCH3）；13C- NMR（100 MHz，Acetone-d6）δ：152.6 （C-2），124.2（C-3），174.7 （C-4），127.6 （C-5），114.8 （C-6），162.4 （C-7），102.3 （C-8），157.9 （C-9），117.7 （C-10），125.4 （C-1′），116.0 （C-2′），146.2 （ C-3′），147.4 （ C-4′），111.2 （ C-5′），120.2 （C-6′），55.4 （4′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［18］報道基本一致，故鑒定為毛蕊異黃酮。

化合物14：白色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：213 ［M ＋H］＋，分子式C14H12O2。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：5.80 （2H，d，J＝12.8 Hz，H-1 ～2），6.65 （4H，d，J＝8.7 Hz，H-3ab′，5ab′），7.44 （ 4H，d，J＝ 8.6 Hz，H-2ab′，6ab′）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：145.8（C-1 ～2），160.9 （ C-4ab′），130.9 （ C-2ab′，6ab′），116.7 （C-1ab′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［19］報道基本一致，故鑒定為反-4，4′-二羥基-二苯基乙烯。

化合物15：白色粉末（氯仿），ESI-MSm／z：463 ［M ＋Na］＋，分子式C31H52O。1H-NMR （400 MHz，CDCl3）δ：3.29 （ 1H，s，H-3），0.97（6H，s，H-18，29），0.89 （ 3H，s，H-21），0.90 （3H，s，H-28），0.81 （3H，s，H-30），4.72 （1H，brs，H-31a），4.67 （1H，brs，H-31b）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：32.0 （C-1），30.4 （C-2），78.9 （C-3），40.5 （C-4），47.1 （C-5），21.1 （C-6），28.2 （C-7），48.0（C-8），20.0 （C-9），26.0 （C-10），26.1 （C-11），35.6 （C-12），45.3 （C-13），48.8 （C-14），32.9 （C-15），26.5 （C-16），52.3 （C-17），18.0（C-18），29.9 （C-19），36.1 （C-20），18.3 （C-21），35.0 （C-22），31.3 （C-23），156.9 （C-24），33.8 （C-25），21.9 （C-26），22.0 （C-27），19.3 （ C-28），25.4 （ C-29），14.0 （ C-30），105.9 （C-31）。以上數(shù)據(jù)與文獻［20］報道基本一致，故鑒定為24-亞甲基環(huán)阿爾廷醇。

化合物16：淡黃色油狀物（氯仿），ESI-MSm／z：283 ［M ＋H］＋，分子式C18H34O2。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：2.27 （2H，t，J＝7.4 Hz，H-2），1.60 （2H，m，H-3），1.31 ～1.22 （20H，m，H-4～7，12 ～17），2.02 （4H，m，H-8，11），5.31 （2H，m，H-9 ～10），0.95 （3H，t，J＝7.1 Hz，H-18）；13C-NMR （ 100 MHz，CDCl3）δ：173.4 （C-1），34.2 （C-2），24.9 （C-3），29.6 ～29.1 （C-4～7，12 ～15），27.1 （C-8，11），129.8（C-9），130.0 （C-10），31.9 （C-16），22.6 （C-17），14.1 （C-18）。以上數(shù)據(jù)與文獻［21］報道基本一致，故鑒定為油酸。

化合物17：無色油狀物 （氯仿），ESI-MSm／z：311 ［M ＋H］＋，分子式C20H38O2。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：2.29 （2H，t，J＝7.3 Hz，H-2），1.63 （2H，t，J＝6.8 Hz，H-3），1.22 ～1.31 （23H，m，H-4 ～7，12 ～17，2′），2.04（4H，t，J＝6.7 Hz，H-8，11），5.35 （2H，dt，J＝6.1 Hz，H-9 ～10），0.91 （3H，t，J＝6.6 Hz，H-18），4.12 （2H，dd，J＝4.3，7.1 Hz，H-1′）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：173.4 （C-1），34.2 （C-2），25.4 （C-3），27.1 （C-4），29.0 ～29.6 （C-5 ～8，12 ～16），130.0 （C-9），129.8 （ C-10），31.9 （ C-11），22.9 （ C-17），14.0 （C-18），59.9 （C-1′），14.1 （C-2′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［22］報道基本一致，故鑒定為油酸乙酯。

化合物18：白色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：437 ［M＋Na］＋，分子式C29H50O。TLC 噴灑10%硫酸-乙醇后于105 ℃烘烤顯色呈紫紅色，與對照品TLC 比較Rf值與顯色一致，以上數(shù)據(jù)與文獻［23］報道基本一致，故鑒定為β-谷甾醇。

化合物19：白色粉末（甲醇），ESI-MSm／z：449 ［M ＋Na］＋，分子式C30H50O。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：3.10 （1H，dt，J＝12.0，3.5 Hz，H-3），5.22 （1H，dd，J＝6.0，1.5 Hz，H-7），0.59 （3H，s，H-18），0.87 （3H，s，H-19），2.87 （1H，m，H-25），0.99 （6H，d，J＝6.4 Hz，H-26 ～27），1.61 （3H，d，J＝6.8 Hz，H-29），0.97 （3H，d，J＝4.8 Hz，H-30）；13CNMR （100 MHz，CD3OD）δ：37.3 （C-1），29.8（C-2），76.7 （C-3），40.8 （C-4），47.2 （C-5），27.1 （C-6），118.6 （C-7），140.0 （C-8），51.0（C-9），34.7 （C-10），21.5 （C-11），39.6 （C-12），44.4 （C-13），56.1 （C-14），22.4 （C-15），27.8 （C-16），57.3 （C-17），12.2 （C-18），27.8（C-19），36.8 （C-20），19.4 （C-21），35.8 （C-22），27.8 （C-23），146.4 （C-24），29.0 （C-25），21.5 （C-26），21.4 （C-27），117.8 （C-28），12.9 （C-29），14.6 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻［24］報道基本一致，故鑒定為檸檬二烯醇。

化合物20：白色粉末（氯仿）。ESI-MSm／z：375 ［M＋Na］＋，分子式C25H52。1H-NMR （400 MHz，CDCl3）δ：0.82 （6H，t，J＝6.6 Hz，H-1，25），1.18 （46H，m，H-2 ～24）；13C-NMR （100 MHz，CDCl3）δ：13.1 （C-1，25），21.7 （C-2，24），30.9 （C-3，23），28.6 （C-4，22），28.7 （C-5 ～21）。以上數(shù)據(jù)與文獻［25］報道基本一致，故鑒定為二十五烷。

化合物21：無色針晶（丙酮），ESI-MSm／z：653 ［M ＋H］＋，分子式C45H80O2。1H-NMR （400 MHz，Acetone-d6））δ：2.29 （2H，t，J＝7.2 Hz，H-4），5.31 （1H，d，J＝5.2 Hz，H-6），0.71 （ 3H，s，H-18），1.0 （ 3H，s，H-19），0.96 （3H，m，H-21），0.85 （3H，s，H-26），0.81 （3H，s，H-27），0.83 （3H，m，H-29），0.87 （ 3H，m，H-16′）；13C-NMR （ 100 MHz，Acetone-d6）δ：37.7 （C-1），32.0 （C-2），71.2（C-3），42.8 （C-4），141.8 （C-5），121.0 （C-6），32.1 （C-7），32.0 （C-8），50.7 （C-9），36.8 （C-10），21.3 （C-11），40.2 （C-12），42.6（C-13），57.1 （C-14），24.4 （C-15），28.4 （C-16），56.3 （C-17），21.8 （C-18），19.3 （C-19），36.4 （C-20），18.8 （C-21），34.1 （C-22），26.2（C-23），46.2 （C-24），29.2 （C-25），19.6 （C-26），19.2 （C-27），23.2 （C-28），11.7 （C-29），178.1 （C-1′），34.1 （C-2′），24.5 （C-3′），29.2（C-4′ ～5′），29.3 （C-6′），29.4 （C-7′），29.5（C-8′），29.6 （C-9′），29.8 （C-10′～13′），32.0（C-14′），23.2 （C-15′），14.3 （C-16′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［26］報道基本一致，故鑒定為β-谷甾醇棕櫚酸酯。

化合物22：淡黃色粉末（丙酮），HR-ESI-MSm／z：167 ［M ＋H］＋，分子式C9H10O3。1H-NMR（400 MHz，Acetone-d6）δ：6.82 （1H，d，J＝3.3 Hz，H-3），6.57 （1H，d，J＝3.3 Hz，H-4），4.57 （2H，s，H-6），6.55 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-7），7.33 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-8），2.27（3H，s，H-10）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6）δ：152.5 （C-2），117.6 （C-3），113.5 （C-4），155.8 （C-5），64.8 （C-6），125.6 （C-7），130.2（C-8），197.7 （C-9），27.9 （C-10）。以上數(shù)據(jù)與文獻［27］報道基本一致，故鑒定為 （E）-4-［5- （hydroxymethyl）furan-2-yl］but-3-en-2-one。

化合物23：淡黃色針晶 （丙酮），ESI-MSm／z：257 ［M ＋Na］＋，分子式C12H10O5。1H-NMR（400 MHz，Acetone-d6）δ：6.72 （2H，d，J＝2.5 Hz，H-3，3′），7.40 （2H，d，J＝2.5 Hz，H-4，4′），4.69 （4H，s，H-6，6′），9.65 （2H，s，-CHO）；13C-NMR （100 MHz，Acetone-d6））δ：177.5 （C-1，1′），157.5 （C-2，2′），111.8 （C-3，3′），122.3 （ C-4，4′），153.1 （ C-5，5′），64.0 （C-6，6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［28］報道基本一致，故鑒定為雙- （5-甲?；坊┟选?/p>

化合物24：淡黃色油 （甲醇），HR-ESI-MSm／z：180 ［M］＋，分子式C10H12O3。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：6.81 （1H，d，J＝3.4 Hz，H-3），6.53 （1H，d，J＝3.4 Hz，H-4），4.45 （2H，s，H-6），6.61 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-7），7.39 （1H，d，J＝16.0 Hz，H-8），2.34 （3H，s，H-10），3.39 （3H，s，-OCH3）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：152.3 （C-2），118.2 （C-3），113.2 （C-4），156.4 （C-5），67.1 （C-6），125.0（C-7），131.5 （C-8），200.6 （C-9），27.3 （C-10），58.3 （-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［27］報道 基 本 一 致，故 鑒 定 為 （E）-4- ［5-（methoxymethyl）furan-2-yl］but-3-en-2-one。

化合物25：紅色油（甲醇），HR-ESI-MSm／z：302 ［M］＋，分子式C17H18O5。1H-NMR （400 MHz，CD3OD）δ：6.53 （1H，d，J＝3.3 Hz，H-3，3′），6.50 （1H，d，J＝3.3 Hz，H-4，4′），4.44 （2H，s，H-6），6.97 （1H，d，J＝15.7 Hz，H-7，7′），7.51 （1H，d，J＝ 15.7 Hz，H-8，8′），3.35（3H，s，-OCH3）；13C-NMR （100 MHz，CD3OD）δ：151.5 （C-2，2′），117.1 （C-3，3′），111.9（C-4，4′），155.1 （C-5，5′），65.8 （C-6，6′），123.7 （C-7，7′），129.5 （C-8，8′），188.9 （C-9），57.0 （-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻［27］報道基本一致，故鑒定為1，5-bis （5-methoxymethyl）furan-2-yl-penta-1，4-dien-3-one。

4 抗氧化活性研究

參考文獻［5］報道，將人參果水提物及人參果85%乙醇提取物濃縮，取一定量梯度稀釋，得到不同濃度的樣品溶液，以L-抗壞血酸為陽性對照，取2 mL 樣品溶液及陽性對照溶液，分別加入配制好的DPPH 溶液2 mL，充分混勻，在室溫下避光靜置30 min，在517 nm 波長處測定吸光度（A1），用水（85% 乙醇）替代樣品溶液測定吸光度（A0），用水（85%乙醇）替代DPPH 自由基溶液測定吸光度（A2）。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X），DPPH 自由基清除率為縱坐標(biāo)（Y），進行線性回歸，并以半數(shù)抑制濃度（IC50）為評價指標(biāo)，重復(fù)3 次，取平均值，計算IC50值，結(jié)果見圖1。各溶劑提取物均具有一定的抗氧化能力，在50 ～300 μg／mL 范圍內(nèi)對DPPH 自由基的清除能力隨著質(zhì)量濃度的增加而增加，IC50值分別為119.50、103.60 μg／mL，L-抗壞血酸的IC50值為1.01 μg／mL，人參果85%乙醇提取物抗氧化能力強于人參果水提物。

圖1 人參果不同提取溶劑對DPPH 自由基的清除情況Fig.1 DPPH radical scavenging of S.muricatum with different extraction solvents

人參果85%乙醇提取物分別用水、30%甲醇、60%甲醇、甲醇洗脫，濃縮得各部分浸膏，進行DPPH 自由基活性測定，結(jié)果見圖2。各極性段均具有一定的抗氧化能力，IC50值分別為594.04、4.16、53.30、24.89 μg／mL，抗氧化能力依次為30%甲醇部分、甲醇部分、60% 甲醇部分、水部分。

圖2 人參果85%提取物不同極性段對DPPH 自由基的清除情況Fig.2 DPPH radical scavenging in different polar segments of 85% extracts of S.muricatum

4 討論

本研究采用DPPH 法對人參果果實提取物進行體外抗氧化活性篩選，發(fā)現(xiàn)人參果總提取物及85%乙醇提取物各極性段均有一定的自由基清除能力，其中30%甲醇部分顯示出較好的自由基清除能力； 通過硅膠、MCI gel、Sephadex LH-20、RPC18等方法從人參果中分離得到11 個酚酸及其酯、6 個甾醇、2 個呋喃、2 個雙呋喃、1 個苯丙素、1個異黃酮、2 個其他類化合物。研究發(fā)現(xiàn)，人參果中的化學(xué)成分主要以酚酸類化合物居多，酚酸類化合物具有抗炎、抗氧化、抗癌等生物活性［29］。人參果提取物抗氧化實驗表明，人參果提取物具一定抗氧化活性，通過分離實驗表明人參果中起到抗氧化作用的化合物為酚酸類化合物。據(jù)有關(guān)文獻報道，化合物7 具有一定的保肝活性和抗炎活性［30］；化合物13 具有抗腫瘤生物活性，有望成為治療惡性腫瘤的潛在藥物成分［31］； 化合物14 具有較強的抗氧化活性［32］； 化合物22、24 具有抑制免疫的活性； 化合物25 具有抑制ADP 體外刺激的正常小鼠血小板聚集的活性。本研究豐富了人參果化學(xué)成分，為人參果抗氧化的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及功能性產(chǎn)品開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。