童燕翔,楊發(fā)建,林 馳△,陳曉鵬

(云南省滇南中心醫(yī)院/紅河州第一人民醫(yī)院 1.神經(jīng)外科 2.藥劑科,云南 蒙自 661100)

云南省紅河哈尼族彝族自治州是高海拔邊疆少數(shù)民族地區(qū),少數(shù)民族眾多,分布廣泛,本地區(qū)人員構(gòu)成比及地理環(huán)境不同于平原和高原地區(qū)。

阿司匹林可預防心腦血管疾病,有效降低血管事件,心腦血管疾病常常由于血栓形成引起,大部分患者需要服用阿司匹林抑制血小板功能,可明顯降低復發(fā)率,有少部分患者治療效果不明顯,甚至無效,研究發(fā)現(xiàn)與阿司匹林的抵抗基因相關,稱為aspirin resistance,即AR,甚至有研究表明抵抗和血管事件程度呈正相關性,所以提倡聯(lián)合用藥[1],抵抗主要表現(xiàn)為臨床治療抵抗和實驗室生化抵抗兩方面,臨床治療抵抗是指正常治療劑量且遵醫(yī)囑規(guī)律服用藥物,卻不能避免心腦血管事件的發(fā)生,實驗室生化抵抗是指正常治療劑量且遵醫(yī)囑規(guī)律服用藥物但不能有效抑制血小板聚集功能,可通過檢測指標診斷其抵抗[2],臨床常常監(jiān)測血小板內(nèi)皮聚集體1(platelet endothelial aggregation receptor 1,PEAR1)基因,其是心血管疾病的易感基因之一[3],但基因多態(tài)性分布不同地域差異性巨大,與地域、民族等明顯關聯(lián),對需要服用阿司匹林治療的冠心病及腦缺血患者完善PEAR1和前列腺素-內(nèi)過氧化物合酶1(prostaglandin-endoperoxide synthase 1,PTGS1)基因型檢測意義重大,現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 研究對象

回顧性分析紅河哈尼族彝族自治州第一人民醫(yī)院2019年5月-2020年6月169例冠心病及腦缺血患者,所有患者均為云南高海拔少數(shù)民族地區(qū)常住居民,少數(shù)民族45例(哈尼族15例,彝族20例,壯族2例,苗族8例),漢族124例。男性124例,女性45例。年齡段35～86歲,60歲及其以上患者95例,60歲以下患者74例,平均(61.53±11.01)歲,通過行冠狀動脈造影或冠狀動脈增強三維重建、心肌酶學篩查及心電圖診斷冠心病,通過頭顱影像學檢查、臨床表現(xiàn)及癥狀確診腦缺血。

納入標準:(1)云南高海拔少數(shù)民族地區(qū)本地居民;(2)確診冠心病或腦缺血;(3)完善PEAR1和PTGS1基因檢測;(4)無家族遺傳性疾病。

排除標準:(1)非本地區(qū)常住居民;(2)非冠心病及腦缺血患者;(3)對阿司匹林過敏、出血性疾病、合并惡性腫瘤、嚴重器質(zhì)性疾病、感染急性期者等。本研究已通過院級醫(yī)學倫理委員會審核并批準,患者或其家屬已簽署知情同意書。

1.2 所使用方法、儀器、試劑

所有患者抽取空腹靜脈血2mL,專用抗凝管抗凝,抽血時間與檢測間隔小于3h,用測序反應通用試劑盒-阿司匹林 20T/盒,采用某公司多通道熒光定量分析儀 Facan 48E分析,每一個步驟均由經(jīng)驗豐富的技術人員嚴格按照說明書的標準流程進行標準化操作。

1.3 基因分型

依據(jù)PEAR1基因rs12041331位點多態(tài)性將其分為野生型(GG型)、突變雜合型(GA型)、突變純合型(AA型);PTGS1分為AA型、GA型、GG型。

1.4 血脂評價標準(參照2007《中國成人血脂異常防治指南》)

TC≥6.22mmol/L為高膽固醇,TG≥2.26mmol/L為高甘油三酯,HDL-C<1.04mmol/L為高密度脂蛋白低,LDL-C≥4.14mmol/L為低密度脂蛋白高。

1.5 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 基因型分布

表1 高海拔少數(shù)民族地區(qū)169例冠心病及腦缺血患者PEAR1基因分布情況[n(%)]

表2 高海拔少數(shù)民族地區(qū)169例冠心病及腦缺血患者PTGS1基因分布情況[n(%)]

2.2 不同因素組基因型分布情況

發(fā)現(xiàn)高海拔少數(shù)民族地區(qū)冠心病及腦缺血患者PEAR1基因分布與民族及性別有關聯(lián),P值為(0.034及0.032),差異性具有統(tǒng)計學差異性意義(P<0.05),PEAR1基因分布和年齡、血脂情況、基礎疾病、心腦血管疾病的種類無相關性,不具有統(tǒng)計學差異性意義(P>0.05),見表3。

2.3 高海拔少數(shù)民族地區(qū)基因分布與其他地區(qū)基因分布對比(文獻資料查閱各地基因情況)

本研究高海拔少數(shù)民族地區(qū)人群與青島、許昌、上海地區(qū)人群PEAR1基因分布有統(tǒng)計學差異,P值為(0.027、0.001、0.014)(P<0.05),即高海拔少數(shù)民族地區(qū)人群,PEAR1基因型以GA為主,青島以GG型為主,許昌三種基因型相差不大,上海以GA及GG型為主。高海拔少數(shù)民族地區(qū)人群與武漢、大連、廣州、河源、北京、南京地區(qū)的PEAR1基因分布無差異性(P>0.05),見表4,即本地區(qū)與武漢、大連、廣州、河源、北京、南京地區(qū)基因分布均以GA型為主;高海拔少數(shù)民族地區(qū)人群與河源、北京、上海地區(qū)人群PTGS1基因分布無差異性(P>0.05),見表5,即本地區(qū)與河源、北京、上海地區(qū)人群PTGS1基因型以AA型為主。

表4 不同地區(qū)PEAR1基因多態(tài)性結(jié)果分析(例)

表5 不同地區(qū)PTGS1基因多態(tài)性結(jié)果分析(例)

3 討論

心腦血管疾病對人們的影響越來越大[4],阿司匹林和氯吡格雷為基礎用藥,在臨床中使用比較廣泛,雙抗比單抗效果更好,氯吡格雷價格較高,阿司匹林便宜,但阿司匹林比氯吡格雷消化道出血風險高[5,6],所以使用阿司匹林需謹慎,其代謝與PEAR1基因相關,對血小板聚集的影響途徑是特異性的[7],但基因突變比較常見,可以通過基因檢測進行血管風險評估和預測藥物療效[8]。

本研究發(fā)現(xiàn),本地區(qū)PEAR1基因分布與民族及性別有關聯(lián),少數(shù)民族野生型GG型基因占15.6%,漢族GG型基因占36.3%,少數(shù)民族GG型基因占比低于漢族,可見漢族阿司匹林代謝高于少數(shù)民族。男性GG型基因占25.8%,女性GG型基因占44.4%,女性GG型基因占比遠遠高于男性,女性阿司匹林代謝高于男性,與陳靜靜等[9]發(fā)現(xiàn)性別是AR 的獨立危險因素一致,PEAR1基因分布和年齡、血脂情況、基礎疾病及心腦血管疾病的種類無聯(lián)系,即AR抵抗與年齡、血脂情況、基礎疾病及心腦血管疾病種類無聯(lián)系,與王召月等[10]相關報道一致。Keramati AR等[11]研究顯示歐洲裔美國人和非洲裔美國人不同基因突變點患者對血小板聚集影響不同。Xu等[12]發(fā)現(xiàn)AA純合子30天內(nèi)主要心血管不良事件的發(fā)生率、死亡、非致命性心肌梗死和缺血性中風的綜合發(fā)生率顯著高于非AA純合子,G等位基因優(yōu)于A等位基因,尤其純合子基因型更明顯。

石秀錦等[13]發(fā)現(xiàn)突變位點數(shù)目和血小板聚集率呈正相關性,即AR可能性越大,本研究PEAR1基因突變頻率44.67%,GA及AA基因型占49.11%及20.12%,高海拔少數(shù)民族地區(qū)人群以突變雜合子型為主,推測本地區(qū)大部分人對阿司匹林代謝較差,AR可能性大。有研究報道高加索人和非裔美國人PEAR1基因突變純合子型人群的心血管事件發(fā)生情況和最終病死率均明顯高于野生純合子基因型[14]與魯燕等[15]研究一致,說明突變型A基因攜帶人群為血管事件高危人群,阿司匹林低代謝,可進行基因篩查對重點人群監(jiān)測,尤其突變純合子基因型攜帶者,對阿司匹林存在嚴重抵抗影響預后[16]。高海拔少數(shù)民族地區(qū)人群與青島、許昌、上海地區(qū)人群PEAR1基因分布有差別,高海拔少數(shù)民族地區(qū)人群以GA型為主,占49.11%,AA型最少,占20.12%,青島地區(qū)人群以GG型為主,占39.3%,AA型最少,占23.3%,許昌地區(qū)三種基因型分布比較均衡,上海地區(qū)以GA型為主,占46.0%,AA型最少,僅占13.4%,說明本地區(qū)人群阿司匹林代謝低于上海地區(qū),青島及許昌與本地代謝情況比較接近,PEAR1基因分布存在地域差異性,與相關研究結(jié)論一致[17]。

高海拔少數(shù)民族地區(qū)人群PTGS1基因以AA型為主,占99.41%,未檢測到GG基因型,與河源、北京、上海地區(qū)人群PTGS1基因分布無差別,所有地區(qū)均以AA基因型為主,GA基因型少見,GG基因型未見,有報道日本和越南都未發(fā)現(xiàn)PTGS1 G等位基因存在,北京地區(qū)PTGS1 G等位基因為2.2%,歐洲地區(qū)PTGS1 G等位基因可達7%[18],但所有地區(qū)均以A基因為主,說明PTGS1基因地域分布差異性較小。有研究表示PTGS1基因突變對血小板功能和出血有影響,但由于G等位基因占比少,相關研究較少[19],有待進一步進行研究。

綜上所述,阿司匹林用于心腦血管疾病[20],高海拔少數(shù)民族地區(qū)冠心病及腦缺血患者PEAR1基因分布與民族及性別有關聯(lián),與年齡、血脂情況、基礎疾病和心腦血管疾病種類無關聯(lián)性,本地區(qū)人群阿司匹林代謝相對稍差,漢族阿司匹林代謝高于少數(shù)民族,女性阿司匹林代謝高于男性,臨床上完善基因檢測可實現(xiàn)個體化用藥和安全用藥,意義重大。