畢家琛,胡重重,姜易彤,許建海,常建宇,孫明志,孟和那仁,杜孟澤,范 開

(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,北京 海淀 100193 ; 2.長春市農(nóng)業(yè)科學(xué)院,吉林 長春 130000 ; 3.赤峰市農(nóng)牧業(yè)綜合行政執(zhí)法支隊(duì),內(nèi)蒙古 赤峰 024000 ; 4.北京農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,北京 昌平100096)

中藥飲片識(shí)別是中獸醫(yī)教學(xué)的重要內(nèi)容,飲片的形態(tài)、顏色、氣味和味道等特征與其藥性和藥效有密切關(guān)系,是中藥飲片鑒定的重要知識(shí)點(diǎn)[1]。飲片受溫度、濕度、日光、空氣、霉菌、害蟲和包裝容器等儲(chǔ)存條件和環(huán)境因素的影響,易發(fā)生腐敗、潮解、蟲蛀、變色、泛油、氣味散失、風(fēng)化和霉變等問題,導(dǎo)致質(zhì)量不穩(wěn)定[2,3],影響教學(xué)效果。飲片標(biāo)本的保存是長期以來困擾中獸醫(yī)教學(xué)工作的問題之一。

在中獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,學(xué)生要對(duì)飲片的氣味、質(zhì)地、形態(tài)特征進(jìn)行仔細(xì)的觀察,標(biāo)本不斷處于開放環(huán)境并被人手觸摸,霉菌污染不可避免。南方地區(qū)氣候潮濕,多數(shù)飲片標(biāo)本1年內(nèi)會(huì)霉變;北方地區(qū)雖然氣候相對(duì)干燥,但在暑濕季節(jié)也存在霉變風(fēng)險(xiǎn)。另外,飲片中常夾帶蟲卵,無論在南方或北方,含淀粉、蛋白類營養(yǎng)成分較高的藥物保存1年以上往往會(huì)出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象。霉變或蟲蛀導(dǎo)致飲片變質(zhì),影響觀察,引起學(xué)生不適,如未及時(shí)發(fā)現(xiàn),還會(huì)迅速擴(kuò)散到周邊,造成污染,很難清除。變質(zhì)的飲片需要定期更換,造成教學(xué)資源浪費(fèi)。目前,為防止飲片霉變和蟲蛀,工作人員主要采取消毒后密封保存的方法。但消毒中常用的輻射滅菌法可導(dǎo)致很多飲片的質(zhì)地發(fā)生酥脆化;而標(biāo)本一旦密封,學(xué)生也就無法直接接觸,無法直觀感受到其氣味、質(zhì)地,無法觀察其細(xì)節(jié),嚴(yán)重影響教學(xué)效果。鑒于此,本試驗(yàn)探索了飲片的樹脂固化保存方法。

1 材料與方法

1.1 主要儀器和材料 真空冷凍干燥機(jī),真空泵,帶氣嘴的耐壓容器,恒溫干燥箱,天平,紅外測(cè)溫儀,游標(biāo)卡尺等。丙烯酸樹脂液,購自山東領(lǐng)研生物科技有限公司;乙二胺固化劑,購自濟(jì)南元素化工有限公司;郁金、地榆、莪術(shù)、桑白皮、僵蠶、黃柏、香附、木香、白芍、百部、蒼術(shù)、川芎、木通、大黃、澤瀉、升麻、桂皮、黃連、狗脊、藁本、白術(shù)、鉤藤、山藥、浙貝母、厚樸、檳榔、枳實(shí)、土鱉蟲、水蛭和海馬共30種飲片各若干,均購自北京同仁堂(集團(tuán))有限責(zé)任公司。

1.2 固化方法 挑選特征較典型的中藥飲片,刷凈表面的浮塵,根據(jù)不同飲片的形狀,選擇其長徑(長度)、短徑(寬度)和厚度,用游標(biāo)卡尺對(duì)1.1中30種飲片的尺寸分別進(jìn)行測(cè)量并記錄,用天平對(duì)川牛膝、山奈、山楂、地榆、杜仲、制附子、白芍、蓽撥、仙茅、百合、水蛭、土鱉蟲和海馬飲片進(jìn)行稱重并記錄。將飲片充分干燥至含水率為5%以下;在丙烯酸樹脂液中加入適量固化劑,并用稀釋劑調(diào)節(jié)好黏度,將飲片完全浸沒于調(diào)配好的溶液中;將浸泡飲片的容器移入帶氣嘴的耐壓容器,密閉,接好氣泵;先抽負(fù)壓,使容器內(nèi)氣壓降至0.01 MPa左右,少頃打開氣閥恢復(fù)常壓;再以氣泵加正壓至0.6 MPa左右,保持一段時(shí)間后打開氣閥恢復(fù)常壓;用濾網(wǎng)撈出已浸透樹脂液的中藥飲片,常溫靜置半日,用布或吸水紙吸干飲片表面殘留的樹脂液;將飲片置于恒溫干燥箱中加熱至80 ℃左右,取出,用布或吸水紙吸干滲出的樹脂液;將飲片翻面后再放回干燥箱,飲片應(yīng)散在排布,不宜堆疊;將干燥箱升溫至110 ℃,保持少頃,待樹脂液完全固化后取出飲片,候涼即得。

樹脂液浸泡過程中,負(fù)壓和正壓的維持時(shí)間,因飲片的體積大小和質(zhì)地的致密程度而異。體積大、質(zhì)地緊密的飲片應(yīng)適當(dāng)延長時(shí)間,以便樹脂液充分滲入飲片內(nèi)。另外,丙烯酸樹脂液受熱后體積輕度膨脹,故加熱固化過程需有間斷,期間需去除因受熱膨脹溢于飲片表面但尚未固化的樹脂液,防止溢出的樹脂液凝結(jié)于飲片表面而影響教學(xué)觀察。

1.3 固化前后飲片數(shù)據(jù)處理和質(zhì)量測(cè)評(píng) 將固化后的飲片樣本按固化前所采用的相同方法分別檢測(cè)其尺寸,并記錄數(shù)據(jù)。用天平對(duì)1.2中稱重的飲片再次進(jìn)行稱重并記錄數(shù)據(jù)。將飲片固化前后所測(cè)得的尺寸、重量數(shù)據(jù)用SPSS軟件進(jìn)行單因素配對(duì)樣本t檢驗(yàn),當(dāng)Sig(雙尾)<0.05時(shí),表明配對(duì)樣本間存在顯著差異。

1.4 主觀感知測(cè)試 將30種固化后的飲片各若干混入相應(yīng)的常規(guī)飲片中,隨機(jī)抽取10名不知情的本科生參加測(cè)試,從形態(tài)、色澤、氣味和質(zhì)地等方面檢驗(yàn)飲片是否存在差異,隨后告知參試者其中含有樹脂固化飲片,令其仔細(xì)觀察固化前后飲片是否存在差異。

2 結(jié)果

2.1 尺寸變化 在固化前后對(duì)30種飲片的尺寸分別進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn),同一飲片的尺寸在樹脂固化前后均未發(fā)生變化。

2.2 重量變化 用天平對(duì)飲片在樹脂固化前后分別進(jìn)行稱重,結(jié)果可見,川牛膝、山奈、山楂、地榆、杜仲、水蛭、土鱉蟲和海馬的飲片固化后顯著增重,制附子、白芍、蓽撥、仙茅和百合的飲片固化前后無顯著變化(表1)。

表1 部分飲片固化前后重量變化 (n=4)

2.3 主觀感知測(cè)試 不知情參試者的主觀感知測(cè)試結(jié)果顯示,所有學(xué)生均未能檢出混入常規(guī)飲片中的固化飲片,樹脂固化法較好地保持了飲片的原貌(圖1)。經(jīng)告知其中含有樹脂固化飲片后,部分參試者經(jīng)仔細(xì)觀察,可主動(dòng)感知到水蛭、土鱉蟲和海馬3種固化飲片的密度增大;可辨識(shí)到一部分樹脂固化的大黃飲片顏色較常規(guī)飲片加深(圖2);其余各種飲片則均需由教師明確分揀出固化飲片供學(xué)生觀察,學(xué)生才能區(qū)別。參試者表示,樹脂固化飲片較好地保留了飲片固有的辛香氣味,不會(huì)明顯改變中藥飲片的形態(tài)和顏色,不含有特殊化工品氣味。

圖1 部分中藥的常規(guī)飲片和樹脂固化飲片的對(duì)比

圖2 常規(guī)大黃飲片(A)和樹脂固化大黃飲片(B)的顏色對(duì)比

2.4 穩(wěn)定性對(duì)比 本試驗(yàn)首批固化的30種飲片,自2018年至今已在北京地區(qū)樓房一層室內(nèi)條件下存放4年,樹脂固化飲片完全未見霉變、生蟲表現(xiàn),其形態(tài)、顏色和氣味未發(fā)生明顯變化,而同批購入并在相同條件下保存的地榆、莪術(shù)、僵蠶、木香、蒼術(shù)、大黃、川芎、澤瀉、白術(shù)、山藥和土鱉蟲共11種常規(guī)飲片已經(jīng)生蟲或發(fā)霉。

3 討論

丙烯酸樹脂具有熱固化特性,固化溫度不高,熱固化后無色、無味。經(jīng)丙烯酸樹脂固化后的飲片,組織細(xì)胞內(nèi)填充了固化的樹脂,使其中的營養(yǎng)成分難以被霉菌和蛀蟲利用,可長久保存而不易發(fā)生霉變或蟲蛀,且硬度增加,耐磨損性能大大增強(qiáng)。固化處理不改變飲片的組織結(jié)構(gòu),使其特殊形態(tài)得到較好的保存,而且多數(shù)有辛香氣味的飲片,仍保持了其原有的氣味特征。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示,各飲片固化前后尺寸變化均小于5%,大黃和木通2種飲片固化后尺寸稍有減小,可能是操作過程中摩擦、撞擊損耗所致;川牛膝、山奈、山楂、地榆、杜仲、土鱉蟲、水蛭和海馬的飲片固化處理后重量顯著增加。分析其原因發(fā)現(xiàn),固化后顯著增重的飲片,均屬質(zhì)地相對(duì)疏松者,如杜仲和地榆等;或因動(dòng)物藥物體內(nèi)有較大空間可存留樹脂,如土鱉蟲、海馬和水蛭等。這類飲片經(jīng)浸膠后,大量樹脂填充于組織空隙內(nèi),如浸膠后直接加熱固化,飲片重量會(huì)顯著增加。而組織致密的飲片,如制附子、百合和白芍等,則固化后均未顯著增重。從參試者感官鑒別的結(jié)果來看,由于中藥飲片本身體積和重量的絕對(duì)值均很小,即使固化后有所增重,參試者也難以分辨。當(dāng)然,如欲追求更完美的效果,使固化成品的密度盡量接近原始的常規(guī)飲片,則可在充分浸膠后再用離心機(jī)適度離心,離出多余樹脂后再行加熱固化。

樹脂固化的方法適用于保存皮類、藤木類、果實(shí)果皮類、菌藻類、蟲類、較肥大的根及根莖類、較大型的種子類藥材的飲片和個(gè)貨。而質(zhì)地單薄的標(biāo)本,如葉類飲片,一方面本就不易霉變生蟲,另一方面即使經(jīng)樹脂固化處理,仍質(zhì)脆易碎,則不必采用本方法保存。

本試驗(yàn)結(jié)果表明,中藥飲片經(jīng)樹脂固化處理,可大大延長標(biāo)本的使用時(shí)間,提高使用效率,減少更換頻率,節(jié)約教學(xué)資源,值得推廣。