曹榮生

沂南縣馬牧池畜牧獸醫(yī)站，山東臨沂 276300

0 引言

中華人民共和國農業(yè)農村部規(guī)定的二類動物疫病是指可造成重大經濟損失、需要采取嚴格控制、撲滅措施的疫病。37 種二類動物疫病中，多種動物共患病7 種，牛病3 種，分別是牛結節(jié)性皮膚病（Lumpy skin disease，LSD）、牛傳染性鼻氣管炎（傳染性膿皰外陰陰道炎，Infectious bovine rhinotracheitis,IBR）和牛結核?。╞ovine tuberculosis，BTB）。這些傳染病不僅影響奶牛健康、生產性能和繁殖性能，降低泌乳量，還可嚴重影響牛奶及牛奶制品的品質，潛在病原體甚至引起交叉感染，威脅人的身體健康，可能引發(fā)社會公共衛(wèi)生問題。生產實踐中，為做好這些疫病的防控，要認真分析疫病流行情況，探討防控新策略，通過疫情上報與調查、疫區(qū)和受威脅區(qū)劃定、疫區(qū)內消毒滅源和威脅區(qū)內易感動物緊急免疫等措施，有效控制、凈化和根除疫情。

1 牛結節(jié)性皮膚病（LSD）

LSD也稱牛結節(jié)疹，是由牛結節(jié)性皮膚病病毒（Lumpy skin disease virus，LSDV）引起以皮膚出現(xiàn)結節(jié)為特征的疫病。LSD不是人畜共患病。LSD是2019年8月傳入我國新疆維吾爾自治區(qū)伊犁州的新發(fā)傳染病，對養(yǎng)牛業(yè)產生新的威脅和重大經濟影響[1]。2022年6月23日，農業(yè)農村部發(fā)布第573號公告，將LSD由一類動物疫病調整為二類動物疫病。

1.1 診斷要點

1.1.1 流行情況

（1）病原特點。該病病原L S D V 屬痘病毒科（Poxviridae）、山羊痘病毒屬（Capripoxvirus，C a P V），毒株呈現(xiàn)多樣性，代表毒株為南非Neethling株，僅有一個血清型[2]。LSDV在55 ℃ 2 h，或65 ℃ 30 min可滅活。但在-90 ℃皮膚病變組織內可保存10 年，在受感染組織液中4 ℃可存活6 個月，病變結痂內至少可存活3 個月。pH值6.6～8.6可長期存活。LSDV能被直射陽光滅活，對20%乙醚、1%甲醛、氯仿、2%苯酚（15 min）、2%～3%次氯酸鈉、0.5%季銨類化合物等敏感。

（2）流行情況。牛易感，肉牛、水牛、奶牛不分品種、性別和年齡，均可感染，但奶牛對LSDV更易感[3]?；疾』蚋腥綥SDV牛是該病主要傳染源；可經媒介生物如蚊、蠅、蠓、虻和硬蜱叮咬間接傳播，或注射針頭、草料污染、相互舔舐等直接傳播，也可經人工授精、自然交配等垂直傳播。發(fā)病率2%～45%，致死率一般不超過10%。LSD發(fā)病有明顯的季節(jié)性，吸血蟲媒活躍的夏、秋季節(jié)多發(fā)。一般呈散發(fā)。

1.1.2 臨床癥狀

自然感染時，LSD潛伏期一般為28 d，實驗條件下潛伏期4～15 d。初期，病牛體溫升高到41 ℃，高熱稽留持續(xù)5～7 d左右；之后，病牛全身淺表淋巴結，特別是肩胛下淋巴結和股前淋巴結明顯腫大，全身尤其是頭頸、四肢、乳房和生殖器周圍皮膚表面形成直徑約10～50 mm的圓形可見結節(jié)突起，堅固，有的結節(jié)破潰后感染流膿，經久不愈，有的結節(jié)纖維化后形成疤痕；可視黏膜出現(xiàn)炎癥、壞死，主要表現(xiàn)為眼、鼻流漿液性或膿性分泌物，口腔黏膜潰瘍，口角流涎。奶牛產奶量顯著下降，發(fā)情延遲，孕牛可發(fā)生流產[4]，公牛因精液品質下降、精子活力降低可導致不育。

1.1.3 實驗室診斷

通過發(fā)熱、皮膚上出現(xiàn)特征性結節(jié)等臨床癥狀，結合流行病學等情況，可做出疑似LSD診斷。確診需進行實驗室LSDV分子生物學、免疫學等檢測。（1）病原鑒定。實驗室檢測LSDV常用分子生物學方法。采集病牛血清、EDTA抗凝全血、口鼻等分泌物拭子、破潰結節(jié)內膿汁等，進行常規(guī)聚合酶鏈式反應（Polymerase chain reaction，PCR）分子生物學技術、實時熒光定量PCR（Fluorescence quantification real-time PCR，RT-PCR）、高分辨率熔解曲線（High-resolution melting，HRM）基因分析以及簡便、快捷、精確的環(huán)介導等溫擴增（Loop-mediated isothermal amplification，LAMP）等方法。也可進行LSDV分離和電鏡觀察。

（2）血清學鑒定。常規(guī)實驗室LSDV免疫學檢測方法可進行病毒中和試驗（Virus neutralization test，VNT），檢測LSDV特異性血清抗體。此外，間接熒光抗體試驗（Indirect fluorescent antibody technique，IFAT）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）、瓊脂凝膠免疫擴散試驗（Agar gel immunodiffusion test，AGID）和蛋白印跡試驗（Western blot，WB）等常用血清學檢測方法也可用于LSDV血清學鑒定。但市售的酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒可用于羊痘病毒屬快速檢測，但存在缺陷，不能區(qū)分山羊痘病毒屬3 種病毒。

1.2 防控策略

1.2.1 疫情處置

2020年，農業(yè)農村部發(fā)布《牛結節(jié)性皮膚病防治技術規(guī)范》（農牧發(fā)〔2020〕30號）中要求，一方面要做好外防輸入性病例，必須嚴把國門，嚴防引進疫區(qū)國家的活牛及其肉制品、皮張、精液等產品；還要求對確診的LSD病例和病原學陽性病例立即撲殺，病死牛及產品、污物、墊料等同時進行無害化處理。做好同群病原學陰性奶牛的隔離飼養(yǎng)和臨床監(jiān)視，發(fā)現(xiàn)異常，及時處置；對奶牛場環(huán)境、設施、車輛、用具、人員等進行徹底消毒，消滅蚊、蠅、蜢、虻、硬蜱等昆蟲媒介，防止叮咬奶牛；疫區(qū)、受威脅區(qū)內，限制同群奶牛移動，禁止所有活牛調出和引進，嚴密監(jiān)測和排查養(yǎng)殖場、屠宰場、交易場等感染風險和疫情動態(tài)，做好疫情監(jiān)測和預警；在國內尚無特異性疫苗的情況下，選擇臨時替代疫苗山羊痘活疫苗對所有牛只進行緊急免疫，以保護非疫區(qū)健康牛群。

1.2.2 加強飼養(yǎng)管理

要加強奶牛飼養(yǎng)管理，嚴格落實各項生物安全措施，加強并實施嚴格的衛(wèi)生消毒，殺滅蠓、硬蜱、蚊、蠅等吸血蟲媒，填埋養(yǎng)殖場周邊死水溏，清理雜草和污物、垃圾，消除蚊蟲孳生環(huán)境；按照動物疫病監(jiān)測與流行病學調查計劃要求，加強對重點防控地區(qū)和重點環(huán)節(jié)的監(jiān)測，加強對邊境地區(qū)散放奶牛的巡查力度，為LSD風險評估提供科學依據(jù)。

1.2.3 免疫接種

如有必要，根據(jù)各地實際情況，疫區(qū)可進行免疫接種，但必須逐級上報，待批準并備案后方可實施。

（1）常規(guī)免疫程序。每年3月份，可試用山羊痘活疫苗5 頭份對所有易感牛進行普免，21～30 d后強化免疫1 次；犢牛出生后，可試用5 頭份山羊痘疫苗進行首次免疫，21～30 d后強化免疫1 次。（2）一刀切式免疫程序（表1）。

表1 一刀切式免疫程序

2 牛傳染性鼻氣管炎（傳染性膿皰外陰陰道炎，IBR）

IBR是由牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）或I型牛皰疹病毒（BHV-1）引起的一種以呼吸道型和生殖道型為主的接觸性傳染病。農業(yè)農村部將其列為二類動物疫病。

2.1 診斷要點

2.1.1 流行特點

該病病原是牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）或I型牛皰疹病毒（BHV-1）。不分年齡和品種，牛均有易感性，20～60 日齡犢牛易感性高。秋、冬季多見，舍飼、高密度飼養(yǎng)更易誘發(fā)該病傳播流行。

2.1.2 臨床癥狀

可出現(xiàn)多種類型，但因臨床表現(xiàn)復雜，且多種類型常同時存在，很少單獨發(fā)生。

（1）呼吸道型。最常見的是輕重不一的鼻氣管炎。病初高熱，40～42 ℃以上；精神萎頓，不食；呼吸高度困難，偶有咳嗽但不嚴重，呼出氣有惡臭味；鼻腔流出大量分泌物，黏性或膿性，鼻黏膜高度充血腫脹，鼻鏡發(fā)紅，又稱紅鼻病。奶牛泌乳量突然下降。

（2）生殖道型。奶牛表現(xiàn)傳染性膿皰外陰陰道炎，外陰腫脹，流出膿性分泌物。公牛表現(xiàn)傳染性龜頭包皮炎，喪失配種能力，但可成為傳染源。

（3）角膜結膜炎型。眼瞼、眼結膜水腫、充血，角膜輕度混濁，流淚；嚴重病牛眼瞼腫脹黏連，眼結膜外翻，角膜云翳，流出膿性分泌物。

（4）腦膜炎型。多見于犢牛。表現(xiàn)共濟失調，無目的轉圈運動，空口磨牙，口吐白沫，角弓反張。

（5）腸炎型。多見于2～3 周齡犢牛。腹瀉，血便。

2.1.3 實驗室診斷

該病疑似診斷的依據(jù)主要是鼻黏膜充血、膿皰、呼吸困難、鼻腔流膿等，但確診須進行病毒分離鑒定和血清學試驗。

2.2 防控策略

2.2.1 疫情處置

發(fā)現(xiàn)可疑病例，立即采取隔離、封鎖和消毒等措施，使用弱毒疫苗，對所有假定健康牛群進行緊急免疫接種。

IBR目前沒有特效藥，可對癥治療，使用中藥防止病牛繼發(fā)感染。如病牛高燒不退時，可1 次肌內注射復方氨基比林注射液20～50 mL。

2.2.2 綜合防控

引進牛要嚴格檢疫，隔離飼養(yǎng)，嚴禁從疫區(qū)引進種牛。做好常規(guī)飼養(yǎng)管理，保持環(huán)境清潔衛(wèi)生，定期消毒，養(yǎng)殖密度合理，牛舍通風換氣、保溫防寒，定期檢疫。

靈活選用弱毒疫苗、滅活疫苗、亞單位疫苗等進行免疫。IBR可引起持續(xù)性感染，通過PCR檢測技術，檢出陽性牛并撲殺，是根除該病的有效措施。

3 牛結核病（BTB）

牛結核病是由牛型結核分枝桿菌（Mycobacterium bovis）引起，以組織器官結節(jié)性肉芽腫、干酪樣及鈣化壞死病灶為特征的慢性消耗性疫病。農業(yè)農村部2022年9月印發(fā)《全國畜間人獸共患病防治規(guī)劃（2022—2030年）》，將牛結核病確定為重點防治的畜間人獸共患病之一，并將其列為二類動物疫病。近年來，由于加大對奶牛規(guī)模化飼養(yǎng)推行力度，奶牛群體不斷擴大，數(shù)量增多，個體調運逐漸頻繁等原因，牛結核病在我國奶牛群體中仍有一定程度流行。監(jiān)測結果顯示，我國牛群尤其是奶牛群中BTB實際流行情況和發(fā)病率可能高于官方疫情報告數(shù)量，因此，BTB防控形勢仍存在很大挑戰(zhàn)和壓力，應引起高度警覺[5]。

3.1 診斷要點

3.1.1 流行病學特征

BTB是由牛型結核分枝桿菌病原引起的。該病原有3 種類型，分別是牛型、人型和禽型，其中以牛型結核分枝桿菌致病力最強。人感染結核病主要是牛型和人型結核分枝桿菌。奶牛最易感，其次是水牛、黃牛、牦牛等，人也有不同程度易感性。

患牛是主要傳染源，經呼吸道，通過痰液、鼻液等分泌物傳播；或經被糞尿等污染的飲水、飼草飼料經消化道傳播；或牛間相互撕咬，通過唾液、鼻液傳播；還可經乳汁、空氣等途徑傳播給健康牛；妊娠期母牛如已感染該病，會通過母體胎盤將攜帶病菌直接傳染給犢牛。人食用帶有結核分枝桿菌的牛奶、牛肉時易感染。

該病一年四季均可發(fā)生，季節(jié)性發(fā)病不明顯，也不存在發(fā)病地域性。如果屠宰檢疫不嚴格，發(fā)現(xiàn)陽性奶牛后，因補償?shù)仍虿荒芗皶r撲殺淘汰，牛群未凈化，會導致奶牛群較大面積交叉感染。衛(wèi)生不潔、環(huán)境惡劣、密度過大、飼養(yǎng)不良等可誘發(fā)該病；散放條件下奶牛的結核病發(fā)病率低，但規(guī)模化圈養(yǎng)奶牛的感染率高[5]。

3.1.2 臨床癥狀

BTB自然感染時，潛伏期一般16～45 d，有的病例可能會達數(shù)年，一般呈慢性經過。臨床上多見的類型如下。

（1）肺結核。病初無明顯臨床癥狀，只在清晨呼吸冷空氣、塵?；蚝写碳ば詺馕兜目諝鈺r，病牛表現(xiàn)短干咳，以后變成比較頑固干咳；隨著病情發(fā)展，咳嗽逐漸加重，呼吸頻率明顯加快，伴有氣喘，呼吸困難，精神極差，肺部聽診摩擦音；從鼻孔流出淡黃色黏液性鼻液或膿性鼻液；午后、夜間常低燒。病程長，雖經治療，但經久不愈。

（2）淋巴結核。各型結核病、各時期、各處的淋巴結均可發(fā)生結核病。體表淋巴結明顯腫大，手摸可觸及；咽喉淋巴結腫大時，因迫壓咽喉導致狹窄，吞咽和噯氣障礙，破裂后形成潰瘍，呼吸音粗礪；肩前、股后淋巴結腫大，表現(xiàn)跛行；縱膈淋巴結腫大，可致瘤胃臌氣。

（3）乳房結核。主要病變在乳房，以乳房淋巴結尤其是后方乳腺區(qū)的乳房上淋巴結腫大最常見。乳房淋巴結出現(xiàn)硬結腫塊，表現(xiàn)大小不等、凹凸不平，觸摸無熱痛，泌乳量顯著減少，乳品質下降，顏色灰白，稀薄如水，有時混有膿塊，常被棄掉。后期乳腺萎縮，喪失泌乳能力。

（4）腸結核。犢牛常多發(fā)。病犢牛表現(xiàn)漸進性消瘦，食欲不振，腹瀉和便秘交替發(fā)生，腹痛；病的后期常排出粥樣帶血稀糞或膿汁樣下痢，腥臭，頑固不愈，有時還可見鮮血，運動無力。

3.1.3 實驗室診斷

通過臨床癥狀，可對奶牛結核病做出疑似診斷，確診需根據(jù)不同情況進行實驗室檢查。

疑似BTB牛群可結合實驗室檢查，使用結核菌素皮內變態(tài)反應試驗確診。皮內注射結核菌素0.1 mL，72 h后，如局部皮膚出現(xiàn)紅腫，皮厚增加超過4 mm，可判定為陽性；紅腫不明顯，皮厚增加不超過4 mm，為疑似病例；皮厚增加低于2 mm，為陰性。

使用γ-干擾素試劑盒進行牛結核病的體外檢測，是國內公認特異性和敏感性較高的方法。但進口試劑盒價格高，國產牛結核病γ-干擾素ELISA檢測試劑盒、膠體金試紙條可在不同層面檢測和監(jiān)測。

臨床癥狀表現(xiàn)較明顯的疑似病牛，須在臨床癥狀檢查基礎上，進行抹片抗酸染色、微生物離心培養(yǎng)等細菌學檢測方法，或進行核酸探針、PCR和DNA圖譜、胸部影像學等分子生物學方法，與實驗室診斷相結合，作為主要診斷方法[6]。

3.2 防控策略

《全國畜間人獸共患病防治規(guī)劃（2022—2030年）》對牛結核病防治目標是：到2025年，有25%以上的規(guī)?；膛鲞_到凈化或無疫標準；到2030年，要求50%以上的規(guī)?；膛鲞_到凈化或無疫標準。為此，必須嚴格落實各項綜合防控措施，包括監(jiān)測凈化、檢疫監(jiān)管、無害化處理等。奶牛場（戶）要主動協(xié)調有關機構和單位做好春、秋兩季結核病監(jiān)測，如發(fā)現(xiàn)陽性病例，必須第一時間及時報告并進行撲殺和無害化處理。對出現(xiàn)的可疑陽性病例、檢測陰性病例的疑似病牛等隔離、監(jiān)管。

3.2.1 監(jiān)測凈化

規(guī)模化奶牛場對BTB監(jiān)測較重視，但部分肉牛養(yǎng)殖場（戶）戶忽視該病監(jiān)測，或積極性不高，或能力不足，尤其春、秋季節(jié)[7]，可能導致因陽性牛未及時檢出而出現(xiàn)BTB傳播、擴散，偽陽性、假陰性狀況發(fā)生，給BTB有效防控帶來隱患。

建立健全并認真實施奶牛防疫制度。各地動物防疫監(jiān)督機構要不斷強化和加大對牛BTB疫情監(jiān)測力度，加強對奶牛場結核病防治工作指導和監(jiān)督，及時準確把握養(yǎng)殖場、屠宰場、交易市場等的牛型結核分枝桿菌分布和結核病疫情動態(tài)，科學監(jiān)測和評估BTB疫情風險同時，及時發(fā)布預警信息，提高應對時效性。

逐步建立奶牛個體健康檔案和追溯標識。規(guī)?；膛鲆鸩酵晟颇膛Ｏ底V、產奶等基礎信息，飼料及飼料添加劑購買、飼喂信息，消毒信息，免疫和診療記錄等內容為主的健康檔案。對規(guī)模化奶牛場的每頭奶牛都實行“一牛一標”可追溯標識，發(fā)現(xiàn)感染奶牛及時追蹤溯源并持續(xù)跟蹤監(jiān)測。根據(jù)“一場一策”要求，對規(guī)模化奶牛場實行分類指導，分別制定切實可行的凈化計劃和凈化方案，統(tǒng)籌推進BTB防治工作。

在非結核病疫區(qū)，對BTB監(jiān)測發(fā)現(xiàn)的陽性牛和臨床發(fā)現(xiàn)的患病牛，發(fā)現(xiàn)一頭淘汰一頭，加速對牛場結核病凈化[8]。

3.2.2 檢疫監(jiān)管

加強對奶牛產地檢疫和屠宰檢疫。奶牛跨省調運過程中，必須切實加強產地檢疫和流通監(jiān)管，嚴格落實農業(yè)農村部《跨省調運乳用種用家畜產地檢疫規(guī)程》（農牧發(fā)〔2023〕16號），按標準、按程序檢疫并做好記錄、結果處理。規(guī)范牛的屠宰檢疫，淘汰奶牛嚴格按照《牛屠宰檢疫規(guī)程》屠宰檢疫，杜絕已患BTB奶牛和產品包括牛奶、牛肉、皮張等流入市場。

3.2.3 無害化處理

加大推進奶牛標準化規(guī)模養(yǎng)殖力度，提高飼養(yǎng)管理水平。努力構建以科學選址與規(guī)劃、規(guī)范引種和生產管理、嚴格防疫、隔離和定期消毒、對病死奶牛和糞污無害化處理等為主要內容，持續(xù)有效的生物安全防御體系，促進奶牛養(yǎng)殖業(yè)轉型升級。結核病陽性奶牛要堅決撲殺，積極培育奶牛結核病陰性群。