王夢蝶,楊發(fā)建,2a△,沈 磊,馬 韜,侯夢凌,王雄飛

(1.大理大學藥學院,云南 大理 671000;2.云南省滇南中心醫(yī)院/紅河州第一人民醫(yī)院 a.藥學部臨床藥學室 b.心血管疾病醫(yī)學中心,云南 蒙自 661100)

冠狀動脈疾病(coronary artery disease,CAD)和急性冠狀動脈綜合征(acute coronary syndromes,ACS)[1]是全球重大的公共衛(wèi)生負擔,導致發(fā)病率和死亡率很高。雙聯(lián)抗血小板治療(dual antiplatelet therapy,DAPT)[2,3]已被證明可以減少復發(fā)性缺血事件。DAPT治療中,規(guī)范使用其中之一的藥物氯吡格雷仍有4%～30%的可能出現(xiàn)支架內血栓、再發(fā)心梗,甚至心源性死亡的事件,這可能與氯吡格雷的代謝酶CYP2C19有關。如慢代謝型CYP2C19(*2、*3)使氯吡格雷活性代謝物生成減少,代謝減慢,血小板活性抑制作用減弱。在我國,CYP2C19基因多態(tài)性存在地域和民族差異[4]。目前,全國很多地區(qū)對CYP2C19基因型的地區(qū)和民族差異進行了研究[5],但未見對紅河州地區(qū)的報道。因此,本文旨在探索云南省滇南中心醫(yī)院冠心病患者CYP2C19基因多態(tài)性分布特點,以了解該基因在紅河州地區(qū)的分布情況,并比較該基因多態(tài)性的地區(qū)和民族差異,為本地區(qū)冠心病患者抗血小板治療提供理論依據(jù),現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 資料來源

選取2022年1月-2022年12月就診于云南省滇南中心醫(yī)院(紅河州第一人民醫(yī)院)心內科冠心病患者462例,其中男327例,女135例;年齡26～82歲,平均年齡(62.79±11.30)歲。納入標準:(1)年齡18～90歲。(2)紅河州哈尼族、彝族、漢族常住居民。(3)經冠脈造影證實至少 1 支主要冠脈分支的管腔狹窄≥50%或支架植入≥ 1 枚。(4)正在接受阿司匹林聯(lián)合氯吡格雷或其中一種抗血小板藥治療。排除標準:(1)不能排除主動脈夾層或其他高出血風險者。(2)近1月內有活動性內臟出血、外科大手術史、創(chuàng)傷史。(3)近6月內罹患腦卒中。(4)合并惡性腫瘤、血液病。本研究經本院醫(yī)院倫理委員會批準,倫理編號HY2023LLSC-79。

1.2 儀器與試劑

Fascan48E多通道熒光定量分析儀、Mini-8K低速離心機、XW-80A旋渦混合器、MK-10干式恒溫器、SNP-U3測序反應通用試劑盒、移液槍10μL、冰箱(-20℃)、生物安全柜。

1.3 檢測方法

抽取2mL外周靜脈血,置于乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetie acid,EDTA)抗凝管,無凝血或溶血,檢測血液樣本的單個核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP)位點(CYP2C19*2 c.681G>A、CYP2C19*3 c.636G>A和CYP2C19*17 c.-806C>T)堿基類型,統(tǒng)計分析等位基因突變率、基因型、代謝表型。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結果

2.1 Hardy-Weinberg平衡定律檢驗結果

表1 CYP2C19基因型Hardy-Weinberg平衡檢驗

2.2 冠心病患者不同代謝表型的臨床資料比較

納入本研究的462例冠心病患者的性別、年齡、合并疾病、吸煙史、飲酒史等臨床資料在快代謝型(rapid metabolizer,RM)、正常代謝型(normal metabolizer,NM)、中間代謝型(intermediate metabolizer,IM)、慢代謝型(poor metabolizer,PM)之間進行比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表2。

表2 冠心病患者不同代謝表型的臨床資料比較[n(%)]

2.3 冠心病患者CYP2C19等位基因分布情況

本研究發(fā)現(xiàn)冠心病患者CYP2C19等位基因*1、*2、*3、*17的分布頻率分別為63.31%、30.63%、5.19%,0.87%,見表3。

表3 冠心病患者CYP2C19等位基因分布(%)

2.4 冠心病患者CYP2C19基因型分布

本研究發(fā)現(xiàn),本院冠心病人群CYP2C19基因型主要有8種,野生純合型:*1/*1(40.91%);攜帶一個功能增強的突變雜合基因型為:*1/*17(1.30%);攜帶一個功能減弱的突變雜合基因型為:*1/*2(37.01%)、*1/*3(6.49%);攜帶一個功能減弱和功能增強的突變雜合基因型為:*2/*17(0.43%);攜帶兩個功能減弱的基因型為:2/*2(10.17%)、*3/*3(0.22%)、*2/*3(3.46%),見表4。

表4 冠心病患者CYP2C19基因型分布[n(%)]

2.5 冠心病患者CYP2C19代謝型分布

本研究發(fā)現(xiàn),本院冠心病患者中主要以IM為主,占43.94%;NM為40.91%、PM為13.85%、RM為1.30%占比最少,見表5。

表5 冠心病患者CYP2C19代謝型分布[n(%)]

2.6 本院不同民族冠心病患者CYP2C19等位基因及代謝表型分布

本研究共納入紅河州哈尼族45例、彝族75例、漢族342例冠心病患者,并行CYP2C19基因檢測統(tǒng)計分析,CYP2C19等位基因及代謝表型無顯著性差異(P>0.05),見表6。

表6 本院不同民族冠心病患者CYP2C19等位基因及代謝表型分布頻率比較[n(%)]

2.7 紅河州與其他民族、地區(qū)CYP2C19等位基因、代謝表型分布頻率比較

紅河州地區(qū)冠心病患者CYP2C19等位基因及代謝表型分布頻率同維吾爾族、新疆地區(qū)藏族P<0.05相比較存在明顯差異(P<0.05);同回族、蒙古族、云南漢族、廣州漢族、北京豐臺區(qū)、河南、攀西地區(qū)相比較[6-15]差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表7。

表7 紅河州與其他民族、地區(qū)CYP2C19等位基因、代謝表型分布頻率比較(%)

3 討論

本研究采用實時熒光定量PCR對紅河州462例冠心病患者(哈尼族45例、彝族75例、漢族342例)行CYP2C19(*2、*3、*17)基因檢測分析,經Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗(P>0.05),本研究對象具本有地區(qū)代表性。通過研究發(fā)現(xiàn),患者代謝表型與性別、年齡、病史、吸煙飲酒史無相關性。462例研究對象等位基因*1、*2、*3、*17的占比分別為63.31%、30.63%、5.19%,0.87%,無功能等位基因分布頻率大于30%;基因型以*1/*1(40.91%)、*1/*2(37.01%)、*2/*2(10.17%)為主;經統(tǒng)計分析,紅河州地區(qū)哈尼族、彝族、漢族冠心病患者CYP2C19等位基因及代謝表型無顯著性差異(P>0.05),但存在哈尼族、彝族樣本量較小等局限,需要擴大樣本量進一步研究得到更準確的結論;紅河州地區(qū)冠心病患者CYP2C19等位基因及代謝表型分布頻率同維吾爾族、藏族及新疆地區(qū)相比較存在明顯差異(P<0.05),維吾爾族正常功能等位基因*1(80.16%)、藏族正常功能等位基因*1(69.43%)、新疆地區(qū)功能增加等位基因*17(4.31%)占比較大;同回族、蒙古族、云南漢族、廣州漢族、北京豐臺區(qū)、河南、攀西地區(qū)研究結果一致。

CYP2C19的基因多態(tài)性與氯吡格雷的藥效有較強的相關性[16]。氯吡格雷為前藥,在肝臟經細胞色素 P450 酶CYP2C19轉化成硫醇衍生物,不可逆的與血小板膜表面的ADP受體P2Y12結合,使纖維蛋白原與糖蛋白受體 GP II b/III a 無法結合,從而抑制血小板聚集[17]。然而,CYP2C19基因多態(tài)性存在很大的民族和地理位置差異,據(jù)現(xiàn)有文獻報道,國內以漢族人群作為研究對象,對CYP2C19 基因多態(tài)性與氯吡格雷的療效差異的研究較豐富,而對少數(shù)民族人群的研究相對較少。我國多個民族的風俗文化、生活習慣、疾病認知不同,疾病影響因素、疾病發(fā)生發(fā)展及預后不同[18]。了解不同地區(qū)和民族抗血小板藥基因組學特征,檢測相關基因預測藥物療效,選擇合適的藥物和劑量個體化施治是精準醫(yī)學的必然趨勢。

綜上所述,鑒于紅河州冠心病人群 CYP2C19基因多態(tài)性分布特點,CYP2C19中間代謝型(43.94%)和慢代謝型(13.85%)患者已超過半數(shù),結合國內外最新研究報道和相關指南推薦,建議臨床考慮使用氯吡格雷藥物前行CYP2C19*2、CYP2C19*3、CYP2C19*17基因檢測,依據(jù)CYP2C19基因型和患者病理生理情況,以優(yōu)化抗血小板治療方案,實現(xiàn)個體化治療,讓冠心病患者獲得最大治療效益。