朱立蕊 崔曉文 楊希國 李妍 陳玉艷 張?zhí)戽?/p>

*通信作者：崔曉文，講師，博士研究生，研究方向為動物醫(yī)學(xué)和飼料學(xué)；E-mail：58865387@qq.com

摘? 要：本研究對飼料添加劑L-纈氨酸的鑒別、含量、干燥失重、灼燒殘渣、比旋光度、pH、總砷、重金屬進行了檢測和評價分析。結(jié)果顯示，所檢測項目均符合國家標準，飼料添加劑L-纈氨酸的質(zhì)量安全狀況良好。建議將國家標準GB 7300.104—2022《飼料添加劑 第1部分：氨基酸、氨基酸鹽及其類似物? L-纈氨酸》中檢測重金屬的標準比色溶液制備過程中鉛標準工作溶液體積由1.5 mL降為1.0 mL，或?qū)U標準工作溶液濃度由15 μg/mL降為10 μg/mL，以使檢測方法更科學(xué)合理。

關(guān)鍵詞：飼料添加劑；L-纈氨酸；質(zhì)量安全；重金屬

中圖分類號：S816 文獻標志碼：A ? ? ? ?文章編號：1001-0769（2023）06-0076-05

L-纈氨酸是組成蛋白質(zhì)的氨基酸之一，化學(xué)名稱為L-2-氨基-3-甲基丁酸，屬于支鏈氨基酸[1]。目前，L-纈氨酸的生產(chǎn)方式有蛋白質(zhì)水解提取法、化學(xué)合成法、微生物發(fā)酵法等，其中微生物發(fā)酵法具有原料成本低、反應(yīng)溫和、發(fā)酵產(chǎn)率高、不需拆分、易于規(guī)?；a(chǎn)等優(yōu)點，是生產(chǎn)L-纈氨酸的主要方法[2]，被廣大生產(chǎn)企業(yè)采用。L-纈氨酸的生物發(fā)酵法主要是采用谷氨酸棒桿菌等菌株[3]，培養(yǎng)基為葡萄糖、尿素、無機鹽等，經(jīng)發(fā)酵、提取、干燥的工藝而生產(chǎn)。L-纈氨酸為必需氨基酸，動物自身不能合成，必須從日糧中攝入。L-纈氨酸能夠幫助動物合成更多的蛋白質(zhì)，促進生長和發(fā)育，滿足其營養(yǎng)需要。隨著“氨基酸平衡理論”的發(fā)展和支鏈氨基酸研究的深入，L-纈氨酸在養(yǎng)殖業(yè)得到了廣泛關(guān)注和應(yīng)用。

L-纈氨酸主要用于乳仔豬料和哺乳母豬料，可提高泌乳母豬采食量、泌乳量和乳質(zhì)量，提高仔豬斷奶體重[4]；同時能夠提高豬機體免疫力，增強抗病力，降低死淘率，提高經(jīng)濟效益。L-纈氨酸在水產(chǎn)養(yǎng)殖中也有應(yīng)用，能夠促進水產(chǎn)動物的蛋白質(zhì)代謝，提高免疫功能和抗氧化能力[5]。

使用不合格的L-纈氨酸可能會帶來嚴重危害：⑴含有有害物質(zhì)或不良成分，導(dǎo)致動物中毒、代謝紊亂、免疫系統(tǒng)受損；⑵含量不足，影響蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致生長速度減慢，飼料轉(zhuǎn)化率和生產(chǎn)性能下降；⑶如果動物攝入了受偽劣飼料添加劑污染的飼料，可能會導(dǎo)致動物生產(chǎn)的肉、蛋、奶等食品不符合食品安全標準，對人類健康構(gòu)成威脅。為避免上述問題的發(fā)生，按國家標準GB 7300.104—2022《飼料添加劑? 第1部分：氨基酸、氨基酸鹽及其類似物 L-纈氨酸》[6]對L-纈氨酸鑒別、含量、干燥失重、灼燒殘渣、比旋光度、pH、總砷、重金屬進行檢測分析，確保飼料添加劑L-纈氨酸的質(zhì)量安全。此外，國家標準化管理委員會于2022年發(fā)布了國家標準GB 7300.104—2022，并計劃于2024年1月1日實施。本研究通過對L-纈氨酸的檢測，評價分析了市場上該產(chǎn)品的質(zhì)量是否符合國家標準，并對國家標準中重金屬的檢測方法提出改進建議，供飼料質(zhì)量安全工作者參考。

1? 材料與方法

1.1 主要儀器和設(shè)備

GZX-9240MBE電熱鼓風干燥箱購自上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠，SX-5-12箱式電阻爐購自上海科恒實業(yè)發(fā)展有限公司；IP-digi 300/2自動旋光儀購自上海儀邁儀器科技有限公司，IS128 pH計購自上海儀邁儀器科技有限公司，UV2300Ⅱ雙光束紫外可見分光光度計購自上海天美科學(xué)儀器有限公司。

1.2 主要試劑和標準溶液

α-萘酚苯基甲醇（指示劑）購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司，高氯酸滴定液購自上海安譜試驗科技股份有限公司，砷標準溶液購自壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司，鉛標準溶液購自壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司。

1.3 試驗樣本

試驗用L-纈氨酸樣本為市場上隨機選取的9個飼料添加劑L-纈氨酸。

1.4 試驗方法

L-纈氨酸鑒別、含量、比旋光度、pH、重金屬按國家標準GB 7300.104—2022規(guī)定進行測定[5]；干燥失重按國家標準GB/T 6435—2014《飼料中水分的測定》中直接干燥法的規(guī)定進行測定[7]；灼燒殘渣按國家標準GB/T 6438—2007《飼料中粗灰分的測定》規(guī)定進行測定[8]；總砷按國家標準GB/T 13079—2006《飼料中總砷的測定》中干灰化法進行樣本前處理，按銀鹽法進行測定[9]。

1.5 檢測結(jié)果評價

L-纈氨酸鑒別、含量、比旋光度、pH、干燥失重、灼燒殘渣、重金屬、總砷的檢測結(jié)果按國家標準GB 7300.104—2022規(guī)定進行評價。

2? 結(jié)果與分析

2.1 L-纈氨酸鑒別

紅外光譜法是在4 000～400㎝-1波數(shù)范圍內(nèi)測定物質(zhì)的吸收光譜，用于化合物的鑒別檢查或含量測定的方法。除部分光學(xué)異構(gòu)體及長鏈烷烴同系物外，幾乎沒有兩個化合物具有相同的紅外光譜，據(jù)此可以對化合物進行定性和結(jié)構(gòu)分析[10]。本研究中，L-纈氨酸樣本的紅外光譜圖與標準品的圖譜一致，見圖1和圖2。

2.2 L-纈氨酸含量檢測

L-纈氨酸含量測定有電位滴定法[11-12]、高氯酸滴定法[6]、高效液相色譜法[12]等。國家標準GB 7300.104—2022指出可以采用高氯酸滴定法測定L-纈氨酸的含量，該方法無須電位滴定儀、液相色譜儀等設(shè)備，操作簡便，便于推廣應(yīng)用。由表1可知，L-纈氨酸的含量介于99.3％～99.8％，平均值為99.6％，9個樣本的L-纈氨酸含量均符合國家標準GB 7300.104—2022的規(guī)定。

2.3 干燥失重檢測

本研究所用L-纈氨酸9個樣本的干燥失重測定結(jié)果見表2。結(jié)果顯示，不同樣本的干燥失重結(jié)果差異較大，介于0.11％～0.37％，均符合不高于1.0％的規(guī)定要求，合格率為100％。

2.4 灼燒殘渣檢測

表3可知，灼燒殘渣含量在0.02％～0.07％，均符合不高于0.5％的規(guī)定要求。灼燒殘渣含量均較低，對產(chǎn)品質(zhì)量影響較小。

2.5 比旋光度檢測

比旋光度是單位濃度和單位長度下的旋光度，是旋光物質(zhì)的特征物理常數(shù)。國家標準GB 7300.104—2022規(guī)定L-纈氨酸的比旋光度在+26.6°～+29.0°，本研究采用鈉光譜的D線（589.3 nm）測定了9個樣本的比旋光度。由表4可知，測定結(jié)果在+27.47°～+27.93°，滿足國家標準的規(guī)定要求。

2.6 pH檢測

pH測定結(jié)果在5.22～5.83，滿足國家標準中4.50～6.50的規(guī)定要求，pH測定結(jié)果見表5。

2.7 總砷含量檢測

L-纈氨酸樣本中總砷含量按國家標準? GB/T 13079—2006中干灰化法進行樣本前處理，按銀鹽法進行測定，該方法的最低檢測濃度為0.04 mg/kg。對9個樣本進行了總砷含量的測定，結(jié)果均小于所用方法規(guī)定的最低檢測濃度，滿足國家標準GB 7300.104—2022中不高于2.0 mg/kg的規(guī)定。

2.8 重金屬（以鉛計）濃度檢測

國家標準GB 7300.104—2022規(guī)定的重金屬（以鉛計）含量的測定方法為限量檢查法。當試樣中重金屬（以鉛計）含量為限量值時，試樣溶液中的鉛濃度與標準比色溶液中的鉛濃度應(yīng)一致，以便進行比色檢測；而國家標準GB 7300.104—2022中標準比色溶液中的鉛濃度是預(yù)期濃度的1.5倍，不適宜進行比色檢測。本研究將標準比色溶液制備過程中加鉛標準工作溶液由1.5 mL改為1.0 mL，使檢測方法更科學(xué)合理。結(jié)果表明，L-纈氨酸中重金屬（以鉛計）的含量均小于15 mg/kg。

3? 結(jié)論

本研究隨機選取了9個飼料添加劑L-纈氨酸樣本，按國家標準GB 7300.104—2022對L-纈氨酸鑒別、含量、干燥失重、灼燒殘渣、比旋光度、pH、總砷、重金屬含量進行了檢測分析，結(jié)果表明被檢樣本在這幾項指標上均滿足國家標準GB 7300.104—2022對L-纈氨酸的質(zhì)量安全規(guī)定要求，飼料添加劑L-纈氨酸的質(zhì)量安全狀況良好。同時，建議在按國家標準GB 7300.104—2022對飼料添加劑L-纈氨酸進行重金屬測定時，標準比色溶液制備過程中將加鉛標準工作溶液由1.5 mL降為1.0 mL， 或?qū)U標準工作溶液濃度由15 μg/mL降為10 μg/mL，使檢測方法更科學(xué)合理，為飼料質(zhì)量安全工作者提供參考。

4? 討論

飼料添加劑L-纈氨酸質(zhì)量安全與以下幾種情況密不可分。

4.1 生產(chǎn)質(zhì)量控制

制造商在生產(chǎn)過程中必須遵循一系列質(zhì)量控制標準和規(guī)定，以確保產(chǎn)品的質(zhì)量和純度。這包括原材料的選擇、生產(chǎn)過程的控制、設(shè)備清潔和維護等。

4.2 監(jiān)管體系

政府和監(jiān)管機構(gòu)通常會制定并執(zhí)行食品和飼料安全法規(guī)，以確保飼料添加劑的質(zhì)量和安全。制造商需要遵守這些法規(guī)，接受監(jiān)管機構(gòu)的檢查和審查。

4.3 產(chǎn)品標簽和說明

飼料添加劑L-纈氨酸的產(chǎn)品標簽必須提供準確的信息，包括用途、建議的用量和儲存條件等。這有助于用戶正確使用產(chǎn)品。

4.4 安全性評估

在引入新的飼料添加劑L-纈氨酸，或改變使用方式時，通常需要進行安全性評估，以確保其對動物和人類安全。這種評估包括毒性研究、代謝途徑研究等。

4.5 質(zhì)量檢測和控制

飼料添加劑L-纈氨酸的質(zhì)量通常需要經(jīng)過多次檢測和控制，以確保其在生產(chǎn)和銷售過程中的一致性和穩(wěn)定性。

4.6 監(jiān)測和溯源

監(jiān)測體系通常會監(jiān)測市場上的飼料添加劑L-纈氨酸，以及在發(fā)現(xiàn)問題時進行追溯。這有助于快速應(yīng)對潛在的質(zhì)量和安全問題。

在接下來的研究中可以從生產(chǎn)過程的控制、監(jiān)管體系的有效性以及用戶的正確使用等方面為飼料添加劑L-纈氨酸的質(zhì)量安全狀況提供數(shù)據(jù)支持，從而確保動物的健康和飼料的質(zhì)量。

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