摘" 要：隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖向集約化和工廠化養(yǎng)殖發(fā)展，水產(chǎn)養(yǎng)殖動物病害頻繁發(fā)生，在諸多病原菌中，創(chuàng)傷弧菌（Vibrio vulnificus）是水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的主要病原體之一，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失。文章簡要介紹了創(chuàng)傷弧菌對水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的影響及致病機理，同時對創(chuàng)傷弧菌疾病預防和治療提出更環(huán)保的治療方式，以期加強對創(chuàng)傷弧菌的致病性和危害性的重視與研究，有助于合理地進行疾病診斷和采取防控措施，同時為進一步深入研究創(chuàng)傷弧菌的致病機理奠定重要基礎。

關鍵詞：創(chuàng)傷弧菌（Vibrio vulnificus）；水產(chǎn)養(yǎng)殖；致病機制；特異性治療

中圖分類號：S917.1文獻標志碼：A

文章編號：1674-2419（2024）06-0679-05

弧菌是水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的主要病原體之一，在熱帶和溫帶海洋環(huán)境中廣泛分布[1]，部分種屬也是許多水生動物腸道正常菌群的一部分[2]。其中一些弧菌屬于機會致病菌，當養(yǎng)殖環(huán)境發(fā)生劇烈變化時，能夠引起水產(chǎn)養(yǎng)殖動物患病，進而導致死亡，造成產(chǎn)量降低并增加了在疾病管理方面的成本，對水產(chǎn)養(yǎng)殖造成重大經(jīng)濟損失[3]。在中國，隨著工廠化養(yǎng)殖半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis）規(guī)模不斷擴大，細菌性疾病頻繁發(fā)生，其中弧菌病給半滑舌鰨養(yǎng)殖帶來巨大的經(jīng)濟損失[4]。此外，與成魚相比，幼魚對生長環(huán)境的變化更加敏感，因而導致幼魚養(yǎng)殖管護的成本居高不下[5]。目前，弧菌科有約172個種屬，其中如鰻弧菌（Vibrio anguillarum）、擬態(tài)弧菌（Vibrio mimicus）、副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）等對海洋魚類和貝類等養(yǎng)殖物種均造成重大影響。其中，哈維弧菌（Vibrio harveyi）、創(chuàng)傷弧菌（Vibrio vulnificus）、溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）和副溶血性弧菌是比較常見的魚類病原體，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成重大經(jīng)濟損失[6]。

1 創(chuàng)傷弧菌簡介

創(chuàng)傷弧菌作為一種革蘭氏陰性細菌，在海洋等水環(huán)境中是構成正常微生物群的微生物之一[7]。創(chuàng)傷弧菌是機會致病菌，在溫暖的季節(jié)大量繁殖，很容易在軟體貝類中積聚，成為傳染源。創(chuàng)傷弧菌感染主要是通過食用包括牡蠣（Ostreidae）在內受污染的海產(chǎn)品或開放性傷口暴露于受污染的水中而被感染，可引起如敗血癥等疾病的發(fā)生[8]。創(chuàng)傷弧菌還會感染養(yǎng)殖魚類，主要癥狀包括出血性敗血癥和水腫等[9]。因此，當養(yǎng)殖場暴發(fā)創(chuàng)傷弧菌感染時，會給水產(chǎn)養(yǎng)殖動物造成巨大損失。有研究發(fā)現(xiàn)，近年來，創(chuàng)傷弧菌的地理分布和感染率都有所上升，這可能是全球變暖和海水溫度大幅上升的結果[10]。

2 創(chuàng)傷弧菌感染的臨床癥狀與病理變化

創(chuàng)傷弧菌不僅可以感染人類，出現(xiàn)導致致命的原發(fā)性敗血癥和傷口感染，而且對魚類也有很強的致病性，對中國的水產(chǎn)養(yǎng)殖造成了嚴重的經(jīng)濟損失。朱永肖等[11]在水族館患病赤魟（Dasyatis akajei）中分離到創(chuàng)傷弧菌，觀察發(fā)現(xiàn)病魚游動緩慢、食欲喪失，體表充血發(fā)紅，鰭條殘缺不全，局部有潰爛，鰓部充血水腫，腹部腫脹，剖檢發(fā)現(xiàn)病魚腹腔有大量腹水，肝臟腫大發(fā)黃。馬愛敏等[12]在患病黃姑魚（Nibea albiflora）中分離到創(chuàng)傷弧菌，經(jīng)回歸感染后，黃姑魚發(fā)生死亡，死亡魚出現(xiàn)急性敗血癥的癥狀，全身出血，爛鰭、爛尾，肝臟和腎臟腫脹出血等。胡秀彩等[4]在患病半滑舌鰨中也有分離到創(chuàng)傷弧菌，通過觀察病理切片發(fā)現(xiàn)鰓絲上皮細胞增生和融合，肝臟充血和潰爛，腎臟彌漫性出血、壞死，腸道黏膜固有層萎縮，并且發(fā)現(xiàn)組織中淋巴細胞、黏液細胞增多。另外，在國外，Sumithra 等[13]在患病羅非魚（Oreochromis niloticus）中分離到創(chuàng)傷弧菌，患病羅非魚腸道中明顯出現(xiàn)血細胞浸潤、黏膜細胞凋亡、絨毛脫落，腸道和肝臟出現(xiàn)出血癥狀。此外，在患病石鰈（Kareius bicoloratus）和軍曹魚（Rachycentron canadum）等許多出現(xiàn)皮膚潰爛、腹部積水、腸炎等臨床癥狀魚體內均分離到創(chuàng)傷弧菌[4]。

此外，除了魚類，創(chuàng)傷弧菌對其他水產(chǎn)養(yǎng)殖動物也有較強的危害。溫水秀等[14]研究發(fā)現(xiàn)，感染創(chuàng)傷弧菌的大海馬（Hippocampus kuda）進食量明顯減少，活力下降，背腹皮膚出現(xiàn)淡黃色斑點并逐漸擴大轉為白色，解剖可見肝變色、腹水和腎腫大等病理癥狀。張彬等[15]研究發(fā)現(xiàn)感染創(chuàng)傷弧菌的凡納濱對蝦（Penaeus vannamei）主要表現(xiàn)為肝胰腺顏色變淡，部分出現(xiàn)萎縮，空腸空胃，腹節(jié)肌肉白濁。由此可見，創(chuàng)傷弧菌感染后，不僅對魚類造成嚴重的危害，還會對對蝦和海馬等養(yǎng)殖動物造成影響，給養(yǎng)殖戶造成巨大損失。

3 致病機制

創(chuàng)傷弧菌感染的顯著特點是發(fā)病迅速，可在幾天內發(fā)展為致命的全身感染。創(chuàng)傷弧菌致病機制有多種，接下來簡要介紹創(chuàng)傷弧菌的幾種感染機制，以期對創(chuàng)傷弧菌感染機制研究提供參考。

創(chuàng)傷弧菌的生活方式常以自由生活的浮游狀態(tài)或已形成莢膜的形式生活，其中形成莢膜的細菌比浮游狀態(tài)下更能承受如營養(yǎng)匱乏和宿主免疫系統(tǒng)等帶來的環(huán)境壓力[16]。因此，莢膜的形成在很大程度上會影響創(chuàng)傷弧菌在牡蠣中的定殖，進而增加創(chuàng)傷弧菌在牡蠣中積聚，使牡蠣等貝類成為感染的主要來源之一[17]。莢膜與弧菌的傳播和致病密切相關，Pu和Rowe-Magnus[18]研究發(fā)現(xiàn)，iam基因座編碼的IV型纖毛在初始附著階段發(fā)揮了重要作用，而IV型纖毛則有利于創(chuàng)傷弧菌表面莢膜的形成和自聚集，從而促進在牡蠣中的定殖。

其次創(chuàng)傷弧菌在入侵宿主后，能夠表達多種外毒素，這些外毒素對宿主細胞具有較強的侵襲性和組織破壞能力。例如，Kim等[19]研究發(fā)現(xiàn)，由rtxA基因編碼一種多功能的自處理重復序列毒素（MARTX），具有較強的細胞毒性。MARTX毒素分泌后，會通過重復區(qū)與宿主質膜結合，形成孔狀結構，并將其中心效應域轉運到宿主細胞質中，并在宿主特異性分子的作用下被加工并釋放到細胞質中[20-21]，進而導致細胞骨架和高爾基體破壞、宿主細胞信號傳導失調以及細胞凋亡等[22-24]。MARTX毒素能夠提高創(chuàng)傷弧菌抗吞噬能力，促進其定殖、向血液和其他組織擴散，從而導致宿主死亡[25]。另外MARTX毒素的表達可能減弱腸道上皮細胞的免疫反應，但會刺激免疫細胞的炎癥信號傳導[26]。

此外，cAMP受體蛋白（CRP）也是創(chuàng)傷弧菌感染的過程中重要蛋白之一，CRP蛋白通過感知營養(yǎng)物質的豐富度從而能夠調控毒力因子的表達，在CRP蛋白的作用下，創(chuàng)傷弧菌外毒素可在感染的不同階段根據(jù)營養(yǎng)物質的供應情況發(fā)揮作用[27]。在感染初期，小腸上部和血液中的葡萄糖水平相對較高，在富含葡萄糖的環(huán)境中，CRP會誘導MARTX毒素表達，并從小腸擴散到其他器官。隨著細菌感染時間延長，腸和血液中的葡萄糖水平會因腸細胞的吸收或弧菌的消耗而逐漸降低，在感染后期缺乏葡萄糖的條件下，CRP能進一步誘導plpA、vvhA和vvpE表達，導致炎癥和疾病進一步發(fā)展[28]。

4 特異性治療方式

由于集約化養(yǎng)殖的發(fā)展，水產(chǎn)養(yǎng)殖動物病害頻繁發(fā)生，應用抗生素藥物控制水產(chǎn)養(yǎng)殖動物各種細菌性疾病依然是較為廣泛的方式。然而抗生素的大量使用帶來了許多問題，如出現(xiàn)耐藥菌株，影響水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的腸道微生態(tài)等，因此開發(fā)針對特定病原體的治療方式迫在眉睫。近來有研究發(fā)現(xiàn)，細菌轉錄因子可參與調節(jié)毒力因子的表達，以適應不斷變化的環(huán)境[29]，因此，干擾轉錄因子的方式能夠降低病原菌毒力因子的表達，減緩在感染期間疾病的進展過程。這種方式能減輕病原菌的威脅并促進免疫清除[30]，因此，對于治療耐藥菌株有較大優(yōu)勢。下面將簡單介紹幾種特異基因的抑制劑。

例如SmcR能夠調節(jié)毒力因子的表達，同時還能促進創(chuàng)傷弧菌在宿主中定殖[31]，Dickey等[29]研究發(fā)現(xiàn)QStatin [1-（5-bromothiophene-2-sulfonyl）-1H-pyrazole]可以作為弧菌SmcR的選擇性抑制劑，QStatin能夠與SmcR的受體結合，導致該蛋白的調節(jié)活性降低，從而降低毒力因子表達。Dickey等[29]還發(fā)現(xiàn)QStatin還可以破壞致病弧菌中LuxR基因的功能，并且在對蝦模型中驗證發(fā)現(xiàn)QStatin能夠降低創(chuàng)傷弧菌、哈維弧菌和副溶血性弧菌等多種弧菌對宿主的毒性。接下來，Newman等[32]研究發(fā)現(xiàn)了QStatin的衍生物，其中，PTSP[3-phenyl-1-（thiophen-2-ylsulfonyl）-1H-pyrazole]對包括創(chuàng)傷弧菌、副溶血性弧菌和坎氏弧菌（Vibrio campbellii）在內大多數(shù)弧菌的抑制活性最高。Kim等[33]研究發(fā)現(xiàn)另一種SmcR抑制分子quoromycin [6-（phenylsulfonyl） nicotinonitrile]可通過直接與SmcR結合來阻礙SmcR的DNA結合，其抗菌功效已在小鼠模型中得到證實。

另外，有學者指出HlyU在包括創(chuàng)傷弧菌在內的弧菌屬感染宿主時首先表達上調，當HlyU表達水平降低時，能夠引起rtxA、plpA和vvhA等外毒素基因的表達降低，從而顯著減弱弧菌的毒力[28]。由于HlyU在許多致病弧菌中廣泛保守，因此HlyU 可以作為抑制弧菌毒力的另一個有利的靶點。目前已報道了三種HlyU抑制劑： CM14 [N-（4-oxo-4H-thieno[3，4-c]chromen-3-yl）- 3-phenylprop-2-ynamide][34]、DHC（2′，4′-dihydroxychalcone）[35]和FTH（fursultiamine hydrochloride）[36]。

此外，Gong等[37]發(fā)現(xiàn)奧替溴銨也對創(chuàng)傷弧菌具有強效抗菌活性，在最低抑菌濃度的濃度下，顯著抑制創(chuàng)傷弧菌的集群運動和對宿主細胞的黏附，還顯著降低外膜蛋白TolCV1的表達水平，從而抑制rtxA基因編碼的毒素分泌，降低了創(chuàng)傷弧菌對宿主細胞的細胞毒性。綜上所述，抑制創(chuàng)傷弧菌特異的轉錄因子，可減少藥物對其他正常菌群的影響，對宿主的生存以及對環(huán)境保護均能起到良好的效果，因此未來可以考慮加大研發(fā)針對特定病原菌的藥物，以降低對抗生素的依賴。

5 結語

創(chuàng)傷弧菌感染后在宿主體內繁殖，造成組織損傷和宿主敗血癥，加之宿主的炎癥反應和免疫反應以及各種毒力因子的影響，會導致宿主最終死亡?，F(xiàn)階段，應用抗生素藥物治療水產(chǎn)養(yǎng)殖動物弧菌引起的疾病，依然是較為常見的方式，然而抗生素的大量使用帶來了許多問題，因此需要尋找更合適的治療和預防方法。文章簡要介紹了幾種創(chuàng)傷弧菌的致病機制，并介紹了對環(huán)境更友好地治療創(chuàng)傷弧菌感染的方式，以期加強對創(chuàng)傷弧菌的致病性和危害性的重視與研究，有助于合理地進行疾病診斷和采取預防和控制措施，同時為進一步深入研究創(chuàng)傷弧菌的致病機理奠定重要基礎。此外，文章建議，在治療創(chuàng)傷弧菌等各類弧菌疾病過程中，首先選擇副作用較小的抗生素，以減少對環(huán)境的影響。此外，需要開發(fā)特異性治療弧菌病的藥物，例如使用文章所述的抑制弧菌毒力因子表達的抑制劑特異性治療弧菌病，以減少對養(yǎng)殖動物腸道微生態(tài)的影響。另外在養(yǎng)殖過程中，應加強對水質的監(jiān)測，及時改善水質，同時在飼料中添加益生菌等生物制劑，提高水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的免疫功能，減輕細菌性疾病對水產(chǎn)養(yǎng)殖動物造成的影響，促進綠色健康養(yǎng)殖。

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The impact on aquaculture and pathogenic mechanism of Vibrio vulnificus

YANG Wenxiang

（College of Fisheries， Tianjin Agriculture University， Tianjin， 300384）

Abstract：With the development of aquaculture to intensive and factory farming， aquaculture animal diseases occur frequently. Among many pathogens， Vibrio vulnificus is one of the main pathogens of aquaculture animals， causing huge losses to aquaculture industry. This paper briefly introduced the effects of V. vulnificus on aquaculture animals and its pathogenic mechanism， and proposed more environmentally friendly treatment methods for the prevention and treatment of V. vulnificus disease， with a view to strengthening the attention and research on the pathogenicity and harmfulness of V. vulnificus， and contributing to reasonable disease diagnosis and prevention and control measures. At the same time， it lays an important foundation for further research on the pathogenic mechanism of V. vulnificus.

Keywords：Vibrio vulnificus; aquaculture; pathogenic mechanism; specific therapy

作者簡介：楊雯翔（1996- ），男，碩士，研究方向為水產(chǎn)動物免疫與病害。 E-mail：yangwx_1205@163.com。